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文档简介
生物化学名词解释
-名词解释
1等电点:蛋白质解离成正、负离子的趋势相等时溶液的PH值。
2蛋白质变性:在理化因素作用下,蛋白质空间结构破坏,从而导致其
性质改变和活性丧失。
3Tm值:50%DNA解链时的温度。
4增色效应:DNA解链过程中,对260nm紫外光吸收增加的现象。
5必需基团:与酶活性密切相关的基团
6活性中心:能与底物特异性结合,并催化底物转变为产物的酶的特定
的空间区域。
7同工酶:催化相同反应,但酶蛋白分子结构、理化性质、免疫学特征
均不同的一组酶。
8酶原激活:在一定条件下,无活性酶原转变成有活性酶的过程。
9呼吸链:由按一定顺序排列在线粒体内膜上的酶和辅酶组成的连锁反
应体系,能将代谢物脱下的氢传递给氧生成水。
10高能建:水解时释放的能量超过21kl/mol的化学键。
11底物磷酸化:将底物中的高能建转移给ADP生成ATP的过程。
12氧化磷酸化:代谢物脱氢经呼吸链传递给氧的过程中释放的能量使
ADP磷酸化生成ATP的过程。
13糖酵解:机体缺氧时,葡萄糖分解成乳酸并释放能量的过程。
14糖异生:非糖类的物质转变成糖的过程。
15血糖:血液中的葡萄糖,正常人体空腹血糖溶度3.9-6.1mmol/l.
16关键酶:控制代谢月向和速度的醯
17血浆脂蛋白:血浆中脂类和载脂蛋白形成的复合物。
18酮体:乙酰乙酸、3羟丁酸、丙酮三者的统称。
19脂肪肝:因甘油三酯堆积过多引起的肝脏病变
200-氧化:脂肪酸彻底氧化生成水和二氧化碳并释放能量的过程
21氮平衡:体内每天摄入氮和排出氮的关系。
22氧化脱氨基:氨基酸在酶的作用下脱去氨基同时伴有脱氢氧化的过
程。
23—碳单位:某些氨基酸在代谢过程中能生成含有一个碳原子的化学基
团。
24生物转化:非营养物质在体内代谢转化的过程。
25黄疸:体内胆红素超过正常水平,使皮肤、粘膜等组织黄染的现象、
生物化学名词解释和问答
第一早
名词解释
肽键一个a—氨基酸的竣基和另一个c(氨基酸的氨基脱水缩合而
成的化学键,具有双键的性质,不可旋转,这种化学键叫做肽键
模序在蛋白质分子中,可发现两个或者三个具有二级结构的肽段,
在空间上相互靠近,形成一个特殊的空间构象,并具有相应的功能,成
为模序(motif)
分子伴侣在直白质合成时,其空间构象的正确形成,除去一级结
构为决定因素外,还需要一类特殊的蛋白质参与,它可促进、帮助、监
视和加速蛋白质分子进行正确的折叠,这种蛋白质叫做分子伴侣。
肽单元指肽西元肽键中的4个原子及相邻的2个a-C原子在同
一平面所构成肽单元
结构域蛋白质的三级结构通常可分割成一个或者数个球状或者
纤维状的区域,折叠的较为紧密,各行使其功能,称为结构域。
问答
蛋白质的两性解离和等电点
由于所有的蛋白质都含有碱性的C(一氨基和酸性的a一竣基,既可以在
酸性溶液中与H+结合成带正点的阳离子,也可以在碱性溶液中与0H
一结合成带正电的阳离子,即蛋白质的两性解离成正、负离子的趋势相
等,即成为兼性离子,净电荷为零,此时溶液的PH即为蛋白质的等电
点。
什么是蛋白质的一级结构?为什么说蛋白质的一级结构决定其空
间结构?
蛋白质的一级结构指蛋白质多肽链中的氨基酸残基排列顺序。因为蛋白
质分子肽链的排列顺序包含了自动形成复杂的三维结构(即正确的空间
构象)所需要的全部信息,所以一级结构决定其高级结构。
3什么的是蛋白质的空间结构?蛋白质的空间结构与其生物功能有何关
系?
蛋白质的空间结构是指蛋白质分子中原子和基团在三维空间上的排列
顺序、分布以及肽链的走向。蛋白质的空间结构决定蛋白质的功能c空
间结构与蛋白质各自的功能是相适应的。
蛋白质的一二三四级结构?维持各级结构的化学键主要是什么?
蛋白质的一级结构:指多肽链中氨基酸的排列顺序。主要由肽键维持。
蛋白质的二级结构:指多肽链主链原子的局部空间排布,不包括侧链的
构象。主要由氢键维持。
蛋白质的三级结构:指整条多肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置,
即整条多肽链中所有原子在三维空间的排布。主要由次级键和二硫键维
持。
蛋白质的四级结构:指由两条或者两条以上具有完整三级结构的多肽借
次级键彼此缔合而成。由次级键维持
第二章
名词解释
1.核小体核小体由DNA和组蛋白共同组成。组蛋白分子共有五种,分
另!J成为HlH2AH2BH3和H4O各两分子的H2A,H2BH3和H4共
同构成了核小体的核心,DNA双螺旋分子(约180—200bp)缠绕在
这一核心上构成了核小体。
2.Z—DNA为DNA的二级结构的形式,这种DNA是左手螺旋。其明
显特征是脱氧核糖核酸一磷酸骨架在螺旋中呈锯齿形,所以取其英文单
词(zig-zag)的第一个字母将其命名为Z—DNA;在体内不同构象
的DNA在功能上有所差异,可能参与基因表达的调节和控制。
3.增色效应:DNA的增色效应是指DNA在其解链过程中,更多的共辗
双键暴露,DNA的A260增力口,与解链程度有一定的比例关系。这种
现象称为DNA的增色效应。
Tm值DNA变形过程中,紫外光吸收值达到最大的50%时的温度称为
DNA的解链温度(Tm)。
核蛋白体核蛋白体是由rRNA与核蛋白体蛋白共同构成的复合物,分
为大、小两个亚基,其功能作为蛋白质合成的场所。
核酶具有自我催化能力的RNA分子自身可以进行分子剪接,这种具有
催化作用的RNA被成为核酶。
核酸分子杂交热变性的DNA经缓慢冷却过程中,具有碱基序列部分
互补的不同的DNA之间或DNA与RNA之间形成杂化双链的现象称为
核酸分子杂交。
DNA变性在某些理化因素的作用下DNA双链的互补碱基之间的氢键
断裂,使DNA的双螺旋结构松散,成为单援的现象。
简答题
L简述真核生物mRNA的结构特点。
(1)大多数的真核mRNA在5'一端以7一甲基鸟瞟吟以及三磷酸
鸟首为分子的帽结构。帽结构具有促进核糖体和mRNA结合,加速翻
译起始速度的作用,同时可以增强mRNA的稳定性。
(2)在3'—末端,大多数有一段长短不一的多聚腺苗酸结构,通常
称为PolyA尾具有维持mRNA的翻译模板活性的作用,防止mRNA
被核酸外切酶降解/
2.简述DNA双螺旋结构模式的要点。
(l)DNA是以反向平行的互补双链结构,脱氧核糖基和磷酸基骨架位于
双链的外侧,碱基位于内侧
⑵两条链之间以氢键链接。腺瞟吟始终与胸腺嚏咤配对存在,形成两个
氢键,鸟噂岭始终与胞喀咤配对存在,形成三个氢键.
(3腻基平面与线性分子结构的长轴相垂直。一条链的走向是5'-3',
另一条链的走向就一定是3'-5'。
(4)DNA是一右手螺旋结构。螺旋每旋转一周包含10对碱基,每个碱
基的旋转角度为36。。螺距为3.4nm,每个碱基平面之间的距离为
0.34nmoDNA螺旋分子存在一个大沟和一个小沟。
(5)DNA双螺旋结构稳定的维系横向靠两条链间互补碱基的氢键维系,
纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维持。
3.真核生物基因组的结构特点
1基因组庞大,结构复杂,基因组远大于原核生物
2基因占基因组的比例小,即编码序列少于非编码序列
3转录产物为单顺反子(指翻译一种蛋白质)
4有大量的重复序列
5真核生物的基因大多是不连续的(存在内含子和外显子)
6表达上存在时空差异
第三章、第四章
名词解释
1酶酶是由活细胞合成的,对其特异底物起高效催化作用的蛋白质,
是机体内催化多种代谢反应最主要的催化剂。
2辅酶辅酶是结合酶分子中与酶蛋白疏松结合的辅助因子,可以用透
析或超虑方法除去。
3同工酶同工酶是指催化的化学反应相同,酶蛋白的分子结构,理化
性质乃至免疫学性质不同的一组酶。
4酶原及酶原激活:有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前
体,必须在一定的条件下,这些酶的前体水解开一个或几个特定的肽键,
致使构象发生改变,表现出酶的活性。这种无活性酶的前体称为酶原。
酶原向酶的转化过程称为酶原的激活。酶原的激活实际上是酶的活性中
心形成或暴露的过程。
5酶的活性中心:酶分子中与酶的活性密切相关的基团称为酶的必需基
团。这些必需基团在一级结构上可能相距很远,但在空间结构上彼此
靠近,组成具有特定空间结构的区域,能与底物特异的结合并将底物转
化为产物,这一区域被称为酶的活性中心。
6酶的变构效应:体内有的代谢物可以与某些酶分子活性中心外的某一
部位可逆结合,使酶发生变构并改变其催化活性,这种现象称为酶的别
构效应。
7米氏常数(km):是单底物反应中酶与底物可逆生成中间产物和中间
产物转变为产物这三个反应的速度常数的综合。米氏常数等于反应速度
为最大速度一半时的底物浓度。
8酶的化学修饰调节:酶蛋白肽链上的某些残基在酶的催化下发生可逆
的共价修饰,从而引起酶活性改变,这种调节称为酶的化学修饰。
简答题
1简述温度对酶促反应的影响。
酶是生物催化剂,温度对酶促反应有双重影响。升高温度一方面可加快
酶促反应速度,但同时也增加酶变性的机会,又使酶促反应速度降低。
温度升高到60。(:以上时,大多数酶开始变性;80。<2时,多数酶的变
性也不可逆。综合这两种因素,酶促反应速度最快时的环境温度为酶促
反应的最适温度。在环境温度低于最适温度时,温度加快反应速度这一
效应起主导作用,温度每升高10℃,反应速度可加大1-2倍。温度
高于最适温度时,反应速度则因酶变性而降低。
2酶原为何无活性?酶原激活的原理是什么?有何生理意义?
有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体,必须在一定的条
件下,这些酶的前体水解开一个或几个特定的肽键,致使构象发生改变,
表现出酶的活性。这使无活性酶的前体称为酶原。酶原向酶的转化过程
称为酶原的激活。酶原的激活实际上是酶的活性中心形成或暴露的过程。
酶原的激活具有重要的生理意义。消化管内雷白酶以酶原形式分泌出来,
不仅保护消化器官本身不遭酶的水解破坏,而且保证酶在其特定的部位
和环境发挥其催化作用。此外,酶原还可以视为酶的贮存形式。如凝血
和纤维蛋白溶解酶类以酶原的形式在血液循环中运行,一旦需要便不失
时机地转化为有活性的酶,发挥其对机体的保护作用。
3匕匕较三种可逆性抑制作用的特点。
(1)竞争性抑制抑制剂的结构与底物相似,共同竞争酶的活性中心。
抑制作用大小与抑制剂和底物的浓度以及酶对它们的亲和力有关。Km
升高,Vmax不变。
(2)非竞争性抑制:抑制剂与底物结构不相似或完全不同,只与酶活性
中心以外的必需基团结合。不影响酶在结合抑制后与底物的结合。该抑
制作用的强弱只与抑制剂的浓度有关。Km不变,Vmax下降。
(3)反竞争抑制:抑制剂只与酶・底物复合物结合,生成的三元复合物
不能解离出产物。Km和Vmax均下降。
4.酶与一般催化剂相比有何异同?
相同点:
(1)反应前后无质和量的改变;
(2)只催化热力学允许的反应;
(3)不改变反应的平衡点;
(4)作用的机理都是降低反应的活化能。
不同点:
(1)酶的催化效率高;
(2)对底物有高度特异性;
(3)酶在体内处于不断的更新之中;
(4)酶的催化作用受多种因素的调节;
(5)酶是蛋白质,对热不稳定,对反应的条件要求严格。
5举例说明酶作用的三种特异性。
(1)绝对特异性:有的酶只能作用于特定结构的底物,进行一种专一
的反应,生成一种特定结构的产物。这种特异性称为绝对特异性。如眼
酶只水解尿素。
(2)相对特异性:有些酶的特异性相对较差,这种酶作用于一类化合
物或一种化学键,这种不太严格的选择性称为相对特异性。如脂肪酶水
解脂肪和简单的脂。
(3)一种酶仅作用于立体异构体中的一种,酶对立体异构物的这种选
择性称为立体异构特异性。如乳酸脱氢酶只作用于L-乳酸,而不催化
D-乳酸。
第八早
名词解释
乳酸循环(Cori循环):在肌肉中葡萄糖经糖酵解生成乳酸,乳
酸经血液运至肝脏,肝脏将乳酸异生为葡萄糖。葡萄糖释放入血后又被
肌肉摄取利用,这种代谢途径称为乳酸循环。
糖异生:由糖化合物如丙酮酸、乳酸、甘油、氨基酸等在肝脏
转变为葡萄糖或糖原的过程
三竣酸循环即柠檬酸循环,在线粒体内乙酰coA经八步酶促反
应并构成循环反应系统,共经历4次脱氢,2次脱竣,生成4分子还原
当量和2分子C02,循环的各种间产物没有量的变化,是糖、脂肪、
氨基酸共同功能途经和物质转变枢纽。
简答题
1.简述血糖的来源、转变及其调节血糖浓度的激素。
血糖的来源:
Q)食物经消化吸收的葡萄糖;(2)肝糖原的分解;(3)糖异生。血糖的转
变:Q)氧化供能;(2)合成糖原;(3)转变为脂肪及某些非必需氨基酸;
(4)转变为其他糖类物质。调节血糖浓度的激素:(1)升高血糖浓度的
激素有:胰高糖素,糖皮质激素,肾上腺素和生长素。(2)降低血糖
浓度的激素:胰岛素
2.简述糖酵解及糖有氧氧化的生理意义。
糖酵解的生理意义:Q)迅速供能;(2)某些组织细胞依赖糖酵解供能,
如成熟红细胞。(3)病理下的功能
3.列表比较糖酵解与糖有氧氧化进行的部位、反应条件、关键酶、产
物、能量生成及生理意义。
糖酵解糖有氧氧化
反应条
缺氧或供氧不足有氧情况
件
进行部
胞液胞液和线粒体
位
己糖激酶(或葡萄糖
激酶),磷酸果糖
己糖激酶(虱葡
激酶丙酮酸激
萄糖激酶),
酶,丙酮酸脱氢酶
关键酶硝酸果糖激
系,异柠檬酸脱氢
酶-1,丙酮酸
酶,酮戊二酸脱
激酶Q-
氢酶系,柠檬酸合
成酶
产物乳酸,ATPH2o,C02,ATP
lmol葡萄糖,
lmol葡萄糖可净得
能量净得2moi的
30或32moiATP
ATP
迅速供能;某些
生理意是机体获取能量的主
组织的主要供
义
能途径
4..写出糖异生的关键酶及该途径的生理意义。
关键酶:丙酮酸竣化酶,磷酸烯醇式丙酮酸竣激酶,果糖双磷酸酶-1,
葡萄糖6-磷酸酶。生理意义Q)空腹或饥饿时利用非糖化合物异生成葡
萄糖,以维持血糖水平恒定。(2)糖异生是肝脏补充或恢复糖原储备的重
要途径。(3长期饥饯时,肾脏糖异生有利于维持酸碱平衡
5.在百米短跑时,肌肉收缩产生大量的乳酸,试述该乳酸的主要代谢
去向。
大量乳酸透过肌细胞膜进入血液:(1)在肝脏经糖异生合成糖;(2)在心
肌中经LDH1催化生成丙酮酸氧化供能;⑶在肾脏异生为糖或经尿排
出;(4)一部分在肌肉内脱氢生成丙酮酸而进入有氧氧化。
6.简述三竣酸循环的特点及生理意义
特点:Q)TAC中有4次脱氢、2次脱竣及1次底物水平磷酸化;(2)TAC
中有3个不可逆反应、三个关键酶(异柠檬酸脱氢酶,a-酮戊二酸脱氢
酶系,柠檬酸合成酶);(3)TAC的中间产物包括草酰乙酸在内起着催
化剂的作用。草酰乙酸的回补反应是丙酮酸直接竣化或者经苹果酸生成。
生理意义:(l)TAC是三大营养素彻底氧化的最终代谢通路;(2)TAC
是三大营养素代谢联系的枢纽;(3)TAC为其他合成代谢提供小分子前
体;(4)TAC为氧化磷酸化提供还原当量。
第七章
名词解释
1.呼吸链在生物氧化过程中,代谢物脱下的氢和电子,经过多种酶和
辅酶催化的连锁反应逐步传递,最终与氧结合生成水。由于此过程与细
胞呼吸有关,故将此传递体系称为呼吸链。
2..P/0比值每消耗1/2摩尔的02所需要的磷酸的摩尔数,即所能
合成ATP的摩尔数
3.氧化磷酸化在呼吸链电子传递过程中,释放的能量在ATP合酶的作
用下使ADP磷酸化生成ATP的过程,称为氧化磷酸化。
4.底物水平磷酸化:代谢物在脱氢、脱水过程中,底物分子内部能量
重新分布,直接将代谢物分子中高能磷酸键转移给ADP生成ATP的过
程。
5.生物氧化生物氧化是有机物在体内氧化分解成二氧化碳和水并释
放能量的过程。
简答题
1.试说明物质在体内和体外氧化有哪些主要异同?
例如糖和脂肪在体内外氧化。相同点:终产物都是C02和H20;总能
量变化不变;耗氧量相同。不同之处在于:体内条件温和,在体温情况
下进行、pH接近中性、有水参加、逐步释放能量"本外则是在高温下
进行,甚至出现火焰。体内有部分能量形成ATP储存,体外全以光和
热的形式释放。体内以有机酸脱竣方式生成C02,体外则碳与氧直接
化合生成C02。体内以呼吸链氧化为主使氢与氧结合成水,体外是氢
与氧直接结合生成H2Oo
2.试述呼吸链的组成,顺序和各组分的主要功能。
呼吸链包括四种具有电子传递功能的酶复合体:复合体I为NADH-泛
醍还原酶,复合体口为琥珀酸■泛醍还原酶।复合体ni为泛醍-细胞色素
C还原酶,复合体IV为细胞色素C氧化酶。氧化呼吸链有两条,其排列
JII页序分另U为:(1)NADH氧化呼吸链-NADH+H+月兑下的2H经
复合体I(FMN,Fe・S)传给CoQ,再经复合体m(CytbrFe-S,
Cytcl)传至Cytj然后传至复合体IV(Cyta,Cyta3),最后将
2e交给02。(2)琥珀酸氧化呼吸链(FADH2氧化呼吸链)——琥
珀酸由琥珀酸脱氢酶催化脱下的2H经复合体口(FAD,Fe-S,b560)
使CoQ形成CoQH2,再往下的传递与NADH氧化呼吸链相同。
3.
第八章
名词解释
脂肪动员:储存在脂肪细胞中的脂肪在脂肪酶的作用下,逐步水
解,释放出游离脂肪酸和甘油供其它组织细胞氧化利用的过程称脂肪动
员。
酮体:酮体是脂肪酸在肝脏经有限氧化分解后转化成的中间产物,
包括乙酰乙酸、阳羟丁酸和丙酮。
血脂:血脂是血浆中脂类物质的总称,包括甘油三酯、胆固醇、
胆固醇酯、磷脂和游离脂肪酸。
脂肪酸活化:脂肪酸在脂酰CoA合成酶催化下,消耗两个高能
磷酸键转变为脂酰CoA的过程,称脂肪酸活化。
脂肪酸氧化:脂酰CoA进入线粒体基质后,在脂肪酸如氧化多
酶复合体的催化下,从脂酰基的3碳原子开始,进行脱氢、水化、再脱
氢及硫解等四步连续反应,脂酰基断裂生成lmol比原来少2个碳原子
的脂酰CoA及lmol乙酰CoA的过程。称脂肪酸如氧化
血浆脂蛋白:血浆中血脂与蛋白质的结合物称为血浆脂蛋白。
载脂蛋白:脂蛋白中的蛋白质部分称载脂蛋白
简答题
试计算1摩尔硬脂酸(18C)在机体内彻底氧化净生成的ATP摩
尔数(写出计算依据)。
(8x1.5)+(8x2.5)+(9x10)=122-2=120ATP
2.酮体是如何产生和利用的?有何生理意义?
酮体是脂肪酸在肝脏经有限氧化分解后转化成的中间产物,包括乙酰乙
酸、3羟丁酸和丙酮。肝细胞以氧化所产生的乙酰CoA为原料,先
将其缩合成羟甲戊二酸单酰CoA(HMG-CoA),接着HMG-CoA被
HMG-CoA裂解酶裂解产生乙酰乙酸。乙酰乙酸还原产生如羟丁酸,乙
酰乙酸脱竣生成丙酮。HMG・CoA合成酶是酮体合成的关键酶。肝脏没
有利用酮体的酶类,酮体不能在肝内被氧化。酮体在肝内合成后,通过
血液运往肝外组织,作为能源物质被氧化利用。丙酮量很少,又具有挥
发性,主要通过肺呼出和肾排出。乙酰乙酸和3羟丁酸都先被转化为乙
酰CoA,最终通过三竣酸循环氧化。生理意义:Q)酮体是脂肪酸在肝
内正常的中间代谢物,是肝输出能源的一种形式。(2)长期饥饿、糖供应
不足时可以代替葡萄糖,成为脑组织及肌肉的主要能源。
3.试述血浆脂蛋白的分类,组成特点及功能。
⑴分类:电泳法将血浆脂蛋白分为a脂蛋白、前B脂蛋白、B脂蛋白和乳
糜微粒四类;超速离心法将血浆脂蛋白分为乳糜微粒(CM)、极低密度
脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)四类。(2)组
成特点:血浆脂蛋白都含有蛋白质、甘油三酯、磷脂、胆固醇及其酯等;
从CM-HDL,蛋白质含量逐渐增多、甘油三酯逐渐减少、磷脂逐渐增
多,LDL中胆固醇及胆固醇酯含量最多。⑶功能:CM转运外源性甘油
三酯及胆固醇,VLDL转运内源性甘油三酯及胆固醇,LDL转运内源性
胆固醇,HDL逆向转运胆固醇。
4.简述乙酰CoA的来源及去路。
(1)来源/酰CoA来源于糖的有氧氧化、氨基酸氧化及脂肪酸的氧化。
⑵去路:氧化供能;合成脂肪酸;合成胆固醇;转变为酮体。
5.试述体内胆固醇的来源、去路、合成原料、限速酶及简要步骤。
人体胆固醇的来源有:Q)从食物中摄取;(2)机体细胞自身合成。去路
有:(1)用于构成细胞膜;(2)在肝脏转变为胆汁酸;(3)转变为类固醇激
素,如肾上腺皮质激素,性激素等;(4)在皮肤可转变为维生素D3;(5)
可酯化为胆固醇酯储存在胞液中。合成原料:Q)乙酰CoA,来源于葡
萄糖、氨基酸及脂肪酸在线粒体的分解代谢;(2)NADPH+H+,来源于
磷酸戊糖途径。限速酶:HMG-CoA还原酶。简要步骤:(1)甲羟戊
酸的生成;(2)鲨烯的生成;(3)胆固醇的生成。
第九章
名词解释
转氨基作用:在转氨酶催化下,某氨基酸的一。氨基转移到另一。
酮酸的酮基上,生成相应的氨基酸,原来的氨基酸则转变成相应的a酮
酸。
联合脱氨基作用:氨基酸与a-酮戊二酸在转氨酶作用下生成酮
酸和谷氨酸,然后谷氨酸再经L-谷氨酸脱氢酶作用,脱去氨基而生成a
-酮戊二酸,这种反应过程称为联合脱氨基作用。
蛋白质的腐败作用:在消化过程中,有小部分蛋白质不被消化,
也有一小部分消化产物不被吸收,肠道细菌对这部分蛋白质及其消化产
物所起的分解作用,称为腐败作用。
丙氨酸-葡萄糖循环指通过丙氨酸和葡萄糖在肌肉和肝之间进行
氨的转运过程。
甲硫氨酸循环:指甲硫氨酸经S腺昔甲硫氨酸、S-腺昔同型半胱
氨酸、同型半胱氨酸,重新生成甲硫氨酸的过程。
氧化脱氨基作用:是氨基酸经脱氢,生成不稳定的亚氨基酸,后
者立即水解产生a-酮酸及NH3
鸟氨酸循环:指氨与C02通过鸟氨酸、瓜氨酸、精氨酸生成尿素
的过程。
简答题
1.写出血氨的来源和去路。
血氨的来源有:氨基酸脱氨;肾小管上皮细胞谷氨酰胺分解产生;肠道
吸收。血氨的去向有:合成尿素:合成谷氨酰胺;合成瞟岭、喀碇核
甘酸;合成非必需氨基酸;以NH4+形式随尿排出。
2.试述鸟氨酸循环的途径、细胞定位、生理意义。
鸟氨酸循环的途径指氨与C02生成氨基甲酰磷酸,后者与鸟氨酸合成
瓜氨酸,瓜氨酸再与天冬氨酸合成精氨酸,精氨酸最后水解生成尿素的
过程。其合成原料是氨、C02、天冬氨酸;细胞定位在胞液和线粒体;
生理意义是解氨毒。
.3..何谓一碳单位?并试述具来源和生理意义。
一碳单位是指某些氨基酸分解代谢过程中产生含有一个碳原子的基团,
包括甲基、亚甲基(甲烯基)、甲快基、甲歌基及亚氨甲基等。来源于
个别氨基酸如甘丝组色氨酸等代谢。主要生理意义:参与核酸合成;联
系氨基酸和核酸代谢;是体内多种转甲基化作用的枢纽。
体内氨基酸主要来源有:(1)食物蛋白质的消化吸收;(2)组
织蛋白质的分解;(3)经转氨基反应合成非必需氨基酸。主要去路有:
(1)合成组织蛋白质;(2)脱氨基作用;(3)脱竣基作用;(4)
转变为瞟吟、喀碇等化合物。
第十章
名词解释
denovosynthesisofpurinenucleotide即瞟岭核昔酸从头合
成:是指由磷酸核糖、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、一碳单位及C02
等简单物质为原料,经过多步酶促反应合成瞟吟核甘酸的过程。
II密陡核昔酸的补救合成指利用体内游离的喀陡碱基或口密咤核苗
为原料,经过口密咤磷酸核糖转移酶或口密陡核苗激酶等催化简单反应合成
口密陡的过程
简答题
1.试述核甘酸在体内的主要生理功能。
核甘酸具有多种生物学功用,表现在Q)作为核酸DNA和RNA合成的
基本原料;(2)体内的主要能源物质,如ATP、GTP等;⑶参与代谢和
生理性调节作用,如cAMP是细胞内第二信号分子,参与细胞内信息
传递;(4)作为许多辅酶的组成部分,如腺苗酸是构成NAD、FAD、
辅酶A等的重要部分;(5)活化中间代谢物的载体,如UDP葡萄糖是合
成糖原等的活性原料,CDP-二酰基甘油是合成磷脂的活性原料,PAPS
是活性硫酸的形式,SAM是活性甲基的载体等。
2.简述PRPP(磷酸核糖焦磷酸)在核甘酸代谢中的重要性。
PRPP(磷酸核糖焦磷酸)在瞟岭核苜酸、喀咤核甘酸从头合成与补救合成
过程中都是不可缺少的成分,表现在:(1)核苗酸补救合成中,PRPP
与游离碱基直接生成各种一磷酸核甘;(2)瞟吟核昔酸从头合成过程
中,PRPP作为起始原料与谷氨酰胺生成PRA,然后逐步合成各种瞟吟
核甘酸;(3)II密贷核甘酸从头合成过程中,PRPP参与乳清酸核甘酸
的生成,再逐渐合成尿嚏咤一磷酸核甘。
第十一章
名词解释
限速酶指整条代谢通路中,催化反应速度最慢的酶,它不但可影
响整条代谢途径的总速度,还可改变代谢方向,是代谢途径的关键酶,
常受到变构调节和/或化学修饰调节。限速酶一般都是变构酶
变构酶指代谢途径中受到变构调节的酶,酶分子中含与底物结合
起催化作用的催化亚基倍B位)和与变构效应剂结合起调节作用的调节亚
基(部位)。
Allostericregulation即变构调节,某些物质能以非共价键形式
与酶活性中心以外特定部位结合,使酶蛋白分子构象发生改变,从而改
变酶的活性。.
酶的化学修饰酶蛋白肽链上某些残基在酶的催化下发生可逆的
共价修饰,从而导致酶活性改变。
物质代谢机体在生命活动过程中不断摄人氧及营养物质,在细胞
内进行中间代谢,同时不断排出二氧化碳和代谢废物,这种机体和环境
之间不断进行的物质交换即物质代谢。
简答题
为何称三竣酸循环是物质代谢的中枢,有何生理意义?
三竣酸循环是糖、脂、蛋白质分解代谢的最终共同途径,体内各种代谢
产生的ATP、CO2、H2O主要来源于此循环。三陵酸循环是三大物质
相互联系的枢纽,机体通过神经体液的调节,使三大物质代谢处于动态
平衡之中,正常情况下,三竣酸循环原料:乙酰CoA主要来源于糖的
分解代谢,脂主要是储能;病理或饥饿状态时,则主要来源于脂肪的动
员,蛋白质分解产生的氨基酸也可为三竣酸循环提供原料。生理意义1)
糖脂代谢的联系:当糖供充足时:葡萄糖-3-磷酸甘油醛—cc-磷酸甘油
一甘油三酯.葡萄糖一丙酮酸―乙酰CoA/草酰乙酸一柠檬酸一脂肪酰
CoA-甘油三酯。同时,合成所需能量主要由三竣酸循环提供,还原当
量主要由磷酸戊糖途径提供。此外,乙酰CoA也可合成胆固醇,可见
糖很容易转变为脂。但脂肪酸如氧化产生的乙酰CoA很难转变为糖,
只有甘油,丙酮,丙酰CoA可异生成糖,但其量微不足道。(2)在病
理或饥饿时,脂肪动员产生脂肪酸一乙酰CoA-酮体-乙酰CoA-三
竣酸循环。脂代谢要顺利进行,依赖于糖代谢的正常进行,因为乙酰
CoA进入三竣酸循环需草酰乙酸后者主要由糖代谢的丙酮酸经竣化产
生,此外,酮体在体外分解需琥珀酰CoA参与。(3)糖、脂代谢可受到
代谢物、神经、体液的调节"吏其处于动态平衡之中。
2.比较酶的变构调节与化学修饰调节的异同。
相同点:均为细胞水平的调节,属快速调节,受调节的酶为代谢的关键
酶或限速酶。不同点:变构调节:变构剂与酶非催化部位通过非共价键
可逆结合,使酶构象改变,活性改变。无放大效应。化学修饰调节:需
酶催化,通过共价键结合或去掉一些基团,使酶结构改变,活性改变,
消耗少量ATP,有放大效应。
3.试述饥饿48小时后,体内糖、脂、蛋白质代谢的特点。
饥饿48小时属短期饥饿,此时,血糖趋于降低,引起胰岛素分泌减少,
胰高血糖素分泌增加。糖:糖原已基本耗竭,糖异生作用加强,组织对
葡萄糖的氧化利用降低,大脑仍以葡萄糖为主要能源。脂:脂肪动员加
强,酮体生成增加,肌肉以脂酸分解方式供能。蛋白:肌肉蛋白分解加
强。
4.简述人体在长期饥饿状态下,物质代谢有何变化?
长期饥饿状态下,人体内的物质代谢变化为:糖:肾脏糖异生作用加强,
乳酸和甘油成为肝糖异生的主要原料。脂:脂肪进一步动员,大量酮体
生成,脑组织利用酮体增加,超过葡萄糖,肌肉主要以脂酸供能。蛋白:
肌肉蛋白分解减少,负氮平衡有所改善。
5.试述体内草酰乙酸在物质代谢中的作用。
草酰乙酸在三竣酸循环中起着催化剂样的作用,其量决定细胞内三蝮酸
循环的速度,草酰乙酸主要来源于糖代谢丙酮酸陵化,故糖代谢障碍时,
三竣酸循环及脂的分解代谢将不能顺利进行;草酰乙酸是糖异生的重要
代谢物;草酰乙酸与氨基酸代谢及核苗酸代谢有关;草酰乙酸参与了乙
酰C。A从线粒体转运至胞浆的过程这与糖转变为脂的过程密切相关;
草酰乙酸参与了胞浆内NADH转运到线粒体的过程(苹果酸一天冬氨酸
穿梭);草酰乙酸可经转氨基作用合成天冬氨酸;草酰乙酸在胞浆中可
生成丙酮酸,然后进入线粒体进一步氧化为CO2+H2O+ATP。
6.讨论下列代谢途径可否在体内进行?并简要说明其可能的途径或不
可能的原因Q)葡萄糖一软脂酸(2)软脂酸一葡萄糖(3)丙氨酸一葡萄糖(4)
葡萄糖一亚油酸(5)亮氨酸-葡萄糖
(1)能。葡萄糖一乙酰CoA/NADPH+ATP-软脂酸(2)不能。软脂酸
经B氧化生成乙酰CoA,乙酰CoA不能转变为丙酮酸(丙酮酸脱氢酶复
合体催化的反应不可逆),故软脂酸不能异生成糖。(3)能。丙氨酸脱氨
基生成丙酮酸经糖异生可生成葡萄糖。(4)不能。亚油酸是必需脂肪酸。
(5)不能。亮氨酸是生酮氨基酸。
7.给动物以丙酮酸,它在体内可转变为哪些物质?
Q)丙酮酸一丙氨酸.(2)丙酮酸一乳酸(3)丙酮酸一葡萄糖.(4)丙酮酸一磷
酸二羟基丙酮一甘油.⑸・丙酮酸一乙酰辅酶A-<O2+H2O.⑹丙酮酸
一乙酰CoA一脂肪酸.(7)丙酮酸一乙酰CoA一酮体.(8)丙酮酸一乙酰
CoA-胆固醇⑼丙酮酸一草酰乙酸
8.糖、脂、蛋白质在机体内是否可以相互转变?简要说明可转变的途径
及不能转变的原因。糖与脂:糖容易转变为脂类,糖一磷酸二羟丙酮T
磷酸甘油一甘油三酯。糖一乙酰CoA一脂肪酸/胆固醇T甘油三酯/胆
固醇酯。脂变糖可能性小,仅甘油,丙酮,丙酰CoA可异生成糖,其
量甚微。蛋白质与糖、脂:蛋白质可以转变为糖、脂,但数量较小,蛋
白质-20种氨基酸一生糖氨基酸一糖和生糖,生酮氨基酸一脂类糖。
脂不能转变为蛋白质;糖、脂不能转变为必需氨基酸,虽可提供非必需
氨基酸的碳氢氧骨架,但缺乏氮源。
第十二章
名词解释
半保留复制:复制时,母链DNA解开成两股单链,每股链各自
作为模板复制子代DNA在子代DNA分子中,一条链为亲代DNA链,
一条链为新合成链,但保留了亲代DNA的全部信息。(2)半不连续
复制:即DNA复制时一条链是连续合成的,另一条链是不连续的片断
合成,最后才连接成长链。
逆转录与逆转录酶逆转录:以RNA为模板合成DNA的过程。
逆转录酶:催化逆转录反应的酶称逆转录酶,该酶以RNA为模板催化
DNA合成、水解杂化链上的RNA及用DNA作模板催化DNA合成三
种活性。
引发体在解链的基础上,DnaB、C雷白与起始点相结合形成复
合体,再结合引物酶。形成较大的复合体,再结合到DNA上,这种复
合体称引发体°弓I发体一共有四个部分构成:解旋酶DNAB6SB,弓I物
酶DNAG,DNA复制的区域
领头链与随从链在DNA复制中,解链方向与复制方向一致,因
而能沿5'至3'方向连续复制的子链称为领头链。子链合成方向与复
制叉前进方向相反者称随从链。
冈崎片段冈崎片段是由于解链方向与复制方向不一致,其中一股
子链的复制,需待母链解出足够长度才开始生成引物接着延长。这种不
连续的复制片段称冈崎片段。
简答
1.解释遗传相对保守性及其变异性的生物学意义和分子基础。
遗传相对保守性,其分子基础在复制上,包括已知的三方面:依照碱基
配对规律的半保留复制、DNA-polI的校读、修复机制和DNA-Polm
的碱基选择作用。因此,遗传信息代代相传,作为基因组(全套基因)
传代,是相对稳定的。物种的变化是漫长过程的积累,如果不用人工手
段去干预,是不可能在几个世代之内就见得到的。生物的自然突变率很
低(10-9),但生物基因组庞大,自然突变是不容低估的。例如同一物
种的个体差别、器官组织的分化、长远组织的分化,生物的进化,从长
远意义上说,都是突变造成的结果。突变都是DNA分子上可传代的各
种变化(点突变、缺失、插入、框移、重排),其后果需具体问题具体
分析,不能笼统地简化为有利或有害。当然,更新的技术可诱变或其他
手段改造物种,建立有益于人类的突变体。遗传的相对保守性应该可以
理解为DNA复制的保真性,L严格的碱基互补配对2.DNApol的错
配校对3.DNA的损伤修复4.复制终止时RNA引物的切除及填补
2.参与DNA复制的酶在原核生物和真核生物有何异同?
原核生物有DNA-polI,II,W;真核生物为DNA-pola,仅丫、4
£;而且每种酶都各有其自身的功能。这是最主要的差别。相同之处在
于底物(dNTP)相同,催化方向(5'-3')相同,催化方式(生成磷酸二
酯键)、放出PPi相同等等。当然其他的酶类、蛋白质也会有差别。例
如DNA拓扑异构酶的原核、真核生物就有不同;又如:解旋酶,原核
生物是dnaB基因的表达产物(DnaB),真核生物就不可能是这个基因和
这种产物。
3.DNA拓扑异构酶在DNA复制中有何作用?如何起作用?
主要是理顺由复制的高速度引起的DNA连环、缠绕、打结等现象和使
复制中过度拧紧的正超螺旋得以松弛。这些都是复制能继续进行的保证。
DNA拓扑酶的作用本质是靠其核酸内切酶活性和催化磷酸二酯键生成
的活性,即先在DNA链上造成缺口,其中一股链绕过缺口后再与原断
端连接,就可达到松弛DNA拓扑构象的目的。
4..真核生物染色体的线性复制长度是如何保证的?
真核生物染色体采取线性复制方式,在两端形成的复制引物RNA被水
解留下的空隙,如果是环状DNA,其填补空隙应当没问题,但线性复
制两端不能填补,则会复制一些变短一些。端粒的DNA序列高度重复
并形成反折式二级结构。端粒酶含RNA,又有反转录酶活性,引物除
去留下的空隙,靠端粒,端粒酶爬行式复制填补而不缩短。
第十三章
名词解释
不对称转录:两重含义,一是指双链DNA只有一股单链用作转
录模板(模板链);二是同一单链上可以交错出现模板链或编码链。
编码链和模板链编码链:DNA双链上不用作转录模板的一股单
链,因其碱基序列除T/U有别外,和转录产物mRNA序列相同而得
名。模板链:DNA双链中按碱基配对能指引转录生成RNA的单股链。
转录起始前复合物(PIC)PIC,是真核生物转录因子之间先互相辨
认结合,然后以复合体的形式与RNA聚合酶一同结合于转录起始前的
DNA区域而成
锤头结构。核酶能起作用的结构要求,至少含有3个茎(RNA分
子内配对形成的局部双链),1至3个环(RNA分子局部双链鼓出的单链)
和至少有13个一致性的碱基位点。
Rho因子(p因子)。是原核生物转录终止因子,有ATP酶和解螺
旋酶活性。依赖Rho因子的转录终止需Rho因子。
o(sigma)因子:原核生物RNA聚合酶全酶的成份,功能是辨认
转录起始区,这种。因子称。32,此外还有分子量不同,功能不同的其
他。因子。
外显子:定义为断裂基因上及其初级转录产物上出现,并表达为
成熟RNA的核酸序列。
内含子:是隔断基因的线性表达而在剪接过程中被除去的核酸序
列。
剪接体,为内含子剪接场所。由5种核小RNA和大约50种蛋白
质装配而成。因分子中碱基以尿喀陡含量最丰富,故以U作分类命名。
简答题
1.复制和转录过程有什么相似之处?又各有什么特点?
复制和转录都以DNA为模板,都需依赖DNA的聚合酶,聚合过程都
是在核苗酸之间生成磷酸二酯键,生成的核酸链都从5'向3'方向延
长,都需遵从碱基配对规律。复制和转录最根本的不同是:通过复制使
子代保留亲代全部遗传信息,而转录只需按生存需要部分信息表达。因
此可以从模板和产物的不同来理解这一重大区别。此外,聚合酶分别是
DNApol和RNApol,底物分另是dNTP和NTP,还有碱基酉己对的差
别,都可从二者产物结构性质上理解。
(简要总结:不同点模板一个是双链一个是单链原料不同酶一个是
DNA聚合酶一个是RNA聚合酶产物不同一个需要引物一个不需要
起始点一个是富含AT的序列一个是有启动子一个是复制叉一个是
转录泡)
2.什么是不对称转录?怎样用实验来证明转录的不对称性?
同名词解释第1题。要证明不对称转录,比较简单的可用核酸杂交法。
DNA链的双链用热变性解开并分离成两股单链分别与转录产物RNA
杂交,可发现哪一链上的哪些区段是转录模板。还可用核酸序列测定加
以比较。
3.原核生物和真核生物的RNA聚合酶有何不同?
原核生物RNA-pol是由多个亚基构成的。。2郃’称为核心酶,a2郎’
。称为全酶。真核生物RNApol有I、口、ID三种,各由多个亚基组成,
专一性地转录不同的基因,产生不同的产物,分别转录45s-rRNA,
和小分子的和原核生物和真
hnRNARNA(5s-rRNA,tRNAsnRNA)o
核生物RNApol的特异性抑制剂分别是利福平和鹅膏蕈碱。
4.讨论原核生物RNA聚合酶各亚基的功能。
原核生物RNA聚合酶有a,0,,,。亚基,a亚基决定哪些基因转录,
B亚基在转录全程中起催化作用,*亚基结合DNA模板,起开链的作
用,。亚基辨认起始点。
5.讨论原核生物的两种终止转录的方式
原核生物转录终止有依赖Rho因子与非依赖Rho因子两种方式。Rho
因子有ATP酶和解螺旋酶两种活性,与mRNA、RNA-pol结合后使
RNA-pol变构,从而使RNA-pol停顿不再前移,用解螺旋酶活性使
RNA3'-端与模板缝的DNA分开,从而RNA脱落。非依赖Rh。因
子的转录终止主要依赖于RNA产物3'■端的茎环(发夹)结构及随后的
一串寡聚茎环结构生成后仍被所包容,因而使
UeRNApolRNA-pol
变构而不能前进,polyU与模板polyA序列是最不稳定的碱基配对结
构,当酶不再前移QNA双链就要复合从而使转录产物RNA链脱落。
共同的道理是两种转录终止都是RNA-pol停顿和转录产物脱落,只不
过是停顿和脱落的因素有别。
第十四章
名词解释
1.遗传密码:mRNA链中每3个相邻的核甘酸编成一组,代表某种氨
基酸或肽链合成的起始或终止信号,称为三联体密码子。遗传密码决定
蛋白质的一级结构。
2.信号肽信号肽是未成熟分泌性蛋白质中可被细胞转运系统识别的
氨基酸序列。含有碱性N端区,中段的疏水核心区,以及c端加工区和
其邻近可被信号肽酶裂解的位点
3.翻译:蛋白质的生物合成也称为翻译,指以mRNA为模板,在核糖
体上合成蛋白质的过程。
4.S-D序列在原核生物mRNA上的碱基序列位于翻译起始密码AUG
的上游,相距8-13个核甘酸处,为一段由4-6个核昔酸组成的富含瞟
吟的序歹LAGGAGG
5.多核蛋白体一个mRNA分子上同时有多个核蛋白体在进行蛋白质
合成。即mRNA和多个核蛋白体的聚合物,称为多聚核蛋白体。
6.蛋白体循环翻译过程的肽链延长,称为核蛋白体循环,包括进位;
注册、成肽、转位三个步骤,狭义的核蛋白体循环仅包含肽链的延伸阶
段。广义的核蛋白体循环指翻译的全过程。
7.靶向运输:蛋白质合成后,定向地到达其执行功能的目标地点,称
为靶向运输
简答题
1.遗传密码有哪些特征?
遗传密码的特点:筒并性,通用性,摆动性,连续性,方向性
遗传密码的连续性(commaless)。密码的三联体不间断,需3个一
组连续读下去。mRNA链上碱基的插入或缺失,可造成框移(frame
shift),使下游翻译出的氨基酸完全改变。简并性(degeneracy)o
遗传密码中除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外其余氨基酸有2,
3,4个或多至6个三联体为其编码。遗传密码的简并性是指密码子上
第三位碱基改变往往不影响氨基酸的翻译。。摆动性(wobble)。翻
译过程中氨基酸的正确加入,需靠mRNA上的密码子与tRNA上的反
密码子相互以碱基配对辨认。密码子与反密码子配对,有时会出现不遵
从碱基配对规律的情况,称为遗传密码的摆动现象。这一现象更常见于
密码子的第三位碱基对反密码子的第一位碱基,二者虽不严格互补,也
能相互辨认。通用性(universal)。从最简单的生物例如病毒,一直至
人类,在蛋白质的生物合成中都使用同一套遗传密码。
2.简述氨基酰-tRNA合成酶的作用特点?
氨基酰-tRNA合成酶的作用是催化氨基酸的竣基(-COOH)与tRNA
的3'-0H脱水生成氨基酰-tRNA。其作用特点是:具有绝对专一性,
酶对氨基酸和tRNA两种底物都能高度特异地识别;具有校正活性
校正活性是把错配的氨基酸水解下来,换上与密
(editingactivity)o
码子相对应的氨基酸。
3.何谓翻译后的加工?加工包括哪些内容?
肽链从核蛋白体释放后,经过细胞内各种修饰处理过程,成为有活性的
成熟蛋白质,称为翻译后加工(post-translationalprocessing)包括
高级结构的加工修俯、一级结构的加工修£解口靶向运输三个方面。高级
结构的修饰分为亚基聚合、辅基连接和肽链自行根据其一级结构的特征
折叠和盘曲成高级结构。一级结构的修饰包括去除N-甲酰基或N-蛋氨
酸、个别氨基酸的修饰和水解修饰。蛋白质合成后的靶向运输是指蛋白
质合成后定向地到达其执行功能的目标地点。
第十五章
名词解释
1.顺式作用元件(cis-actingelement)是指可以影响自身基因表达活
性的真核DNA序列。,包括启动子,上游调控原件,增强子,加尾信
号和一些调控因子。
2.反式作用因子(trans-actingfactor)指调控转录的蛋白质因子。它
们由某一基因表达后通过与特异的顺式作用元件相互作用,反式激活另
一基因的转录。
3.管家基因(housekeepinggene)某些基因产物对生命全过程都是
必需的或必不可少的。这类基因在一个生物个体的几乎所有细胞中均表
达,被称为管家基因。
4.基因表达的时空性即基因表达的时间、空间特异性。时间特异性:
按功能需要某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生。在多细胞
生物基因表达的时间特异性又称阶段特异性。空间特异性:在个体生长
全过程,某种基因产物在个体在不同组织或器官表达,即按空间顺序出
现。
5.启动子(promoter)启动子指RNA聚合酶结合位点周围的一组
转录调控组件,包括至少一个转录起始点以及一个以上的功能组件。
6.增强子(enhancer)指远离转录起始点(1〜30kb),决定基因的
时间,空间特异性表达,增强启动子转录活性的DNA序列,其发挥作
用的方式通常与方向,距离无关。
7.沉默子(silencer)是某些基因含有负性调节元件,当其结合特异
蛋白质因子时,对基因转录起阻遏作用。
8.基本转录因子(generaltranscriptionfactor)为RNA聚合酶结合
启动子所必需的一组蛋白质因子,决定三种RNA(tRNA、mRNA及
rRNA)转录的类别。
9.特异转录因子(specialtranscriptionfactor):为个别基因转录所
必需,决定该基因的时间、空间特异性表达,故称特异转录因子。有增
强子启动蛋白和沉默子启动蛋白。
10.基因组(genome):指一个细胞或病毒所携带的全部遗传信息或
整套基因。
11.基因表达:指储存遗传信息的基因转录及翻译合成蛋白质,或者经
转录合成RNA的过程。
简答题
1.简述乳糖操纵子结构,解释阻遏蛋白的负性调节机制,CAP的正性
调节机制及不同生长条件下的协调调节。
乳糖操纵子的结构:Ecoli的乳糖操纵子(lacoperon)含Z、Y及A
三个结构基因,分别编码如半乳糖苗酶、透酶和乙酰基转移酶;此外还
有一个操纵序列、一个启动序列在启动序列上游还有一个分解
0PeP
(代谢)物基因激活蛋白(CAP)结合位点。由P序列、0序列和CAP
结合位点共同构成lac操纵子的调控区,三个酶的编码基因即由同一调
控区调节,实现基因产物的协调表达。阻遏蛋白的负性调节:在没有乳
糖存在时,lac操纵子处于阻遏状态。I序列在PI启动序列操作下表达
的此阻遏蛋白与0序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结合,抑制
转录启动。阻遏蛋白的阻遏作用并非绝对,偶有阻遏蛋白与0序列解
聚,使得细胞中可能有少数分子加半乳糖甘酶和透酶生成。当有乳糖存
在时,乳糖经透酶催化、转运进入细胞,再经原先存在于细胞中的少
数如半乳糖甘酶催化,转变为半乳糖。半乳糖结合阻遏蛋白,使蛋白构
象变化,导致阻遏蛋白与0序列解离、发生转录。CAP的正性调节:
CAP是同二聚体,在其分子内有DNA结合区及CAMP结合位点。当
没有葡萄糖及cAMP浓度较高时,cAMP与CAP结合工AP结合在lac
启动序列附近的CAP位点,可刺激RNA转录活性,使之提高50倍;
当有葡萄糖存在时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP结合受阻,lac
操纵子表达下降。协调调节:lac阻遏蛋白负性调节与CAP正性调节两
种机制协调合作,当lac阻遏蛋白封闭转录时,CAP对该系统不能发挥
作用;但是如果没有CAP存在来加强转录活性,即使阻遏蛋白从操纵
序列上解聚仍无转录活性。可见,两种机制相辅相成、互相协调、相互
制约。(简要:乳糖操纵子的结构:含有A,Y,Z三个结构基因,此外
还有一个操纵序列O,一个启动子P,和一个调节基因I,I含有自己独
立的启动子PLP基因前还有一个CAP结合位点。正性调控:阻遏蛋白
的正性调控,细胞在没有乳糖的情况下lac转录因子处于阻遏状态I基
因在PI作用下产生阻遏蛋白结合。序列,阻碍转录的发生,当存在乳
糖时,乳糖进入细胞经过一系列酶促反应转变成半乳糖,与阻遏蛋白结
合,离开0序列,使lac处于激活状态,转录开始正性调控,cap的
正性调控,CAP为同二聚体,当培养基中缺乏葡萄糖时,cAMP浓度
增高,与cap序列结合,刺激基因转录,存在葡萄糖时cAMP浓度下
降,cAMP和CAP结合受阻,lac操纵子表达受抑制两种机制相辅相
成,相互协调,相互抑制)
2.简述基因表达的特点及表达方式。
无论是病毒、细菌,还是多细胞生物,乃至高等哺乳类动物及人,基因
表达表现为严格的规律性,即具有时间、空间特异性。基因表达的方式
有基本(组成性)基因表达、诱导和遏表达。
第十八早
名词解释
l.plasmid(质粒):是存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分
子。质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构,能在宿主细胞独立自主地
进行复制,并在细胞分裂时恒定地传给子代组胞。质粒带有某些遗传信息,
所以会赋予宿主细胞一些遗传性状。因为质粒DNA有自我复制功能及
所携带的遗传信息等特性,故可作为重组DNA操作的载体。
2.restrictionendonuclease(限制性核酸内切酶):就是识别DNA
的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类核酸内切酶。
限制性核酸内切酶存在于细菌体内,与相伴存在的甲基化酶共同构成细
菌的限制性修饰体系限制外源DNA、保护自身DNA,对细菌遗传性状
的稳定遗传具有重要意义。限制性核酸内切酶分为三类。重组DNA技
术中常用的限制性内切核酸酶为n类酶。
3.vector(载体):即基因载体,或称克隆载体,是在基因工程中为〃携
带〃感兴趣的外源DNA、实现外源DNA的无性繁殖或表达有意义的
蛋白质所采用的一些DNA分子,具有自我复制和表达功能。其中,为使插
入的外源DNA序列可转录、进而翻译成多肽链而特意设计的克隆载体
又称表达载体。克隆载体有质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA,它们
经适当改造后仍具有自我复制能力,或兼有表达外源基因的能力。
4.DNAcloning(DNA克隆):就是应用酶学的方法,在体外将各
种来源的遗传物质——同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人
工的DNA与载体DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分子一复
制子,继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化细胞,
再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子,即DNA克隆,又称基因克隆、
重组DNA或基因工程。
5.目的基因:应用重组DNA技术有时是为分离、获得某一感兴趣的基
因或DNA序列,或是为获得感兴趣基因的表达产物——蛋白质。这些感
兴趣的基因或DNA序列就是目的基因,又称目的DNA。
6.同源重组:发生在同源序列间的重组称为同源重组,又称基本重组。
同源重组的发生依赖两分子之间序列的相同或类似性。如果通过转化或
转导获得的外源DNA与宿主DNA同源,那么外源DNA就可以通过同
源重组方式整合进宿主染色体。
7.cDNA文库:以mRNA为模板,利用反转录酶合成与mRNA互补的
DNA,即cDNA,再复制成双链cDNA片段,与
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