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文档简介

1、荧光法测定维生素B2,一、实验目的,荧光光度法测定多维葡萄糖粉中维生素B2 学会使用荧光光度计,二、实验原理,维生素B2（又叫核黄素，VB2） 是橘黄色无臭的针状结晶 易溶于水而不溶于乙醚等有机溶剂 在中性或酸性溶液中稳定 光照易分解，对热稳定,基本性质,二、实验原理,基本性质,二、实验原理,在430440 nm蓝光的照射下，发出绿色荧光，荧光峰在535 nm。 维生素B2在pH=67的溶液中荧光强度最大， 在pH=11的碱性溶液中荧光消失，,荧光分光光度法,定量测定,三、实验试剂、仪器,荧光光度计 5 ml吸量管1只，2 ml吸量管1只，50 ml容量瓶6只, 100 ml容量瓶1只 10.

2、0g/ml维生素B2标准溶液，冰乙酸， 多维葡萄糖粉试样.,四、实验步骤,了解荧光光度计的基本操作，调节仪器到工作状态。 设置激发波长为440nm，发射波长为540 nm，灵敏度2，入射缝宽和出射缝宽均为10nm。,四、实验步骤,(1)标准系列溶液的配制及标准溶液荧光强度的测定： 标准液：0.50、1.00、1.50，2.00，2.50，3.00ml 冰醋酸：2.00 ml 浓度：0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6ug/ml 从稀到浓测量系列标准溶液的荧光强度,四、实验步骤,（2）未知样的测定 多维葡萄糖粉试样：1.3368g 冰醋酸：2.00 ml 用测定标准系列时相同的条件，平行测量其荧光强度3次,五、实验数据处理,以维生素B2的浓度为横坐标，相对荧光强度为纵坐标，绘制标准曲

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