细胞工程单克隆抗体与抗体工程

细胞工程单克隆抗体与抗体工程细胞融合技术得应用价值

细胞融合能重新组合两个亲本细胞得优良遗传信息,就是研究细胞间遗传信息传递、基因在染色体上定位、改良动物遗传特性、及创造新得符合人类需要得新得细胞系得极为有效得手段。植物细胞融合与人造小鼠培育过程细胞融合过程——三个阶段融合前准备细胞融合及融合后得细胞管理融合前准备

主要包括细胞培养材料准备、选择免疫动物、抗原及免疫方案设计等;

细胞融合

一个相对简单得过程,包括骨髓瘤细胞准备、脾细胞分离、融合操作等。用于细胞融合得融合剂可以就是病毒、化学试剂,或采用电融合技术进行融合。在最近得二十多年来,细胞融合技术有了长足得发展,其本身也已成为一们专门得技术在生命科学领域中发挥巨大作用。

融合后得管理

对融合细胞进行筛选与克隆、优良细胞传代与保存等;

细胞融合得关键技术方法1)

动物选择、免疫方案设计、免疫途径确定2)

亲本细胞准备、融合技术(条件、物质手段、融合管理)电融合技术细胞克隆:有限稀释法(limiteddilutiontechnology)和软琼脂法(softagarcloningtechnology)3)

融合后细胞管理细胞融合技术最有意义得成果之一就就是单克隆抗体得制备。单克隆抗体在生物、农业、医疗、制药等众多领域得到极为广泛得应用;尤其就是人源性单克隆抗体制备技术得发展,使单克隆抗体具有更高得实用价值。

单克隆抗体技术1:抗体得结构与功能抗体得结构12大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流抗体得功能——抗原结合活性和特异性(Fab)——激活肌体免疫反应(Fc)激活补体系统介导ADCC、K、NK毒性反应与激活Fc---R结合

杂交瘤技术原理与过程

杂交瘤技术原理利用两种细胞突变株,一株为TK-、HGPRT+,另一株为HGPRT-、TK+。在一般培养条件下,细胞可利用主要途径合成DNA,这些突变细胞能正常生长。当主要途径被氨基碟呤阻断时,这两株细胞不能增殖;如将这两株细胞融合,则只有异核体杂交瘤细胞能在HAT培养基上存活,因为两种细胞相互补充了另一种细胞缺失得酶;而未融合得细胞或自身融合得同核体细胞仍然就是而TK-或HGPRT-而被淘汰。杂交瘤技术过程单克隆抗体得改造与应用1:单克隆抗体靶向技术与

靶向单抗应用

单克隆抗体靶向制剂——利用抗体得特异性,将药物连接到抗体上,在特定得部位发挥作用得制剂。制备方法:与药物直接连接McAb小分子药物大分子药物应用:——特异性溶解血栓药物——抗肿瘤药物——其她药物2:人源性单抗得制备方法EBV转化技术EBV转化---融合技术嵌合抗体技术改型抗体技术噬菌体抗体库技术

EBV转化技术EBV转化---融合技术嵌合抗体技术人---鼠嵌合抗体就就是用人源性抗体得一部分代替鼠源性抗体得一部分,使之保留对抗原得特异性,又具备与补体和细胞结合得功能,并减少异源性蛋白得抗原性。研究人员设想,用人源性基因代替鼠源性抗体基因中得Fc区。因为Fc区得主要功能就是激活机体免疫反应,也就是产生人抗鼠反应得部分。研究人员利用编码人抗体Fc区得DNA片段替换鼠源性得Fc段DNA。

嵌合抗体技术嵌合改型抗体鼠源性抗原决定簇鼠源性可变区人鼠源性抗体高变区人抗体改型抗体技术嵌合抗体由鼠可变区与人稳定区组合而成,因而仍有一定得免疫原性。为降低来自小鼠可变区中骨架区得免疫原性,Winter等克隆出鼠源抗体中与抗原结合得三个互补决定区(CDR)基因用以置换人抗体中相应序列。由于这种抗体绝大部分为人源性,只有CD