《急白免疫分型》PPT课件.ppt

1、讲座,急性白血病 免 疫 学 分 型,急性白血病的免疫分型,MICM分型: 细胞形态学(包括细胞组化)为基础， 细胞免疫学(免疫表型)为主体， 细胞遗传学为辅助， 分子生物学为补充的原则。 免疫学分型对ALL更重要。 免疫学与FAB分型可不一致。,白血病免疫分型原理,白血病细胞表面有大量的抗原,这些抗原的性质与正常白细胞的抗原性质相同，目前尚未发现特异的白血病抗原。 但白血病细胞可能具有: 1.特异性的联合抗原; 2.某些抗原表达于某个特定系列的发育阶段上,而正常造血细胞不存在这种现象或极为罕见。 这些抗原称为白细胞分化抗原或分化群CD（cluster designations）.,白血病免疫

2、分型原理,白血病免疫分型的意义： 1。有助于白血病亚型的诊断，特别对用形态学、细胞化学染色不能肯定细胞来源时及杂合性白血病； 2。指导临床治疗； 3。有助于判断白血病的预后； 4。可进行疾病的监测如检测。,细胞系列抗原的表达 -B细胞系抗原,B细胞根据发育阶段可分为： B祖细胞 TdT、CD34、HLA-DR 前B细胞（可再分为前前B、前B）TdT、CD34、CD10、CD19、CD24 未成熟B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22 成熟B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22 活化B细胞 CD19、CD24、CD20、CyCD22 浆细胞 CD38,细胞系列抗原的表达-

3、T细胞系抗原,T细胞发育的路径为： 骨髓（骨髓祖细胞前胸腺细胞，亦称T祖细胞） -胸腺（早中晚） -外周血（成熟） 骨髓T祖细胞CD34+、TdT+、CD10+、CD7+ CD7出现最早并贯穿于T细胞发育全程,T细胞系抗原,T 细胞进入胸腺后： （早） CD7+、CD2-、CD3-、CD4-、CD8-、TCR- （中）CD7+、CD2+、CD3+、CD4-、CD8-、TCR- （晚）CD7+、CD2+、CD3+、CD4+、CD8+、TCR+， CD7+CD2+CD3+CD4-CD8+TCR+ CD7+CD2+CD3+CD4+CD8-TCR+ 进入血液及淋巴结,T细胞系抗原-外周血T细胞,血液中

4、T细胞主要有以下亚型： 1.CD3+、CD4+、CD8- 辅助性T细胞/诱导性T细胞，TH/TI 占T细胞总数的60-70% 2.CD3+、CD4-、CD8+ 抑制性T细胞/细胞毒性T细胞，TS/TC， 占T细胞总数的20-30% 3.CD3+、CD4+、CD8+ 占T细胞总数的1-3% 4.CD3+、CD4-、CD8- 占T细胞总数的1-10%,T细胞系抗原-CD4+T细胞亚群,1根据产生淋巴因子的差异分为： TH1产生 IL-2、IFN-、TNF- TH2产生 IL-4、IL-5、IL-6、IL-10 2根据功能分为： TSI（suppressor inducer T-cell） 诱导TS

5、功能，CD31+、CD45RA+ THI（helper inducer T-cell） 辅助B细胞产生抗体，CD31-、CD45RO+ 3分为记忆T细胞、天然T细胞、活化T细胞,天然T细胞 记忆T细胞活化T细胞,髓系抗原,根据髓系抗原表达大致分为7类： 1粒细胞和单核细胞上都有较强表达的抗原： CD13、CDw17、CD32、CD87、 CD88、CD89、CDw92、CD93、 CD156、CD157、CD163。 2以粒细胞为主，也存在于单核细胞上的抗原： CD15、CD65。 3. 以单核细胞为主，也表达在粒细胞上的抗原： CD14、CD33。,髓系抗原,3基本只表达在单核细胞上的抗原：

6、 CD16、CD64、CD68、CD91、CDw136、CD155。 基本只表达在粒细胞上的抗原：CD16b、CD66。 4造血干、祖细胞抗原：CD34、CD90。 5其他髓系相关抗原：主要存在于其他系细胞上， 髓系细胞上也有表达：CD4、CD7、CD9、CD10、 CD11b、CD11c、CD31、CD36、CD38 6血小板相关抗原：CD36、CD41、CD42、CD61、CD62。 7. 红细胞抗原： CD36、GPA,免疫分型,从70年代开始试图进行免疫学分型： 1986年前五分法 1986年后两大类九分法 1994年四型21类法,免疫分型五分法：,五分法：Common型 未分化型 T

7、细胞型 前B细胞型 B细胞型 表型 DR/CD9/CD10+ 复杂 CD2/CD5+ CyIg SmIg+ 发生率：国外 60-70% 30% 15-25% 2-3% 2-3% 国内 50% 30% 20% 0.5% 1.5% 预后： 儿童 最好 次之 再次 最次 最次 成人 次之 再次 最好 最次 最次,免疫分型两类九型法: 非T亚型 HLA-DR CD9 CD10 CD20 链 SmIg 发生率% I + - - - - - 5 II + + - - - - 15 III + + + - - - 30 IV + + + + - - 50 V + + +/- +/- + - 5 VI + +

8、 - + - + 2,免疫分型两类九型法,T亚型 CD7 CD5 CD2 CD3 CD4 CD8 CD1a 发生率 I + + + - - - - 55 II + + + +25% +90% +90% + 25 III + + + + + # + # - 20 #:二者之一阳性,ALL免疫分型 -四型21类法,第一型：裸型- 未分化型,干细胞型 第二型：纯型-Pre-B1,Pre-B2,Pre-B3, Pre-B4,B,T1,T2,T3 第三型：变异型-Pre-B1-4/My+,Pre-B1-4/CD15+, PRE-B1-4/T+,T1-4/My+, T1-4/CD15+,T1-4/B+ 第

9、四型：多表型-Pre-B1-4/M+,T1-4/M, Pre-B+T,Pre-B+T+M.,ALL免疫分型 -FAB的MIC分型,B-ALL CD19 TdT DR CD10 CyIg SmIg FAB亚型 早期前B + + + - - - L1,L2 t(4;11) t(9;22) 普通-ALL + + + + - - L1,L2 6q- 近单倍体 t/del(12p) t(9;22) 前B-ALL + + + + + - L1 t(1;19) t(9;22) B-ALL + + - +/- +/- + L3 t(8;14) t(2;8) t(8;22) 6q-,ALL免疫分型 -FAB的M

10、IC分型,T-ALL CD7 CD2 TdT FAB亚型 早期前T + - + L1,L2 t/del(9q-) T-ALL + + + L1,L2 t(11;14) 6q-,白血病系列积分方法,单表型：某个系列积分大于2分，其他系列为0分： 纯B-ALL，纯T-ALL，纯AML（M0-5），纯AML-M6，纯AML-M7。 表达某一系列抗原为主型：某一个系列积分大于2分，伴另一系列抗原的 表达，但小于或等于2： 1、My+-B-ALL，My+-T-ALL， My+：CD13+/14+/33+和15， 2、CD15+B-ALL，CD15+T-ALL， CD15+：CD15+（CD13/14/3

11、3-） 3、CD2+ B-ALL CD5+ B-ALL CD7+B-ALL， 4、CD20+T-ALL CD24+T-ALL 5、Ly+AML。 3. 双表型：至少二个系列积分大于2分: B-ALL-粒单型（形态ALL），B-ALL-粒单型（形态AML）， T-ALL-粒单型（形态ALL），B-ALL-粒单型（形态AML）。 4. 未分化型，所有系列积分均小于或等于2。,急性白血病免疫学 系列分型的积分方案,分数B系 T系 粒单系 巨核系 红系 2 M/cCD22 M/cCD3 MPO CD41 CD42 血型蛋白A cCD79a M/cTCR/ Ccd13 CD61 RhD HbF c sI

12、g M/cTCR/ FVIII 1 CD19 CD20 CD2 CD5 Mcd13 CD33 CD36 ABH CD36 ABH CD36 CDw65 cCd68 0.5 CD10 CD24 CD7 CD1a CD11a/c CD14 TdT CD4 CD15 CD65 CD117,免疫学分型 与FAB AML分型的相关性,M1：CD34+、MPO+、DR+、TdT+、CD33+、CD13+、CD15-、CD11b-、 无 淋、红、巨核系抗原 M2：CD34+、CD33+、CD13+、DR+、CD15+ M3：CD33+、CD13+、DR-、CD34- M4：CD34+ 、CD33+、CD13

13、+、CD14+、CD15+ M5：CD34+ CD33+、CD13+、CD14+、CD15+ M6：血型糖蛋白+、CD34-，DR-、CD33-、CD13-、CD15- M7：CD34+、CD33+、DR+、CD41+、CD42+、CD61+ M0：FAB：形态学为L2型，MPO、SBB组化阴性，淋系抗原阴性，CD33、CD11、CD15 及antiMPO单抗阳性。,细胞系列抗原的表达 -B细胞系抗原,HLA-DR意义 在白血病分型中，HLA-DR特异性较差， 除B系外，HLA-DR在急非淋、成人T细胞白血病亦表达， 但如DR+，加上CD5-、CD7-则99%为B系。90%B系ALL表达CD1

14、0。,与AL预后有的抗原,1。CD34： 强表达者预后差，特别是复发时CD34增强是最有意义的免疫学表型改变，CD34常与一些预后差的因素共存时有相加的作用，与CD34与Pgp或DR共存的患者，比单表达其中一个抗原的患者完全缓解率明显降低。,与AL预后有的抗原,2。Pgp： 表达者 1、预后较差， 2、常出现耐药现象， 3、常与预后不良的因素如CD34、 CD56相伴随。,与AML预后有的抗原,3。髓系抗原 表型越不成熟预后越差， CD33/CD15/CDw65低表达的AML一般提示治疗无反应或/和生存期较短。,与AL预后有的抗原,4。My+ALL：CR率低 占ALL21.6%， My+ALL

15、 CR52.6%, My-ALL CR80%. 5。CD34+ALL： CR率较低， 占ALL53.6% CD34+ALL CR62%,CD34-ALL CR82.6%, CD34+My+ALL： CR率很低，CR33.3%, CD34-My-ALL83.3%, 6。Ph+ALL ： CR率低，CR41%,Ph-ALL CR83.3%,与AML预后有的抗原,6。Ly+AML： CR率低 占AML43%， CR46%，合并CD34+38%，PgP+15%， （其中CD2+AML7.7%，CD7+AML22%，CD19+13%），Ly-AML：CR73% 7。CD7+AML： CR率低， 占AML

16、22%， 合并CD34+75%，PgP+55%，（ M1：42%，M2：18%，M4：28%，M5：9%，M3：0%）CR35%,与AML预后有的抗原,8。CD19+AML： CR率较低， 占AML13%，合并CD34+67%，PgP+33%，（M2：16%，M5：25%），CR50%。 9。CD2+AML： CR率较高， 占AML18%，合并CD34+57%，PgP+14%，（M3：36%，M5：13%），CR71%。,与AML预后有的抗原,10。MK+AML：CR率很低， 占AML12.8%， CR33%，其中HAL：45%，M5：24%，M2：14%，M3、M6不表达， 常伴CD34+、

17、PgP+，WBC明显增高。 11。Ph+AML： CR率低， 占AML210%，见于M1，M2，M4，CD34高表达，缓解期短。 从分子水平看： bcr断裂点位于M-bcr，产物为P210-CML急变而来； bcr断裂点位于m-bcr，产物为P190-原发性AML。,杂合性急性白血病,杂合性急性白血病（HAL）又称为混合性急性白血病（MAL）指白血病细胞表达一种系以上免疫标记的一组白血病，主要依靠免疫分型确诊。发生率占白血病的1.2%-1.5%，疗效差，预后不良。 分型 1。双表型：白血病细胞较均一，每个细胞同时表达淋巴系和髓系细胞的免疫学标志； 2。双克隆型：白血病细胞不均一，同时存在两种恶

18、性克隆性细胞，一般一种表达淋巴系标志，一种表达髓系细胞标志； 3。双系细胞：与双克隆型相似，但这两部分白血病细胞系来自同一多能干细胞。并限定只有当两种细胞并存，或6个月之内相继发生，才属次型； 4。转换型：白血病细胞由一种表型在6个月以后转为另一种表型，现已不将次型称为HAL。 HAL目前多联合应用形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学等手段来确定诊断。 HAL的淋系和髓系标志均大于标准，T、B淋巴细胞混合一般不作为HAL看。 系统标志积分达不到诊断标准的称为Ly+AML或My+ALL。 诊断标准 多才用积分法。,急性白血病免疫学 系列分型的积分方案,分数B系 T系 粒单系 巨核系 红系 2

19、M/cCD22 M/cCD3 MPO CD41 CD42 血型蛋白A cCD79a M/cTCR/ cCd13 CD61 RhD HbF c sIg M/cTCR/ FVIII 1 CD19 CD20 CD2 CD5 Mcd13 CD33 CD36 ABH CD36 ABH CD36 CDw65 cCd68 0.5 CD10 CD24 CD7 CD1a CD11a/c CD14 TdT CD4 CD15 CD65 CD117,系统标志积分,苏医 B系 T系 髓系 2分 CD22+、 CD3+、 POX+ 1分 CD19+、 CD2+、 CD13+、CD33+、 CD10+ CD41+、CD61

20、+ 0.5分 CD7+ CD14+、CD15+ 大于或等于2分为系列阳性,系统标志积分,CatovskyB系 T系 髓系 2分 CyCD22+ CyCD3+ MPO+ 1分 CD10+ CD19+ CD2+、CD5+ CyCD13+、CD33 0.5分 TdT+、 IgH TdT+、CD7+ CD11+、CD14+ CD15+, 大于或等于2分为系列阳性,系统标志积分,EGI B系 T系 髓系 2分 CD79a+ CyCD3+、 抗MPO+ CyIgM+、 mCD3+、 CyCD22+ 抗TcR+、 1分 CD19+ CD2+、 CD13+、 CD10+、 CD5+、 CD33+、 CD20+

21、 CD8+、 CDw65+ 0.5分 TdT+、CD24+、 TdT+、CD7+、 CD14+、CD15+、 CD64+、CD117 髓系大于或等于2分、淋系大于1分为系列阳性,系统标志积分,307医院 B系 T系 髓系 2分 CD22+、链+、 CD3+、 MPO、CD13+、 CD20+ TCR+、 CD14+、CD33+、 CD19+ Auer小体、PPO 1分 CD10+、CD24+ CD2+、CD5+、 CD11b+、CD11c+、 CD15+、NSE、 CAE、SBB、t（8：21） t（15：17） 0.5分 TdT+、IgH+ CD7+ AML形态学 大于或等于2分为系列阳性,系统标志积分,山东医大 B系 T系 髓系 2分 CD22+、链+、 CD3+、 MPO、CD13+、 CD20+ 、SmIg CD14+、CD33+、 CD19+ Auer小体、PPO CD41、CD42、CD61 1分 CD10+、CD24+ CD2+、CD5+、 CD11b+、CD11c+、 IgL、L3形态学 CD15+、NSE、 CAE、SBB、 t（15：17）或PML/RARa t（8：21）或AML/ETO 形态学M2b、M3a、M6 0.5分 TdT+、IgH+ TCR+、CD3+ 其他AML形态学 两系或三系积分大于