实验室个人防护.ppt

1、实验室生物安全,丰原医院 检验科 李碧云 96.01.14,实验室个人防护,95.12.22,病原体及其使用实验室分级,分类基准(病原微生物危害性),人为的疏失，不良的实验室技术以及器具，装备的错误使用是引起实验室伤害和工作相关的感染。今天我们要讨论是如何避免或减少在报告文献上常提及发生的实验室技术性问题。,个人安全防护,1.进入实验室应穿白袍实验衣，微生物中心人员加着隔离衣，戴外科手术口罩，手戴手套，必要时戴眼罩或面罩。 2.实验之病原体如有疫苗可预防，没有保护抗体之个人，必须事先施打疫苗， 如B型肝炎疫苗。 3.实验室工作人员要事先留存血液检体当Base line ，必要时定期采取，以利健

2、康管理及追踪监视。(本院是每年定期做员工健康检查),实验室内检体的安全处理,实验室内检体的不适当搜集，传送和处理将带给工作人员暴露于感染的险境。,检体容器,检体的容器可用玻璃材质、塑料材质尤佳，容器要坚固，盖子或塞子要盖好，内容物不能泄漏，不可以有检体留在容器之外表，容器外面要标示清楚，检体名称、编号、患者姓、采取日期等。检体报表或检验请求表格不可以包在检体管子外表，要另外放入防水之封套。,实验室内检体之传送,为避免意外的泄漏或溢出，检体要直立挿在试管架上再挿入第二层容器内(运送箱)，第二层容器之材质可以是金属或塑料材质且可高温蒸气减菌或耐化学消毒剂，最好盖子有弹性垫环，检体运送箱要常作清消。

3、,检体的收受,收受多数之检体要特别设立一个房间或区块不可以跟一般办公室混在一起。检体收受人收到检体应立即与医令单或报表核对检体件数、量(检体收受人不可任意打开检体瓶)、保温状况、登记收到日期、时间、并依序分送各组，除非不耐冷温的病原体否则分送时也要保持低温状态。检验人员收到检体要在送验簿(单)上签收(若有的话)才算完成送验程序。,打开检体包装,收受及打开检体包装的人员，应该了解对健康具有潜在的危险性，工作人员需接受训练及熟悉标准操作步骤，尤其是遇到检体容器破裂或泄漏之处理程序，盛检体的容器一定要在生物安全柜(BSC)内才能打开，而且一定要泡好消毒剂以备随时之需。,避免感染物之扩散,避免细菌掉落

4、，微生物接种环(白金耳)的直径限2-3mm，且环要完整，柄端长度不超过6cm，以减少振动。 开放式本生灯有溅射感染物之险，不可使用。应采用有阻体之电气焚烧器灭菌接种环。 小心烘乾痰液检体，避免造成气胶。 要丢弃之检体及培养物应放进防漏之袋子内，贴上灭菌指示带，灭菌后置入弃物桶。 工作完毕工作区域要用适当的消毒剂作清消 有感染性液溅出或滴落立即以浸消毒液之厚纸巾覆盖。,生物安全柜(BSC)之使用(I),向所有使用者说明BSC之使用限制，并订定使用纪录表、安全操作规范或使用操作程序书，发给属员，尤须特别声明，溅洒、破裂或不良之操作技术，无法保护操作者之生命安全 启动BSC电源及马达开关 待BSC之

5、气流稳定后(约5分钟)以纸条测试BSC操作口气流是否形成气幕(Air curtain) 功能故障的BSC不可以使用 BSC台面铺浸消毒液厚纸巾或抗污纸垫 使用操作中不可打开窗口玻璃 BSC台面尽可能少摆放器械及耗材，后方之气栅不可堵塞,生物安全柜(BSC)之使用(II),BSC内不可使用本生灯，因热气扰乱气流，且可能损坏HEPA，可以电气焚烧器替代，最好使用丢弃式灭菌接种环 所有感染性实验操作必须在BSC内之中间或后方台面上，操作者由窗口向内透视 减少人员在操作者后面走动 操作者之手、肘进出不能影响到气流方向 注意检体或实验材料不可堵到气栅，因为这样扰乱气流方向，会造成检体污染及操作者暴露险境

6、 使用真空马达吸引潜藏感染性液必须装Trap及空气过滤器,生物安全柜(BSC)之使用(III),决不可在BSC台面作纪录工作 实验操作中不慎溅出或滴出感染性液，立即以浸消毒剂之吸水性厚纸巾覆盖 实验操作中突然遇到停电或BSC故障，工作人员应立即离开 实验操作前及工作完成后BSC风扇马达至少继续运转5分钟 工作完毕BSC要用适当的消毒剂擦拭 定期擦拭UV灯管 开UV灯设置开灯时间 BSC每年定期检测,避免感染性物刺伤,小心操作避免玻璃器具类之破裂碎片导致意外接种或割伤，尽可能使用塑类器皿替代 意外刺伤都由尖锐物品如注射针、玻璃毛细管或玻璃器皿破裂所导致 减少使用注射筒或使用特别设计之安全针筒及开

7、瓶器以降低伤害 注射针使用后绝不可把针套套回去，用过之针筒弃置于有盖子之坚固容器内 处理破裂之玻璃碎片一定要用扫把及镊子 以塑料品替代玻璃品,避免吞入感染性物及皮肤、眼睛之接触,微生物实验操作中大的颗粒和小液滴(直径5um)很快就落到工作台面上和操作者的手上所以操作者要戴抛弃式手套，并避免口、眼及脸部接触感染性物 实验室内不可贮放或饮食、食物 实验室内嘴巴不可含铅笔，咀嚼口香糖 不可以在实验内化妆 任何可导致溅洒的可能潜藏感染性物操作，脸部、眼睛、口都要有防护,血清分离,经过适当训练的人员才能从事这项工作 戴手套及眼、粘膜之防护 良好的实验操作技术才能避免或减少溅射及气胶之形成，血液及血清要利

8、用自动吸管吸取，不可用倒的或以口吸取 分离血清用之全血注意试管之放置，避免血液碰到试管盖(塞子) 欲丢弃之血液检体管应置于有盖之感染性垃圾桶内，由清洁人员打包秤重之后专人焚烧 备妥适当之消毒剂以备处理污染及溅洒之需 血清检体管盛量要适当，过量易造成污染,离心机之使用(I),良好的机械操作是实验室安全使用离心机之要件 离心机应依照制造厂商之说明书操作使用 离心机放置之高度要使操作人员能看清楚腔室之离心头及离心管套以利操作 离心管及检体管之管壁要厚质玻璃、塑料材质更好，使用前要查看有无瑕疵 注意离心管之材质是能耐你所要的离心力及转速 离心管之检体装量要按生产厂商之使用说明装填 离心管及离心管套盖子

9、必须盖紧 检体之装填及吸取必须小心勿使溅洒在外，必要时在BSC内操作 离心管套及其套环要配对，放好检体后确实称重平衡,离心机之使用(II),用角型转子(Angle rotor)，离心管检体不能装过量，否则会溢出，造成污染 离心第三及第四等级危险之病原体必须用有气密盖之安全离心管套 每日查看离心机腔室内转子旋转高度处之污秽，如有污秽应重新评估protocol 使用前查看转子及离心管套是否有腐蚀或线状龟裂 每次使用后离心管套、转子及离心机腔室要作清洁消毒 离心时转速不可加速太快 用蒸馏水或70%propanol平衡空离心管套(Empty buckets)，不可用生理食盐水或次氯酸钠液因为会腐蚀金属

10、 离心机定期安全检测,高压蒸气灭菌锅 (I),1.欲灭菌之液状物容器不可装满超过三分之二以上的容量且不可紧闭容器口。 2.用过耗材要装进内衬耐高温灭菌袋之不锈钢桶才可送进高压蒸气灭菌锅内。 3.灭菌物贴灭菌温度指示带。 4.随时紧闭锅门。 6.灭菌完成欲打开锅门必先确认内锅压力已归零才可打开锅门。,高压蒸气灭菌锅 (II),7.排气过滤 8.安全阀检查 9.定期清洗 10.年度安全检查,二氧化碳培养箱,1.培养容器外面应标示 2.水盘定期清洗及更换蒸馏水 3.注意二氧化碳桶气体量 4.定期检测及校正培养箱内CO2 5.纪录培养箱温度及CO2厚度 6.有培养物渗漏、污染立即清除消毒,恒温水槽,注

11、意水位不可以低于电热管，随时添加水量 定期清洗恒温水槽 下班之前关闭不用的水槽加热器 有感染物污染时水温调高到75持续加温一小时，待温度降下后加适量维康粉(约1%)消毒，清洗，更换蒸馏水,冰箱、冰柜之使用与管理,冰箱、冰柜要定期清理，贮存中容器如有破裂立即处理，清理时戴面罩及厚橡胶手套、清理完，冰箱、冰柜内面要消毒 超低温冰柜要定期更换温度纪录纸及散热风扇滤网 冰箱、冰柜内要放温度计，并每日作温度纪录 超低温冰柜内保存物少时应放些冰宝以维温度之稳定 所有保存于冰箱、冰柜内之容器外表要清楚标示内容物、保存者姓名、日期、未标示及过期的材料灭菌、弃置 易燃性液体不可以存放在冰箱(柜)内 冰柜内保存物

12、必须列列表保存 超低温冰柜需加锁且专人管理,玻璃及尖锐物,尽可能以塑料装品替代玻璃品，只有Borosilicate glass可以用，有裂痕或瑕疵品都不可以用 注射针筒不可当吸管使用 欲推出注射筒内(有感染性液体)之空气，针头必须置于纱布上，注射筒才缓缓推出空气,冻结乾燥安瓶(装感染性材料)之开封,开冻结乾燥安瓶一定要特别小心，因内容物可能是在负压状态折断安瓶突然间空气进入可能有些内容物会冲出，开安瓶一定要在BSC内操作步骤如下: 消毒安瓶外表 2 手戴双层手套(手术手套外加防切割手套) 3 在安瓶上端之适当位置以安瓶切割器割一下，切割处消毒后，安瓶挿入塑料试管，切割部位露出管口，再取一支塑料

13、试管套在安瓶上端使安瓶切割部位介于两支试管之间，安瓶覆盖数层灭菌纱布后放入塑料袋，手在塑料袋外面，两手握试管轻轻用力一折安瓶就断 4 慢慢注入灭菌蒸馏水或缓冲液溶解内容物。避免产生气泡,显微镜观察之抹片,血液之染色、固定，痰、粪便之显微镜观察不一定杀死所有在玻片上的微生物、病毒，这些抹片之处理要使用铗子，在作清消、高压灭菌弃置之前要做适当的保存,生物安全柜(感染性物)污染之处理,1.先以厚纸巾或吸水性良好之抹布覆盖污染处 2.消毒液倾注于覆盖纸巾上 3.以电话向实验室负责人及生物安全管理人报告 4.30分钟后，清除纸巾及破裂物(玻璃片用镊子夹取， 细碎片用刷子处理)，废弃物置入生物安全柜内之 弃物容器内 5.用浸消毒液厚纸巾擦拭污染区域二次 (不可用手直接擦拭) 6.数分钟后用清水擦拭,7.更换外层手套，脱下之手套放入生物安全柜内之 弃物容器内