常用的分离和富集方法

1、分析化学,主讲：江 虹,化学化工学院,第11章 常用的分离和富集方法,要求： 1.理解沉淀分离法的原理及其 应用； 2.掌握溶剂萃取分离法的基本 原理和方法； 3.掌握分配系数KD、分配比D 的物理意义和萃取百分率 （E%）的计算；,要求： 4.掌握离子交换分离法的原理 及其应用； 5.掌握离子交换树脂的交换平 衡与亲和力； 6.了解液相色谱分离法的原理 与分类； 7.了解比移值Rf的物理意义和 测定方法。,第11章 常用的分离和富集 方法,11-1 概述 对分离的要求： （1）干扰组分应减少至不再干扰被测组分的测定； （2）被测组分在分离过程中的损失要小到可忽略不计。 分离效果的衡量： （1

2、）回收因数（RA）,对常量组分的分析，要求回收率99.9% 对微量组分的分析，要求回收率99% 对痕量组分的分析，要求回收率95% （2）分离因数（SB/A）,11-2 沉淀分离法 利用沉淀反应使被测离子与干扰离子分离的方法就是沉淀分离法。 一、常量组分的沉淀分离 氢氧化物沉淀分离法、硫化物沉淀分离法。 二、微量组分的共沉淀分离和富集 共沉淀分离法是在试液中加入一种试剂，使其产生一种共沉淀剂（载体），使被测定的元素因共沉淀作用而与沉淀剂一同析出，以达到分离与富集的目的。,（一）无机共沉淀剂 无机 共沉淀剂的作用主要是对痕量元素的表面吸附、吸留或与痕量元素形成混晶，而把微量组分载带下来。 1.吸

3、附或吸留作用的共沉淀剂 例如：欲从金属铜中分离出微量铝。,2.混晶作用的共沉淀剂 如果两种金属离子生成沉淀时，具有相似的晶格，就能生成混晶而共同析出。 如：BaSO4和RaSO4 PbSO4和SrSO4 3.形成晶核的共沉淀剂 有些痕量元素由于含量实在太少，即使转化成难溶物质，也无法沉淀出来。但可把它作为晶核，使另一种物质聚集在该晶核上，使晶核长大成沉淀而一起沉淀下来。,（二）有机共沉淀剂 特点：富集效率较高；选择性较好；有机载体容易通过高温灼烧除去，从而获得无载体的被共沉淀的元素，这样不致干扰微量元素的测定。 1.利用胶体的凝聚作用 利用带不同电荷的胶体的凝聚作用，使被测元素的化合物胶体与共

4、沉淀剂的胶体带有不同性质的电荷，彼此结合而沉淀下来。例如：欲分离富集试液中微量的H2WO4。,2. 利用形成离子缔合物 缔合物：阴离子和阳离子以较强的静电引力相结合而形成的化合物叫做缔合物。 例如：欲分离富集试液中微量的Zn2+。 （P.307） 在含有痕量Zn2+的弱酸性溶液中，若加入硫氰酸铵NH4SCN和甲基紫，甲基紫在溶液中电离为带正电荷的大阳离子R+，它们之间发生如下反应：,3.利用惰性共沉淀剂 加入一种有机试剂与被测金属离子生成螯合物或离子缔合物，同时再使溶液中形成一种含有相同有机结构的固体萃取剂，两者结合发生共沉淀作用。 例如：欲分离富集试液中微量的Ni2+。,11-3 溶剂萃取分

5、离法,如果被萃取组分是有色化合物，就可以用比色法或分光光度法测定，这种方法称为萃取比色法或萃取光度法。,萃取：在一定的条件下，利用有机溶剂将无机组分从水溶液中分离出来就叫做萃取。 一、萃取分离的基本原理 （一）萃取过程的本质 无机盐如：CaCl2、La(NO3)3 具有亲水性。,有机化合物如：酚酞、PAN指示剂及常用的有机溶剂，具有疏水性。 萃取分离就是利用物质溶解性质的上述差异，用与水不相混溶的有机溶剂，从水溶液中把无机离子萃取到有机相中，以实现分离的目的。,例如：镍的萃取 在氨性溶液（pH9）中，加入丁二酮肟，使其与Ni2+形成螯合物：,鲜红色螯合物,丁二酮肟,(二)分配系数 当某一溶质A

6、同时接触到两种互不混溶的溶剂时，溶质A就分配在这两种溶剂中： A水 A有,分配定律,分配系数,活度比,例：含有0.120g碘的碘化钾溶液100mL，25时用25.0mL四氯化碳与之一起振摇，假设碘在四氯化碳和在碘化钾溶液之间的分配达到平衡后，在水中测得有0.00539g碘，试计算碘的分配系数。,解：0.00539g碘存在水中，则有 0.120-0.00539=0.115g碘进入CCl4中， ,故 碘的分配系数为85。,（三）分配比 表示溶质A在两相中以各种型体存在的总浓度的比值，就是分配比，用D表示。,只有在简单体系中，溶质在两相中的存在形式相同时，分配比D才等于分配系数KD。,例如：碘在四氯

7、化碳和水中的分配过程，是溶剂萃取最典型的简单示例。如果水溶液中有I-存在，I2和I-形成络离子I3- ：,I2 + I- I3-,I2分配在两种溶剂中： I2水 I2有,当I-=0时，D=KD ； 当I-渐渐增加，D值渐渐下降； 当KfI-1时，上式可以简写为：,随着I-增加，D值按比例下降。,又如：醋酸在苯和水中的分配过程： CH3COOH水 CH3COOH有,醋酸在水溶液中存在着电离过程：,CH3COOH水 CH3COO- + H+,(1),(2),醋酸在苯中部分地聚合成二聚体： 2CH3COOH有 (CH3COOH)2有,(3),醋酸在两相间的分配比D为：,（4）,将（1）、（2）、（3

8、）式代入（4）式：,从上式可看出，在即发生电离、聚合的情况下，分配比随着溶液中溶质的浓度和酸度而改变。,（四）萃取率 萃取率表示物质萃取到有机相中的程度。,分子分母同除以C水V有，则得：,当V有=V水时，,当D=1000时，E=99.9%，可认为一次萃取即可完全； 当D=100时，E=99.5%，一次萃取不能定量完全，一般要求连续萃取2次； 当D=10时，E=90%，需要连续萃取数次才能完全； 当D=1时，E=50%，萃取完全比较困难。,若连续萃取，萃取百分率可推导如下： 假设用V有（mL）溶剂萃取，V水（mL）试液中含有溶质A为m0（g），一次萃取后水相中剩余溶质A为m1（g），则进入有机相

9、的量为（m0-m1）g，这时分配比D为：,(2),例：在盐酸介质中，用乙醚萃取镓时，分配比等于18，若萃取时乙醚的体积与试液相等，求镓的萃取百分率。 解：已知 D=18， V水=V有,例：用8-羟基喹啉氯仿溶液于pH=7.0时，从水溶液中萃取La3+。已知它在两相中的分配比D=43，今取含La3+的水溶液（1mg/mL）20.0mL，计算用萃取液10.0mL 一次萃取和用同量萃取液分两次萃取的萃取率。,解：已知 m0=20.0mg, V水=20.0mL , V有=10.0mL, D=43,用10.0mL萃取液一次萃取时：,或,每次用5.0mL萃取液连续萃取两次时：,或,例：P.310，例11-

10、1 题略 解：（1）已知 V水=100mL ，V有=90mL ，D=85 ， m0=10mg 全量一次萃取时：,（2）每次用30mL分3次萃取时：,例：P.310, 例11-2 略 例：某溶液含Fe3+10mg，将它萃取于某有机溶剂中，分配比D=99，问用等体积溶剂萃取1次、2次各剩余Fe3+多少？萃取百分率各为多少？ 解：已知 m0=10mg ，D=99 ，V有=V水 ，则,（1）萃取1次，n=1，剩余Fe3+的量等于：,（2）萃取2次，n=2，剩余Fe3+的量等于：,萃取百分率为：,萃取百分率为：,（五）分离系数 分离系数是用来表示A、B两组分在萃取中分离效果的好坏。 分离系数又称分离因数

11、，它是两种不同组分分配比的比值。,二、重要萃取体系 （一）金属螯合物萃取体系 1. 常用的螯合剂 （1）8-羟基喹啉 （2）双硫腙 （3）铜铁试剂（又称铜铁灵） （4）乙酰基丙酮 （5）二乙基胺二硫代甲酸钠（又称铜试剂） 2. 金属螯合物的萃取平衡,包括四个平衡过程： 萃取剂在水相和有机相中的分配平衡；萃取剂在水相中的电离平衡；被萃取离子和萃取剂的络合平衡；生成的内络盐在水相和有机相中的分配平衡。,（1）,（2）,（3）,（4）,（5）,分子分母同乘以R-n，同时除以 MRn水，并把（3）、（4）两式代入， 则得：,（6）,由（2）式得：,代入（6）式则得：,（7）,由（1）式得：,（8）,代

12、入（7）式得：,由于所形成的内络盐在水中的溶解度很小，在（5）式的分母中Mn+MRn水 ，相应地在（8）式中：,（9）,（10）,（11）,3. 萃取条件的选择 （1）螯合剂的选择 选择的螯合剂应与被萃取金属离子形成稳定的螯合物。 （2）酸度的控制 （3）萃取溶剂的选择 根据螯合物的组成和结构，按照“相似相溶”规则选择合适的有机溶剂。 （4）干扰离子的消除,（二）离子缔合物萃取体系 1. 缔合物的分类 （1）金属阳离子的离子缔合物 金属阳离子与大体积的络合剂作用，形成没有或很少配位水分子的络阳离子，然后与适当的阴离子缔合，形成疏水性的离子缔合物。 （2）金属络阴离子的离子缔合物,金属离子与溶液

13、中简单配位阴离子形成络阴离子，然后与大体积的有机阳离子形成疏水性的离子缔合物。 （3）形成 Yang盐的缔合物 含氧的有机溶剂中的氧原子提供孤对电子，与H+或其它阳离子形成络离子，称为 Yang离子。,例如：在HCl溶液中，用乙醚萃取Fe3+。溶剂乙醚与H+键合生成 Yang离子(CH3CH2)2OH+,该 Yang离子与铁的络阴离子FeCl4-缔合成称为Yang盐的中性分子，可被有机溶剂萃取。,Fe3+ + 4Cl- = FeCl4-,含氧有机溶剂形成Yang离子的能力按下列次序增强： R2OROHRCOOHRCOORRCOR,Yang离子,离子缔合物,（4）形成铵盐的缔合物 含氮有机物中的

14、N原子可提供孤对电子与H+结合形成带正电荷的铵离子型的大阳离子，进而与带负电荷的络离子形成电中性的铵盐型缔合物。这类大分子缔合物难溶于水，易溶于有机溶剂。 （5）形成其它离子缔合物,2. 离子缔合物萃取条件的选择 （1）萃取剂和有机溶剂的选择 （2）酸度 （3）加入盐析剂 加入某些与被萃取化合物具有相同的阴离子盐类，有助于提高萃取效率，这种作用称为盐析作用。,例如：用甲基异丁酮萃取硝酸铀酰晶体（UO2(NO3)2）时，如果在溶液中加入硝酸盐，如Mg(NO3)2 ,则分配比就能始终保持相当大的数值，最后使萃取分离达到完全。这就是盐析作用，加入的硝酸盐为盐析剂。,作为盐析剂，必须满足以下几个条件：

15、 盐析剂要易溶于水，而不溶于有机溶剂； 盐析剂与被萃取物及共存的其它盐类应不发生化学反应； 加入的盐析剂要对以后的分析没有妨碍。,（4）加入适当的配位剂 使金属离子先形成亲水性小的络阴离子，然后才能与 羊离子或铵离子形成离子缔合物。 （三）无机共价化合物萃取体系 某些稳定的无机共价化合物，在水中以分子形式存在，不带电荷，没有极性或极性很小。由于它们在水中的溶解度较小，而易溶于某些有机溶剂中，可以利用CCl4、CHCl3或苯等进行萃取。,三、萃取操作方法 常用的萃取操作有三种：间歇萃取法、连续萃取法和逆流萃取法。 分配比D足够大时，可采用间歇萃取法。 分配比较小的体系，应采用连续萃取法。 四、溶

16、剂萃取在分析化学中的应用 （1）萃取分离 （2）萃取富集 （3）萃取比色,11-4 离子交换分离法 利用离子交换剂与溶液中的离子发生交换作用，而使离子分离的方法，称为离子交换分离法。 19世纪泡沸石软水剂 Ca2+ + Na2Z 2Na+ + CaZ,交换,再生或洗脱,测定尿中氨含量,20世纪人工合成有机离子交换树脂（称离子交换树脂）,一、离子交换树脂的结构和性质 （一）结构 离子交换树脂是具有网状结构的复杂的有机高分子聚合物。网状结构的骨架部分一般十分稳定，对于酸、碱、某些有机溶剂和一般的弱氧化剂都不起作用，对热也比较稳定。,1. 阳离子交换树脂 能交换阳离子的树脂，称为阳离子交换树脂。 磺

17、酸型离子交换树脂是一种阳离子交换树脂，其中不能交换的离子称为固定离子，可交换的离子称为平衡离子。,能交换阳离子的活泼基团： SO3H CH2SO3H PO3H2 COOH OH,SO3H COOH N(CH3)3,（1）强酸性阳离子交换树脂,（2）弱酸性阳离子交换树脂 2.阴离子交换树脂 能交换阴离子的树脂称为阴离子交换树脂。含有一个可以交换的阴离子和一个不能交换的阳离子。,（1）强碱性阴离子交换树脂 具有强碱性的活泼基团季胺基N(CH3)3 。 （2）弱碱性阴离子交换树脂 具有伯胺基RNH2、仲胺基RNH(CH3)及叔胺基RN(CH3)2的树脂为弱碱性阴离子交换树脂。,3.特殊的离子交换树脂

18、 （1）具有高选择性的离子交换树脂 （2）螯合树脂 （3）电子交换树脂 能使离子发生氧化还原反应的离子交换树脂称为电子交换树脂（称为氧化还原树脂更为合适）。,（二）性质 1.交联度,例如：用90份苯乙烯和10份二乙烯苯合成制得的树脂。交联度为10%,交联度大小对离子交换树脂性能的影响,2.交换容量,例：称取0.5000g氢型阳离子交换树脂，装入交换柱中，用NaCl溶液冲洗，至流出液使甲基橙呈橙色为止。收集全部洗出液，用甲基橙作指示剂，以0.1mol/L NaOH标准溶液滴定，用去24.51mL，计算树脂的交换容量。,解：用去NaOH溶液的物质的量等于被交换到树脂上Na+的物质的量，也等于树脂上

19、被交换下来的H+的物质的量。,二、离子交换亲和力,交换平衡常数,离子在离子交换树脂上的交换能力，称为离子交换树脂对离子的亲和力。,当KB/A1时，树脂对B+的亲和力大于A； 当KB/A1时，树脂对B+的亲和力小于A.,例：称取1.0g氢型阳离子交换树脂，加入100mL0.010mol/L的HNO3溶液（其中含有1.010-4mol/L的AgNO3）中，使交换达到平衡。计算银的分配系数和银被交换到树脂上的百分率各为多少？已知KAg/H=6.7；树脂的交换容量为5.0mmol/g。 解：,Ag+的分配系数为：,已知KAg/H=6.7，达平衡时：,树脂中的Ag+r为溶液中Ag+的3.34103倍。,

20、即树脂中银的量为溶液中银的量的33.4倍，所以银被交换的百分率为：,例：P.318 例11-3 略,离子交换树脂对不同离子亲和力的大小与离子所带电荷及它的水化半径有关。一般为： 不同价态的离子，电荷越高，亲和力越大；相同价态的离子，水化半径越小（对阳离子而言，原子序数越大），树脂对它们的亲和力就越大。,三、离子交换色谱法 因离子交换分离法类似于色谱分离过程，故又称为离子交换色谱法。 以强酸性阳离子交换树脂分离K+和Na+为例。（P.320,图11-3） 交换反应：RH+ + K+ RK+ + H+ RH+ + Na+ RNa+ + H+,洗脱反应：RNa+ +H+ RH+ + Na+ RK+

21、+ H+ RH+ + K+,四、离子交换分离法的操作 （一）树脂的选择和处理 1. 选择 例如：Ca2+、Mg2+的测定，PO43-有干扰。 通过Cl-型强碱性阴离子交换树脂，交换除去PO43-，则Ca2+、Mg2+就能顺利地测定。,当需要测定某种阴离子，而受到共存的阳离子干扰时，应选用强酸性阳离子交换树脂，交换除去干扰的阳离子，阴离子仍留在溶液中可供测定。 如果需要测定某种阳离子，而受到共存的其它阳离子的干扰，则可先将阳离子转化为络阴离子，然后再用离子交换法分离。 在分析中必须根据需要选择一定粒度的树脂。,交换树脂粒度选择表,分析用阳离子交换树脂交联度一般为：8%； 阴离子交换树脂一般用4%

22、左右。 2.处理 处理过程包括：研磨、过筛和浸泡、净化等。 （二）装柱 注：装柱前树脂需经净化处理和浸泡溶胀。否则干燥的树脂将在交换柱中吸收水分而溶胀，使交换柱堵塞。,（三）交换 1. 柱上操作 以Ca2+在H+-型强酸性阳离子交换树脂上的交换反应为例： 2RSO3H+ + Ca2+ (RSO3)2Ca2+ + 2H+,例如： 分离Fe3+和Al3+时，可在9mol/L HCl溶液中进行交换，这时，铝成Al3+存在，而铁则成为FeCl4-络阴离子。如果采用阴离子交换树脂进行分离，则FeCl4-交换留在柱上，Al3+进入流出液中，从而将Fe3+和Al3+分开。,2. 交换过程及交换条件的选择,交

23、换过程,洗脱过程,在流出液中开始出现未被交换的阳离子（或阴离子）的这一点，称为“始漏点”或“流穿点”。到达始漏点为止，交换柱的交换容量称为“始漏量”或“工作交换容量”。柱中树脂的全部交换容量称为“总交换容量”或“全交换容量”。,影响始漏量的各种因素： （1）离子的种类 （2）树脂颗粒的大小 （3）溶液的流速 （4）温度 （5）交换柱的形状 （6）溶液的酸度,（四）洗脱及条件的选择 洗脱过程是交换过程的逆过程。 洗脱情况与许多因素有关： （1）树脂颗粒的大小 （2）洗脱剂的浓度 （3）流速,注：在装柱和整个交换洗脱过程中，要注意使树脂层经常全部浸在液面下，切勿让上层树脂暴露在空气中，否则在这部分

24、树脂间隙中会混入空气泡，这种空气泡在以后加水或加溶液时不会逸出。当树脂间隙中夹杂气泡时，溶液将不是均匀地流过树脂层，而是顺着气泡流下，不能流经某些部位的树脂，即发生了“沟流”现象，使交换、洗脱不完全，影响分离效果。,五、离子交换分离法的应用 （一）纯水的制备 自来水中常含有一些无机离子，在生产和科研中普遍采用离子交换分离法进行纯化，这样制得的纯水又叫做去离子水。纯度可以符合一般分析工作的要求。 交换除去各种阳离子： M+ + RSO3H RSO3M + H+,如水中的CaCl2：,交换除去阴离子：,H+ + X- + RN(CH3)3OH- RN(CH3)3X- + H2O,Cl- + RN(

25、CH3)3OH RN(CH3)3Cl + OH-,Ca2+ + 2RSO3H (RSO3)2Ca + 2H+,H+ + OH- H2O,(二)干扰离子的分离 1. 阴阳离子的分离 例如：用重量法以BaSO4沉淀形式准确测定SO42-时，Fe3+、Ca2+等阳离子存在时常常发生共沉淀现象而产生误差。 为此，在BaSO4沉淀前先把试液中的阳离子交换除去，然后以BaCl2溶液为沉淀剂，用重量法测定流出液中的SO42-。 为了分离除去干扰的阳离子，也可使被测定的阳离子络合成络阴离子，而后通过阴离子交换树脂以分离除去。,2. 同性电荷离子的分离 例如：欲分离Li+、Na+、K+三种离子。 把此溶液通过H

26、+-型阳离子交换柱，三种离子均被交换在树脂上，然后用1mol/L 稀HCl淋洗，三种离子都被洗脱。 当它们向下流动时，遇到新鲜的树脂层，又被交换上去，接着又被HCl洗脱。如此反复地吸着、洗脱。由于树脂对Li+、Na+、K+的亲和力是K+ Na+ Li+，因此Li+先被洗脱，然后是Na+，最后是K+。将洗脱下来的Li+、Na+、K+分别用容器承接后进行测定。,（三）微量组分的富集 例如：测定天然水中K+、Na+、Ca2+、Mg2+、SO42-、Cl-等组分。 可取数升水样，让它流过阳离子交换柱，再流过阴离子交换柱。然后用数十毫升至100mL的稀盐酸溶液把交换在柱上的阳离子洗脱，另用数十毫升至10

27、0mL的稀氨液慢慢地洗脱各种阴离子。经过这样交换、洗脱处理，这些组分的浓度就增加数十倍至100倍，于是在流出液中测定这些离子就比较方便了。,蔗糖中金属离子的测定、饮用水中碘（131）的测定、牛奶中锶（90）的测定，都可利用离子交换法预先进行富集。,11-5 液相色谱分离法 一、色谱分离法简述 色谱法又称层析法或色层分析法，是一种物理化学分离方法。 色层分析过程中总是由一种流动相带着被分离的物质流经固定相，从而使试样中的各种组分分离。,流动相 固定相 色层分析法种类,按层析分离的原理的不同，又可分为： 1.吸附层析：固定相为吸附剂，利用它对被分离组分吸附能力强弱的差异来进行分离。气固色谱和液固色

28、谱属于这一类。 2.分配层析：是利用各个被分离组分在固定相和流动相两相间分配系数的不同来进行分离的，气液层析和液液层析属于这一类。 3.离子交换层析：以离子交换剂作固定相，利用各种组分的离子交换亲和力的差异来进行分离。,4.凝胶层析（又称排阻色谱）：用凝胶作固定相，利用凝胶对分子大小不同的组分所产生阻滞作用的差异来进行分离。 按固定相所处的状态不同，色层分析可分类如下： 1.柱层析：将固定相装填在金属或玻璃制成的管中，做成层析柱以进行分离的，称为柱层析；把固定相附着在手细管内壁，做成色谱柱的，为毛细管色谱。,2.纸层析：利用滤纸作为固定相以进行层析分离的为纸层析。 3.薄层层析：把吸附剂粉末铺

29、成薄层作为固定相以进行层析分离的为薄层层析。 二、柱色谱（又叫柱层析） （一）吸附柱层析 所谓吸附是指物质在吸附剂表面上集中浓缩的现象。,吸附剂一般是多孔的微粒状物质，在其表面具有许多吸附中心（或吸附位置），这些吸附中心数量的多少以及吸附能力的强弱直接影响吸附剂的吸附性能。 柱色谱法是把吸附剂如氧化铝、硅胶等装在一支玻璃管内，作为固定相，叫做色谱柱。,柱色谱法分离过程示意图,色谱分离中，溶质在固定相和流动相中差速迁移，它既能进入固定相，又能进入流动相，这个过程称为分配过程。分配过程进行的程度可用分配系数KD表示。,在低浓度和一定温度下KD是一个常数。,KD值大，表明该物质在柱内被吸附得牢固，移

30、动的速度慢；,KD值小，表明该物质在柱内吸附得不牢固，移动速度快；,KD=0，意味着该物质不进入固定相，即该物质不被吸附，将随同流动相迅速流出。, 混合物各组分之间分配系数KD值相差越大，越容易分离，反之，则难分离。,柱色谱分离法对吸附剂的要求： 1.应具有较大的吸附面积和足够大的吸附能力； 2.吸附剂应不与洗脱剂和样品起化学反应，在洗脱剂中不溶解； 3.吸附剂的颗粒要有一定的细度，并且粒度要均匀。,柱色谱法对洗脱剂的要求： 1.对样品组分的溶解度要大； 2.粘度小，易流动，不致洗脱太 慢； 3.对样品和吸附剂无化学作用； 4.纯度要合格。,（二）分配柱层析 分配层析是根据欲分离组分在两种互不

31、混溶（或部分混溶）溶剂间溶解度的差异来实现的。 这两种互不混溶的溶剂：一种是流动相；另一种是吸收在载体或担体中的溶剂，这种溶剂在层析过程中不流动，是固定相。,例如：含有一定量水分的硅胶，吸附性能消失（或极弱），它含有的水分是固定相，硅胶为担体。当流动相带着试样中的各种组分沿着层析柱流动时，试样中的各种组分就在流动相和固定相两种溶剂间进行分配，不同的组分分配系数有差异时，它们在层析柱中前进的速度就不同，于是得以分离。,分配柱层析中常用的担体有如下几种： 1.硅胶：在分配柱层析中用作担体的硅胶应在较低温度下活化，使其表面残留一定量的水分作固定相。,2. 纤维素：层析用纤维素可分两种，即天然纤维素和微晶纤维素。 3. 硅藻土：系天然存在的非晶形硅胶，其中除SiO2外还含Al2O3、Fe2O3、CaO、Na2O和有机物及水分等。需经净制才能供层析用。,分配柱层析中常用的固定相：水；稀硫酸、甲醇、甲酰胺等强极性溶剂作固定相。