《现代生物化学实验技术》课程教学大纲

ADDINCNKISM.UserStyle《现代生物化学实验技术》课程教学大纲（实验课程）一、课程基本信息课程号1223S00027开课单位生命科学学院课程名称（中文）现代生物化学实验技术（英文）ModernBiochemistryExperimentalTechnique课程性质选修考核类型考查课程学分2课程学时68课程类别专业拓展课适用专业（类）生物技术专业、生物科学专业、生物信息学专业二、课程描述及目标（一）课程简介生物化学是生命的化学，是研究生命的化学组成和生命过程中化学变化规律的科学，是生命科学体系的重要基础课，生物化学为生物学科其他分支学科提供重要的理论基础和实验技术。现代生物化学实验技术是学习了生物化学和生物化学实验课的基础上开设的重要专业实验课。根据学生的生物化学基础，生物化学的发展现状，实际拥有的实验条件，再结合学生深造和就业所需，本课程拟开设包括蛋白质提取技术、离心技术、可见分光光度技术、紫外分光光度技术、离子交换层析技术、亲和层析技术、Western-blotting技术、酶动力学参数分析技术等的综合性实验。（二）教学目标现代生物化学实验技术是生命学科许多领域如分子生物学、生物工程、食品、医药等研究的重要技术手段。本实验课均为综合性实验，每个综合性实验包括多种生化技术，在强化学生的动手能力的同时，更着重培养学生综合运用所学知识解决实际问题的能力。本课程要求学生掌握重要的生物化学原理及技术，包括蛋白质提取技术、紫外-可见分光光度技术、离子交换层析技术、高效液相色谱技术、亲和层析技术、Western-blotting技术、酶动力学参数分析技术等，达到如下教学目标：课程目标1：蛋白质和酶的提取技术。课程目标2：紫外-可见分光光度技术。课程目标3：离子交换层析技术。课程目标4：亲和层析技术。课程目标5：蛋白质电泳技术。课程目标6：高效液相色谱技术。课程目标7：Western-blotting技术。课程目标8：酶动力学参数分析技术。课程目标9：实验设计能力、数据作图与分析能力、批判性思维能力、团结协作能力。三、课程目标对毕业要求的支撑关系毕业要求指标点课程目标1：掌握扎实的生物科学与生物技术的基础理论、基本知识和基本技能，熟悉生物技术及其产业的相关方针、政策、法规。课程目标1-92：具有综合运用所掌握的理论知识和技能，从事生物技术、生物工程及其相关领域科学研究的能力。课程目标1-93：具备良好的专业素质，受到严格的科学思维训练，有求实创新的精神、批判性思维和可持续发展理念。课程目标1-9四、教学方式与方法本课程采用的教学方式有：讲授式、重点难点归纳式、讨论式，综合运用多媒体课件、实验视频、实验操作指导等方式。教学方法：多媒体教学与传统板书相结合、集中示范与个别指导相结合、基础理论与实践技术相结合、老师帮助与学生自己动手相结合。课前进行实验预习、课堂结合教师讲解进行实验操作，掌握实验技能，课后对实验结果、实验数据汇总分析，完成实验报告。每一实验后的思考题，帮助学生巩固课堂知识，加深对问题的理解和掌握。五、教学重点与难点（一）教学重点本课程的重点和难点是各项生化技术的原理及应用这些原理所进行的操作以及对实验结果的分析。生物大分子制备部分包括蛋白质和酶的基本性质、粗分离、纯化的一般原理和技术；电泳部分主要是聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理、鉴定蛋白质纯度及测定分子量的应用；柱层析包括常用的离子交换剂的性质、特点、应用方法，柱层析的操作和核酸蛋白检测仪的使用；蛋白质的Western-blotting包括目的蛋白的提取、亲和层析纯化、蛋白质的电泳、转移及显色。高效液相色谱方法的建立和运行；酶动力学研究包括酶的提取、纯化，进一步掌握柱层析操作，掌握线性梯度洗脱方法，学习酶的重要参数米氏常数Km和最大反应速度Vmax的测定。（二）教学难点本课程的教学难点是指导学生对综合性实验结果的正确规范表述及分析。如柱层析纯化蛋白质层析图谱的绘制，纯化总表的填写，蛋白质相对分子质量的计算，Western-blotting的原理及影响结果的因素分析，酶促反应进程曲线测定条件选择及双倒数作图法中对底物浓度的选择等。六、实验内容、基本要求与学时分配序号实验项目名称实验内容与要求学时类型对应课程目标1鸡卵类黏蛋白的提取纯化及性质测定掌握有机溶剂沉淀杂蛋白和分级沉淀目标蛋白的方法；掌握透析袋及透析的操作；掌握DEAE-Cellulose纯化蛋白的方法；掌握蛋白质浓度测定的方法；理解并掌握BAEE法测定CHOM活性的方法；掌握并会熟练操作SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）的方法及测定蛋白质分子量的技术原理。28综合性、设计性课程目标1-62大肠杆菌重组蛋白纯化及蛋白质免疫印迹检测掌握Western-blotting技术的原理、操作及应用，包括蛋白的提取、SDS、转移、显色。理解亲和层析的原理，掌握组氨酸标签蛋白的纯化流程。12综合性、设计性课程目标6-83HPLC检测保健品CoQ10的含量掌握超临界萃取技术和高效液相色谱技术12综合性、设计性课程目标6和94蔗糖酶的提取纯化及酶动力学研究掌握蔗糖酶的提取和粗酶液制备方法、理解酶反应进程曲线条件确定的方法、掌握酶的动力学的测定方法和动力学参数的计算。16综合性、设计性课程目标1-4,9合计68注：实验要求包括必修、选修；实验类型包括“验证性”、“设计性”、“综合性”等。七、学业评价和课程考核（一）考核类型：考试√考查（二）考核方式：√实验报告实验作品√其它：实验操作（填写具体考核方式）（三）成绩评定：考核依据建议分值（百分比）考核/评价细则对应课程目标平时考核出勤10%全勤满分，旷课三次0分。课程目标1-9作业40%按时提交实验报告，视完成情况给分。课程目标1-9表现10%根据听讲、操作、实验完成、值日等情况给分。课程目标1-9期末考核40%根据实验操作的规范、完成速度、结果的正确性等给分。课程目标1-9八、课程目标达成评价课程目标的实际达成效果计算方式如下，达成值越高，教学效果越好。课程目标达成度毕业要求指标点达成度九、教材与教学参考书（一）教材《生物化学实验教程》，武金霞，科学出版社，2012年，第一