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文档简介
1、,第十八章 分枝杆菌属,Department of Microbiology Harbin Medical University,主讲教师:陈思佳,第二篇 致病性细菌,第十八章 分枝杆菌属 Mycobacterium,医学微生物学教研室 哈尔滨医科大学,结核分枝杆菌 形态、染色及培养特性 抵抗力和变异性 致病物资及特点 所致疾病 免疫性及超敏反应 郭霍现象 结核菌素试验 卡介苗 治疗和预防原则 麻风分枝杆菌 形态染色特点 致病特点及分型 防治原则 非结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌的分组及致病性,主要内容,分枝杆菌属(Mycobacterium)共同特性,细长略带弯曲的杆菌 生长速度慢 无鞭毛、无
2、芽孢、不产生内外毒素 细胞壁含有丰富的脂质成分(分枝菌酸) 致病性与菌体成分相关 抗酸杆菌(acid-fast bacillus),分枝杆菌属,分类 结核分枝杆菌复合群 结核分枝杆菌 牛型分枝杆菌 非洲分枝杆菌 田鼠分枝杆菌 麻风分枝杆菌 非结核分枝杆菌,根据生长速度 快生长菌 慢生长菌,第一节 结核分枝杆菌,Mycobacterium tuberculosis (TB),流行病学,结核病的病原菌 1882年德国细菌学家 Koch 证明 全球性卫生问题 是艾滋病高发区人群的首要死因 世界防治结核病日 3月24日,结核病的国际形势,WHO统计 世界1/3的人口感染结核 世界范围每年死亡人数为20
3、0万人140万(2010年) 90%以上在发展中国家 每年新病例为800万-1000万人 我国结核病人450万人,每年死亡人数约25万,生物学形状,形态染色 培养特性 抵抗力 变异性,形态与染色,细长略弯, 分枝状杆菌 无芽胞无鞭毛, 无内外毒素 抗酸染色阳性(Zeihl-Neelsen acid-fast stain),齐-尼氏抗酸染色法 Ziehl-Neelsen method for acid fast bacteria,涂片、固定、干燥 初染:石炭酸复红 脱色:3%的盐酸酒精 复染:美篮染液 干燥、镜检,培养特性,专性需氧,最适pH6.5-6.8 生长缓慢:代时18h 营养要求高 罗氏
4、培养基:甘油、天门冬素、蛋黄、马铃薯、无机盐类、孔雀蓝 液体培养基 吐温-80 (Tween 80),抵抗力,Resistant to 干燥 酸碱 碱性染料 青霉素等,Sensitivity 紫外线 酒精 湿热 抗结核药物 异烟肼 利福平等,变异性,形态 L型 Much 颗粒 菌落 耐药性 毒力变异,卡介菌-卡介苗(Bacilli Calmette-Gurin,BCG) 是毒力变异株,将有毒的牛型结核分枝杆菌培养于含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中,经230次传代,历史13年而获得的减毒活菌株,目前广泛应用于结核病的预防,致病性,致病物质 类脂 蛋白质 多糖,致病物质,类脂(lipid) 分枝菌酸
5、(mycolic acid).抗酸染色特性 索状因子(cord factor).慢性肉芽肿 磷脂(phosphatide).结核结节,干酪样坏死 蜡质D(wax-D)迟发型超敏反应 硫酸脑苷酯(sulfatide).细胞内寄生 蛋白质结核结节形成、全身中毒 多糖(polysaccharide).胞内寄生,所致疾病,感染类型 肺部感染:肺结核(原发感染、继发感染) 肺外感染 传播途径 呼吸道 消化道 破损皮肤黏膜等 侵犯多种组织器官,肺结核-原发感染(primary infection),多发生于儿童,原发结核,原发综合征:原发灶、淋巴管炎、肺门淋巴结肿大,致病性,原发型肺结核 正,肺结核-继发
6、感染:成人多发,诱发因素 原发病灶中潜伏的结核分枝杆菌引起 外界的结核分枝杆菌再次入侵 感染特点 病灶局限,不累及临近淋巴组织 易发生慢性肉芽肿和干酪样坏死和空洞,肺结核-继发感染,病程呈慢性渐进性,伴有乏力、体重减轻、咳嗽、盗汗、午后潮热、胸痛等。病灶多局限呈干酪样结节,若结节破溃,则可形成空洞,传染性强。,致病性,右上干酪样肺结核,右下干酪样肺结核,右下干酪性肺炎并空洞形成,肺外感染,免疫力低下患者 形成全身粟粒性结核或播散性结核,临床表现,咳嗽,咳痰(血痰) 全身倦怠感 微热 盗汗 胸痛 食欲低下 体重减少,感染结核菌的过程,感染不发病 (既往感染),初次感染发病 原发感染,抵抗力下降时
7、发病 继发感染 成人多发,数月-2年之内发病 儿童多见,80%-90%,5%-10%,5%-10%,免疫机制:主要是细胞免疫,感染免疫、有菌免疫(infection immunity ) 感染TB或接种BCG后,机体可产生对该菌特异性免疫力,维持依赖于TB在体内的存在 细胞免疫 迟发型超敏反应,结核菌,初次感染(10-14d),既往感染 (1-2d),皮下注射,红肿、溃疡、坏死,红肿、浅表溃烂,淋巴结肿大 全身播散,死亡,病灶局限 无播散,无死亡,获得免疫力,郭霍现象,结核菌素试验,结核菌素试剂 旧结核菌素(old tuberculin,OT) 纯蛋白衍化物 (purified protein
8、 derivative,PPD),结核菌素试验,方法 取两种PPD 5单位注入两前臂皮内 4872小时后观察红肿直径 结果 阴性:5mm 阳性:5mm 强阳性:15mm,结核菌素试验结果、临床意义,阳性 强阳性 阴性,硬结、红肿直径 515mm之间,既往感染过结核分枝杆菌 卡介苗接种成功,硬结直径超过15mm以上,表明可能有活动性结核,应进一步检查,注射部位有针眼大的红点或稍有红肿,硬结直径小于5mm,原发感染的早期 严重结核病或其他传染病(麻疹) 老年人 免疫力低下病人,微生物学检查,标本取材和处理 涂片染色镜检:抗酸染色 须与非结核分枝杆菌进行鉴别 加热法:非结核分枝杆菌加热2分钟即失去抗
9、酸性,而结核分支杆菌则不然 结核菌素皮肤试验:检测潜伏结核感染的唯一的方法 细菌学基因诊断:PCR 动物试验,结核分枝杆菌痰标本抗酸染色,结核分枝杆菌尿标本抗酸染色,荧光金胺染色,结核分枝杆菌,结核病快速诊断方法,全自动核酸扩增试验(NAAT)被世界卫生组织认可 约100分钟内可为多名病人做出准确诊断,特异性防治,卡介苗预防 接种对象:新生儿和结核菌素试验阴性的儿童 免疫时间:35年 药物治疗 五项原则 早期、联合、规则、足量、全程,第二节 麻风分枝杆菌,Mycobacterium leprae,麻风分枝杆菌(M. leprae),麻风病的病原菌 慢性传染病 主要侵及皮肤、粘膜和神经 引起关节
10、的畸形性病变 世界各地均有报道 主要分布在亚、非洲 拉丁美洲,生物学形状,形态与染色,细长略弯曲 无芽胞,无荚膜,无鞭毛 抗酸染色阳性 典型的胞内寄生菌 麻风细胞 抵抗力 抗干燥:可存活7天 低温环境生存良好 紫外线及加热敏感,培养特性,不能在人工培养基中生长 小鼠足垫:传代 动物模型:犰狳(armadillo),致病性,易感人群: 人 传播途径: 密切接触和呼吸道传播 潜伏期: 平均2-5年 发病慢、病程长 麻风分为3种类型 瘤型麻风 结核样型 界线类、未定类,瘤型麻风,传染性强 病情严重 侵犯部位 皮肤和粘膜 神经 眼睛及内脏 镜检病变部位 麻风细胞 肉芽肿,结核样型,传染性小 侵犯部位
11、皮肤 外周神经 很少累及内脏,Mycobacterium leprae,结核样型麻风皮肤损害,界线类麻风引起的手变形,微生物学诊断,显微镜检查,抗酸染色 PCR:尚在研究阶段,麻风细胞抗酸染色,麻风分枝杆菌组织切片(Triff染色),防治原则,特异的预防 尚无有效的菌苗 早期发现、早治疗 目前多采用二三种药联合治疗 氨苯砜(dapsone,DDS),Lepromatous Leprosy Pre- and Post-Treatment,非结核分枝杆菌,除人型结核分枝杆菌、牛型结核分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌菌群 海分支杆菌 ( M. marinum ) 耻垢杆菌 ( M. smegma
12、tis ) 多存在于自然界,是条件致病菌 与结核分支杆菌鉴别,小结,生物学性状 形态大小、培养、染色特点及抵抗力 致病性 致病物质及引起的疾病 郭霍现象、结核菌素实验及判定标准 微生物学检查 抗酸染色及快速检测方法(核酸检测) 治疗与预防:BCG,问题,简述结核分枝杆菌的主要生物学特性 简述结核菌素试验原理、结果判断及意义 简述结核病的预防及抗结核药物的治疗原则 何为卡介苗?简述卡介苗在实际工作中的应用及对其效果的评价 简述麻风分枝杆菌的生物学特性及致病特点,参考文献,普通高等教育 “十一五”国家规划教材医学微生物学(第二版)谷鸿喜主编,北京大学医学出版社 2009年7月 普通高等教育 “十一
13、五”国家规划教材医学微生物学(第六版)李凡主编,高等教育出版社 2011年5月 WHO:/en/ US CDC: NIH: China CDC: China Ministry of Health: 维基百科:,第十九章 梭菌属,第二篇 致病性细菌,第十九章 梭菌属 Clostridium,医学微生物学教研室 哈尔滨医科大学,主要内容,破伤风梭菌 芽胞及抵抗力 破伤风痉挛毒素 致病机制 所致疾病 特异性防治 产气荚膜梭菌 形态及培养特点 致病物质
14、 所致疾病 微生物检查法 肉毒梭菌 形态特点 肉毒毒素 致病机制 肉毒中毒 毒素检测 艰难梭菌 毒素及致病性,梭菌属 (Clostridium),一群专性厌氧、革兰阳性的粗大杆菌 形成芽胞,细菌膨胀呈梭形 产生外毒素 广泛分布于自然界 破伤风梭菌破伤风 产气荚膜梭菌气性坏疽 肉毒梭菌肉毒中毒 艰难梭菌假膜性结肠炎、抗生素相关腹泻,Drawing of a Soldier dying of Tetanus,第一节 破伤风梭菌(C.tetani),生物学性状,形态与染色 G+ ,1mx5m ,粗大杆菌 芽胞位于顶端,菌体呈鼓槌状 芽胞抵抗力强,专性厌氧,周身鞭毛,破伤风梭菌,致病性,感染途径 创伤
15、、不洁接生 疾病 引起破伤风、新生儿破伤风 感染条件 厌氧微环境 伤口深而窄 混有泥土、异物 局部组织缺血或同时伴有需氧菌混合感染,致病性,致病物质 破伤风痉挛毒素(tetanospasmin) 强毒性蛋白质 对人的致死量是1g 轻链具有毒性作用 重链能与神经细胞表面受体神经节苷脂结合 0.3%甲醛作用4周后脱毒成为类毒素,破伤风痉挛毒素对脑干神经和脊髓前角细胞有高度亲和力,局部感染,毒素,脊髓前角神经细胞,与神经节苷脂结合,封闭抑制性突触,阻止抑制突触 释放介质(甘),兴奋性增高,全身肌肉痉挛,血、淋巴,外周神经间隙,阻断上下神经元间正常抑制性神经冲动传递,致病机制,破伤风痉挛毒素作用,嚼肌
16、痉挛,牙关紧闭和吞咽困难。 躯干及四肢肌肉强直,角弓反张体征。 膈肌痉挛、呼吸困难窒息而死。,免疫性,破伤风免疫是典型的抗毒素免疫 微量毒素即发病,且与神经迅速结合,不能引起有效免疫应答 有效地获得抗毒素的途径是: 主动免疫:注射类毒素 被动免疫:注入大剂量抗毒素,微生物学检查法,临床诊断主要结合创伤史和特有体征 微生物学检查对早期诊断意义不大 必要时可取伤口渗出物涂片染色镜检及厌氧菌培养,并以培养物滤液做动物试验,以确定有无毒素产生,防治原则,人工主动免疫 制剂:精制破伤风类毒素 对象:婴幼儿、部队战士、建筑工人及其他易受伤人群 方法:基础免疫1年后加强免疫 对36个月儿童可采用白百破(DP
17、T)三联疫苗 人工被动免疫 制剂:注射破伤风抗毒素(TAT) 用途: 紧急预防 1500-3000u 特异治疗 早期、大量注射破伤风抗毒素 注意事项:注射前应做皮肤过敏试验,脱敏疗法 抗生素的使用 大量青霉素或甲硝唑,第二节 产气荚膜梭菌,革兰阳性大杆菌 卵圆形芽胞 荚膜 无鞭毛 厌氧培养:繁殖极快 分解乳糖产气多 凝固酪蛋白 A-E 5型 A型常见,汹涌发酵实验,所致疾病,多种毒素和酶 :-毒素 气性坏疽(gas gangrene) 局部组织坏死、水肿、气肿、 肿胀剧痛,触摸有捻发感 特殊的臭味 全身中毒 食物中毒: A型产肠毒素,微生物学检查法,直接涂片镜检 分离培养与动物实验 血平板或疱肉培养基 厌氧培养 涂片镜检 生化鉴定 取细菌培养液给小鼠或家兔静脉注射,防治原则,及时处理伤口 扩创、清创、手术器械灭菌 早期可用多价抗毒素血清 抗生素使用,第三节 肉毒梭菌(C.botulinum),革兰阳性粗大杆菌 周鞭毛 无荚膜 椭圆形芽胞 专性厌氧 透明溶血,致病物质 肉毒毒素 对人致死量为0.1g 嗜神经性 所致疾病 食物肉毒中毒(豆制品、牛羊肉)神经麻痹 婴儿肉毒中毒(蜂蜜) 创伤肉毒中毒(伤口),致病性,微生物学检查法,检出毒素 动物实验:1组注上清发病;2组注煮
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