2025高考生物学第二轮复习专练：细胞工程（含答案）

2025版新教材高考生物学第二轮复习

专题21细胞工程

五年高考

考点1植物细胞工程

1.（2024黑、吉、辽,6,2分）迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时,先诱导外植体

形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产

量。下列叙述错误的是（）

A.迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体

B.诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸

C.悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团

D.茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率

2.（2024湖北,11,2分）植物甲抗旱、抗病性强,植物乙分篥能力强、结实性好。科研人员通

过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错

误的是（）

______酶解（1.5小时）______

植物甲_^...与_甲的原

同融合的原

:①混合酶液处理:一生质体

植物乙乙的原

叶片生质体

I植物丙日愈伤组织内杂种细胞声■

A.过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异

B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合

C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素

D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株

3.（不定项）（2024山东,20,3分）下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（）

A.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体

B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织

C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核

D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖

4.（2023河北,13,2分）植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术。

下列叙述错误的是（）

A.植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理

B.经纤维素酶和果胶酶充分处理后，植物细胞团分散为单个完整的悬浮细胞

C.为使悬浮细胞正常生长,培养基须保持适当的温度、pH和渗透压

D.利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗

5.（2023江苏,13,2分）研究者通过体细胞杂交技术，探索利用条斑紫菜和拟线紫菜培育杂种

紫菜。下列相关叙述正确的是（）

A.从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，用于去除细胞壁

B.原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡

C.检测原生质体活力时可用苯酚品红或甲紫溶液处理,活的原生质体被染色

D.聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞

6.（2023山东,14,2分）利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养

使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（）

A.利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物

B.植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产

C次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养

D.该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量

7.（2022辽宁,14,2分）蓝莓细胞富含花青素等多酚类化合物。在蓝莓组织培养过程中，外植

体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醍类化合物，这一过程称为褐变o褐变会

引起细胞生长停滞甚至死亡，导致蓝莓组织培养失败。下列叙述错误的是（）

A.花青素通常存在于蓝莓细胞的液泡中

B.适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率以减少褐变

C.在培养基中添加合适的抗氧化剂以减少褐变

D.宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体

8.（2023新课标,35,12分）根瘤菌与豆科植物之间是互利共生关系，根瘤菌侵入豆科植物根

内可引起根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能力。为了寻找抗逆性强的根瘤菌,某研究

小组做了如下实验:从盐碱地生长的野生草本豆科植物中分离根瘤菌;选取该植物的茎尖

为材料，通过组织培养获得试管苗（生根试管苗）;在实验室中探究试管苗根瘤中所含根瘤

菌的固氮能力。回答下列问题。

⑴从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物

是O

⑵取豆科植物的茎尖作为外植体,通过植物组织培养可以获得豆科植物的试管苗。外植体

经诱导形成试管苗的流程是:外植体旦愈伤组织旦试管苗。其中①表示的过程

是，②表示的过程是o由外植体最终获得完整的植株,这一过程说明

植物细胞具有全能性。细胞的全能性是

指。

⑶研究小组用上述获得的纯培养物和试管苗为材料,研究接种到试管苗上的根瘤菌是否

具有固氮能力，其做法是将生长在培养液中的试管苗分成甲、乙两组，甲组中滴加根瘤菌菌

液,让试管苗长出根瘤。然后将甲、乙两组的试管苗分别转入的培养液中培

养，观察两组试管苗的生长状况，若甲组的生长状况好于乙组，则说

明O

⑷若实验获得一种具有良好固氮能力的根瘤菌，可通过发酵工程获得大量根瘤菌用于生

产根瘤菌肥。根瘤菌肥是一种微生物肥料，在农业生产中使用微生物肥料的作用是

（答出2点即可）。

考点2动物细胞工程

9.（2023辽宁,7,2分）大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列

叙述错误的是（）

A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制

B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清

C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖

D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量

10.（2022湖北,7,2分）某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代

神经元生长缓慢，其原因不可能的是（）

A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织

B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封

C.血清经过高温处理后加入培养基

D.所使用的培养基呈弱酸性

11.（2022湖北,15,2分）纳米氧化亚铜是一种纳米材料。为了探究纳米氧化亚铜对贴壁生长

细胞活性的影响，研究者在培养基中添加一定量的纳米氧化亚铜,8小时后观察到细胞萎缩,

体积变小，细胞核变大，细胞膜内侧出现纳米氧化亚铜富集现象，培养瓶中大量贴壁细胞脱

落,出现细胞悬浮。根据该实验现象，能得出的正确结论是（）

A.纳米氧化亚铜改变了细胞的贴壁生长习性

B.纳米氧化亚铜对该细胞生长有抑制作用

C.纳米氧化亚铜能通过自由扩散进入细胞

D.纳米氧化亚铜不影响细胞的新陈代谢

12.（2022山东,15,2分）如图所示川各由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外

解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（）

抗体1抗体2双抗

A.双抗可同时与2种抗原结合

B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞

C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原

D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞

13.（多选）（2022江苏,19,3分）如图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人一鼠杂

种细胞中人的染色体会以随机方式丢失,通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞I、

n、in中人的4种酶活性，只有n具有芳蝶羟化酶活性，只有ni具有胸背激酶活性，i、in

都有磷酸甘油酸激酶活性,i、n、in均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有（）

A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合

B.细胞I、n、ni分别为人一人、人一鼠、鼠一鼠融合细胞

C.芳煌羟化酶基因位于2号染色体上,乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上

D.胸背激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上

14.（2021辽宁,13,2分）如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。有关叙

述正确的是（）

£一窗

①供体细巧射

胞培养送］里激活并

，合，、培养移代孕

乙

牛重组细胞

生出后

代丁牛

A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定

B.过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体

C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理

D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植

15.（2021辽宁,3,2分）下列有关病毒在生物学和医学领域应用的叙述，错误的是（）

A.灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合

B.用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体

C.基因工程中常用噬菌体转化植物细胞

D.经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防

16.（2023重庆,16,10分）妊娠与子宫内膜基质细胞的功能密切相关。某研究小组通过如图

所示的实验流程获得了子宫内膜基质细胞，以期用于妊娠相关疾病的研究。

⑴手术获得的皮肤组织需在低温下运至实验室，低温对细胞中各种蛋白质的作用

为。

⑵过程①中，诱导形成iPS细胞时，需提高成纤维细胞中4个基因的表达量,可采用

技术将这些基因导入该细胞。这4个基因的主要作用为:M基因促进增殖,S基因和C基因

控制干细胞特性,K基因抑制凋亡和衰老。若成纤维细胞形成肿瘤细胞，最有可能的原因是

基因过量表达。

⑶培养iPS细胞时，应对所处环境定期消毒以降低细胞被污染风险。可用紫外线进行消毒

的

是（多选）。

A.培养基B.培养瓶

C.细胞培养室D.CO2培养箱

⑷过程②中,iPS细胞经历的生命历程为。PCR技术可用于检测子宫内

膜基质细胞关键基因的mRNA水平,mRNA需经过才能作为PCR扩增的模板。

17.（2023湖北,22,16分）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋

白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒,其主要技术路线如图所示。

回答下列问题:

(1)与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞(含浆细胞)(填“需要”或“不需

要”)通过原代培养扩大细胞数量;添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对

细胞膜的作用是。

(2)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对

和生长具有抑制作用。

(3)单克隆抗体筛选中,将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是

(4)构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下列属于DNA连接酶底物的是

HOOHPP

51।।I।।।।।।।।।3,5，-mJ'i।।।।।।।।31

1

3，U_L_U_LJ11kli1」_5,3-.1.1l,1.1.1l,,!.!11.1..5

HOOHPP

①②

POHHOP

5|||I|||||||||3,5'TT"f11111111131

3>i।ii11iniii115>

3，J_LLLLU11kllJJ_5,

HOPPOH

③④

18.(2022辽宁,24,10分)某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段,

制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。

I.N蛋白胞外段抗原制备，流程如图1

|N蛋白胞病毒

体

脂质

组

装N蛋白胞|

包装收集感染海一|

释

放，外段表达、

导入

细胞病毒5SW|纯化|

|毒质粒

图1

(1)构建重组慢病毒质粒时，选用氨苇青霉素抗性基因作为标记基因，目的

是O用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞,质粒被

包在脂质体(填“双分子层中”或“两层磷脂分子之间”)。

⑵质粒在包装细胞内组装出由组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而

表达并分离、纯化N蛋白胞外段。

II.N蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图2

图2

(3)用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用酶处理，制

成细胞悬液,置于含有混合气体的中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤

细胞进行融合。

⑷用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行

培养。用技术检测每孔中的抗体,筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又

能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集，提取单克隆

抗体。

⑸利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成，实现特异性治疗。

19.（2022福建,21节选,8分）美西螺具有很强的再生能力。研究表明,美西螺的巨噬细胞在

断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表

面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下。回答下列问题：

（二）抗CD14单克隆抗体的制备

流程如图所示：

免疫

①陋』

特定培养专一抗⑤⑥

基筛选体检测

SP2/0细胞③④

⑴步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射

和O

⑵步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是。

⑶吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原一抗体杂交原理，需加入进

行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因

是。

⑷步骤⑥从中提取到大量的抗CD14抗体用于检测巨噬细胞。

考点3胚胎工程

20.（2024湖北,5,2分）波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等

优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（）

A.选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理

B.胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测

C.普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体

D.生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选

21.（2024贵州,13,3分）生物学实验中合理选择材料和研究方法是顺利完成实验的前提条件。

下列叙述错误的是（）

A.稀释涂布平板法既可分离菌株又可用于计数

B.进行胚胎分割时通常是在原肠胚期进行分割

C.获取马铃薯脱毒苗常选取茎尖进行组织培养

D.使用不同的限制酶也能产生相同的黏性末端

22.（2023广东,3,2分）科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体

内，使后者成功妊娠并产仔,该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操

作是（）

A.超数排卵B.精子获能处理

C.细胞核移植D.胚胎培养

23.（2023浙江1月选考,12,2分）在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。

下列叙述第误的是（）

A.经获能处理的精子才能用于体外受精

B.受精卵经体外培养可获得早期胚胎

C.胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率

D.胚胎移植前需对受体进行选择和处理

24.（2022北京,11,2分）将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接

受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠（Me）。据此分析，下列叙述第误的是（）

A.获得Me的生物技术属于核移植

B.Mc表皮中有两种基因型的细胞

C.注射入的细胞会分化成Me的多种组织

D.将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠

三年模拟

综合基础练

1.（2024河北唐山一模,13）紫杉醇具有良好抗癌作用。科研人员用植物外植体获得愈伤组

织，然后在液体培养基中进行细胞悬浮培养，以获得更多紫杉醇。下列叙述错误的是（）

愈

外

伤液体培养工厂化生产、

细胞悬浮_

r组

基中悬浮一培养与继^弋一提取、检测

织振荡培养紫杉醇

A.诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等

B.由愈伤组织得到悬浮细胞可以使用纤维素酶和果胶酶进行处理

C.使用液体培养基并振荡有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长

D.利用植物细胞培养技术获得初生代谢产物紫杉醇能避免大量破坏野生红豆杉种群

2.（2024九省联考贵州卷,15）植物体细胞杂交技术可克服种间生殖隔离。应用该技术获得

“番茄一马铃薯”杂种植株，拓展了植物的种质资源。下列叙述正确的是（）

A.植物细胞壁的水解需要纤维素酶和几丁质酶

B.愈伤组织是由已分化的细胞所构成的细胞团

C.杂种细胞的染色体数一定是原细胞染色体数的2倍

D.“番茄一马铃薯”杂种植株未表现出亲本的所有性状

3.（2024湖北十一校二模,6）悬浮培养的动物细胞会因细胞密度过大、有害代谢产物积累等

而分裂受阻。生产上常用灌流式培养避免这些现象出现。灌流式培养是在细胞培养管内,

一边不断注入新鲜培养基,一边将培养液的上清液不断移出。下列相关叙述正确的是（）

A.灌流式培养的细胞会贴壁生长，但不会出现接触抑制现象

B.灌流是在细胞密度达到一定浓度或者营养物质低于一定浓度时进行的

C.灌流速率越高，营养物质利用越充分

D.培养管通常放置在95%的02和5%CO2的环境中

4.（2024九省联考江西卷,11）脂质体可作为运载工具海药物分子运送到特定的细胞内发挥

作用。为了提高药物运送的特异性,可在脂质体表面连接识别特定细胞的单克隆抗体，形成

药物一脂质体一单克隆抗体复合物（见图）。下列叙述错误的是（

单克隆抗体

脂质体

药物

A.脂质体的作用是帮助复合物通过主动运输进入特定细胞内

B.可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内来获取大量的单克隆抗体

C.复合物中的药物借助单克隆抗体和细胞表面抗原的相互作用来实现运送的特异性

D.单克隆抗体的制备需使用特定的选择培养基来筛选杂交瘤细胞

5.（2024九省联考甘肃卷,16）胚胎工程技术的迅速发展实现了优良家畜品种的大量繁殖，能

显著提高畜产品质量改善人民生活，还可以解决濒危动物繁育的问题。下列有关哺乳动物

胚胎工程的叙述，正确的是（）

A.刚采集到的卵母细胞即可与获能处理后的精子在体外受精

B.在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，标志着卵子受精

C.卵裂在透明带内进行，此时胚胎细胞数量和总体积不断增加

D.为了获得大量同卵多胚,可对囊胚或桑意胚进行无限次分割

综合拔高练

1.（2024九省联考黑龙江、吉林卷,7）《本草纲目》记载，樱桃具有利脾、止泻的功效。樱桃

中的棚皮素等酚类化合物具有抗氧化活性。我国已经利用组织培养技术繁育樱桃优良品

种,满足人们食用和药用需要。下列叙述错误的是（）

A.应用微型繁殖技术可获得大量樱桃脱毒苗

B.可以选用樱桃幼嫩的芽原基和叶原基作外植体

C.富含色氨酸的培养基有利于樱桃幼嫩的芽合成生长素

D.应用樱桃细胞培养可工厂化生产初生代谢产物柳皮素

2.（2024安徽合肥二模,15）植物A细胞核中具有耐盐碱效应基因植物B细胞质中具有高产

效应基因。研究人员用A、B两种植物的细胞进行体细胞杂交，最终获得高产耐盐碱再生

植株，如图所示。下列有关叙述错误的是（）

使细胞质失活

0—^0愈伤组织杂种植株

使细胞核失活

A.高产耐盐碱再生植株的获得体现了生物多样性的直接价值

B.选用两种不同颜色的原生质体有利于观察细胞的融合状况

C.只有异源融合形成的细胞才能够经①过程诱导为愈伤组织

D.①②过程所用培养基无需加入碳源，需加入高浓度的钠盐

3.（2024山东青岛一模,13）研究表明，髓系细胞触发受体2（TREM2）是一种免疫抑制受体，在

肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。因此,TREM2抗体药物有望提高肿瘤免疫疗法的疗效。

如图为TREM2单克隆抗体的制备流程图，下列说法正确的是（）

免疫小鼠

4一⑤

特定培养专一抗体

基筛选检测⑥

③④

A.步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗体的杂父瘤细胞

B.经步骤②诱导后融合的细胞既能分泌TREM2抗体又可无限增殖

C.步骤③和④的培养孔中均含有TREM2蛋白，依据的原理都是抗原一抗体杂交

D.步骤⑥和植物组织培养均需使用二氧化碳培养箱进行大规模培养

4.（2024T8一联,14）嵌合体是指同一个生物体中同时存在两种或两种以上染色体组成不同

的细胞，且这些细胞相互间处于嵌合状态。构建某种肤色为黑白相间的嵌合体小鼠的过程

如图所示，下列有关叙述正确的是（）

发育成

白鼠的一造

受精卵A代孕&缢W

f母鼠一嵌合屋

发育成

黑鼠的一的幼鼠

受精卵8细胞胚

A.过程①使用的培养液需要适时更换

B.16细胞胚的形成依赖于细胞融合技术

C.囊胚的滋养层细胞发育成幼鼠的各种组织和器官

D.嵌合体幼鼠的每个细胞中都有来自白鼠和黑鼠的基因

5.（2024湖南衡阳八中二模,2）寄生性支原体是肺炎、支气管炎等常见的病原体，也是动物细

胞培养难以根除的“绝症”。在分离培养寄生性支原体时，需要先培养动物细胞后接种;而培

养独立生存的支原体时则不需要。下列表述正确的是（）

A.动物细胞培养时可以使用氨苇青霉素防范支原体的感染

B.培养独立生存的支原体一般不需要添加动物血清

C.稀释涂布平板法不能用于支原体的计数

D.支原体细胞内的遗传物质遇二苯胺试剂不能变蓝

6.（多选）（2024河北石家庄二模,18）我国育种专家用普通小麦与耐盐偃麦草体细胞杂交获

得耐盐新品种山融3号,培育过程如图所示。下列叙述错误的是（）

普通小麦

普通小麦、去除原生质体、PEG融合原

耐盐偃麦草,细胞城耐盐偃麦草/生厚体

原生质体

,lia47u,选择用含06%钠盐愈伤.____杂种

“1犍3''一纫牙'的培养基培养组织细胞

A.原生质体由细胞膜、液泡膜及两者之间的细胞质组成

B.融合原生质体需放在无菌水中培养，以防杂菌污染

C.愈伤组织再分化形成的芽产生的生长素会抑制愈伤组织生根

D.可将获得的试管苗移栽于高盐土壤中进行筛选后，再推广栽培

7.（多选）（2024江西南昌二模,15）现代生物技术在畜牧业上有重要的应用。在某牧场中，偶

然出现了一只异常健壮的公马,为了得到更多这种健壮的马，下列方法中，可行的是（）

A.将该公马的DNA提取出来，注入普通马的受精卵中，最后繁殖出更多新个体

B.收集该公马的精子用人工授精方式产生后代,挑选后代母马继续人工授精，如此不断回

交

C.将该马的体细胞提取出来,通过动物细胞培养快速培育出更多新个体

D.将该公马的体细胞核注射到母马的去核卵母细胞，经胚胎培养、胚胎移植等操作后培育

出

8.（2024湖南衡阳八中一模,21）双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特

异性抗体。如图是科研人员通过杂交瘤细胞技术（免疫的B细胞和骨髓瘤细胞杂交技术）

生产能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性抗体的部分过程。回答下列

问题：

温富/管胞

®一图2晶一幽一幽—

/曰HAT培养基多孔培养板

/③④

骨髓瘤0细胞

单克隆杂

提取双特交鬻胞

异性抗体曷_______________

I:

单克隆杂：

交瘤细胞

⑴过程①处理后（填“需要”或“不需要”）对小鼠进行抗体检测，理由

是O

⑵过程②常用灭活的病毒来诱导融合，其作用机理

是O

⑶过程③得到的杂交瘤细胞的特征是。

⑷过程④一般在多孔细胞培养板上进行:先将细胞悬浮液稀释到7~10个细胞/mL,再在每

个培养孔中滴入01mL细胞稀释液，其目的是。

⑸请简述图中过程⑤的操作目

的：。

专题21细胞工程

五年高考

考点1植物细胞工程

1.（2024黑、吉、辽,6,2分）迷迭香酸具有多种药理活性。进行工厂化生产时,先诱导外植体

形成愈伤组织，再进行细胞悬浮培养获得迷迭香酸，加入诱导剂茉莉酸甲酯可大幅提高产

量。下列叙述错误的是（B）

A.迷迭香顶端幼嫩的茎段适合用作外植体

B.诱导愈伤组织时需加入NAA和脱落酸

C.悬浮培养时需将愈伤组织打散成单个细胞或较小的细胞团

D.茉莉酸甲酯改变了迷迭香次生代谢产物的合成速率

2.（2024湖北,11,2分）植物甲抗旱、抗病性强,植物乙分篥能力强、结实性好。科研人员通

过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错

误的是（B）

______酶解（1.5小时）______

植物甲区==^一甲的原

叶片一片产^一生质体

②」融合的原

:①混合酶液处理:一生质体

植物乙乙的原

叶片生质体

I植物丙日愈伤组织内杂种细胞声■

A.过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异

B.过程②中常采用灭活的仙台病毒或PEG诱导原生质体融合

C.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素

D.可通过分析植物丙的染色体，来鉴定其是否为杂种植株

3.（不定项）（2024山东,20,3分）下列关于植物愈伤组织的说法正确的是（BD）

A.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体

B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织

C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核

D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖

4.（2023河北,13,2分）植物细胞悬浮培养是将单个细胞或细胞团进行液体培养增殖的技术。

下列叙述错误的是（B）

A.植物细胞悬浮培养的培养基须经无菌处理

B.经纤维素酶和果胶酶充分处理后植物细胞团分散为单个完整的悬浮细胞

C.为使悬浮细胞正常生长,培养基须保持适当的温度、pH和渗透压

D.利用悬浮培养技术生产次生代谢物，可减少植物资源的消耗

5.（2023江苏,13,2分）研究者通过体细胞杂交技术，探索利用条斑紫菜和拟线紫菜培育杂种

紫菜。下列相关叙述正确的是（D）

A.从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，用于去除细胞壁

B.原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡

C.检测原生质体活力时可用苯酚品红或甲紫溶液处理,活的原生质体被染色

D.聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞

6.（2023山东,14,2分）利用植物细胞培养技术在离体条件下对单个细胞或细胞团进行培养

使其增殖，可获得植物细胞的某些次生代谢物。下列说法正确的是（A）

A.利用该技术可获得某些无法通过化学合成途径得到的产物

B.植物细胞体积小，故不能通过该技术进行其产物的工厂化生产

C次生代谢物是植物所必需的，但含量少，应选择产量高的细胞进行培养

D.该技术主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量

7.（2022辽宁,14,2分）蓝莓细胞富含花青素等多酚类化合物。在蓝莓组织培养过程中，外植

体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醍类化合物，这一过程称为褐变o褐变会

引起细胞生长停滞甚至死亡，导致蓝莓组织培养失败。下列叙述错误的是（D）

A.花青素通常存在于蓝莓细胞的液泡中

B.适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率以减少褐变

C.在培养基中添加合适的抗氧化剂以减少褐变

D.宜选用蓝莓成熟叶片为材料制备外植体

8.（2023新课标,35,12分）根瘤菌与豆科植物之间是互利共生关系，根瘤菌侵入豆科植物根

内可引起根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能力。为了寻找抗逆性强的根瘤菌,某研究

小组做了如下实验:从盐碱地生长的野生草本豆科植物中分离根瘤菌;选取该植物的茎尖

为材料，通过组织培养获得试管苗（生根试管苗）;在实验室中探究试管苗根瘤中所含根瘤

菌的固氮能力。回答下列问题。

⑴从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物是

根瘤菌。

⑵取豆科植物的茎尖作为外植体,通过植物组织培养可以获得豆科植物的试管苗。外植体

经诱导形成试管苗的流程是:外植体旦愈伤组织旦试管苗。其中①表示的过程是脱分

化.②表示的过程是再分化。由外植体最终获得完整的植株，这一过程说明植物细胞

具有全能性。细胞的全能性是指细胞经分裂和分化后，仍然具有产生完整生物体或分化

成其他各种细胞的潜能

⑶研究小组用上述获得的纯培养物和试管苗为材料,研究接种到试管苗上的根瘤菌是否

具有固氮能力，其做法是将生长在培养液中的试管苗分成甲、乙两组，甲组中滴加根瘤菌菌

液,让试管苗长出根瘤。然后将甲、乙两组的试管苗分别转入不含氮的培养液中培养,

观察两组试管苗的生长状况，若甲组的生长状况好于乙组,则说明根瘤菌具有固氮

能力。

⑷若实验获得一种具有良好固氮能力的根瘤菌，可通过发酵工程获得大量根瘤菌用于生

产根瘤菌肥。根瘤菌肥是一种微生物肥料,在农业生产中使用微生物肥料的作用是』t

土壤肥力，改良土壤结构,促进植物生长（答出2点即可）。

考点2动物细胞工程

9.（2023辽宁,7,2分）大量悬浮培养产流感病毒的单克隆细胞，可用于流感疫苗的生产。下列

叙述错误的是（D）

A.悬浮培养单克隆细胞可有效避免接触抑制

B.用于培养单克隆细胞的培养基通常需加血清

C.当病毒达到一定数量时会影响细胞的增殖

D.培养基pH不会影响单克隆细胞的病毒产量

10.（2022湖北,7,2分）某兴趣小组开展小鼠原代神经元培养的研究，结果发现其培养的原代

神经元生长缓慢，其原因不可能的是（A）

A.实验材料取自小鼠胚胎的脑组织

B.为了防止污染将培养瓶瓶口密封

C.血清经过高温处理后加入培养基

D.所使用的培养基呈弱酸性

11.（2022湖北,15,2分）纳米氧化亚铜是一种纳米材料。为了探究纳米氧化亚铜对贴壁生长

细胞活性的影响，研究者在培养基中添加一定量的纳米氧化亚铜,8小时后观察到细胞萎缩,

体积变小，细胞核变大，细胞膜内侧出现纳米氧化亚铜富集现象，培养瓶中大量贴壁细胞脱

落,出现细胞悬浮。根据该实验现象,能得出的正确结论是（B）

A.纳米氧化亚铜改变了细胞的贴壁生长习性

B.纳米氧化亚铜对该细胞生长有抑制作用

C.纳米氧化亚铜能通过自由扩散进入细胞

D.纳米氧化亚铜不影响细胞的新陈代谢

12.（2022山东,15,2分）如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外

解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是(D)

抗体1抗体2双抗

A.双抗可同时与2种抗原结合

B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞

C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原

D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞

13.(多选)(2022江苏,19,3分)如图表示利用细胞融合技术进行基因定位的过程，在人一鼠杂

种细胞中人的染色体会以随机方式丢失,通过分析基因产物进行基因定位。现检测细胞I、

n、in中人的4种酶活性，只有n具有芳烧羟化酶活性，只有ni具有胸背激酶活性,i、in

都有磷酸甘油酸激酶活性,I、n、in均有乳酸脱氢酶活性。下列相关叙述正确的有(ACD)

A.加入灭活仙台病毒的作用是促进细胞融合

B.细胞I、n、ni分别为人一人、人一鼠、鼠一鼠融合细胞

C.芳煌羟化酶基因位于2号染色体上,乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上

D.胸背激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体上

14.(2021辽宁,13,2分)如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图。有关叙

述正确的是(B)

£一窗

①供体细片射

胞培养融激活并

令/、培养-麒备髓

乙便:构胚及1

牛重组细胞.V

生出后

代丁牛

A.后代丁的遗传性状由甲和丙的遗传物质共同决定

B.过程①需要提供95%空气和5%CO2的混合气体

C.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理

D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植

15.(2021辽宁,3,2分)下列有关病毒在生物学和医学领域应用的叙述，错误的是(C)

A.灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合

B.用特定的病毒免疫小鼠可制备单克隆抗体

C.基因工程中常用噬菌体转化植物细胞

D.经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防

16.（2023重庆,16,10分）妊娠与子宫内膜基质细胞的功能密切相关。某研究小组通过如图

所示的实验流程获得了子宫内膜基质细胞，以期用于妊娠相关疾病的研究。

,肿瘤细胞|

|人皮肤组织声号成纤维细胞4H人iPS细胞|

|子宫内膜基质细卧——|体腔上至|

⑴手术获得的皮肤组织需在低温下运至实验室,低温对细胞中各种蛋白质的作用为3

制酶的活性（降低蛋白质或酶的活性），防止蛋白质变性（维持蛋白质的结构，抑制蛋白质变

性）。

⑵过程①中，诱导形成iPS细胞时，需提高成纤维细胞中4个基因的表达量,可采用转基

因（显微注射、病毒介导、基因工程。但是答农杆菌介导、侵染，基因枪均不对）技术将

这些基因导入该细胞。这4个基因的主要作用为:M基因促进增殖,S基因和C基因控制干

细胞特性,K基因抑制凋亡和衰老。若成纤维细胞形成肿瘤细胞,最有可能的原因是M

基因过量表达。

⑶培养iPS细胞时，应对所处环境定期消毒以降低细胞被污染风险。可用紫外线进行消毒

的是CD（多选）。

A.培养基B.培养瓶

C.细胞培养室D.CO2培养箱

⑷过程②中,iPS细胞经历的生命历程为增殖分化（分裂分化）。PCR技术可用于检测

子宫内膜基质细胞关键基因的mRNA水平,mRNA需经过逆转录才能作为PCR扩增

的模板。

17.（2023湖北,22,16分）某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋

白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒,其主要技术路线如图所示。

I基因A|—­孽塞圈T蛋白A|—T免疫小鼠卜

离体培养的小I

鼠骨盛型胞I吧鲤『~

I单克隆抗体筛选卜——I杂交言细胞的筛选I

回答下列问题:

⑴与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）」S需£（填“需要”或“不需

要”）通过原代培养扩大细胞数量;添加脂溶性物质PEG可促进细胞融合，该过程中PEG对

细胞膜的作用是增加细胞膜的流动性。

⑵在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基（如HAT培养基），该培养基对未

融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞生长具有抑制作用。

⑶单克隆抗体筛选中.将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交.其目的是检测抗体特异

（4）构建重组质粒需要使用DNA连接酶。下列属于DNA连接酶底物的是④

HOOH

51।।|*||।।।।।।।।3,

，3-1IIIIII.1IIII«

3UJ_U」J1fLJJ_L1_5,J11

HOOHPP

①②

POHHOP

5f।।I|||||||||3r5ZTT|IIIIIIIII

3山11」1”"115,>lIIIIII“Ills，

J311J

HOPPOH

③④

18.（2022辽宁,24,10分）某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段,

制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。

I.N蛋白胞外段抗原制备，流程如图1

|N蛋白胞病毒

体

脂质MN蛋白胞|

包装|

收集感染海一

威,外段表达、

导入

细胞病毒5SW|纯化|

毒质粒

图1

⑴构建重组慢病毒质粒时.选用氨节青霉素抗性基因作为标记基因.目的是便于重组

DNA分子的筛选。用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞.质粒被包

在脂质体双分子层中（填“双分子层中”或“两层磷脂分子之间

（2）质粒在包装细胞内组装出由蛋白质和核酸组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞

进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。

II.N蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图2

图2

（3）用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后.取小鼠脾组织用胰蛋白酶或胶原蛋白

酶处理.制成细胞悬液.置于含有混合气体的CO2培养箱中培养.离心收集小鼠的B淋

巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合。

（4）用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行

克隆化培养。用抗原一抗体杂交技术检测每孔中的抗体.筛选既能产生N蛋白胞外

段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株.经体外扩大培养，收集细胞培养液，提取

单克隆抗体。

⑸利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成抗体一药物偶联物（ADC），实现特异性治

疗。

19.（2022福建,21节选,8分）美西螺具有很强的再生能力。研究表明,美西螺的巨噬细胞在

断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表

面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下。回答下列问题：

（二）抗CD14单克隆抗体的制备

流程如图所示：

一n

h

BI

细F特定培养专一抗⑤⑥

基筛选体检测

③④

⑴步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射CD14蛋白/CD14抗原和分泌抗CD14抗体的杂

交瘤细胞。

⑵步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是能在体外无限增殖。

⑶吸取③中的上清液到⑷的培养孔中.根据抗原一抗体杂交原理.需加入CD14蛋白

进行专一抗体检测,检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体,原因是上与娶

成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，有的不能分泌抗CD14抗体。

⑷步骤⑥从小鼠腹水中提取到大量的抗CD14抗体用于检测巨噬细胞。

考点3胚胎工程

20.（2024湖北,5,2分）波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等

优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是（D）

A.选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理

B.胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测

C.普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体

D.生产中对提供精子的波尔公山羊无需筛选

21.（2024贵州,13,3分）生物学实验中合理选择材料和研究方法是顺利完成实验的前提条件。

下列叙述错误的是（B）

A.稀释涂布平板法既可分离菌株又可用于计数

B.进行胚胎分割时通常是在原肠胚期进行分割

C.获取马铃薯脱毒苗常选取茎尖进行组织培养

D.使用不同的限制酶也能产生相同的黏性末端

22.(2023广东,3,2分)科学家采用体外受精技术获得紫羚羊胚胎，并将其移植到长角羚羊体

内，使后者成功妊娠并产仔,该工作有助于恢复濒危紫羚羊的种群数量。此过程不涉及的操

作是(C)

A.超数排卵B.精子获能处理

C.细胞核移植D.胚胎培养

23.(2023浙江1月选考,12,2分)在家畜优良品种培育过程中常涉及胚胎工程的相关技术。

下列叙述错误的是(C)

A.经获能处理的精子才能用于体外受精

B.受精卵经体外培养可获得早期胚胎

C.胚胎分割技术提高了移植胚胎的成活率

D.胚胎移植前需对受体进行选择和处理

24.(2022北京,11,2分)将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞注射到白色小鼠囊胚腔中，接

受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠(Me)。据此分析，下列叙述第误的是(A)

A.获得Me的生物技术属于核移植

B.Mc表皮中有两种基因型的细胞

C.注射入的细胞会分化成Me的多种组织

D.将接受注射的囊胚均分为二，可发育成两只幼鼠

三年模拟

综合基础练

1.（2024河北唐山一模,13）紫杉醇具有良好抗癌作用。科研人员用植物外植体获得愈伤组

织，然后在液体培养基中进行细胞悬浮培养，以获得更多紫杉醇。下列叙述错误的是（D）

愈

外

伤液体培养工厂化生产、

细胞悬浮_

r组

基中悬浮一培养与继^弋一提取、检测

织振荡培养紫杉醇

A.诱导愈伤组织需要考虑外植体的取材部位、培养基组成和激素种类等

B.由愈伤组织得到悬浮细胞可以使用纤维素酶和果胶酶进行处理

C.使用液体培养基并振荡有利于细胞获取氧气和营养物质，促进细胞生长

D.利用植物细胞培养技术获得初生代谢产物紫杉醇能避免大量破坏野生红豆杉种群

2.（2024九省联考贵州卷,15）植物体细胞杂交技术可克服种间生殖隔离。应用该技术获得

“番茄一马铃薯”杂种植株，拓展了植物的种质资源。下列叙述正确的是（D）

A.植物细胞壁的水解需要纤维素酶和几丁质酶

B.愈伤组织是由已分化的细胞所构成的细胞团

C