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文档简介
1、兽医微生物学绪论和第一章细菌的形态和结构1、微生物:自然界存在的一种大型集团型微小,结构简单,肉眼看不到,必须用光学显微镜和电子显微镜放大几百倍、几千倍,甚至数万倍才能观察到的微小生物。2、微生物种类:三型八大类(三菌四体一病毒)真核细胞型微生物:核有核膜和核仁,真菌般的细胞器很完备。原核细胞型微生物:原核、非核膜、仅核仁。 细胞器不完备。 DNA和RNA同时存在。 有细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体。非细胞型微生物:最小的微生物。 没有典型的细胞结构,只能在活细胞内繁殖。 核酸的种类是DNA或RNA。 病毒属。3 .微生物的特征体积小,面积大代谢能力强,代谢类型多繁殖快,容易培
2、育容易变异,适应力强种类多,分布广。4 .细菌的基本形态细菌根据其外形,主要是球菌、杆菌和螺旋状菌。球菌菌体呈球形或大致球形,根据细胞分裂的方向和分裂后各子细胞的空间序列状态,球菌可分为单球菌、双球菌、链球菌、四连球菌、八重球菌、葡萄球菌等。杆菌杆菌是细菌中种类最多的类型,根据菌种不同,菌体细胞的长度、粗细等也不同。杆菌形态:短棒状、长棒状、棒状、纺锤状、月状、竹节状等杆菌细胞繁殖后的序列有链状、格子状、“八”字状等。螺旋菌:弧菌、螺旋菌。五、科赫定律特殊病原菌在同一种病中被发现,在健康者中不存在这种病原菌可以分离培养成单纯的种类这种纯培养物接种敏感性动物,就会得同样的病从实验感染的动物体内,
3、可以重新得到这种病原菌的单纯培养。6、细菌老化型或退化型:指在恶劣环境或老年期出现与细菌正常形状不同的个体。 将其恢复到正常的培养环境就能恢复到正常状态。7、细菌多样性:处于老化型或退化型状态的细菌即使在适当的环境下生长,其形状也与正常的不一致,如嗜血杆菌。8、菌落:各个细菌在适当的固体培养基表面或内部培养一定期间后,繁殖的数量巨大菌体,形成用肉眼看具有一定形态的群体。 可用于细菌的分离、纯化、计数和鉴定。9、菌苔:各“菌落”互相连接成一片。10、细菌活着的非培养状态(VBNC ) :细菌在恶劣的环境下细胞呈球形,不能用普通的方法培养繁殖,但以还活着的特殊存在形式,在一定条件下可以恢复,有毒性
4、。11 .细菌的结构基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核体。特殊结构:荚膜、s层、鞭毛、菌毛、芽胞。12 .磷酸的功能形成表面抗原决定簇的成分;提高膜结合酶的能力(使细胞壁成为负电荷环境,吸附镁离子,维持酶活性)。保证克阳性病原菌(a族链球菌等)与宿主的粘连构成噬菌体的吸附部位。十三、细胞壁革兰氏阳性菌多肽多糖磷酸革兰氏阴性菌脂多糖(LPS )配置:脂质a :没有物种特异性,内毒素的主要毒性成分侧链多糖:即菌体抗原,具有型特异性核心多糖:具有特异性。功能:可以吸附Ca2、Mg2等阳离子;为噬菌体提供特异的吸附受体。外膜蛋白质(OMP ) :含有细孔蛋白质、脂蛋白。周质间隙14 .细胞壁的功能保
5、持菌体外形,提高机械强度,保护细菌在低渗透环境中阻止有害物质侵入菌体维持菌体内外离子平衡参与细菌的正常分裂表面有多种抗原分子,能诱发机体的免疫应答。15 .细菌细胞膜不含胆固醇。16、拟核:细菌没有形成的核,无核膜、核仁、遗传物质称为拟核(核质)。 核物质由单一的密闭环状DNA分子反复旋转卷缩而构成松散的网状结构。17 .荚膜概念:部分细菌在细胞壁外周发生的层包围着整个菌体,边界清晰的粘液样物质,用理化方法去除后,不影响细胞的生命活动。功能抗食作用:由于荚膜有宿主吞噬细胞的作用,荚膜是病原菌的重要毒性因子。抗有害物质的损伤作用:荚膜位于细胞的最外层,能保护菌体不受有害物质损伤,减少菌体的损伤。
6、营养物质的储藏场所和废弃物的排出。18、s层的功能分子筛和离子通道屏障作用,细菌的保护粘结宿主细胞重要的表面抗原。十九、鞭毛的功能运动器官有抗原性和致病性有关。20 .菌毛与细菌的运动无关。菌毛蛋白具有抗原性必须用电子显微镜观察分为普通菌毛、性菌毛。21、细菌细胞壁缺陷型(细菌l型):细胞壁损伤也能生长和分裂的细菌。 一般环境下菌体内高渗透压上升而死亡,在高渗透环境下也能生存。革兰阳性菌细胞壁缺损后,原生质体仅在一层细胞膜上包裹了原生质体。革兰阴性菌肽聚素层损伤后,有外膜保护原生质体球。将两种不同的原生质体或原生质体融合生成细菌的技术称为原生质体融合技术。22 .研究l细菌的意义由于诊断困难,
7、l细菌在通常的培养条件下难以成功,常被误诊为非病原体感染阻碍细胞壁合成的药物敏感性下降,青霉素、聚酰亚胺酶等抗原性因细胞壁的少和无而降低,l细菌的感染可以逃避正常菌抗体的攻击,所以长期存在与慢性病和复发性疾病有关药物成为l型进一步感染对药物不敏感的等原因利用l细菌是细菌的基础研究。23、革兰氏染色原理g菌:肽聚糖含量高,交联度大,乙醇脱色后,肽聚糖因脱水而孔径缩小,结晶紫碘复合体被阻塞在细胞内,细胞仍呈紫色。G-菌:肽聚糖层薄,交联松弛,乙醇脱色不能使其结构收缩。 由于其含量高,乙醇溶解脂肪,缝隙大,酒精脱色细胞,呈无色,黄砂(苯酚复红)染红。方法细菌标本的固定,结晶紫初染,碘液介质染,结晶紫
8、-碘复合体的生成,95%酒精脱色,稀释后的复红再染。用途:细菌形态鉴定、菌种鉴定意义:鉴别细菌,选择抗菌药,研究细菌对抗生素的敏感性、对结晶紫的敏感性、细菌的等电点,指导临床药。24 .克阳性细菌和克阴性细菌细胞壁成分的比较革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌细胞壁厚度阶层是否含有磷酸。脂多糖对青霉素的敏感性对溶菌酶的敏感性厚度(1580nm )主要是一层多肽多糖层有。没有很贵很贵薄(1015nm )2层、肽多卫星层和外膜层没有有。低还是不敏感矮25、芽胞:部分革兰氏阳性菌在一定环境条件下,在菌体内部形成圆形或卵圆形的休眠体。 芽胞形成后细菌就会失去繁殖力。芽胞的构造为外向的内侧:外膜外膜皮质芽胞壁内膜芯
9、髓。性质:一个细菌只形成一个芽细胞,一个芽细胞发芽也只生成一个菌体,细菌的数量没有增加,所以芽细胞不是细菌的繁殖方式。 与芽胞相比,不形成芽胞而具有繁殖能力的菌体叫做繁殖体(营养体)。特长对高温、干燥、辐射、化学药品有很强的抵抗力。含水量低,壁厚致密,渗透性差,不易着色,折射性强。芽胞内的新陈代谢几乎停止,处于休眠状态,但保持着潜在的发芽力。不是繁殖器官,芽胞只能产生营养状态的细胞。意思对外界恶劣环境有很强的抵抗力,是细菌保存生命的休眠结构消毒的指标是杀死芽胞(121/30分钟,朊病毒除外)。反恐战争的必要性。第二章细菌的生理1 .细菌和真核生物新陈代谢的主要差异生长和繁殖很快利用各种化合物作
10、为能量的能力很强营养需要多种多样可以利用超常管线合成大分子物质。形成特殊物质2 .细菌物质的摄取方式单纯扩散(被动扩散)促进扩散自主运输基重排需要载体蛋白和能量,有两个特征运输过程中物质发生了化学变化主要存在于厌氧菌和显性厌氧菌中。3、时代时间:一个菌体分裂成两个菌体所需要的时间。4、生长曲线:将细菌接种到液体培养基中放置在适当的温度下,定期采样检测活菌数,发现细菌的生长过程有规律。 以时间为横轴,以活菌数的对数为纵轴,可以得到生长曲线。5 .细菌繁殖的四个时期晚期:是细菌来到新环境的适应过程。特点:代谢活跃,合成和积累必要的酶系统虽然RNA含量明显增加,但DNA含量没有变化细菌数不会增加。对
11、数期:细菌迅速生长,以一定速度分裂繁殖,活菌数呈几何级数增加,达到峰值,生长曲线接近斜直线。 此时病原菌致病力最强,形态、染色特性及生理活性典型,对抗菌药的作用敏感。OD=0.40.6被认为处于对数期。稳定期:由于营养的消耗、代谢产物的积累,细菌的繁殖速度下降,死亡数逐渐上升,新繁殖的活菌数和死亡菌数几乎平衡。 细菌的形态和生理性状经常变化,格兰阳性菌染成阴性,在毒素、抗生素、芽胞多时发生。衰退期:死菌数超过生菌数,细菌菌体变形或自溶,染色不典型,难以鉴定。6 .培养基概念:人工调制的基质,含有细菌繁殖所需的营养物质。 制作培养基后,必须进行灭菌处理。营养条件基本营养氧:根据细菌对氧的需求,可
12、分为白杨菌、厌氧菌和两性厌氧菌厌氧培养基:为培养厌氧菌而设计的温度:根据细菌对温度的适应范围,可以将细菌分为嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌碱度:多数病原菌的最佳ph为7.27.6,为鼻坏疽菌的偏振酸、霍乱菌的偏振酸7 .培养基的分类营养分类基础培养基:基本营养成分营养培养基:在基础培养基中添加葡萄糖、血液、血清、生长因子等其他营养物质按状态固体培养基: 1.5%2%用于琼脂、细菌分离纯化半固体培养基: 0.5%琼脂,进行穿刺试验液体培养:扩增纯粹培养的菌体各功能鉴别培养基:在培养基中加入特定的基质,观察细菌生长后的分解基质,鉴别细菌。选择培养基:加入培养基中的化学物质可以抑制一种细菌的生长,有利于另一
13、种细菌的生长,因此选择后者。麦考凯培养基含胆盐,能抑制革兰阳性菌的生长,能生长大肠菌和沙门菌。厌氧培养基:用于厌氧菌的分离、培养和鉴别。 通常的培养基在无氧环境下培养,或者使培养基本身成为无氧环境。废肉培养基是常用的厌氧培养基之一,其中不含饱和脂肪酸和谷胱甘肽的肉渣起到还原剂的作用。8、分离培养:将标本和培养物在固体培养基表面划线接种,通过划线的分散作用,许多原始细菌在固体培养基表面扩散。9 .液体培养基中的生长现象混浊:大部分细菌沉淀:生长成链状的细菌菌膜:结核菌、枯草菌等特殊好氧菌10、生化反应:细菌对糖、蛋白质的分解能力不同,代谢产物不同,用生化方法鉴定细菌称为细菌的生化反应。 主要有氧
14、化酶试验、VP试验、甲基红试验、吲哚试验等。11、生物被膜:通常生活在自然界的细菌不是作为游离的单一菌体存在,而是作为群落出现,该群落的主要表现形式称为生物被膜。 是自己产生的聚葡萄糖包着菌细胞的结构集团,是细菌具有保护性的生长模型,其结构有水和营养物质的通道。12 .生物膜的特性生长速度缓慢不均匀。细菌生物膜是在不利的环境下形成的,环境变化对其影响很小。 膜表面的细菌,由于营养等因素分裂快,体积大,内层相反。细菌的毒性下降毒性强的细菌形成被膜菌后,不会让动物死亡。耐化学药品性提高逃避宿主的免疫监视多糖膜降低了免疫细胞和免疫分子的趋化,使包膜菌和宿主长期共存。13、密度感应(QS ) :多数细
15、菌合成和释放被称为自诱导素(信号素)的信号分子,细胞外信号分子浓度随着细菌密度的增加而增加,达到临界浓度时,信息素会诱发菌体中相关基因的表达,调节细菌的生物行为,适应环境变化的现象14 .微生物种群之间的关系:互生、共生、拮抗、寄生。15 .正常菌群与其宿主之间形成共生关系,具体表现为营养、免疫、生物拮抗三个方面。16、菌膜病:牙周炎、中耳炎、坏死性筋膜炎、心内膜炎。17、没有特定病原体的动物(SPF ) :指不存在特定病原性或潜在病原性微生物的动物。18、感受状态:细胞生活周期中特殊的生理状态。第三章消毒和灭菌1、灭菌:指杀死物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽胞、霉菌孢子的方法。2、消
16、毒:指杀死物体中病原微生物的方法。 只要达到去除传染性的目的,而不要杀死非病原微生物及其芽胞、孢子全部。3、防腐:指阻止或抑制微生物繁殖的方法。4、无菌:指没有活微生物的状态。5、无菌操作:防止微生物侵入机体和局部环境的操作技术。6、物理消毒灭菌法:热灭菌法、辐射灭菌法、超声波灭菌法、过滤灭菌法。7、热灭菌法:干热灭菌、湿热灭菌。两者的比较在同一温度下,湿热灭菌的效力大于干热灭菌。理由:湿热中的细菌菌体蛋白质比较容易凝固;湿热的渗透力大于干热湿热的蒸汽中存在潜热。干热灭菌法火焰灭菌法热风灭菌法干热灭菌器适用于高温下不会破损、不变质的产品,如玻璃器具、瓷器等。灭菌温度需要在160下维持2h。湿热灭菌法煮沸灭菌巴氏消毒法:在较低的温度下杀菌液态食品中的病原菌和特定微生物,不会严重损害营养成分和风味。低温维持鲈鱼消毒法6365/30min高温瞬时巴氏消毒法7172/15s超高温巴氏消毒法132/12s流通蒸汽灭菌法:采用常压蒸汽消毒法,细菌繁殖体在1530min时死亡,芽胞不完全死亡。间歇灭菌法/丁达尔灭菌法(蒸汽反复流通):用于对鸡蛋培养基、血清培养基、糖培养基等不高温培养基进行灭菌。高
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