遗传学综合大实验--正式版

1、遗传学综合大实验（反交）,组员：方维 乔韦 陈力 王玲 葛彤,实验目的：,掌握果蝇的饲养及培养基配制的方法. 验证果蝇的分离定律，自由组合定律，伴性遗传定律以及和连锁与交换定律 学会记录结果以及掌握一定的统计处理方法 学习并掌握实验结果的数据处理及重组值计算方法 掌握利用三点测验绘制遗传学图谱原理及方法,实验原理,反交：26() 6(),分离定律： 决定相对性状 的一对等位基因在形成配子时彼此分开，分别进入一个配子细胞中去。其结果是在F2中出现两种表型，比例为3：1. 本实验采用果蝇的一对性状：灰体/黑檀体e(3),自由组合定律： 基因的分离是独立的，而在配子中非等位基因自由组合，产生四种比例

2、相同的配子。F2自交出现四种表现型，比例为9：3：3：1. 本实验将采用果蝇的两对相对性状：灰体/黑檀体e（3）、长翅/短翅m(1) 这两对性状分别位于不同的染色体上,伴性遗传： 由性染色体携带的基因在遗传时，性状总是与性别联系的遗传方式。 本实验将采用果蝇的一对相对性状：红眼/白眼w（1） （基因位于X染色体上）,连锁与交换定律： 位于不同染色体上的两对基因，它们所决定的两对相对性状在子二代中是自由组合的。而同一条染色体上的基因则是连锁的，但同源染色体的基因之间可以发生交换，交换的百分率即为重组值。重组值去掉百分符号就是基因在染色体上的相对距离，即基因间的图据。三点测交就是通过三对连锁基因的

3、交换行为，确定三对基因在染色体上的相对位置。 本实验采用果蝇的三对性状红眼/白眼w(1)、长翅/短翅m(1)和直刚毛/卷刚毛sn(1) 均位于X染色体上,实验材料,果蝇材料： 26() 6() 实验器具与药品：培养管 、解剖镜、麻醉瓶、死蝇瓶、白瓷板、毛笔、 镊子、烘干箱、培养箱。 药品：乙醚,实验步骤,一、处女蝇的挑选：亲本饲养两周后，把培养瓶内所有活的成虫倒干净。新羽化的雌果蝇自羽化开始10小时之内尚未成熟而无交配能力即为处女蝇。选择处女蝇时，先把培养瓶中的老果蝇全部除去，收集10小时之内羽化出来的新果蝇，麻醉后用放大镜在白瓷板上将果蝇雌雄分开，这时得到的雌果蝇应该全部都是处女蝇。 二、亲

4、本杂交产生F1：消毒过的毛笔把4只26品系处女蝇扫入培养管中，然后要把培养管水平放置，以免让麻醉状态下的果蝇沾到培养基或水珠被闷死，随即，用同样方法扫入4只6品系雄蝇，塞紧棉塞，保持水平放置直至果蝇苏醒。 三、贴标签：贴好标签，标明日期，品系、组别，移入25恒温培养箱中培养,四、去除亲本：培养七天后，把亲本果蝇成虫全部倒出来处死 五、观察F1： 45 天后，F1 成蝇出现，观察F1 性状。麻醉F1 成蝇，移出56 对果蝇，放到另一新培养瓶，置于培养箱中培养。 六、 7天后，把F1成虫全部倒出处死，已有卵和幼虫的培养基放回培养箱中继续培养 七、再过45 天，F2 成蝇出现，开始观察。连续统计78

5、 天。被统计过的果蝇放到死蝇盛留器中。,试管标签（反交）,（） （ ）,（） （ ）,原始数据采集表,实验结果记录表格：,分离定律,统计日期,性状,自由组合定律,统计日期,性状,伴性遗传,统计日期,性状,连锁交换定律,统计分析,实验结果测验表 分离定律,统计日期,性状,自由组合定律,统计日期,性状,伴性遗传,（1） 自由度n1 = 查 表，若P0.05，两者之间无显著差异，说明观察值与理论值之间的偏差是没有意义的，也就是说观察值符合假设。若P0.05，则两者之间差异显著，说明实验观察值不符合假设。 若出现重组与交换现象，则计算重组率 重组率=重组型数目/总数目,若出现重组与交换现象，则计算重组

6、值,（2）计算基因间重组值： m-sn间重组值=， m-w间重组值=， w-sn间重组值= （3）计算双交换值 m-w间重组值与m-sn间重组值及w-sn间重组值比较，需用二倍双交换值经行校正，得正确的双交换值。 （4）画遗传图： m sn w X染色体上三基因的定位,实验中可能存在的困难、问题及解决方法,1、利用实验室保存的那两个果蝇品系杂交，即可一次验证所有的遗传定律？ 正交： 6(）26 () 反交： 26() 6() 2.亲本雌蝇为何一定要选用处女蝇？怎样才能保证所选雌蝇为处女蝇？ 答：由于雌蝇生殖器官中有贮精囊，一次交配可保留大量精子，供多次排卵受精用，如果不选取处女蝇而直接进行交配

7、，则该果蝇可能已有其他果蝇的精子而使产生后代，不是与所用雄果蝇交配而得到的后代！因此做杂交实验前必须收集未交配过的处女蝇。 雌果蝇自羽化开始10小时之内尚未成熟而无交配能力。选择处女蝇时，先把培养瓶中的老果蝇全部除去，收集10小时之内羽化出来的新果蝇，麻醉后用放大镜在百瓷板上将果蝇雌雄分开，这时得到的雌果蝇应该全部都是处女蝇。如果要验证选取的处女蝇是否准确，先不要放入雄蝇，3天后看雌蝇是否产卵，如果产卵就不是处女蝇了。当证明确实是处女蝇的情况下再放入,3.在进行亲本杂交或F1自交一定时间后为什么要释放杂交亲本 或F1？ 答：因为当F1或F2代的成虫出现并有生育能力后，如果不及时将亲代释放， 就

8、会造成回交，对实验结果有很大影响。 4.反交组为何不能直接进行三点测验？如果需要进行反交组的 三点测验，应如何对实验过程加以调整？ 答：(1）因为反交组由于FI代的亲本雄蝇X染色体上的基因都是野生型,与F1代亲本雌蝇所产生的配子结合后掩盖了其隐形等位基因的表达.故在F2代的雌蝇中都表现为长翅红眼直刚毛.要用反交组验证三点侧交可以排除F2代的雌蝇,只统计F2代的雄蝇,再按三点测验的方法求出遗传图距.（2）也可以利用F1雌性与亲本雄性回交，统计F2性状，即可求出遗传图距,5.伴性遗传的性状在正交和反交的后代中为什么会出现差异？与性别的关系如何？,亲本P: 26() 6() 黑檀体长翅红眼直刚毛 灰

9、体短翅白眼卷刚毛 (e e, m+ w+ sn+/ m+ w+ sn+) (e+ e+, m w sn/Y) 亲本P: 26() 6() 黑檀体长翅红眼直刚毛 灰体短翅白眼卷刚毛 (e e, m+ w+ sn+/ Y) (e+ e+, m w sn/m w sn) F1: () 灰体长翅红眼直刚毛 () 灰体长翅红眼直刚毛 (e+ e, m+ w+ sn+/ m w sn) (e+ e, m+ w+ sn+/ Y) F1: () 灰体长翅红眼直刚毛 ( ) 灰体短翅白眼卷刚毛 (e+ e, m+ w+ sn+/ m w sn) (e+ e, m w sn/ Y) F2:,注：黑字代表反交组,红

10、字代表正交组,F2（反交组）: 灰体红眼长翅直刚毛（ 雌）e+ e+,m+ w+ sn+/ m+ w+ sn+ e+ e,m+ w+ sn+/ m+ w+ sn+ e+ e+,m+ w+ sn+/ m w sn e+ e,m+ w+ sn+/ m w sn; 黑檀体红眼长翅直刚毛(雌) e e,m+ w+ sn+/ m+ w+ sn+ e e,m+ w+ sn+/ m w sn 黑檀体红眼长翅直刚毛(雄) e e,m+ w+ sn+/ Y 灰体红眼长翅直刚毛(雄） e+ e+,m+ w+ sn+/ Y e+ e,m+ w+ sn+/ Y 黑檀体白眼短翅卷刚毛(雄) e e,m w sn/ Y

11、灰体白眼短翅卷刚毛(雄) e + e+,m w sn/ Y e + e, m w sn/ Y 对于反交，所得到的的雌蝇均为红眼长翅直刚毛，而雄蝇既存在红眼长翅直刚毛，又存在白眼短翅卷刚毛且比例为2:1:1，而红眼长翅直刚毛：白眼短翅卷刚毛比例为3:1.,F2（正交组）： 灰体红眼长翅直刚毛（雌） e+ e+,m+ w+ sn+/ m w sn e+ e,m+ w+ sn+/ m w sn; 灰体白眼短翅卷刚毛（雌） e+ e+,m w sn/ m w sn e+ e,m w sn/ m w sn; 黑檀体红眼长翅直刚毛(雌) e e ,m+ w+ sn+/ m w sn 黑檀体白眼短翅卷刚毛(

12、雌) e e ,m w sn / m w sn 灰体红眼长翅直刚毛（雄） e+e+,m+ w+ sn+/ Y e+ e,m+ w+ sn+/ Y 灰体白眼短翅卷刚毛（雄） e+ e+,m w sn/ Y e+ e,m w sn / Y 黑檀体红眼长翅直刚毛(雄) e e,m+ w+ sn+/ Y 黑檀体白眼短翅卷刚毛(雄) e e,m w sn / Y 对于正交后红眼长翅直刚毛和白眼短翅卷刚毛在雄蝇和雌蝇中均会出现且比例为1:1,决定性状的基因为于位于性染色体上，所以其遗传与性别有关，同配性别传递纯合显性遗传基因时，F2性状分离呈显性：隐形的值为3：1；同配性别传递纯合隐性基因时F2性状与性别均为1:1,6.本实验中为何正交组与反交组自由组合定律的预期分离比不同？ 正交组的自由组合定律分离比,是以体色和翅长为考虑性状,所以F