DB36T-淡水鱼苗种产地临床检疫技术规范

ICSFORMTEXT     FORMTEXT点击此处添加中国标准文献分类号FORMTEXT     DBFORMTEXT36DBFORMTEXT36/FORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXXFORMTEXT     FORMTEXT淡水鱼苗种产地临床检疫技术规范FORMTEXTThetechnicalspecificationsforfreshwaterfishlarvaequarantineinoriginmanufacturingareasFORMTEXT点击此处添加与国际标准一致性程度的标识FORMDROPDOWNFORMTEXT     FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX发布FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX实施FORMTEXT江西省市场监督管理局   发布DB36/XXXXX—XXXX目  次前言 Ⅱ1范围 12规范性引用文件 13术语和定义 14检疫对象 25检疫程序和内容 26检疫合格标准 67检疫文书的出具 6附录A 8附录B 9附录C 10附录D 12附录E 13附录F 14附录G 15附录H 16附录I 17前  言本文件按照GB/T1.1-2020给出的规则起草。本文件由江西省农业农村厅提出并归口，本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件起草单位：江西省农业技术推广中心（江西省水生动物疫病监控中心）。本文件主要起草人:田飞焱、李小勇、刘文珍、徐节华、孟霞、黄海莉、张锦波、顾瑶、万华敏、范明、林一舟、裴建明。淡水鱼苗种产地临床检疫技术规范范围本文件规定了淡水鱼苗种产地检疫的检疫对象、临床检查、采样送检、实验室检测、临床检疫合格标准等技术规范。本文件适用于江西省行政区域内的淡水鱼的苗种产地临床检疫。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T10585.2传染性造血器官坏死病诊断规程GB/T15805.5鲤春病毒血症诊断规程GB/T34734淡水鱼类小瓜虫病诊断规程GB/T36190草鱼出血病诊断规程GB/T36194金鱼造血器官坏死病毒检测方法SC/T7103水生动物产地检疫采样技术规范SC/T7211传染性脾肾坏死病毒检测方法SC/T7212.1鲤疱疹病毒检测方法第1部分：锦鲤疱疹病毒SC/T7229鲤浮肿病诊断规程SN/T1152鲤春病毒血症检疫技术规范SN/T1474传染性造血器官坏死病检疫技术规范SN/T1674锦鲤疱疹病毒检疫技术规范SN/T3584草鱼出血病检疫技术规范SN/T4290多子小瓜虫检疫技术规范SN/T5363鲤浮肿病检疫技术规范术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1淡水鱼苗种Freshwaterfishlarvae是指用于繁育、增养殖生产、科研试验以及观赏的淡水鱼的亲本（包括后备亲本）、幼体、受精卵及其遗传育种材料。3.2产地检疫Quarantineinoriginmanufacturingareas在鱼类及鱼类产品生产及养殖地区（例如水产养殖场）进行的检疫。3.3批次Batch同一水产养殖场内或自然水体，以同一水域、同一品种、环境及养殖条件相同的水生动物为一个采样批次。4检疫对象表1淡水鱼苗种检疫对象表检疫范围检疫对象草鱼、青鱼草鱼出血病、小瓜虫病鲤、锦鲤鲤春病毒血症、锦鲤疱疹病毒病、鲤浮肿病、小瓜虫病鲫鲫造血器官坏死病、小瓜虫病金鱼鲫造血器官坏死病、鲤春病毒血症、小瓜虫病鳜、鲈传染性脾肾坏死病、小瓜虫病虹鳟（包括金鳟）传染性造血器官坏死病、小瓜虫病其它淡水鱼类小瓜虫病注：检疫范围和检疫对象依据于农业农村部相关文件，其调整依据农业农村部最新文件而定。5临床检疫程序和内容5.1查验养殖场防疫状况接到检疫申报并受理后，受委派的渔业官方兽医应当查验养殖场防疫状况，包括进出场、饲料、用水、疾病防治、消毒用药、养殖生产记录和卫生管理等情况，核实养殖场过去12个月内未发生相关水生动物疫情。5.2临床检查临床检查需开展群体检查和个体检查。5.2.1群体检查5.2.2个体检查个体检查通过外观检查、解剖检查或显微镜检查等方法进行。5.2.2.1外观检查观察鳃黏液及颜色变化，眼球有无突出、凹陷或浑浊充血等变化，体表黏液的多少，有无疖疮、囊肿、溃疡、竖鳞、充血、出血等症状，鳍条、鳞片等损伤情况，肛门有无红肿、拖便等现象，有无胞囊或寄生虫寄生等情况。5.2.2.2解剖检查观察有无腹水，脾、肾、肝、胆、脂肪、肠道、鳔、性腺、脑、心脏、脊髓、肌肉等是否正常，有无胞囊或寄生虫及其他病理变化等。5.2.2.3显微镜检通过水浸片法、压片法、涂片法、浓缩法等方法观察体表、鳃、肠道等部位中寄生虫感染状况，检查鱼类器官、组织病变情况。5.2.4临床检查健康判定在群体和个体检查中均正常，临床检查健康；出现疑似附录B～G等疫病的临床症状，怀疑患有相应疫病，及临床检查发现其他异常情况的，临床检查不合格。5.3采样送检5.3.1需采样送实验室检测的情况（1）临床检查不合格的淡水鱼类，应采样进行实验室检测。（2）跨省、自治区、直辖市运输的鱼类，应采样送实验室检测。但以下情况除外：已纳入国家或省级水生动物疫病监测计划的，过去2年内无相应疫病阳性结果的；群体和个体检查均正常，现场采用经农业农村部批准的快速检测试剂盒进行检测，结果为阴性的。5.3.2采样方法和数量对有临床症状的淡水鱼，须挑选临床症状明显的活体，每一采样批次，一般根据样品大小取10～20尾即可。对无症状的，指导货主按照SC/T7103的采样方法，按表2要求随机取样。表2根据假定病原感染率确定的采样数量表群体大小（尾）25050010001500～1000010000或以上2%感染率时采样数（尾）1101301401451505.3.3样品封存渔业官方兽医和货主共同确认样品的真实性、代表性和有效性。封样包装材料应清洁、干燥，不会对样品造成污染和伤害；包装容器应完整、结实、有一定抗压、抗震性。每份样品应分别加贴采样标签，注明采样编号、品种、日期。5.3.4采样记录现场采样人员应严格按照采样要求进行现场采集，并填写《现场采样记录表》（见附录A）。5.3.5样品的运送采样完成后，根据检测对象和送检要求确定送样方式，样品应按按规定时间及时就近送至省级农业农村主管部门指定的具有资质的水生动物疫病诊断实验室。5.3.5.1活体送样按鱼和水1:10的比例将鱼和水（鱼和水体积约占塑料袋体积的的2/3）放入塑料袋中，充氧、降温运输，活体送至水生动物疫病实验室处理。样品的包装和运输以不泄漏、不交叉污染，保证样品存活为基本原则。5.3.5.2组织样品送样有条件的可按相关疫病的检验方法取采样鱼的相应组织，研磨后，按1:5的比例加入运送液（含5%～10%胎牛血清、1000g/mL庆大霉素、800g/mL青霉素、400IU/mL的制菌酶素或两性霉素B的平衡盐溶液），在0～4℃下24小时内送至检测实验室。5.4实验室检测5.4.1样品登记水生动物疫病检验实验室接到样品和采样记录单时，应立即登记，对样品状态及外观进行详细描述，对各个检疫项目以及具体要求进行确认，标注样品名称和实验室编号，及时将样品进入实验室流转。5.4.2样品检测水生动物疫病实验室根据检测项目，按照国家或行业标准进行相关检疫对象的病原微生物检测，并在接到样品后20日内出具相应的检验报告，并及时向渔业官方兽医反馈结果。表3淡水鱼苗检疫对象及检验方法检疫对象检验方法鲤春病毒血症GB/T15805.5鲤春病毒血症诊断规程SN/T1152鲤春病毒血症检疫技术规范草鱼出血病GB/T36190草鱼出血病诊断规程SN/T3584草鱼出血病检疫技术规范锦鲤疱疹病毒病SCT7212.1鲤疱疹病毒检测方法第1部分：锦鲤疱疹病毒SN/T1674锦鲤疱疹病毒检疫技术规范鲤浮肿病SC/T7229鲤浮肿病诊断规程SN/T5363鲤浮肿病检疫技术规范鲫造血器官坏死病GB/T36194金鱼造血器官坏死病毒检测方法传染性脾肾坏死病SC/T7211传染性脾肾坏死病毒检测方法传染性造血器官坏死病GB/T10585.2传染性造血器官坏死病诊断规程SN/T1474传染性造血器官坏死病检疫技术规范小瓜虫病GB/T34734淡水鱼类小瓜虫病诊断规程SN/T4290多子小瓜虫检疫技术规范5.4.3样品保存水生动物产地样品，自发出检疫报告后阳性样品需保存6个月方可作废弃处理。病毒组织样品必须在-20℃以下条件保存，寄生虫用固定液固定后常温保存。6临床检疫合格标准6.1该养殖场近12个月未发生相关水生动物疫情。6.2临床检查健康。6.3需要经实验室检测的，检测结果合格。渔业官方兽医根据上述临床检疫合格标准，结合临床检查情况，进行临床检疫结果判定；对于需要经实验室监测的，还应在实验室结果反馈后进行综合判定。_________________________________附录A(资料性)表A.1现场采样记录表养殖场信息名称通讯地址联系人电话渔业官方兽医信息姓名电话所在单位通讯地址邮编样品信息样品名称采样编号样品数量样品规格样品状态□无病症；□有病症；□濒死；□死亡保存方式□酒精；□冰冻；□活鱼；□其他采样时环境条件水温℃pH检测项目货主签署本次采样始终在本人陪同下完成，上述记录经核实无误，承认以上各项记录的合法性。签字：年月日渔业官方兽医签章本次采样已按要求及采样标准执行完毕，样品经双方人员共同封样，并做记录如上。签字：年月日备注：该表一份三份，一份随同样品转运至检测单位，一份货主保存，一份由渔业官方兽医保存。附录B(资料性)鲤春病毒血症简介及典型临床症状B.1鲤感染鲤春病毒血症简介鲤春病毒血症（springviremiaofcarp，SVC），是一种由弹状病毒科水泡性病毒属的鲤春病毒血症病毒（SVCV）引起的急性、出血性并伴有高度传染的流行病。流行于鲤科鱼类中，特别是鲤和锦鲤。该病通常与春季暴发，并引起幼鱼和成鱼死亡，以全身出血、腹水、鳔充血、肛门突出等，发病急、死亡率高为特征。B.2鲤感染鲤春病毒血症典型临床症状注1：鲤感染鲤春病毒血症病毒后，可见其体表鳞片松散、干涩，脑部、头背部、大侧肌、肛门、尾鳍等部位红肿充血。有的病鱼身体发黑，腹部肿大，皮肤和鳃出血。解剖后可见体腔腹水严重且带血，肠、心、肾、鳔有时连同肌肉也出血，内脏水肿。注2：图来源：欧阳敏、田飞焱等图B.1附录C(资料性)草鱼出血病简介及典型临床症状B.1草鱼出血病简介草鱼出血病（HemorrhageDiseaseofGrassCarp）是由草鱼呼肠孤病毒（GCRV）引起，该病毒直径70mm，球形颗粒，含有11个片段的双链RNA，不同地区存在不同的毒株，主要感染当年草鱼、青鱼等（图11），该病主要在我国中部及南方各省流行，死亡率可高达80%以上，二龄以上的成鱼则较少发病，症状也较轻。水温在20～33℃时发生流行，25～28℃为流行高峰。B.2草鱼出血病典型临床症状注1：草鱼感染草鱼呼肠孤病毒后，解剖见肌肉点状或块状出血。注2：图来源：欧阳敏、田飞焱等图C.1注1：草鱼感染草鱼呼肠孤病毒后，鳍、鳃盖充血明显。注2：图来源：欧阳敏、田飞焱等图C.2注1：草鱼感染草鱼呼肠孤病毒后，肠壁充血、肝脾充血或因失血而发白。注2：图来源：欧阳敏、田飞焱等图C.3附录D(资料性)锦鲤疱疹病毒病简介及典型临床症状D.1锦鲤疱疹病毒病简介锦鲤疱疹病毒病（koiherpesvirusdisease，KHVD），是由锦鲤疱疹病毒（KHV）引起的一种高传染性、高发病率、高死亡率疫病。KHV感染谱较小，目前仅发生于锦鲤和鲤，鱼苗、幼鱼、成鱼均可感染。鱼发病并出现症状24～48小时后开始死亡，死亡率可达80%～100%，对鲤和锦鲤的养殖危害性极大。D.2锦鲤疱疹病毒病典型临床症状注1：锦鲤感染锦鲤疱疹病毒后，锦鲤、鲤皮肤上出现白色块斑、水泡、溃疡，鳃出血并产生大量黏液或组织坏死，病鱼鳃、腹部、鳍条、口腔充血和出血，鳞片有血丝，鱼眼凹陷，一般在出现症状后1～2天内死亡。注2：图来源：江育林图D.1附录E(资料性)鲫造血器官坏死病简介及典型临床症状E.1鲫造血器官坏死病简介鲫造血器官坏死病（haematopoieticnecrosisvirusdisease,HNVD）是由鲤疱疹病毒II（Cyprinidherpesvirus2,CyHV-2）的，导致金鱼、鲫等鱼类死亡的一种病毒性传染病。在全球多个国家和地区均有流行，流行水温为22～28℃。E.2鲫造血器官坏死病典型临床症状注1：鲫、金鱼感染鲤疱疹病毒II后，表现为体色发黑，体表广泛性充血或出血，鳃丝肿胀或鳃血管易破裂出血，解剖后可见内脏肿大充血，鳔壁出现点状或斑块状充血等症状。注2：图来源：欧阳敏、田飞焱等图E.1附录F(资料性)传染性脾肾坏死病简介及典型临床症状F.1传染性脾肾坏死病简介传染性脾肾坏死病（InfectiousspleenandkidneynecrosisvirusDisease，ISKNVD）是由传染性脾肾坏死病毒（Infectiousspleenandkidneynecrosisvirus）引起的，导致鳜、鲈等鱼类死亡的传染性病毒病。流行时间为5-10月，以7-9月为高峰期，流行水温为25～34℃。F.2传染性脾肾坏死病典型临床症状注1：鳜、鲈感染传染性脾肾坏死病毒后，表现为体色发黑，贫血症状明显，头、鳃盖、下颌、眼眶、胸鳍和腹鳍基部、腹部肝区和尾鳍有出血点，肝肿大、灰白或土灰色、或白灰相间呈花斑状、有小出血点，肾肿大、充血、糜烂、暗红色，脾肿大、糜烂、紫黑色。注2：图来源：欧阳敏、田飞焱等图F.1附录G(资料性)鲤浮肿病简介及典型临床症状G.1鲤浮肿病简介鲤浮肿病（Carpedemavirusdiease,CEVD）是由一种痘病毒感染鲤、锦鲤引起的高度传染性流行病。我国在2016年首次报道发生CEVD，现已扩散到我国约一半的省份，该病属于新发疫病，