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文档简介

1、,核酸适配体在生化分离及检测 领域的应用,目 录,核酸适配体的简介,核酸适配体在生化分离中的应用,核酸适配体在检测中的应用,展望,一、简介,一）基本概念 1、核酸适体(Aptamer) 是经体外筛选技术( SELEX) 筛选出的能特异结合蛋白质或其它小分子物质的寡聚核苷酸片段，对可结合的配体有严格的识别能力和高度的亲和力。,2、 核酸适体的筛选技术被称为“配体指数富集系统进化”（SELEX)，它是以组合化学技术、PCR技术以及基因克隆测序技术等为基础的整合技术。,二）核酸适配体的特点 （1）适配体的分子结构：其是一种短链DNA或RNA序列 （2）适配体与靶物质的结合基础：核酸分子形成的特定三

2、维结构 （3）适配体对靶分子有特异性和亲和力 （4）适配体有易修饰性和稳定性,三）核酸适配体的筛选过程,SELEX筛选的基本过程：,二、核酸适配体在生化分离中的应用,核酸适配体结合了抗体亲和技术及分子印迹技术 两者的优点，不仅选择性专一而且具有性质稳 定、易合成、易标记、分子量较小、目标分子广泛 等优势，因此其在生化分离领域显示出广阔的应用 前景。,应用实例： 基于核酸适配体的微流体装置温控分离AMP,设备基础： 样品与适配体间有特异亲和性 适配体构象受温度调控,基于适体的微流体萃取的原理,AMP的分子构型,AMP适配体的化学构型,微流体装置SPE的示意图,实验装置,实验结果表明：当温度达到3

3、2.5时解析率已达到93%，并且升温解析并不影响核酸适配体的循环使用。,局限性：,当待分离的靶目标是蛋白质时，复合物的解离就比较困难。因为适配体对蛋白质的结合能力，比小分子大约强三个数量级，解离常数在纳摩尔范围内，有的甚至在皮摩尔范围内。这时复合物的解离就需要借助较高的温度、高浓度的盐水、较高或较低的pH值等激烈的条件，但在这样的条件下蛋白质的活性会降低甚至会发生变性。,核酸适配体能够特异性地识别靶目标，这一性质使得适配体在检测领域大有用武之地。,二、核酸适配体在检测中的应用,目前核酸适配体已被应用在各类传感器中。比 如电化学传感器、光学传感器以及声学传感器。其中针对核酸适配体在电化学传感器中的应用研究最多。,目前核酸适配 体 已 被 应 用 在 了 很 多 种 检 测 手 段 中。比 如色谱、毛细管电泳和生物传感器等。其中关于核酸适配体在亲和色谱和传感器中应用的报道最为广泛。,四、展望,1.有关适配体在生化分离领域中应用的研究还比较少，其中怎样高效、温和地实现适配体、蛋白质复合物的解离是推动该方向发展的关键。 2.尽管近年来适配体在传感器方向的研究取得了瞩目的成果，但在实际应用中，还需进一步优化传感器的

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