医学微生物学 第7章 呼吸道感染细菌 学习资料VIP

第7章

呼吸道感染细菌呼吸道感染细菌以呼吸道为侵入途径、引起呼吸道及其以外组织器官病变的一类细菌。包括：结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、嗜肺军团菌、流感嗜血杆菌、百日咳鲍特菌等。教学大纲掌握内容结核分枝杆菌主要生物学性状；致病物质及致病机制；结核菌素试验原理及应用；特异性防治原则熟悉内容白喉棒状杆菌的形态染色特性、致病性及微生物学检测法了解内容非结核分枝杆菌的分组及致病性第一节结核分枝杆菌

M.tuberculosis

俗称结核杆菌（tuberclebacillus）结核病的病原菌，肺结核常见结核病是危害人类健康的慢性传染病流行病学

本菌可侵犯全身各组织器官，肺部感染最多见结核的发病率和死亡率曾一度得到控制

艾滋病的流行及耐药菌株等原因，结核病卷土重来我国疫情：活动性肺结核病人500万人，每年因结核病死亡约13万人，位各类传染病第二位结核杆菌的发现

德国的细菌家罗伯特.科赫（RobertKoch）1882年发现世界防治结核病日3月24日世界上第一次发现了炭疽杆菌；

世界上第一次分离出伤寒杆菌；

世界上第一次发明了蒸汽杀菌法；

世界上第一次分离出结核病细菌；

世界上第一次发现了霍乱弧菌；1882年3月24日晚，Koch在科学界发表演讲，称首次发现结核病因一、生物学性状1、形态与染色形态：细长略弯曲的杆菌分枝状生长无芽孢、鞭毛、荚膜可出现L型变异----抗酸阴性而G+颗粒染色：胞壁含大量脂类

抗酸染色，染成红色，背景呈蓝色分枝杆菌抗酸染色：结核杆菌不易着色，但加温或延长染色时间后着色，能抵抗盐酸酒精的脱色，又称抗酸杆菌（acid-fastbacilli)。

过程：

石碳酸复红----3%盐酸酒精----美兰

加热5min1min1minacid-faststainofmycobacteria

抗酸染色结核分枝杆菌（红色）

结核杆菌电镜图2、培养特性专性需氧培养:营养要求高，罗氏培养基（馋）温度：37℃，pH：6.5～7.2生长：慢，繁殖一代需14～18h，

3～4周后，可见粟米大菌落（懒）菌落：乳白色或黄色，干而粗糙，不透明，呈菜花状（怪）液体培养基：表面生长（粗糙菌膜）结核分枝杆菌菌落菌膜3、抵抗力三抗抗干燥（尘埃8-10d、干燥痰6-8月）

抗酸碱（处理标本，4%NaOH/6%H2SO4）抗碱性染料（培养基内加入，抑制杂菌）三敏感紫外线敏感

75％酒精敏感（细胞壁中含有脂质）湿热敏感（煮沸）4、变异性可发生变异：如：形态变异----L型变异，致病耐药性变异（异烟肼）----染色体突变目前多重耐药（MDR）流行——全球问题

毒力变异—BCG卡介苗（BCG）：1908年，CalmetteandGuerin将牛型结核杆菌经13年传230代，获得的减毒株，用于预防接种。二、致病性致病物质:

不产生内毒素、外毒素无菌毛及侵袭酶其致病性下列因素有关：菌体的脂质成分代谢产物的毒性细菌在细胞内生长繁殖所致炎症免疫病理损伤（IV超敏反应）有关致病物质：菌体成分脂质1.索状因子：破坏线粒体，引起慢性肉芽肿2.磷脂：刺激单核细胞增生，抑制蛋白酶的分解

（结核结节）（干酪样坏死）3.硫酸脑苷脂：抑制吞噬体与溶酶体结合----胞内寄生4.蜡质D：引起迟发型过敏反应蛋白质结核菌素，引起迟发型过敏反应，致组织坏死，全身中毒多糖趋化炎性细胞2.致病机制低毒力TB：Mφ吞噬、杀灭强毒力TB：

Mφ吞噬、TB在Mφ内增殖炎症C浸润、C坏死

早期炎症，TB易播散

局部：单个核C浸润（T、Mφ）

肉芽肿、结核结节干酪样坏死172~4W（CMI、Ⅳ型）结核结节是在细胞免疫的基础上，中心为干酪样坏死，周围为放射状排列的上皮样细胞，并可见郎格汉斯巨细胞，再向外为较多淋巴细胞浸润，结节周围还可见纤维结缔组织包绕3.所致疾病：传染源：开放性结核病人传播途径：呼吸道、消化道、损伤的皮肤黏膜所致疾病

引起多种脏器组织的结核病，肺结核为最多见肺感染

原发感染：外源性感染

儿童多见，无免疫力，炎症反应较轻，易扩散

原发后感染：外或内源性感染

成人多见，有免疫力，局部反应剧烈，易局限肺外感染

原发感染

结核杆菌↓吸入

肺泡,巨噬细胞吞噬↓脂质抗吞噬

繁殖后破坏巨噬细胞↓释放

炎症原发灶

经淋巴管扩散↓肺门淋巴结肿大

原发综合征↓钙化、纤维化但：病灶内仍有细菌潜伏

1.内源性感染的来源

2.维持机体免疫力

极少部分-----全身粟粒性结核或结脑原发后感染：多见于成人内源性——

原发病灶内外源性——

重新感染（少）病灶多局限、不扩散形成结核结节、干酪样坏死、纤维化等转归：钙化、纤维化-----痊愈液化----形成空洞

----开放性结核（传染性强）肺外结核----继发感染：免疫力低下者随血液循环而播散，肾、骨/关节、肠、生殖器、脑（结核性脑膜炎）、腹腔（结核性

腹膜炎）等少数播散至全身BoysufferingfromPulmonarytuberculosis粟粒性肺结核骨结核皮肤结核结核杆菌感染分布图带菌免疫/传染免疫(infectionimmunity)指结核杆菌（或BCG）在体内存在时，机体对细菌再次入侵有免疫力，而当细菌从体内消失后机体的免疫力也随之消失。结核菌感染依赖细胞免疫(致敏Th和Mφ)三、免疫性

细胞免疫和迟发型超敏反应（DTH）并存

其强弱决定了感染的结局和预后

超敏反应结核菌素与蜡质D共同刺激T细胞，形成DTH致敏T细胞再次遇到结核杆菌时，释放淋巴因子，引起强烈的DTH，发生干酷样坏死、液化形成空洞。细胞免疫：rRNA免疫性和超敏反应四、微生物学检查1、标本：根据感染部位（痰、脑脊液、尿、粪便）

2、涂片染色镜检：抗酸染色3、免疫学诊断：

结核菌素皮肤试验、IFN-γ释放试验等4、分离培养：罗氏培养基上接种培养3～4周

5、细菌基因诊断：PCR6.动物试验结核菌素皮肤试验(tuberculinskintest,TST)定义：应用结核菌素进行皮试，以检测受试者对结核杆菌是否有迟发型超敏反应和细胞免疫。原理：皮肤迟发型超敏反应和细胞免疫共存意义：检测机体对结核杆菌的免疫性结核菌素：旧结核菌素(OT)、

纯蛋白衍生物(PPD)方法：前臂皮内注射OT或PPD，48-72h观察。注意局部有无硬结，不能单独以红晕为标准。TBskintest.前臂皮内注射PPD.结核菌素试验结果阳性：5～15mm-----出现超敏反应，机体曾感染过结核，或接种BCG成功，有特异性免疫力强阳性：>15mm-----可能有活动性结核，应进一步检查阴性：<5mm-----无结核杆菌感染或未接种过BCG。

但应考虑：原发感染的早期（T细胞尚未被致敏）；

严重结核病患者；艾滋病等免疫功能低下者；使用免疫抑制剂等。48-72小时后，结核菌素试验红肿硬结直径>10mm结核菌素试验

结果？

应用：

①诊断婴幼儿的结核病；

②测定接种卡介苗后免疫效果；

③结核分枝杆菌感染的流行病学调查；

④测定的细胞免疫功能。结核菌素试验五、防治原则1、预防:接种卡介苗接种对象：新生儿及结核菌素试验阴性儿童接种后可以维持约6-10年2、治疗：合理营养、注意休息；早发现，早治疗

早期、联合、规则、适量、全程药物：链霉素、利福平、异烟肼（联合用药，减少耐药菌株）第二节白喉棒状杆菌(diphtheriabacillus)白喉棒状杆菌人类白喉的病原体白喉是一种急性传染病，其特征是咽喉形成灰白色假膜假膜一、生物学性状1、形态与染色形态：细长微弯，末端膨大呈棒状排列不规则，呈V/L染色革兰染色阳性Albert染色：菌体绿色

异染颗粒蓝黑色－有鉴别意义棒状杆菌白喉杆菌Albert染色（X1000)革兰染色白喉杆菌革兰染色（X1000)

异染颗粒

成分：核糖核酸+多磷酸盐

作用：储存养料、鉴定

2、培养特性需氧或兼性厌氧，营养要求较高培养基：亚碲酸钾培养基血平板/吕氏血清黑色菌落白色光滑突起菌落3、抵抗力抵抗力较强抗干燥和寒冷湿热、消毒剂敏感药物青霉素、红霉素敏感

二、致病性1、致病物质：(1)白喉毒素(最主要)：

只有携带β棒状杆菌噬菌体的溶原性白喉杆菌才能产生外毒素(2)索状因子：破坏线粒体(3)K抗原：粘附，抗吞噬白喉毒素:成份：一种毒性强、具有高度抗原性的蛋白质组成：由A、B两个亚单位组成。A---毒性区，通过促进ADPR（腺嘌呤二磷酸核糖）与EF-2结合，使EF-2失活，抑制易感细胞蛋白质的合成，细胞功能受损B---无毒性，吸附细胞膜受体（HB-EGF)，协助A链入胞。作用靶c：心肌和神经细胞AB细胞膜2.所致疾病

白喉--急性呼吸道传染病临床表现细菌-----上呼吸道粘膜，生长繁殖，产生毒素细菌与毒素共同作用引起局部症状：炎症，坏死，纤维蛋白渗出假膜——窒息毒素入血引起全身中毒症状（毒血症）外周N---N炎：膈肌麻痹--呼吸困难声带麻痹--声音嘶哑软颌麻痹--吞咽困难心肌---心肌炎(死亡主要原因)咽部白喉咽部白色伪膜三、免疫性感染后机体可获得牢固的免疫力体液免疫：白喉抗毒素阻止B亚单位与易感细胞结合机体还可通过其它方式获得免疫力：六个月以下婴儿------母亲成人--------------隐性感染、疫苗四、微生物学检查标本：棉签采取假膜边缘分泌物直接涂片:

菌体颜色、菌体排列、异染颗粒结合临床症状可做初步诊断分离培养:

吕氏血培养基-------白色菌落亚碲酸钾血培养基-------黑色菌落毒力鉴定体内法：动物实验体外法：双向扩散（Elek平板法）五、防治原则1、预防：人工自动免疫类毒素（白百破三联疫苗）人工被动免疫对易感儿童注射抗毒素紧急预防，同时用类毒素延长免疫力2、治疗抗毒素：要早期、足量注射白喉抗毒素（注意皮试）。抗生素：青霉素或红霉素，预防继发感染第三节流感嗜血杆菌（H.influenzae）生物学特性

革兰阴性小杆菌，多形性无鞭毛，有毒株有荚膜生长需要X和V因子（新鲜血液）

巧克力色平板上生长较佳菌落：灰白色，圆形，光滑与金葡菌共培养：卫星现象抵抗力：弱根据荚膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最强血红素辅酶Ⅰ或Ⅱ卫星现象

（satellitephenomenon）

当与金黄色葡萄球菌在血平板上共同孵育时，由于后者能合成较多的V因子，在金黄色葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌的菌落较大，离金黄色葡萄球菌菌落越远的越小。致病物质荚膜菌毛内毒素：脂寡糖（LOS）IgA蛋白酶所致疾病继发性（内源性）感染常继发于流行性感冒麻疹百日咳结核病等临床类型慢性支气管炎中耳炎鼻窦炎等原发性（外源性）感染急性化脓性感染：脑膜炎，鼻咽炎等免疫性以体液免疫为主诊断与防治痰液、脑脊液、鼻咽分泌物、血液和脓液等。脓汁、脑脊液、标本直接涂片结合临床症状初步诊断分离培养镜检诊断可选用广谱抗生素。治疗预防荚膜多糖菌苗嗜肺军团菌（L.pneumophila)１９７６年美国费城的一次退伍军人大会期间，爆发原因不明的肺炎，当时称为军团病，３４人死亡，分离出一种新的Ｇ－杆菌，１９７８年命名为嗜肺军团菌，１９８４年，正式单独列为军团菌科、军团菌属，有３９个菌种，６１血清型自然界普遍存在，各种水源，人工冷、热水管道系统中一、生物学特性革兰阴性杆菌，常规染色不易着色，Dieterle镀银法染成黑褐色

Giemsa法染色染成红色菌体形态易变异，人工培养基上呈多形性，组织中呈短杆状端生或侧生鞭毛，有菌毛和微荚膜专性需氧菌活性炭-酵母浸出液琼脂（BCYE),灰白色有光泽S菌落，加0.01％溴甲酚兰，菌落呈浅绿色有菌体抗原（Ｏ），鞭毛抗原（Ｈ）以气溶胶方式传播；化学消毒剂、干燥、紫外线敏感；对氯或酸有一定抵抗什么是气溶胶呢？固体或液体的微小颗粒悬浮在空气中，就叫做气溶胶。如：烟囱里冒出的烟，是微小的炭粒悬浮在空气中形成的；天空的雾，是微小的水粒悬浮在空气中形成的。烟和雾都是气溶胶。致病物质主要是产生的多种酶类和毒素：

蛋白水解酶、磷酸酶、核酸酶、细胞毒素等抑制吞噬体和溶酶体融合此外：微荚膜的抗吞噬作用菌毛的黏附作用内毒素的作用所致疾病——军团菌病医院内感染