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1、二 、动物细胞工程 (第二课时),动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体,胚胎移植,核移植,读下面一段文字资料,思考以下问题:,长期以来,为了获得抗体,采用的是把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体,不仅产量低,而且抗体的特异性差,纯度低,反应不够灵敏。人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。,1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念,2、怎样才能获得单克隆抗体?,提示1:仅用细胞培
2、养技术可行吗?,提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?,提示3:有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢?,用单个B细胞进行克隆,得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体,这种抗体就叫做单克隆抗体。,实验目的:制备单克隆抗体. 实验原理:B淋巴细胞能产生抗体,骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。 实验材料:小白鼠 实验器材:培养皿、针筒等等。 实验过程:如下页,根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验方案:,单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,(1)为什么选用小鼠骨髓瘤
3、细胞与B淋巴细胞融合?,(小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖, B淋巴细胞能够产生抗体, 细胞的同源性越近,融合形成的杂种细胞越易成活。,(2)骨髓瘤细胞是癌细胞吗?,有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞, 具有转移能力的肿瘤细胞,称为癌细胞, 所以说,瘤细胞不能等于癌细胞。,(3)整个制备过程为何要经过两次筛选?,(第一次筛选得到杂交瘤细胞(多种), 第二次需先在多孔培养板上,在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的,所以产生的抗体必然是化学性质单一的,特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义,只不过克隆的不是B淋巴细胞,而是杂交瘤细胞。),胚胎移植技术,试管动物(婴儿)培养过程,受精卵,核移植技术,克隆羊培育过程,另一头绵羊的子宫,植物组织培养和动物细胞培养的比较,细胞全能性,细胞增殖,固体 营养物质 植物激素,液体 营养物质 动物血清,培养成植株,培养成 细胞株 细胞系,快速繁殖 培养无病毒植株,获得细胞产品、细胞,植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较,细胞膜 流动性,去壁 原生质体 融合,细胞分散 细胞融合,物
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