临床血液分析技术基础.ppt

1、临床血液分析技术基础,鄂钢医院检验科 梅玉峰,内容,一、概述 二、标本采集 三、测定方法原理 四、直方图 五、参考区间 六、临床意义 七、CRP在临床血液分析应用,一、概述,什么是临床血液学,化验项目名称：血常规（血Rt) 临床血液学在所有的医学实验室里扮演着最重要的角色，是医生在做出诊断前最先开出的化验项目。 化验目的：检测全血各细胞成分的数量、比例、体积、结构和形态、分类情况及异常细胞等,血液的一般检查（血常规检查）是对血液 中的有形成分（红细胞、白细胞和血小板) 的数量和质量进行检测。包括全血细胞计 数和白细胞的分类计数。 CBC+DF+Ret,二、标本采集,采血顺序 (accordin

2、g to CLSI recommendation),（ 安 全 头 盖 ）,标本采集与要求,抗凝剂 ：EDTA-K2 静脉采血方法 ：4小时内测定 毛细血管采血方法 ：半小时内测定 手指血与静脉血有差异，条件允许尽可能静脉采血 尽可能同一体位（血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数于站位时增加）、一定时间和近似生理条件下采血,三、测定方法原理,血细胞分析：计数+分类,PLT 血小板参数 PLT计数 MPV 平均血小板体积 Pct 血小板压积 PDW 血小板分布宽度,WBC 白细胞参数 WBC计数 WBC分类计数 NE 中性粒细胞 LY 淋巴细胞 MO单核细胞 EO嗜酸性粒细胞 Baso嗜碱性粒细胞,

3、RBC 红细胞参数 RBC计数 HGB 血红蛋白 Hct 细胞压积 RDW 红细胞分布宽度 MCV, MCH, MCHC RET 网织红细胞 NRBC 有核红细胞,数量：手工计数法 仪器法（电阻抗分析为主） 分类：显微镜人工分类法 自动分类计数仪分类方法,测定方法,库尔特原理,“当一个不良导体颗粒，例如血细胞，通过两个电极之间时，导致电路的电阻抗发生变化。” -华莱士.库尔特,1947,根据血细胞非传导性的性质 ，以对电解质溶液中悬浮颗 粒在通过计数小孔时引起的 电阻变化进行检测为基础， 来进行血细胞计数和体积测 定，这种方法也被称为 库尔特原理,血细胞分析仪类别,（WBC）三分类血细胞分析仪

4、 库尔特原理分类 WBC三分群：LY,(Baso),MO,(EO),NE （WBC）五分类血细胞分析仪 VCS 3D 2D 库尔特原理+细胞化学染色 激光流式细胞检测+细胞化学染色 MAPSS（多角度偏振光散射）,VCS技术是库尔特五分类血球仪对白细胞分类的专利技术，即分类时不需传统的染色方法，只采用三个物理量VOLUME（体积）、CONDUCTIVITY（传导性）、SCATTER（激光）将五种白细胞分开的技术。 流体动力聚焦的流式通道 近于原态的白细胞在鞘液的包裹下通过流式通道道检测；将重叠限制到最低限度。 三种能量同时作用于一个细胞，总共计数8192个颗粒。,VCS技术,四、直方图,直方图

5、的由来,在小孔计数时仪器获得细胞的数量和大小(体积)的信息，再进一步分类整理，得到在各种不同体积下相应的数量分布，反应在坐标上 坐标横轴表示细胞大小，以fl(飞升)为单位 坐标纵轴表示相应数量,直方图的应用,一.白细胞直方图形(1)可显示检测标本中是否存在形态异常细胞或各类细胞比例异常,决定是否推片检查 (2)根据图形,判断仪器工作状态； 二.血小板直方图可帮助分析被检查的血小板体积大小分布状态,帮助判断结果能否报告； 三.红细胞直方图可帮助判断治疗效果,疾病的诊断和鉴别诊断有较大的临床价值。,红细胞直方图,典型的红细胞直方图上，可以看到两个细胞群体： 1细胞主群 从50 fL开始，两侧对称呈

6、正态分布的曲线，又称“主峰”； 2大细胞群 在主群右侧，又称“足趾部”，是一些红细胞二聚体、三聚体、多聚体的混合物。,红细胞直方图应用举例(1)- 巨幼红细胞性贫血,大细胞性贫血，直方图上表现为右移,红细胞直方图应用举例(2)- 缺铁性贫血,小细胞性贫血，直方图上表现为左移,红细胞直方图应用举例(3)- 再生障碍性贫血(输血后),输血后，红细胞表现出两个细胞亚群，在直方图上表现为两个细胞峰。 该病例中左峰为输入的正常人红细胞峰；右峰为患者自身的红细胞峰。,白细胞直方图,小细胞,单个核细胞,粒细胞,数量,体积fl,白细胞直方图亚群分布,在上图，可以看到三个明显的亚群分布： 小 细 胞 群： 以淋

7、巴细胞为主，分布在35 90fL； 单个核细胞群 ：以单核细胞为主，分布在90 160fL； 粒 细 胞 群 ： 以中性粒细胞为主，分布在160 450fL。,粒细胞峰明显变大，淋巴细胞峰明显变小。在严重的细菌感染时，如果中性粒细胞发生中毒性改变，粒细胞峰可向左移动或向右延伸,白细胞直方图应用举例(1)-中性粒细胞比例增高或淋巴细胞比例减低,白细胞直方图表现为粒细胞峰明显变小，淋巴细胞峰明显变大,白细胞直方图应用举例(2)-中性粒细胞比例减低或淋巴细胞比例增高,在单个核细胞区出现一个明显的峰，其大小与单核细胞比例增高的程度有关。增高仅表示可能是单核细胞增高，也可能是嗜酸性粒细胞或幼稚细胞等，因

8、此，必须涂片染色后经显微镜确认。,白细胞直方图应用举例(3)-单核细胞比例增高,血小板的细胞直方图 可反映血小板数及MPV等参数。 可判断影响因素,血小板细胞直方图,血细胞分析仪通常在230fl范围分析血小板，正常血小板主要集中在于220fl范围内，一般在2530fl之间的某一点与横坐标重合，直方图是一条呈对数正态分布的光滑曲线。,曲线峰右侧右移，在大于30fl的某一点与横坐标重合，MPV明显增高。如果血小板数减低，可见于ITP及体外循环时；如果血小板数升高，见于脾切除术后。如果血小板数正常，可见于慢性髓性白血病、骨髓纤维化等,血小板直方图应用举例(1)-大血小板直方图,曲线峰右侧左移，在小于

9、20fl的某一点与横坐标重合，MPV值明显减低。如果血小板数减低，可见于AIDS病毒感染和脾亢等；如果血小板数正常，可见于慢性再障；如果血小板数升高，可见于反应性血小板增多症。,血小板直方图应用举例(2)-小血小板直方图,曲线峰变低，如果以 20个的血小板聚集为主，则曲线峰变低、变平，右侧抬高不明显。此时，在白细胞直方图的35fl处有一个小峰。见于标本采集不当或EDTA依赖性血小板聚集等,血小板直方图应用举例(3)-聚集的血小板直方图,在曲线峰的右侧抬起并上扬，不与横坐标重合。可见于IDA或发生溶血的标本。,血小板直方图应用举例(4)-小红细胞干扰的血小板直方图,分析仪白细胞分类与镜检关系 1

10、.镜检是细胞形态分析的最终手段（金标准），仪器 只是筛选工具，具有特异诊断意义的形态变化必须镜检 2.分析仪某些结果可为镜检提供筛选手段，降低假阳性和 假阴性结果，提高镜检效率，保证医疗质量（报警） 3.分析仪某些参数是对镜检的补充 (MPV RDW PDW ),为了保证血液分析结果准确，特别是形态分析原则上每个血液标本都采用镜检，但目前化验室人员少，工作量大，每天有几十甚至于几百个标本需要及时报告，要使用规范的镜检及时地发出报告是困难的，最好寻找一个简单、快速的方法进行过筛，即将完全正常的标本筛去后，对异常的标本进行规范性镜检。血液分析仪提供了过筛的手段。筛选不是取消镜检而是为了更好的镜检.

11、,36,为什么提出镜检筛选,适合中国人群的Coulter血细胞分析仪复片参考规则,由北京和睦家医院，北京人民医院，温州医学院附一院共同进行的大样品多中心研究 参加仪器：MAXM, GENS, LH750 根据中国实验室实际情况，缩减至23条 考虑中国人群血细胞正常参考范围以及常规工作习惯。 对新规则进行了再次临床验证，没有漏掉血液病，复检率与国际报道相当 论文已发表：国际血细胞复检规则在贝克曼库尔特系列血细胞分析仪上的应用及改进方案。中华检验医学杂志， 2008，31（7）：758-762.,五、参考区间,六、临床意义,红细胞和血红蛋白检测的临床意义,(一)红细胞及血红蛋白增多 多次检查成年男

12、性红细胞6.01012/L，血红蛋白170g/L；成年女性红细胞5.51012/L，血红蛋白160g/L即为增多。可分为： 1、相对性增加 因血浆容量减少，使红细胞容量相对增加。见于严重呕吐、腹泻、大量出汗、大面积烧伤、尿崩症、甲亢危象、糖尿病酮症酸中毒等。,红细胞和血红蛋白检测的临床意义,2、绝对性增加 红细胞增多。按病因可分为： (1)继发性红细胞增多症： 血中红细胞生成素增多致。 a、红细胞生成素(EPO)代偿性增加：因缺氧血氧饱和度降低红细胞增多。生理性EPO见于胎儿及新生儿、高原地区居民。病理性EPO见于慢阻肺、肺心病、发绀型先心、异常血红蛋白病。,红细胞和血红蛋白检测的临床意义,b

13、、EPO非代偿性增加：肿瘤或肾脏疾病EPO，见于肾癌、肝细胞癌、卵巢癌、肾胚胎细胞癌、肾上腺皮质腺癌、子宫肌瘤、肾盂积水及多囊肾。 (2)真性红细胞增多症 骨髓慢性良性增殖性疾病，部分病人可继发骨纤，转变为白血病。,红细胞和血红蛋白检测的临床意义,(二)红细胞及血红蛋白减少 （1）生理性减少：婴幼儿及15岁以前的儿童约低10-20；部分老年人，妊娠中、晚期。 （2）病理性减少：各种贫血,白细胞检测,图示,白细胞检测,中性粒细胞 1、形态及正常值 2、临床意义 1)中性粒细胞增多 生理性：下午较上午高，孕后期、分娩时、剧烈运动或劳动后、饱餐或淋浴后、高温、严寒均可暂时升高。,白细胞检测,病理性：

14、 a、急性感染：尤化脓性球菌感染为最常见原因。但严重感染、G-杆菌感染可不高； b、严重的组织损伤或大量血细胞破坏：外伤、大手术、烧伤、急性心梗、严重血管内溶血； c、急性大出血； d、急性中毒：代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒、尿毒症及妊毒症；急性化学药物中毒如急性铅、汞及安眠药中毒；生物性中毒如昆虫毒、蛇毒等。 e、白血病、骨髓增殖性疾病和恶性肿瘤。,白细胞检测,2)中性粒细胞减少 a、感染：G-杆菌、病毒、原虫。 b、血液病：再障、骨髓增生异常综合征、骨 转移癌等。 c、理化因素：射线、苯、铅、氯霉素等。 d、单核吞噬细胞系统功能亢进：脾亢等。 e、自身免疫性疾病：SLE、甲亢等。,白细胞检

15、测,3)中性粒细胞核象变化 a、核左移：外周血不分叶核5称核左移。见于感染、急性失血、急性中毒及急性溶血、白血病及类白血病； b、核右移：外周血中分叶大于等于5叶的核超过3称核右移。见于巨幼贫、造血功能衰退、抗代谢药及炎症恢复期。,中性粒细胞核象变化,白细胞检测,淋巴细胞 1、淋巴细胞增多,婴儿出生时淋巴细胞35，以后逐渐升高，46岁时淋巴细胞比例逐渐降低达成人水平。,白细胞检测,病理性： 1)感染性疾病：病毒、百日咳、梅毒及弓形体等； 2)肿瘤性疾病：急淋、慢淋、淋巴瘤； 3)急性传染病的恢复期； 4)移植排斥反应：再障、粒细胞减少症核粒细胞缺乏症时淋巴细胞比例增高，但绝对值不高。,白细胞检

16、测,2、淋巴细胞减少 主要见于应用肾上腺皮质激素、烷化剂、抗淋巴细胞球蛋白以及放射线损伤、免疫缺陷病、丙种球蛋白缺乏症等。,白细胞检测,嗜酸性粒细胞 1、嗜酸性粒细胞增多 1)过敏性疾病：支气管哮喘、荨麻疹等； 2)寄生虫病：肺吸虫病及血吸虫病等； 3)皮肤病：湿疹、天疱疮等；,白细胞检测,4)血液病：慢粒、淋巴瘤等； 5)某些恶性肿瘤：如肺癌； 6)某些传染病：猩红热； 7)其他：风湿病、垂体前叶功能减低等。 2、嗜酸性粒细胞减少：伤寒、大手术、烧伤、长期用肾上腺皮质素后，临床意义不大。,白细胞检测,嗜碱性粒细胞 1、嗜碱性粒细胞增多 1)过敏性疾病：过敏性结肠炎、类风关及红斑等； 2)血液病：慢粒、骨纤及嗜碱性粒细胞白血病； 3)恶性肿瘤：转移癌； 4)其他：糖尿病、结核、流感、天花。 2、嗜碱性粒细胞减少无临床意义,白细胞检测,单核细胞增多 1、生理性增多：婴幼儿、儿童； 2、病理性增多： a、感染：感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、急性感染恢复期、结核病；