山东省莱芜市重点中学2025届高三3月第一次质量检查生物试题含解析

山东省莱芜市重点中学2025届高三3月第一次质量检查生物试题注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．下列实验操作及现象错误的是（）A．观察DNA和RNA在细胞中的分布实验的水解步骤不能对临时装片盖盖玻片B．用高倍显微镜观察叶绿体实验临时装片中的黑藻叶肉细胞不能进行新陈代谢C．叶绿体中色素的提取和分离实验烧杯中的层析液不能没及滤纸条上的滤液细线D．观察根尖分生区细胞的有丝分裂实验临时装片中的根尖细胞不能由前期进入中期2．野生型金黄色葡萄球菌对青霉素敏感，将它接种到青霉素浓度为0.1单位/cm3的培养基上，大多数菌株死亡，极少数菌株能存活下来。存活下来的菌株经过不断选育，最后可以获得能生长在青霉素浓度为250单位/cm3的培养基上的细菌品系。据此分析，下列有关说法正确的是A．抗青霉素的金黄色葡萄球菌增殖过程中能将抗青霉素的性状直接传递给后代B．在此过程中，青霉素起到了定向诱导金黄色葡萄球菌变异的作用C．在此过程中，金黄色葡萄球菌种群的基因频率发生了定向改变D．能在含青霉素的培养基上生长的细菌品系发生的变异是染色体变异3．对图曲线模型分析不正确的是（）A．若表示酶促反应速率与反应底物浓度的关系，则AB段限制因素可能是酶浓度B．若表示葡萄糖进入成熟哺乳动物红细胞速率与膜内外浓度差关系．则AB段限制因素可能是载体数量C．此曲线可表示动物骨骼肌细胞内ATP生成量与O2供给量之间的关系D．若表示环境温度与生物体内酶活性的关系，则该曲线不能表示恒温动物4．下列有关叙述中，错误的是（）A．减数分裂联会时期的交叉互换实现了同源染色体上等位基因的重组B．色盲患者男性多于女性，但男性群体中色盲的基因频率等于女性群体C．由基因突变导致的疾病有时可以通过光学显微镜观察进而确诊D．生物经过长期的自然选择，一种基因的频率可能降为零5．下图表示某细胞内蛋白质合成过程，其中X表示一种酶，核糖体a、b、c合成的多肽链甲的序列完全相同，核糖体d、e、f合成的多肽链乙的序列完全相同。下列相关叙述正确的是（）A．该细胞合成酶X时需要高尔基体的加工与运输B．核糖体a和d在不同的位置结合到该mRNA上C．核糖体a、b和c共同参与合成一条多肽链甲D．核糖体a和d在mRNA上移动的方向不同6．现有甲和乙两个不同的生态系统，两个生态系统生产者同化的总能量相同。甲生态系统含有7个营养级，乙生态系统含有7个营养级。下表为甲生态系统第二、三营养级的能量生产情况。营养级摄取量(J/hm6•a)粪便量(J/hm6•a)呼吸散失量(J/hm6•a)第二个营养级1．87×10116．77×10107．17×1010第三个营养级1．07×10107．70×1097．77×109下列叙述正确的是（）A．甲生态系统第三个营养级用于生长和繁殖的能量为6．77×109J/hm6•aB．甲生态系统的次级生产量为7．777×1010J/hm6•aC．甲生态系统的能量利用率高于乙生态系统D．若传递效率相同，则甲、乙两个生态系统的次级生产量相同7．下列关于生物学实验的叙述，正确的有几项（）①在“脂肪的鉴定”实验中，体积分数为50%的酒精溶液的作用是溶解组织中的脂肪②在“观察紫色洋葱鳞片叶细胞质壁分离与复原”实验中，原生质层的形态和位置变化为因变量，该实验不存在对照③探究温度对酶活性影响的实验，可选用新鲜的肝脏研磨液和H2O2溶液④小鼠吸入18O2，则在其尿液中可检测到H218O，呼出的CO2可能含有18O⑤鉴定DNA时，将溶解的粗提产物与二苯胺混合后进行沸水浴可看到紫色反应A．无正确项 B．只有一项正确C．有两项正确 D．有三项正确8．（10分）下列关于物质跨膜运输的叙述中，不正确的是()A．同一物质进入不同细胞的方式可以相同，如葡萄糖进入肝脏细胞和骨骼肌细胞B．不同物质进入相同细胞的方式可能相同，如氨基酸和核苷酸进入小肠上皮细胞C．同一物质进入相同细胞的方式可能不同，如水分子进入某些具有水通道蛋白的细胞D．不同物质进入不同细胞的方式可能相同，如乙醇进入小肠上皮细胞和Na＋进入神经细胞二、非选择题9．（10分）果蝇是科研人员经常利用的遗传实验材料，其灰身和黑身、刚毛和截毛各为一对相对性状，分别由等位基因A、a和D、d控制。某科研小组用一对灰身刚毛果蝇进行了多次杂交实验，F1的雄性表现型为灰身刚毛：灰身截毛：黑身刚毛：黑身截毛=3：3：1：1，雌性个体表现为灰身刚毛：灰身截毛：黑身刚毛：黑身截毛＝3：0：1：0。分析回答下列问题：（1）果蝇控制灰身和黑身的等位基因位于____________（填“常”或“X”）染色体上。（2）F1果蝇中，截毛基因的基因频率为____________（用分数表示）。（3）控制果蝇眼色的基因仅位于X染色体上，红眼（R）对白眼（r）为显性。研究发现，眼色基因可能会因染色体片段缺失而丢失（记为Xc）；若果蝇两条性染色体上都无眼色基因，则其无法存活。在一次用纯合红眼雌果蝇（XRXR）与白眼雄果蝇（XrY）杂交的实验中，子代中出现了一只白眼雌果蝇。欲用一次杂交实验判断这只白眼雌果蝇出现的原因，请简要写出实验方案的主要思路：____________。实验现象与结论：①若子代果蝇出现____________，则是环境条件改变导致的；②若子代果蝇出现____________，则是染色体片段缺失导致的；③若子代果蝇出现____________，则是基因突变导致的。10．（14分）乙烯具有促进果实成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术（原理如图1），可以抑制这两个基因的表达，从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。（1）图2中的2A11为特异性启动子，则2A11应在番茄的____________（器官）中表达。（2）从番茄成熟果实中提取___________为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以进行拼接构成融合基因并扩增。（3）合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点，ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点，用限制酶____________对上述两个基因进行酶切，再串联成融合基因，相应的Ti质粒应用限制酶_______________进行切割，确保融合基因能够插入载体中。（4）为了实现图1中反义基因的效果，应将融合基因_______（正向/反向）插入在启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后，接种在含有___的培养基中，可筛选出含有反义融合基因的农杆菌，再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。（5）在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时，____________（填“能”/“不能”）用放射性物质标记的ACC氧化（合成）酶基因片段做探针进行检测，理由是____________。11．（14分）回答下列关于基因工程的相关问题：（1）获取目的基因及目的基因和运载体结合的过程需要用到的工具酶有________________。质粒DNA分子上有特殊的___________，供重组DNA的鉴定和选择。（2）获得目的基因后，利用PCR技术将该基因扩增时，需要添加的有机物质除了模板、原料外，还应加入___________。将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是________________。（3）基因工程技术中，科学家可以从基因文库中获取目的基因，基因文库包括基因组文库和cDNA文库，后者比较小，原因是_________________________________________。（4）若要检测目的基因是否转录和翻译，采用的检测方法分别是________________。（5）基因治疗是指把_______导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的手段。12．阅读下列有关病毒的材料并回答题目。Ⅰ．2019新型冠状病毒，即“2019-nCoV”，为有包膜病毒。颗粒呈圆形或椭圆形，直径50～200nm。颗粒表面有棒状突起，使病毒表面看起来形如花冠，故而得名。2019-nCoV基因组长度为1．8Kb，为单股正链RNA，其5’端为甲基化帽子，3’端有多聚腺苷酸（PolyA）结构，可直接作为翻译模板。截至2020年3月25日上午10时，世界范围确诊感染此病毒的人数已累计达到412461人。（1）下列选项错误的是_____A．细胞膜能控制物质进出，故该病毒只能侵染受损细胞，使人患病B．由于没有核糖体，这种病毒无法合成蛋白质，其包膜组成一定不含蛋白质C．病毒的遗传物质水解后可产生一分子核苷，一分子含氮碱基与一分子磷酸D．此病毒的单股正链RNA，只有转录形成对应的负链RNA才能附着在细胞的核糖体上（2）这种病毒的遗传物质为_____，研究人员紧急研发了核酸检测试剂盒，以此来检测病毒，检测此病毒的核酸可使用_______法。研究人员发现，病毒的中间宿主为蝙蝠，某些情况下，病毒可在不同动物身体内翻译出基本相同的多肽链，这是因为_____。（3）病毒入侵人体后，引起相关细胞分泌抗体，该抗体并不会与其他病症的抗原结合，这体现了________，此原理也可应用于该病的检测。若要用细胞工程的方法生产针对2019-nCoV上抗原的单克隆抗体，用到的技术有_________和_________。（4）将2019-nCoV不稳定的RNA转换成DNA后，技术人员常采用荧光定量PCR技术定量检测样本中病毒的核酸含量。其原理如图：在PCR反应体系中每加入一对引物的同时，加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当_________催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接受到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。反应最终的荧光强度与PCR起始状态_________含量呈正相关。Ⅱ．朊病毒是一种只含蛋白质而不含核酸的病原微生物。按图示1→2→3→4进行实验，验证朊病毒侵染因子是蛋白质，题中所用牛脑组织细胞为无任何标记的活体细胞。（1）本实验采用的研究方法是______。（2）从理论上讲，经1→2→3→4实验离心后上清液中______（填“能大量”或“几乎不能”）检测到32P，沉淀物中___________（填“能大量”或“几乎不能”）检测到32P，出现上述结果的原因是：_________。（3）如果添加试管5，从试管2中提取朊病毒后先加入试管5同时添加35S标记的（NH4）235SO4，连续培养一段时间后，再提取朊病毒加入试管3，培养适宜时间后离心，检测放射性应主要位于_______中，少量位于_______中，原因是：_____________。（4）一般病毒的增殖同朊病毒之间的最主要区别是：一般的病毒侵染细胞是向宿主细胞提供________（物质），利用宿主细胞的_______________等物质进行增殖。

参考答案一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【解析】

观察DNA和RNA在细胞中的分布实验流程：取口腔上皮细胞制片→水解→冲洗→染色→观察。叶绿体中色素的提取和分离实验流程：提取色素→制备滤纸条→画滤液细线→分离色素→观察结果。观察根尖分生区细胞的有丝分裂实验流程：取材→解离→漂洗→染色→制片→观察。【详解】A、观察DNA和RNA在细胞中的分布实验的水解步骤后需染色，不能对临时装片盖盖玻片，A正确；B、用高倍显微镜观察叶绿体实验采用的是新鲜的黑藻，并且临时装片中始终保持有水的状态，黑藻叶肉细胞能进行新陈代谢，B错误；C、叶绿体中色素的提取和分离实验，因为色素溶解于层析液，实验烧杯中的层析液不能没及滤纸条上的滤液细线，C正确；D、观察根尖分生区细胞的有丝分裂实验临时装片中的根尖细胞经解离后已死亡，不能观察到由前期进入中期，D正确。故选B。2、C【解析】

现代生物进化理论认为：变异是不定向的，可遗传变异为生物进化提供原材料，自然选择通过定向改变种群的基因频率而使生物朝着一定的方向进化，生物进化的实质是种群基因频率的改变。【详解】A、在生物的繁殖过程中，个体并不是把性状直接传递给后代，而是通过基因传递给后代，A错误；|

B、变异是不定向的，在此过程中青霉素起定向选择作用，B错误；

C、在青霉素的选择作用下，具有抗青霉素基因的个体有更多的机会生存并繁殖后代，不具有抗青霉素基因的个体逐渐被淘汰，因此青霉素使葡萄球菌的抗青霉素基因的基因频率逐渐升高，C正确；

D、葡萄球菌是原核生物，细胞内没有染色体，故葡萄球菌没有染色体变异的发生，D错误。

故选C。本题易错点在于青霉素的作用：不是诱导葡萄球菌发生变异的作用，而是对葡萄球菌起选择作用。3、C【解析】

1、酶促反应的速率受反应物浓度、酶活性的影响，在一定的范围内，随着反应物浓度升高，酶促反应速率增大，当超过一定的浓度后，反应物浓度升高，酶促反应的速率不再增大，此时限制酶促反应速率的因素可能是酶的浓度、酶活性等，温度、PH等可以通过影响酶活性而影响酶促反应速率．2、哺乳动物成熟的红细胞吸收葡萄糖的方式是协助扩散，影响协助扩散的因素主要是膜内外浓度差．载体数量等．3、骨骼肌细胞可以进行有氧呼吸，也可以进行无氧呼吸，有氧呼吸和无氧呼吸都能合成ATP，在氧气浓度为0时，骨骼肌通过无氧呼吸产生ATP．4、温度影响酶活性，酶有最适宜温度，小于最适宜温度时，随温度升高，酶活性升高，超过最适宜温度后，随着温度升高，酶活性降低甚至失去活性．【详解】A、在一定的范围内，随着反应物浓度升高，酶促反应速率增大，当超过一定的浓度后，反应物浓度升高，酶促反应的速率不再增大，因此题图曲线可以表示酶促反应速率与反应底物浓度的关系，AB段限制因素可能是酶浓度，A正确；B、葡萄糖进入哺乳动物成熟的红细胞是协助扩散，如果该图表示葡萄糖进入成熟哺乳动物红细胞速率与膜内外浓度差关系，则AB段限制因素可能是载体数量，B正确；C、氧气浓度为0时，骨骼肌细胞可以通过无氧呼吸产生ATP，该曲线不能表示动物骨骼肌细胞内ATP生成量与O2供给量之间的关系，C错误；D、正常情况下恒温动物的体温不会随环境温度变化而发生较大变化，因此该图不能表示恒温动物的酶活性与环境温度之间的关系，D正确．故选C．4、A【解析】

1、基因重组有自由组合和交叉互换两类．前者发生在减数第一次分裂的后期（非同源染色体的自由组合），后者发生在减数第一次分裂的四分体（同源染色体的非姐妹染色单体的交叉互换）。2、色盲是X染色体上的隐性遗传病。3、基因突变是由于碱基对的增添、缺失和替换导致DNA分子结构发生改变。【详解】A、减数分裂联会时期的交叉互换实现了同源染色体上非等位基因的重组，A错误；B、男性色盲患者多于女性患者，原因是伴X隐性遗传方式，但人群中男性群体中色盲的基因频率与女性群体中色盲的基因频率相当，B正确；C、镰刀形贫血症是基因突变引发的疾病，可以通过显微镜观察红细胞的形态进行确诊，C正确；D、生物经过长期的自然选择，不断淘汰部分基因，所以可能使某种基因的频率降为零，D正确。故选A。5、B【解析】

分析题图可知，该图表示原核细胞中遗传物质的表达过程，包括DNA的转录与翻译，酶X表示RNA聚合酶，具有解旋DNA与催化RNA形成的作用。【详解】A、题图中表示该细胞的转录和翻译同时发生，可推断该细胞为原核细胞，细胞中不存在高尔基体，A错误；B、核糖体a和d合成不同的多肽链，即识别不同的启动子，在mRNA的不同位置上结合开始翻译，B正确；C、核糖体a、b、c各自合成一条多肽链甲，C错误；D、分析题图可知，核糖体c到a合成的多肽链依次增长，即核糖体a在mRNA上由右向左移动，核糖体f到e合成的多肽链依次增长，即核糖体d在mRNA上同样是由右向左移动，核糖体a和d在mRNA上移动的方向相同，D错误；故选B。6、A【解析】

摄入量=粪便量+同化量；同化量=呼吸散失量+生物用于生长、发育和繁殖的能量。【详解】A、甲生态系统第三个营养级用于生长和繁殖的能量=同化量-呼吸散失的能量=（摄入量-粪便量）－呼吸散失的能量=（1.07×1010－7.70×109）－7.77×109=6.77×109J/hm6•a，A正确；

B、次级生产量（动物和其它异养生物靠消耗植物的初级生产量制造的有机物质或固定的能量）=同化量-呼吸散失的能量=（摄入量-粪便量）－呼吸散失的能量=（1.87×1011-6.77×1010）－7.17×1010=7×1010J/hm6•a，B错误；

C、题干中没有乙生态系统的相关数据，故无法判断甲、乙两个生态系统的能量利用率的高低，C错误；

D、次级生产量（动物和其它异养生物靠消耗植物的初级生产量制造的有机物质或固定的能量）=同化量-呼吸散失的能量，两个生态系统生产者同化的总能量相同，若传递效率相同，则甲、乙两个生态系统中第二营养级同化的能量相同，但不知道呼吸消耗能量值，因此无法进行比较，D错误。

故选A。解答此题要求考生识记能量传递效率，掌握其中的相关计算，能结合表中和题中信息准确判断各选项。7、B【解析】

渗透作用发生的条件：具有半透膜；半透膜两侧具有浓度差；探究pH对酶活性时，自变量应该是不同的pH；探究温度对酶活性的影响时，自变量应该是不同的温度；二苯胺可与DNA在水浴条件下反应呈蓝色。【详解】①在“脂肪的鉴定”实验中，体积分数为50%的酒精溶液的作用是洗去浮色，①错误；

②在“观察紫色洋葱鳞片叶细胞质壁分离与复原”实验中，原生质层的形态和位置变化为因变量，该实验可与未发生质壁分离前的原生质层的形态和位置形成对照，②错误；③由于H2O2溶液不稳定，在高温条件下易分解，因此不能用作探究温度对酶活性的影响实验的材料，③错误；④小鼠吸入18O2，氧气参与有氧呼吸的第三阶段可以进入水中，水再参与有氧呼吸的第二阶段可以进入二氧化碳中，故可以在其尿液中可检测到，呼出的CO2可能含有18O，④正确；⑤用二苯胺试剂鉴定DNA时，在沸水浴条件下溶液呈蓝色，⑤错误。只有一项正确，B正确，ACD错误。故选B。本题考查探究影响教材基础实验，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的取材是否合适、实验选用的鉴定试剂是否合理、实验条件控制是否得当及实验设计是否合理等，这需要考生在平时的学习过程中注意积累。8、D【解析】

物质通过简单的扩散作用进出细胞，叫做自由扩散，如水、氧气、二氧化碳、甘油、乙醇、苯等物质进出细胞。进出细胞的物质借助载体蛋白的扩散，叫做协助扩散，如葡萄糖进入红细胞；从低浓度一侧运输到高浓度一侧，需要载体蛋白的协助，同时还需要消耗细胞内化学反应所释放的能量，这种方式叫做主动运输，如氨基酸和葡萄糖进入小肠绒毛上皮细胞。【详解】同一物质进入不同细胞的方式可以相同，如葡萄糖进入肝脏细胞和骨骼肌细胞，都是主动运输，A正确；不同物质进入相同细胞的方式可能相同，如氨基酸和核苷酸进入小肠上皮细胞，都是主动运输，B正确；同一物质进入相同细胞的方式可能不同，如水分子进入某些具有水通道蛋白的细胞，有自由扩散和协助扩散两种运输方式，C正确；乙醇进入小肠上皮细胞是自由扩散，Na＋进入神经细胞是协助扩散，这两种物质进入不同细胞的运输方式不同，D错误；因此，本题答案选D。解答本题的关键是：区分自由扩散、协助扩散和主动运输三种运输方式，以及相关的实例，再根据题意作答。二、非选择题9、常1/3让这只白眼雌果蝇与红眼雄果蝇杂交，观察和统计后代果蝇的表现型和比例红眼雌果蝇：红眼雄果蝇：白眼雄果蝇=2：1：1红眼雌果蝇：白眼雄果蝇=2：1红眼雌果蝇：白眼雄果蝇=1：1【解析】

分析题意可知：亲本均为灰身刚毛，后代出现了性状性状分离，说明灰身对黑身为显性，刚毛对截毛为显性。后代雌性中没有截毛，因此果蝇控制刚毛和截毛的等位基因位于X染色体上。后代雌雄中灰身：黑身比例均为3:1，因此果蝇控制灰身和黑身的等位基因位于常染色体，因此亲本的基因型为AaXDXd和AaXDY。【详解】（1）由于后代雌、雄个体中都有灰身和黑身，由此可见该性状的遗传与性别无关，所以果蝇控制灰身和黑身的等位基因位于常染色体上。（2）亲本的基因型为AaXDXd和AaXDY，如果只考虑刚毛和截毛这一对相对姓状，后代的基因型为XDXD、XDXd、XDY、XdY，且4种基因型所占比例相等，则截毛基因Xd基因频率为（1+1）/（1×2+1×2+1+1）=1/3。（3）由于纯合红眼雌果蝇（XRXR）与白眼雄果蝇（XrY）杂交的实验中，子代中出现了一只白眼雌果蝇，所以要判断这只白眼雌果蝇出现的原因，需要让这只白眼雌果蝇与任意的一只红眼雄果蝇杂交，观察后代果蝇的表现型和比例情况。如果是环境条件改变导致的不遗传变异，则子代红眼雌果蝇：红眼雄果蝇：白眼雄果蝇=2：1：1；如果是基因突变导致的，则子代果蝇红眼雌果蝇：白眼雄果蝇=1：1；如果是染色体片段缺失导致的（XrXc），则子代XcY致死，子代红眼雌果蝇：白眼雄果蝇=2：1。本题考查基因的自由组合定律和伴性遗传以及生物变异的相关知识，意在考查学生的分析图表的能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。10、果实RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄细胞内本来存在ACC合成酶基因，能与ACC合成酶基因探针发生分子杂交【解析】

分析题意和题图：番茄细胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。图1所示为反义基因转录成的RNA可与靶基因转录出的mRNA形成RNA双链，使靶mRNA不能与核糖体结合或被RNA酶降解，从而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成，影响细胞中乙烯的合成，使番茄具有耐储存、宜运输的优点。图2所示的基因表达载体的组成包括复制原点、启动子、终止子、标记基因和目的基因，目的基因插入点在启动子和终止子之间。【详解】（1）乙烯具有促进果实成熟的作用，因此图2中的2A11为特异性启动子，则2A11应在番茄的果实中表达。（2）从番茄成熟果实中提取RNA为模板，利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以进行拼接构成融合基因并扩增。（3）合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点，ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点，要将两个基因融合，需用同一种限制酶即XbaⅠ酶对上述两个基因进行酶切，再用DNA连接酶串联成融合基因，这样融合基因上有三个限制酶切点：BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ，其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分别位于融合基因的两端，因此相应的Ti质粒应用限制酶BamHl和Sacl进行切割，确保融合基因能够插入载体中。（4）反义融合基因是由番茄果实细胞中的靶基因转录出的mRNA反转录形成的，因此为了实现图1中反义基因的效果，应将融合基因反向插入在启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后，接种在含有卡那霉素的培养基中，可筛选出含有反义融合基因的农杆菌，再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。（5）在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时，因为番茄细胞内本来存在ACC合成酶基因，能与ACC合成酶基因探针发生分子杂交，所以不能用放射性物质标记的ACC氧化（合成）酶基因片段做探针进行检测。解答本题的关键是：1.读取题干信息，结合题图1，弄清反义基因是如何形成的。2.反义mRNA和靶mRNA实质上是分别由靶基因的两条链为模板转录而来。3.结合题图和题意分析融合基因为何是反向插入在启动子2A11的下游。11、限制酶、DNA连接酶标记基因引物、Taq酶（或耐高温的DNA聚合酶）农杆菌转化法cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，在这个时期并不是所有的基因都进行转录分子杂交和抗原-抗体杂交技术正常基因【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术.个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）获取目的基因及目的基因和运载体结合的过程需要用到的工具酶有限制酶、DNA连接酶。质粒DNA分子上有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）PCR技术扩增目的基因时，需要添加的有机物质除了模板、原料外，还应加入引物、Taq酶（或耐高温的DNA聚合酶）。将目的基因导入植物细胞常用的方法是农杆菌转化法。（3）cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，在这个时期并不是所有的基因都进行转录，故cDNA文库比基因组文库小。（4）若要检测目的基因是否转录和翻译，采用的检测方法分别是分子杂交和抗原-抗体杂交技术。（5）基因治疗是指把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的。本题考查基因工程的基本步骤及基因治疗相关知识点，掌握相关知识结合题意答题。12、ABCDRNA分子杂交（几乎）所有生物共用一套密码子抗体具有特异性动物细胞培养动物细胞融合Taq酶模板DNA同位素标记法几乎不能几乎不能朊病毒不含核酸只含蛋白质，蛋白质中磷含量极低，故试管2中提取的朊病毒几乎不含32P沉淀物上清液被35S标记的朊病毒（蛋白质），大部分进入牛脑组织细胞中，只有少量的朊病毒可能没侵入牛脑组织细胞核酸核苷酸和氨基酸【解析】

1、病毒不具有独立代谢能力，只能寄生在活细胞中。据遗传物质不同，可分为DNA病毒和RNA病毒。2019-nCoV的核酸为单股正链RNA，其5’端为甲基化帽子，3’端有多聚腺苷酸（PolyA）结构，可直接作为翻译模板。2、朊病毒不能独立生活，在活细胞内才能增殖，所以要标记朊病毒需先培养带标记的宿主细胞—牛脑