传统发酵技术的应用-高二生物资源（人教版2019选择性必修3）

从传统发酵技术到发酵工程科学家发现了酶在酵母菌发酵中的作用。1897年用微生物生产谷氨酸获得成功，酶制剂、多糖、维生素发酵工业兴起。1957年科学家开始运用数学、动力学、化学工程原理以及计算机技术对发酵过程进行综合研究。20世纪80年代以后法国微生物学家巴斯德通过实验证明酒精发酵是由活的酵母菌引起的。1857年利用发酵工程大规模生产青霉素，抗生素发酵工业兴起。20世纪40年代基因工程、细胞工程等发展，人胰岛素和干扰素大量生产。20世纪70年代以后190019401960185019801970约9000年前我们祖先就会利用微生物将谷物、水果发酵为含酒精的饮料。第1章第1节人教版选择性必修3凉州词二首·其一唐·王翰葡萄美酒夜光杯，欲饮琵琶马上催。醉卧沙场君莫笑，古来征战几人回？诗中提及的葡萄酒是人类利用微生物发酵制作而来的。诗中提及的葡萄酒是人类利用微生物发酵制作而来的。通过微生物的发酵作用还可以制作葡萄醋。葡萄酒和葡萄醋都是以葡萄为原料发酵而来的饮品，为什么一个是醇厚浓郁、耐人寻味的酒，一个却是酸味柔和、口感绵长的醋呢？它们的制作方法有什么不同？你想不想自己动手制作葡萄酒和葡萄醋呢？目录CONTENTS尝试制作传统发酵食品2/发酵与传统发酵技术1/01发酵与传统发酵技术一发酵与传统发酵技术约9000年前，我们的祖先就会利用微生物将谷物、水果等发酵成含酒精的饮料。夏禹时期，已有了关于少康（即杜康）造秫酒的传说。人类最初可能是发现储存的水果会自然发酵变成酒，因而逐渐摸索出酿酒技术的。酿酒技术给古代人民的生活增添了丰富的色彩。我国具有悠久的酿酒文化和历史，许多古老的酿酒工艺一直保留并延续至今。一发酵与传统发酵技术1.古代酿酒的方法：利用附着在谷物、水果等表面的微生物自然发酵。1857年，法国微生物学家巴斯德通过实验证明，酒精发酵是由活的酵母菌引起的。此后，人们才开始了解发酵的本质。还记得巴斯德在哪里讲过吗？?一发酵与传统发酵技术1.古代酿酒的方法：利用附着在谷物、水果等表面的微生物自然发酵。2.发酵：指人们利用微生物，在适宜条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。①概念：②原理：不同的微生物具有产生不同代谢产物的能力，因此利用它们就可以生产出人们所需要的多种产物。C6H12O6等C2H5OH等（同一种微生物处于不同环境条件下，代谢途径也会出现差异。）一发酵与传统发酵技术2.发酵：指人们利用微生物，在适宜条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。①概念：②原理：不同的微生物具有产生不同代谢产物的能力，因此利用它们就可以生产出人们所需要的多种产物。（同一种微生物处于不同环境条件下，代谢途径也会出现差异。）③类型：醋酸发酵酒精发酵需氧发酵厌氧发酵醋酸发酵为氧化发酵之一。是指乙醇在醋酸菌的作用下氧化成醋酸的过程。此外还有多种微生物通过厌氧活动亦可将各种化合物形成醋酸，但对此一般都不称其为醋酸发酵。谷氨酸发酵乳酸发酵

谷氨酸发酵生产是谷氨酸产生菌在其生命活动过程中分解、代谢营养物质、合成所需产物、谷氨酸的生化过程。谷氨酸产生菌既是谷氨酸发酵反应过程的主体，也是反应过程的生物催化剂。工业上应用的谷氨酸产生菌有谷氨酸棒状杆菌、乳糖发酵短杆菌、散枝短杆菌、黄色短杆菌、噬氨短杆菌等。乳酸发酵,指糖经无氧酵解而生成乳酸的发酵过程，乙醇发酵同为生物体内二种主要的发酵形式。一发酵与传统发酵技术2.发酵：指人们利用微生物，在适宜条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。①概念：②原理：不同的微生物具有产生不同代谢产物的能力，因此利用它们就可以生产出人们所需要的多种产物。（同一种微生物处于不同环境条件下，代谢途径也会出现差异。）③类型：醋酸发酵酒精发酵需氧发酵厌氧发酵谷氨酸发酵乳酸发酵

④产品：一发酵与传统发酵技术你知道腐乳是怎么制作的吗？一发酵与传统发酵技术腐乳制作是一种传统发酵技术一发酵与传统发酵技术3.传统发酵技术：直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保留下来的面团、卤汁等发酵物中微生物进行发酵，制作食品的技术。①概念：②实例——腐乳的制作腐乳制作原理：蛋白质小分子肽+氨基酸蛋白酶参与的微生物：酵母、曲霉、毛霉等，起主要作用的是毛霉。一发酵与传统发酵技术制作过程：直接利用原材料中的天然存在的微生物。目的：让毛霉等产生蛋白酶和脂肪酶目的：析出豆腐中的水分、抑制不需要的微生物生长酒：抑制微生物生长，并使腐乳具有独特香味；香辛料：调味，防腐杀菌一发酵与传统发酵技术3.传统发酵技术：①概念：②实例——腐乳的制作③其他实例：利用传统发酵技术制作的食品还有酱、酱油、醋、泡菜和豆豉等，它们是我国传统饮食文化的重要组成部分。④类型：传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，通常是家庭式或作坊式的。02尝试制作传统发酵食品二尝试制作传统发酵食品传统发酵食品常利用的微生物乳酸菌酵母菌醋酸菌二尝试制作传统发酵食品乳酸菌二尝试制作传统发酵食品1.乳酸发酵（1）应用的微生物：（2）原理：C6H12O62C3H6O3（乳酸）+能量酶①代谢类型：②作用：④种类：③分布广泛：⑤应用：乳酸菌厌氧微生物在无氧情况下能将葡萄糖分解成乳酸空气、土壤、植物体表、人或动物肠道常见为乳酸链球菌、乳酸杆菌乳制品的发酵、泡菜的腌制二尝试制作传统发酵食品酵母菌二尝试制作传统发酵食品2.酒精发酵（1）应用的微生物：①代谢类型：②作用：③分布：④特点：⑤应用：（2）原理：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量酶酵母菌兼性厌氧型在无氧情况下，进行酒精发酵含糖量较高的蔬菜、水果表面一类单细胞真菌酿酒、制作馒头和面包二尝试制作传统发酵食品醋酸菌3.醋酸发酵（1）应用的微生物：①代谢类型：②作用：③应用：

C6H12O6+2O2→2CH3COOH+2H2O+2CO2+能量C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O+能量（2）原理：酶酶醋酸菌好氧型在氧气、糖都充足时，能将糖分解成醋酸；在缺糖时，能将乙醇转化成乙醛，在将乙醛变成醋酸酿醋二尝试制作传统发酵食品二尝试制作传统发酵食品乳酸菌酵母菌醋酸菌果酒泡菜果醋二尝试制作传统发酵食品乳酸菌酵母菌醋酸菌泡菜果酒果醋C6H12O62C3H6O3（乳酸）+能量酶C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量酶

C6H12O6+2O2→2CH3COOH+2H2O+2CO2+能量C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O+能量酶酶二尝试制作传统发酵食品4.制作泡菜（1）泡菜制作原理植物体表面的天然的乳酸菌来进行发酵，在无氧的条件下，乳酸菌将糖分解为乳酸。发酵期间，乳酸不断积累，当它的质量分数为0.4%—0.8%时，泡菜的口味和品质最佳。（2）材料用具食盐、清水、新鲜蔬菜、蒜瓣、生姜及其它香辛料、泡菜坛或其它密封性良好的罐子等。二尝试制作传统发酵食品4.制作泡菜（3）方法步骤1.用清水和食盐配置质量分数为5%-20%的盐水，并将盐水煮沸，冷却待用。二尝试制作传统发酵食品4.制作泡菜（3）方法步骤1.用清水和食盐配置质量分数为5%-20%的盐水，并将盐水煮沸，冷却待用。盐水煮沸有两大作用：一是除去水中的氧气，二是杀灭盐水中的其他细菌。盐水冷却的目的是保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。盐的用量不能过高也不能过低。过高乳酸发酵受抑制，导致泡菜的风味差；过低，杂菌易繁殖，导致泡菜变质。二尝试制作传统发酵食品2.将新鲜蔬菜（如萝卜、黄瓜和豇豆）洗净，切成块状或条状，混合均匀，晾干后装入泡菜坛内；装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满。4.制作泡菜（3）方法步骤二尝试制作传统发酵食品2.将新鲜蔬菜（如萝卜、黄瓜和豇豆）洗净，切成块状或条状，混合均匀，晾干后装入泡菜坛内；装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满。4.制作泡菜（3）方法步骤泡菜发酵初期，大肠杆菌、酵母菌等较为活跃，产生较多的CO2，防止发酵液溢出坛外；防止因太满使盐水未完全淹没菜料而导致菜料变质腐烂；留有一定空间，方便拿取泡菜。二尝试制作传统发酵食品3.将冷却好的盐水缓缓倒入坛中，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。4.制作泡菜（3）方法步骤创造无氧环境等二尝试制作传统发酵食品3.将冷却好的盐水缓缓倒入坛中，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。4.制作泡菜（3）方法步骤创造无氧环境等4.向坛盖边沿的水槽中注满水，并在发酵过程中注意经常向水槽中补充水，根据室内温度控制发酵时间。创造无氧环境42配制盐水蔬菜处理装坛加盐水封坛发酵过高：乳酸发酵受抑制，泡菜风味差；过低：杂菌易繁殖，导致泡菜变质。杀菌、除氧泡菜发酵初期，大肠杆菌、酵母菌等较为活跃，产生较多的CO2，防止发酵液溢出坛外；防止因太满使盐水未完全淹没菜料而导致菜料变质腐烂；留有一定空间，方便拿取泡菜。将新鲜蔬菜洗净，切成块状或条状，混合均匀，晾干后装入泡菜坛内；装至半坛时，加入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满；创造无氧环境将冷却好的盐水缓缓倒入坛中，使盐水没过菜料，盖好坛盖；向坛盖边缘的水槽中注满水，在发酵过程中注意向水槽中补充水；根据室内温度控制发酵时间；不影响乳酸菌的生命活动用清水和食盐配制质量百分比为5%-20%的盐水，并将盐水煮沸，冷却待用；（3）制作泡菜方法步骤：泡菜制作过程中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐含量的变化情况分析发酵时期乳酸菌乳酸亚硝酸盐发酵初期少（有氧气，乳酸菌的活动受到抑制）少增加（硝酸盐还原菌的作用）发酵中期最多（乳酸抑制其他菌活动）积累增多，pH下降下降（硝酸盐还原菌受抑制，部分亚硝酸盐被分解）发酵后期减少（乳酸积累，pH下降，抑制其活动）继续增多，pH继续下降下降至相对稳定（硝酸盐还原菌被完全抑制）曲线模型亚硝酸盐是硝酸盐还原菌促进硝酸盐还原形成的（4）进一步探究：

某同学在制作泡菜前，査阅资料得知，可以向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”；在用质量百分比为5%的食盐水制作泡菜时，他在不同时间测定了泡菜中亚硝酸盐的含量，结果见右栏曲线图。(1)

据图分析，从亚硝酸盐的含量来看，你认为该泡菜在什么时间食用比较合适？为什么？发酵10天后，亚硝酸盐含量降到较低水平。(2)他第一次制作出的泡菜“咸而不酸”，造成这个结果最可能的原因是什么？可能是食盐浓度过高、发酵温度过低等原因导致泡菜未能正常发酵。(3)

加入“陈泡菜水”的目的是什么？“陈泡菜水”中含有纯度较高的乳酸菌，加入“陈泡菜水”相当于接种乳酸菌。二尝试制作传统发酵食品（4）进一步探究：如何判断你腌制的泡菜是否成功？色泽如何？口味如何？泡菜质量可以根据泡菜的色泽和风味进行初步的评定；一般来说，腌制成功的泡菜汤清亮，无梅花浮膜，菜质脆嫩度适口，酸甜咸味适宜，具有一定的香气，咀嚼后无渣等。二尝试制作传统发酵食品失败成功（4）进一步探究：如何判断你腌制的泡菜是否成功？色泽如何？口味如何？泡菜质量可以根据泡菜的色泽和风味进行初步的评定；根据亚硝酸盐的含量来评定；根据不同时期泡菜坛中乳酸菌的数量来评定。可以通过在显微镜下观察乳酸菌的形态；二尝试制作传统发酵食品5.制作果酒和果醋二尝试制作传统发酵食品4802(1)所需菌种：酵母菌，属于真核生物，代谢类型为_____________。最适生长温度约为___________。(2)菌种的生活特点①在有氧条件下，进行有氧呼吸，大量繁殖。反应式：___________________________________________。②在无氧条件下，进行___________。反应式：___________________________________________。异养兼性厌氧型C6H12O6＋6O2＋6H2O→6CO2＋12H2O＋能量酒精发酵C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2＋能量28℃酶5.制作果酒和果醋——果酒二尝试制作传统发酵食品酶二尝试制作传统发酵食品5.制作果酒和果醋——果醋(1)所需菌种：醋酸菌，属于原核生物，其代谢类型为___________，最适生长温度为______________。(2)菌种的生活特点①当氧气、________都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成乙酸。反应式：___________________________________________________。②当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为________，再将乙醛变为乙酸。反应式：___________________________________________。糖源乙醛异养需氧型30℃～35℃C6H12O6＋2O2→2CH3COOH6＋2H2O＋2CO2＋能量酶C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O＋能量酶二尝试制作传统发酵食品①制作原理②材料用具葡萄的果皮表面附着有大量的不同种类的野生酵母菌。在这些酵母菌的作用下，水果可以发酵成果酒。在有氧的条件下，果酒经醋酸菌的作用还可以进一步发酵成果醋。新鲜的葡萄、洗洁精、70%的酒精、发酵瓶、纱布和榨汁机等。5.制作果酒和果醋将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，晾干备用;用榨汁机榨取葡萄汁，将葡萄汁装入发酵瓶（注意：要留有大约1/3的空间），盖好瓶盖;将温度控制在18-30℃进行发酵，在发酵过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一点（注意：不是打开瓶盖），此后再拧紧瓶盖。发酵时间为10-12d。可通过从发酵瓶口取样来对发酵的情况进行检测。取新鲜葡萄，用清水冲洗1-2次，再去除枝梗和腐烂的籽粒，沥干;除灰去污避免葡萄破损，减少杂菌污染①有氧条件，利于酵母菌快速繁殖；耗尽O2后，再进行酒精发酵；②防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出。无需多次。防止菌种减少，影响发酵排出CO2，防止爆裂防止杂菌污染器具消毒冲洗葡萄榨汁装瓶果酒发酵③果酒制作步骤：将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，晾干备用;用榨汁机榨取葡萄汁，将葡萄汁装入发酵瓶（注意：要留有大约1/3的空间），盖好瓶盖;将温度控制在18-30℃进行发酵，在发酵过程中，每隔12h左右将瓶盖拧松一点（注意：不是打开瓶盖），此后再拧紧瓶盖。发酵时间为10-12d。可通过从发酵瓶口取样来对发酵的情况进行检测。取新鲜葡萄，用清水冲洗1-2次，再去除枝梗和腐烂的籽粒，沥干;器具消毒冲洗葡萄榨汁装瓶果酒发酵果醋发酵当葡萄酒制作完成后，打开瓶盖，盖上一层纱布，进行葡萄醋的发酵。发酵温度为30-35℃，时间为7-8d。空气中的醋酸菌会进入果酒发酵液中大量繁殖③果醋制作步骤：二尝试制作传统发酵食品④结果分析与评价5.制作果酒和果醋如何检测果酒和果醋的制作是否成功？果酒：a.闻

b.品尝

c.用酸性条件下的重铬酸钾溶液检测果醋：a.闻

b.品尝

c.使用pH试纸检测检测和比较发酵前后的pH值

d.观察醋酸菌膜是否形成。二尝试制作传统发酵食品④结果分析与评价5.制作果酒和果醋1.在制作果酒和果醋的过程中，发酵液分别有哪些变化？其中最明显的变化发生在发酵后多少天？引起变化的原因是什么？在葡萄酒的制作过程中，发酵液中会产生气泡，这是因为酵母菌发酵产生CO2；如果是用紫色葡萄制作葡萄酒，随着发酵时间的延长，由果皮进入发酵液的花青素会越来越多，因而发酵液的颜色会逐渐加深变成深红色。果醋发酵过程中一般不会出现气泡，发酵完成时，在发酵液的液面上会出现一层菌膜，这是醋酸菌膜。二尝试制作传统发酵食品④结果分析与评价5.制作果酒和果醋2.在制作果酒的过程中，除了酵母菌,是否还有其他微生物生长？它们会对果酒发酵产生影响吗？如果有，如何避免这种影响？果酒中除了酵母菌,还有乳酸菌、醋酸菌等微生物。乳酸菌可能分解果酒中的糖、甘油、酒石酸等，从而使果酒变质。可以通过调节发酵的温度、果酒的pH等来控制乳酸菌的含量。果汁中的糖也是醋酸菌重要的碳源和能源。在有氧的情况下，醋酸菌能把糖分解成醋酸；在缺少糖源的情况下，乙醇便是醋酸菌的碳源和能源，它将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。由于醋酸菌在有氧的条件下才能进行旺盛的代谢活动，因此在制作果酒的过程中尽量减少O2含量，可以抑制醋酸菌的生长繁殖。此外，通过调节发酵的温度、果酒的pH等同样可以控制醋酸菌的含量。二尝试制作传统发酵食品④结果分析与评价5.制作果酒和果醋3.在制作果醋的过程中，酵母菌是否还会继续发酵？醋酸菌从何而来？采用什么措施可以加快果醋的制作？随着醋酸发酵的进行，发酵液的pH、发酵温度等均不利于酵母菌的生长繁殖，因此酵母菌活性很低。在我们的实验条件下，当打开瓶盖后，空气中的醋酸菌会进入发酵液中大量繁殖，其他的菌因不适应环境条件而不能繁殖。在工业上,后期醋的发酵需要人工接种醋酸菌。我们制作果醋时，可以先买一瓶醋，将其打开暴露于空气中,一段时间后在醋的表面会有一层薄膜(实际上是醋酸菌)，用这层薄膜进行接种可以明显缩短制作果醋的时间。二尝试制作传统发酵食品④结果分析与评价5.制作果酒和果醋4.你制作的果酒和果醋的口味如何？如果你对结果不满意，应该如何改进？制作成功的葡萄酒爽口，柔和，有浓郁的果香味；制作成功的果醋有特有的果香，酸味柔和，稍有甜味，不涩。如果对制作结果不满意，应从制作过程全面考虑改进措施，如严格控制发酵条件，发酵所用装置要进行清洗、晾干、消毒等。二尝试制作传统发酵食品项目泡菜果酒果醋菌种生物学分类代谢方式最适温度范围生产生活应用发酵原理乳酸菌酵母菌醋酸菌原核生物原核生物真核生物异养厌