生物安全柜及应用ppt课件.ppt

1、生物安全柜biological safety cabinets （BSC）,湛江市疾病预防控制中心 艾滋病确证实验室,1,工作台的分类,超净工作台 生物安全柜 生物安全柜的基本防护功能 保护操作人员 保护样品 保护环境,2,生物安全柜的定义,Class II 生物安全柜,防止操作处理过程中，含有危险性或未知性生物微粒气溶胶散逸的箱形空气净化负压安全装置,3,生物安全柜的分类,根据处理样品的危害不同，分为三个等级: 级, 级, 级 BSC-(级生物安全柜) BSC-( 级生物安全柜) BSC- ( 级生物安全柜),4,级生物安全柜的分类,1.级A1型生物安全柜 柜内空气70%循环，30%排出，窗

2、口流速0.4/s 2.级A2型生物安全柜 柜内空气70%循环，30%排出，窗口流速0.5/s 3.级B1型生物安全柜 柜内空气30%循环，70%排出,窗口流速0.5/s 级B2型生物安全柜 柜内空气100%排出,窗口流速0.5/s,5,级生物安全柜,1.美国对级生物安全柜有新的分 类方法 2.欧洲产品无B2型级生物安全柜,6,级生物安全柜(BSC ),主要功能： 用于低度危险性的微生物和病原体 作业空间并未到达无菌洁净的条件 保护操作人员及环境 但不保护样品,7,级生物安全柜(BSC ),主要结构: 带有抽气装置的操作箱 气体向操作箱内流动,保护操作者 排出气体经HEPA过滤 气流速度在0.4

3、/s以上(排气量/进气面积),8,级生物安全柜,可开启前窗在负压下操作 表面风速75-100fpm 排出的气体经HEPA 过滤 保护操作人员和环境,HEPA,适用于样品不需保护的实验工作,9,级生物安全柜（BSC ）,主要功能： 用于操作低、中度危险的微生物，病原体 操作空间到达无菌的洁净条件,10,级生物安全柜（BSC ）,主要结构： 具有前吸风口和排气口 可防止内部污染气体流出 避免外部气体进入箱內污染样品 气体经HEPA过滤排出,11,级生物安全柜的分类,B1,Type B,B2,Class II,Type A,A1,A2,废气经烟罩排入实验室或室外,废气必须经排风系统排至室外，并带报警

4、装置,12,安全柜的选择,选用A类还是B类生物安全柜? 不是生物因素 而是是否使用挥发性的有害物质或放射性物质,Type B,Type A,13,级生物安全柜,满足生物安全等级1、2、3的要求,不涉及放射性物质,不涉及挥发性有害化学品,建议不应有明火,14,15,级生物安全柜,最小流速 75 fpm,Type A1有排风管路,Type A1无排风管路,16,17,级A2型生物安全柜（B3型）,前窗进风气流平均流速0.5m/s 经HEPA的下送气流与操作口向内气流混合 循环气流比例：70% 经HEPA过滤器的空气，可以排回实验室或通过排风罩排入环境,18,无排风管,级A2型生物安全柜,最小表面风

5、速0.5m/s,有排风管,19,级A2生物安全柜(无排风管),满足生物安全等级1、2、3的要求,不涉及放射性物质,不涉及挥发性有害化学品,建议不应有明火,20,级A2型生物安全柜(有排风管),满足生物安全等级1、2、3的要求,适用于含痕量放射性物质的工作,适用于含少量挥发性有害化学品的工作,建议不应有明火,21,BSC-A2型,正压污染区被负压区域包围,无外接风道,有外接风道,22,23,级B1型生物安全柜,前窗进风气流平均流速0.5m/s 经HEPA过滤器的下送气流，大部分是未被污染的循环吸入气流 循环气流比例为30% 污染的下送气流经HEPA过滤后，大多数经过专门的排风管排入大气,24,级

6、B1型生物安全柜,经HEPA过滤的下送气流，大部分未被污染,污染的下送气流经HEPA过滤后，大部分经排风管排入大气,25,级B1型生物安全柜,满足生物安全等级1、2、3的要求,工作区域的后部可使用少量的放射性物质,工作区域的后部可使用少量的挥发性有害化学品,建议不应有明火,26,BSC-B1型,正压污染区被负压区域包围,27,级B2型生物安全柜（全排型）,前窗进风气流平均流速0.5m/s 循环气流比例为0，即柜中排出的气体不再循环 所有污染的风道和压力排风系统均保持负压,28,级B2型生物安全柜（全排型）,29,级B2型生物安全柜（全排型）,满足生物安全等级,适用于放射性物质*,适用于挥发性有

7、害化学品,建议不应有明火,30,BSC-II-B2型,正压污染区被负压区域包围,31,BSC-型,保护实验人员、实验对象和环境 密闭结构 通过手套操作 柜内负压不小于120Pa 排风两道高效过滤器,32,33,一般无定型产品，需特殊定货 若干级生物安全柜连在一起使用，全部操作流程均在柜内完成，以确保安全,级生物安全柜,34,级生物安全柜,35,生物安全柜的操作理论,颗粒经HEPA过滤去除 气流为层流 气流有方向,生物安全柜的要求:,36,生物安全柜的操作理论,HEPA滤膜 马达/风扇强制气体流动 马达转速的控制部分 气体的吸入、平衡控制及管路系统,生物安全柜的主要部件:,37,操作理论-层流,

8、层流气流向下扫过工作区域，捕获气溶胶，经安全柜的内层至HEPA滤膜 为实现真正的层流，各点的气流速率必须在平均流速的+/- 20%以内,38,操作理论-有方向的气流,空气从柜前和周围吸入，使工作区域的气溶胶更难逃逸 此气流通常以向内吸入的体积或平均流速计算、表示,39,操作理论-烟气分束,在工作区域的一个垂直平面内烟气被分束，向前方和后方的气孔移动 为最有效的防止烟气逃逸，物品应放在烟气分束以后的区域，操作也应在此进行,40,生物安全柜的使用,1.正确安装，确保安全柜与外部 排风系统压力平衡，保证安全柜处于正常工作状态 2.定期维护和检测，确保安全性,41,生物安全柜的使用,工作前认真理解操作

9、步骤和所需设备 尽量减少扰动 准备好消毒剂,制定计划,42,生物安全柜的使用,关紫外灯，前窗开至适当高度，打开安全柜的灯和风扇 检查出风口是否有障碍物，等待5min 用消毒液彻底洗净手和手臂；穿长袖工作服和手套；带防护眼镜,开始,清洁,用70%的乙醇或适当的消毒剂擦拭工作区域内壁,43,生物安全柜的使用,只放入所需物品 不能超载 出风口不要有障碍物 大物体间要保持一定距离 前窗降至适当高度 2-3min以吹扫污染物,上样,44,生物安全柜的使用,工作结束，继续开机10-15min,最后的吹扫,下样,与污染物接触的物品，取出之前必须经表面去污处理 所有托盘或容器取出前必须加盖,45,生物安全柜的

10、使用,用消毒剂清洁内壁，待其干燥 定期抬起工作面清洁下面的区域,清洁,46,生物安全柜的使用,关闭灯、风机、关闭前窗 开紫外灯,关机,47,生物安全柜的使用,所有物品离前窗至少2英寸，所有污染性的操作尽量远离工作区域的后部 干净的与污染的物品分开放置；污染物品尽量放置在工作区域后部 操作时物品和手臂不要穿过前窗,技巧,48,生物安全柜的使用,避免使用明火，用适当的灭菌措施 避免使用干扰安全柜内层流的实验手段 安全柜处于操作状态时，彻底消毒内壁,技巧,49,生物安全柜的使用,干净物品,理想的工作台摆放,污染 区域,废弃物 托盘,垃圾袋,50,51,52,53,54,55,56,生物安全柜内感染性

11、材料溢洒的处理,发生少量溢洒，用吸收纸巾立即处理，并浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所有物品擦洗。消毒后更换手套，不论是摘下手套还是更换手套都要洗手。 若发生大量溢洒，液体通过柜前面或后面的格栅流到下面，柜内所有物品都应进行表面消毒，并从柜中取出，关闭排水阀，将消毒液倒在工作台面上，使液体通过格栅流到排水盘上。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒和/或高压灭菌处理。,57,调整椅子高度，让肩膀放松双肘自然放于两侧,人体工程学方面的考虑,肘和肩膀,58,常见说法和错误认识,喷灯火焰将严重影响安全柜内的层流，可能造成气溶胶的扩散 若喷灯的火苗很大，可能融化HEPA滤膜的粘结剂或烧滤膜 若

12、无人看守，喷灯可能熄灭，在A类或A/B3类安全柜内，泄露的气体可能达到爆炸极限,“可以在安全柜中使用喷灯.,替代方法：如电热套或可抛的加热环。,59,排风柜用于排出有害有毒的烟和气溶胶，应该用对多种化学试剂惰性的材料构成,“可以把生物安全柜当排风柜使用”,不能,常见说法和错误认识,60,常见说法和错误认识,错! 只有在正确使用的情况下，才能保护操作人员、样品和环境。在生物安全柜中工作，什么时候都需无菌操作,如果在生物安全柜中工作， 就不必很小心的操作,61,常见说法和错误认识,错! 使用紫外灯可以减少安全柜不用时工作区域的污染。紫外线穿透力差，不能杀灭被灰尘或有机物保护的微生物,生物安全柜有紫

13、外灯， 就不必消毒清洁工作区域,62,常见说法和错误认识,不能！ 工作区域放置大物体将影响气流，降低安全柜的效率 离心机、搅拌机等电器的风扇，可能破坏安全柜内的气流 离心机内最好使用密封的安全杯，在安全柜内装样和下样,“离心机可以放在生物安全柜内使用?,63,常见说法和错误认识,不一定。 对于远离挥发性有害化学品的侵害， 对于远离生物有害气溶胶的侵害，则不是 根据实际工作的要求和研究内容，确定使用B类或A类的生物安全柜,“B类安全柜和A类相比能提供更好的保护.”,64,常见说法和错误认识,某些应用，如研究生物毒素药物的工作，为防止有害物质逃逸，建议连续使用 连续使用将降低HEPA滤膜的寿命,”

14、所有的生物安全柜应连续工作.”,65,常见说法和错误认识,假若房间密闭，没有通风系统，没有什么活动，循环式的A类安全柜可能会把空气净度降至100级。不幸的是，一旦人员进入，将再次被污染。这样做将降低HEPA滤膜的寿命,”如果让安全柜连续工作，室内空气洁净度将达到100级.”,66,常见说法和错误认识,不一定！ HEPA滤膜应在压力差过大时更换（滤膜沾满颗粒） 决定滤膜寿命的两大因素： 房间内空气污染的程度 安全柜工作的时间 按时间表更换滤膜，而不考虑滤膜被污染的程度,可能造成不必要的浪费,” 应每年更换HEPA滤膜？.”,67,常见说法和错误认识,错! I级安全柜适用于一级、二级和三级安全实验室 级和级安全柜则适用于所有级别安全实验室,I级安全柜只适用于一级安全实验室 级安全柜只适用于二级安全实验室 级安全柜只适用于三级安全实验室,68,生物安全柜的选用,1.凡进行有害微生物和转基因操作，均应使用生物安全柜，不可用净化工作台代替 2.根据工作性质和防护要求，选用适当级