2025年外研版选择性必修3生物上册月考试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年外研版选择性必修3生物上册月考试卷207考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共5题，共10分)1、利用基因重组技术制造的全新致病菌比一般生物武器的危害性大；其原因是（）

①人类从来没有接触过这种致病菌②无药可医。

③具有某种易感基因的民族容易感染，而施放国的人却不易感染A.①B.②C.②③D.①②2、下列属于卵裂期特点的是（）A.细胞分裂方式为减数分裂B.胚胎总体积增加C.胚胎总DNA增加D.胚胎有机物总量增加3、某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是（）A.培养基分装到培养皿后进行灭菌B.转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C.接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D.微生物培养过程中每隔三天或一周观察一次4、将运动发酵单胞菌的丙酮酸脱羧酶基因和乙醇脱氢酶基因导入大肠杆菌，构建新的乙醇合成途径，显著提高了产乙醇效率。在此过程中A.只有获取目的基因这一步才可能利用PCR技术B.根据是否产生乙醇筛选含有质粒的大肠杆菌C.可通过测定酶活性检测目的基因的表达水平D.产乙醇重组大肠杆菌的无氧呼吸没有变化5、慢性病人常出现白蛋白值偏低的状况，缺乏白蛋白的病人容易出现水肿，临床上对白蛋白需求量很大。下图是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图，下列说法错误的是（）

A.已知白蛋白基因的碱基序列，可通过人工合成的方法获取目的基因B.过程③得到的表达载体包括目的基因、乳腺蛋白基因的启动子、终止子、标记基因C.过程⑤之前需选取滋养层细胞进行DNA分析、性别鉴定等D.进行胚胎移植之前需用促性腺激素和孕激素处理代孕奶山羊C评卷人得分二、多选题(共8题，共16分)6、下图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRT-）；在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA，无法生长。下列叙述正确的是（）

A.可用灭活病毒诱导细胞融合B.未融合的细胞和融合的同种核细胞都能在HAT培养液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的选择透过性是细胞融合的基础7、用XhoI和SalI两种限制性内切核酸酶分别单独酶切同一种DNA片段；酶切位点及酶切产物的琼脂糖凝胶电泳结果如图。以下叙述错误的是（）

A.XhoI和SalI两种酶识别的核糖核苷酸序列不同B.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物C.泳道②中的酶切产物可用DNA连接酶拼接成一个重组DNA分子D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA8、B基因存在于水稻基因组中；其仅在体细胞（2n）和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验，培育转基因植株。以下鉴定筛选转基因植株的方式正确的是（）

A.将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交B.以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交C.以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交D.检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光9、蛋白质工程就是通过对蛋白质化学、蛋白质晶体学和蛋白质动力学的研究，获得有关蛋白质理化特性和分子特性的信息，在此基础上对编码蛋白质的基因进行有目的的设计和改造，通过基因工程技术获得可以表达蛋白质的转基因生物，中华鲟是一种濒危野生动物。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境。下列有关说法错误的是（）A.蛋白质工程可定向改变蛋白质分子的结构B.改造蛋白质可通过改变基因结构实现C.改造后的中华鲟和现有中华鲟不再是同一物种D.改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质10、聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如下。下列叙述错误的是（）

A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上B.步骤③所用的培养基中营养物质浓度越高，对嗜盐细菌的生长越有利C.步骤④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株D.挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量11、下列关于基因工程中几种工具的叙述，正确的是（）A.限制酶可水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键B.DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接起来C.DNA聚合酶能够从核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因12、体细胞核移植胚胎组的蛋白甲基化可导致克隆效率降低；毛壳素是组蛋白H3K9甲基化转移酶SUV39H1/2的特异性化学抑制剂，使用毛壳素处理供体细胞，可降低SUV39H1/2在供体细胞和核移植胚胎中的表达水平，提高猪胚胎的发育率，如图是利用不同浓度毛壳素处理对猪胚胎细胞核移植技术成功率的实验流程示意图，下列叙述正确的是（）

A.克隆猪的遗传物质来自供体细胞和代孕母猪B.过程①使用的培养液需添加动物血清或血浆C.过程④采用灭活的病毒处理以促进精卵结合D.过程⑤成功与否与代孕母猪的生理状态有关13、黑尿症是一种单基因遗传病；该病在人群中的发病率大约为百万分之一。患者因缺乏尿黑酸氧化酶，使得尿黑酸不能被氧化分解而导致尿液呈黑色。下图是该遗传病的某家系图。下列说法正确的是（）

A.该实例说明基因通过控制蛋白质的合成而直接控制性状B.控制黑尿症的基因为隐性基因，且位于X染色体上C.Ⅱ4和Ⅱ5婚配，所生男孩患黑尿症的概率约为1/3003D.若用该致病基因制作的探针检测，则Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定会出现杂交带评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)14、一般包括______、______等技术15、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？________16、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。17、获取目的基因的方法______、______、______18、基因工程取得了突飞猛进的发展。_____、_____等技术的应用不仅使生命科学的研究发生了前所未有的变化，而且在实际应用领域，如____、_____、_____、______等方面也展示出美好的应用前景。抗虫棉中的抗虫基因来自_____，抗虫基因作物的使用，不仅减少了_____，降低了____，而且还减少了_____。19、随着现代科技的发展，有些新的致病微生物被发现，它们的危害可能更大。通过互联网或图书馆搜集近年发现的致病微生物的相关资料，分析和归纳这些资料__________。评卷人得分四、实验题(共4题，共16分)20、金黄色葡萄球菌是一种常见的食源性致病微生物；该菌具耐高盐的特性。哥伦比亚血平板含无菌脱纤维羊血，金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。如图为检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程，请回答：

（1）从功能上看7．5％NaCl（高盐）肉汤培养基属于________培养基，用该培养基对金黄色葡萄球菌进行培养的主要目的是提高___________。

（2）从培养过程分析，振荡培养可以____________________________；更有利于微生物的生长。

（3）在配制哥伦比亚血平板时，添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌________（填“之前”或“之后”），原因是________________________。

（4）图中血平板上的接种方法是________________。经规范操作并多次重复，血平板上均出现__________的菌落，初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌。但牛奶供应商仍认为此菌并非牛奶所携带，因此需要对本次操作进行完善，具体方案是________________。21、化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业、用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。碳源细胞干重（g/L）S产量（g/L）葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.18

回答下列问题。

(1)通常在实验室分离纯化培养微生物时，需要设置对照实验，如果自变量设为培养基不同，则是检测____________________________。如果自变量设为_________________；则是检测培养基灭菌是否彻底。

(2)由实验结果可知，菌株C生长的最适碳源是______；用菌株C生产S的最适碳源是______。菌株C的生长除需要碳源外，还需要______（答出2点即可）等营养物质。

(3)由实验结果可知，碳源为淀粉时菌株C不能生长，其根本原因是______。

(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______。

(5)为测定菌株C的含量，常用_________________进行接种，统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，原因是_____________。22、两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴；这是我国的研究成果。一年后5只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆猴的流程，回答下列问题：

(1)在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体细胞核移植的原因是_____。

(2)科学家首先将采集的卵母细胞培养至____期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除____。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是_____。形成的重构胚具有_____的能力。体外培养重构胚时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括_____（答出2点）。

(3)我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的BMAL1基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型_____（填“相同”“不相同”或“不一定相同”）。为验证上述5只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应为_____。在研究人类疾病致病机制、研发人类新药时，选用“模型猴”更优于“模型鼠”的原因是_____。23、下图是某同学设计的传统发酵装置示意图。比较传统发酵技术与现代发酵工程；回答下列问题：

(1)传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒的原理是______。请设计简单的实验验证发酵过程中产生了酒精（不考虑发酵液中葡萄糖的影响），写出实验思路并预期实验结果与结论______。

(2)传统发酵技术一般以天然存在的______发酵，品质不一，现代工业发酵一般为单一菌种发酵，品质较高。自制的果酒并非商品意义上的产品，在实际生产中还需要经过______装瓶等过程才能获得成品酒。

(3)若要测定发酵罐中酵母菌的种群密度，取10mL发酵液稀释1000倍，利用25×16的血细胞计数板，观察并统计到中方格中的酵母菌平均数为9个，则每毫升发酵液中酵母菌数量约是______个。

(4)利用上图中装置酿酒与酿醋时，操作上的最主要的区别是______。评卷人得分五、综合题(共4题，共20分)24、启动子可分为组成型启动子和诱导型启动子。35S启动子是组成型启动子，能够持续、高效地启动目的基因在植物各种组织中表达，但往往也会阻碍植物的生长发育；Rd29A启动子是一种逆境诱导型启动子。沙冬青脱水素基因（AmDHN基因）能使植株具有较强的抗旱作用。科研人员构建Rd29A启动子驱动AmDHN基因表达的载体，过程如下图。再利用农杆菌转化法转化“敖汉苜蓿”培育耐旱新品种，以期在干旱地区发展苜蓿产业。请回答下列问题：。限制酶BclⅠSacⅠBamHⅠPstⅠSmaⅠ识别序列切割位点T↓GATCAGAGCT↓CG↓GATCCCTGCA↓GCCC↓GGG

注：neor是新霉素抗性基因；aadA是链霉素抗性基因。

（1）Rd29A启动子的基本组成单位是_________；能识别启动子的酶是_________。

（2）科研人员扩增Rd29A启动子所设计的引物如下，根据引物的碱基序列及限制酶的识别序列分析，构建载体2时选用的限制酶是_________。

上游引物P1:5'-GACCCGGGTTTCCAAAGATTTTTTTC-3'

下游引物P2:5'-GAGAGCTCTGGGGTTTTGCTTTTGAATGT-3'

（3）选用_________酶切割载体1、2，构建载体3的成功率较高。研究人员在保存目的基因AmDHN时，构建载体4导入大肠杆菌的优点有_________。

①稳定保存②准确复制③快速表达④方便取用。

（4）载体5需先转入_________后再转化苜蓿，转化后应在培养基中添加_________筛选转化成功的愈伤组织。

（5）为检测转基因苜蓿中AmDHN基因的转录水平；挑选10株转基因植株，利用自来水和20%PEG（模拟干旱条件）处理8h，提取RNA通过RT-PCR检测AmDHN基因和MtActin基因（一种骨架蛋白基因）的表达水平，其结果如下图：

①选择MtActin基因转录水平作为参照的依据是MtActin基因在各种细胞中表达相对恒定。

②自来水处理和20%PEG条件下的AmDHN基因表达水平的差异说明_________。25、根据基因工程的有关知识；回答下列问题：

(1)限制性内切核酸酶切割DNA分子后产生的片段，其末端类型有__________和___________。

(2)下图这种限制性内切核酸酶的切点在__________，形成__________个黏性末端。由图可知限制性内切核酸酶识别特点是___________。

(3)按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两类，即___________DNA连接酶和___________DNA连接酶。

(4)限制酶EcoRI来自大肠杆菌却不切割细菌本身的DNA，可能的原因是___________；用限制酶EcoRI处理烟草花叶病毒的核酸，没有发现产物，理由是__________。

(5)基因工程中除质粒外，__________和__________也可作为载体。26、第一代DNA测序技术是由桑格等科学家发明的；又称为链终止法测序，科学家用该技术测定了噬菌体X174的基因组序列，操作流程如下图所示，回答下列问题：

(1)将碎片化的DNA片段连接到质粒载体中，需要用到______、_______等工具酶。

(2)为保证放射自显影观察条带，应选用_______（填“18O”或“32P”）标记ddNTP。

(3)在凝胶电泳中DNA分子的迁移速率与DNA分子的_______、_____有关。

(4)ddNTP法循环测序中，用到PCR技术，该技术的原理是______，加入ddNTP会使PCR反应终止的原因可能是______。27、硒作为生物体内的微量元素；具有抗氧化；增强抵抗力等功能，是生物体内不可或缺的。研究人员以从实验室冷藏的馒头上提取的酵母作为出发菌株，利用紫外线进行物理诱变以筛选富硒能力强的菌株。回答下列问题：

(1)酵母菌细胞呼吸的类型属于___________型。研究人员挑选馒头酵母接种到30mL选择培养基的锥形瓶中，培养基中需要添加的物质主要有____________。将锥形瓶在180r/min的恒温摇床上培养，摇床培养有助于加速培养液中酵母菌的繁殖，原因是___________（答出一点即可）；摇床培养后可添加，以进行梯度稀释获得酵母菌悬液。

(2)将制成的酵母菌悬液用紫外线诱变后，实验人员采用梯度稀释法对诱变菌种稀释105倍，再分别将0.1mL稀释液涂布在3个牛肉膏蛋白陈培养基上，三个平板上统计的菌落数分别为251，265和276，则原酵母菌悬液中每10mL含有的酵母菌个数为____________。为了计算紫外线诱变的致死率，应设计对照实验，对照实验的处理方式为___________。

(3)富硒酵母是制作果酒的优良菌株，在制作果酒的过程中密封不严会导致果酒变酸，其原因是___________；工业发酵时，培养富硒酵母的培养基中还需要添加一定量的抗生素，以___________。参考答案一、选择题(共5题，共10分)1、D【分析】【分析】

生物武器种类：包括致病菌；病毒、生化毒剂；以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。生物武器的特点：1、单位面积效应大；2、有特定的伤害对象；3、具有传染性；4、危害时间久；5、不易被发现和鉴定；6、使用者本身易受伤害；7、生物武器造价低，技术难度不大，隐秘性强，可以在任何地方研制和生产。

【详解】

①人类从来没有接触过这种病菌；可以让大批被感染者突然发病，①正确；

②由于从来没有接触过这种病菌；故该病无药可医，②正确；

③生物武器使用时不易控制；使用不当可危害本方安全，故施放国的人也会感染，③错误，D正确。

故选D。2、C【分析】【分析】

胚胎发育过程：

（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；

（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）；

（3）囊胚：细胞开始分化；其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔，囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；

（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层；下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔，细胞分化在胚胎期达到最大限度。

【详解】

A；卵裂期细胞分裂方式为有丝分裂；A错误；

B；胚胎总体积不变甚至略微减小；B错误；

C；随着细胞分裂；细胞数目增多，每个细胞的DNA含量不变，但胚胎总DNA增加，C正确；

D；卵裂期没有吸收外来的有机物；消耗的是细胞中原有的有机物，因此，胚胎有机物总量减少，D错误。

故选C。

【点睛】3、B【分析】【分析】

1；微生物的筛选与分离过程一般是：样品取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养（或划线培养）和筛选菌株。

2；微生物培养的关键是防止杂菌的污染；无菌技术的主要内容：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

【详解】

A；培养基应该先灭菌；然后再分装到培养皿中，A错误；

B；转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线；B正确；

C；接种后的培养皿须放在恒温培养箱中培养；C错误；

D；微生物培养过程中观察的间隔时间不能太长；适宜条件下一般不超过24h，D错误。

故选B。4、C【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。

【详解】

A；PCR技术可用于目的基因的获取、扩增目的基因以及目的基因的检测等；A错误；

B；分析题意可知；本技术结果是提高乙醇的产率，即未转基因之前也可产生乙醇，故不能根据是否产生乙醇筛选含有质粒的大肠杆菌，B错误；

C；分析题意；本技术是将运动发酵单胞菌的丙酮酸脱羧酶基因和乙醇脱氢酶基因导入大肠杆菌，构建新的乙醇合成途径，而基因的表达产物通常是蛋白质（酶的本质多数是蛋白质），故可通过测定酶活性检测目的基因的表达水平，C正确；

D；结合题意可知；经转基因技术后显著提高了产乙醇效率，乙醇是无氧呼吸的产物，故推测产乙醇重组大肠杆菌的无氧呼吸增强，D错误。

故选C。5、D【分析】【分析】

分析题图：图示是利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备药用白蛋白的流程图；其中①表示卵细胞的采集和培养；②表示精子的采集和获能；③表示基因表达载体的构建；④表示将目的基因导入受体细胞；⑤表示胚胎移植。

【详解】

A；已知白蛋白基因的碱基序列；可通过PCR技术等人工合成的方法获取目的基因，A正确；

B；③表示基因表达载体的构建；得到的表达载体包括目的基因、乳腺蛋白基因的启动子、终止子、标记基因，B正确；

C；过程⑤表示胚胎移植；移植之前需选取滋养层细胞进行DNA分析、性别鉴定等，C正确；

D；促性腺激素可促进排卵；进行胚胎移植之前不需要对代孕奶山羊C进行促排卵，因此不需要对其用促性腺激素处理，D错误。

故选D。二、多选题(共8题，共16分)6、A:C【分析】【分析】

（1）动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；细胞的增殖；诱导手段有电激、聚乙二醇、灭活的病毒等，结果产生杂交细胞，主要用于制备单克隆抗体。

（2）单克隆抗体制备的原理包括：①免疫理：B淋巴细胞能产生特异性抗体；②细胞融合原理：利用病毒对宿主细胞的穿透性使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合；③动物细胞培养技术：对杂交瘤细胞进行体内；体外培养。

（3）制备单克隆抗体过程中的几种细胞：①免疫B细胞（浆细胞）：能产生单一抗体；但不能无限增殖；②骨髓瘤细胞：能无限增殖，但不能产生抗体；③杂交瘤细胞：既能产生单一抗体，又能在体外培养条件下无限增殖。

【详解】

A；诱导动物细胞融合的方法有电激、聚乙二醇、灭活的病毒（如灭活的仙台病毒）等；A正确；

B；两两融合的细胞包括免疫B细胞与免疫B细胞融合的具有同种核的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的具有同种核的细胞、免疫B细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞；骨髓瘤细胞虽然能无限增殖，但缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，免疫B细胞虽然有次黄嘌呤磷酸核糖转移酶，但不具有无限增殖的本领，所以在HAT筛选培养液中，两两融合的具有同种核的细胞都无法生长，只有杂交瘤细胞才能生长，B错误；

C；因每个免疫B细胞只分泌一种特异性抗体；因此在HAT筛选培养液中筛选出来的众多的杂交瘤细胞所分泌的抗体，不一定都是人类所需要的，还需要进一步通过专一抗体阳性检测，把能分泌人类所需要抗体的杂交瘤细胞筛选出来，C正确；

D；动物细胞融合是以细胞膜的流动性为基础的；D错误。

故选AC。

【点睛】7、A:D【分析】【分析】

1；DNA一般是双螺旋结构；限制酶可以识别特定的脱氧核苷酸序列；并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割。

2；图1中SaLl有3个识别位点；能将DNA片段切成4段，Xhol有2个识别位点，能将DNA片段切成3段。

【详解】

A；限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列；不同的限制酶能识别不同的脱氧核苷酸序列，A错误；

B；Sall将DNA片段切成4段；Xhol将DNA片段切成3段，根据电泳结果可知泳道①为Sall，泳道②为XhoⅠ，B正确；

C；同种限制酶切割出的DNA片段；具有相同的粘性末端，再用DNA连接酶进行连接，可以构成重组DNA，C正确；

D；限制酶切割双链DNA；酶切后的DNA片段仍然是双链DNA，D错误。

故选AD。8、B:C:D【分析】【分析】

分析题图：图中①表示将目的基因导入农杆菌；②表示采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞，之后再采用植物组织培养技术获得转基因植株。

【详解】

A；探针是指用放射性同位素（或荧光分子）标记的含有目的基因DNA片段；因此要以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针，而不是将随机断裂的B基因片段制备成探针，A错误；

B；可用DNA分子杂交技术；即以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交，B正确；

C；用标记的目的基因作探针与mRNA杂交；即以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交，C正确；

D；检测目的基因是否翻译成蛋白质；由图可知B基因与Luc基因连接形成B-Luc融合基因，因此可通过Luc基因表达，检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光，D正确。

故选BCD。9、C:D【分析】【分析】

蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。也就是说，蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程，是包含多学科的综合科技工程领域。

基本流程：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相对应的脱氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【详解】

A；蛋白质工程可以通过改造基因来定向改变蛋白质分子的结构；A正确；

B；因为基因指导蛋白质的合成；所以改造蛋白质可通过改变基因结构实现，B正确；

C；改造后的中华鲟具有新的性状；但其和现有中华鲟之间没有生殖隔离，仍是同一物种，C错误；

D；蛋白质工程改造的是基因；可以遗传给子代，因此改造后的中华鲟的后代也具有改造的蛋白质，D错误。

故选CD。10、A:B:C【分析】【分析】

聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯；要从某咸水湖中寻找生产PHA菌种，首先要进行目的菌株的筛选，可将咸湖水接种在含盐量较高的选择培养基上，筛选培养得到嗜盐细菌；然后，从选择培养基上挑选多个单菌落分别进行扩大培养，扩大培养的培养基是液体培养基；最后检测嗜盐细菌的数目和PHA的产量，选择PHA产量最高的嗜盐细菌作为目的菌株。

【详解】

A；PHA是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯；要筛选嗜盐细菌，步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；

B；步骤③培养基浓度过高；会导致菌体失水死亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误；

C；步骤④扩大培养应选用液体培养基；液体培养基中无需加入琼脂，C错误；

D；要挑选高产聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐菌；挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量，进行比较，D正确。

故选ABC。11、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶可识别并在特定位置水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键；A正确；

B；DNA连接酶可以连接黏性末端相同；即末端碱基互补的两个DNA片段之间的磷酸二酯键，B正确；

C；DNA聚合酶只能从核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C错误；

D；标记基因可将含有目的基因的细胞筛选出来；故作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因，D正确。

故选ABD。12、B:D【分析】【分析】

细胞核移植是指通过显微操作将一个细胞的细胞核移植到一个去核的卵母细胞内的技术过程。体细胞核移植技术包括核供体细胞与受体细胞的准备；细胞核移植、重构胚的融合、激活、培养和移植等过程。

【详解】

A；克隆猪的细胞核遗传物质来自提供细胞核的胎猪成纤维细胞；克隆猪的细胞质遗传物质来自去核的卵母细胞，A错误；

B；过程①不仅需要在培养液中添加毛壳素；还需要在培养液中添加动物血清或者血浆，提供一个类似生物体内的环境，B正确；

C；过程④使用显微操作技术使胎猪成纤维细胞与去核卵母细胞融合；C错误；

D；过程⑤是胚胎移植；胚胎移植时供体与受体的生理状态要相同，否则无法成功妊娠，D正确。

故选BD。13、C:D【分析】【分析】

单基因遗传病指的是受一对等位基因控制的遗传病；可用DNA分子杂交技术进行基因检测进而鉴定某胚胎是否携带有某致病基因；DNA分子杂交技术利用放射性同位素（或荧光分子）标记的致病基因片段作为基因探针，通过碱基互补配对原则与待测分子进行配对，能配对的说明某胚胎携带某致病基因存在。

【详解】

A；该实例中；患者因缺乏尿黑酸氧化酶，使得尿黑酸不能被氧化分解而导致尿液呈黑色，即基因通过控制酶的合成，进而控制代谢过程，从而间接控制生物的性状，A错误；

B、遗传家系谱图中，不患黑尿症的Ⅰ1与Ⅰ2生下了患黑尿症的女儿Ⅱ3；确定黑尿症属于常染色体隐性遗传，B错误；

C、假设控制该病的基因为Aa，该病在人群中的发病率约为1/1000000，即aa概率为1/1000000，则a占1/1000，A占999/1000，Aa的概率为2×1/1000×999/1000=1998/1000000，因此人群中正常人为杂合子Aa的概率为（2×1/1000×999/1000）÷（2×1/1000×999/1000+999/1000×999/1000）=2/1001，Ⅱ4的基因型为1/3AA或2/3Aa，Ⅱ5为正常人，为杂合子的概率为2/1001，Ⅱ4和Ⅱ5婚配；所生男孩患黑尿症的概率约为2/3×2/1001×1/4=1/3003，C正确；

D、由前面的分析可知，Ⅰ1和Ⅰ2为杂合子，Ⅱ3为患者，均含有该致病基因，若用该致病基因制作的探针检测，则Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ3一定会出现杂交带；D正确。

故选CD。

【点睛】三、填空题(共6题，共12分)14、略

【解析】①.动物细胞培养和核移植技术、②.动物细胞融合与单克隆抗体15、略

【解析】平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠。将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，又可避免培养基中的水分过快挥发16、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因文库人工合成PCR技术18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】基因转移基因扩增医药卫生农牧业、食品工业环境保护苏云金杆菌农药的用量生产成本农药对环境的污染。19、略

【分析】【详解】

致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，从一个宿主转移到另一个宿主，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。同时近年来由于温室效应加剧，也会使致病微生物的繁殖周期变短，可能会使危害性更大，因此我们需要积极开展科学研究，掌握防范的措施和防范，实现最好的防护，目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。【解析】致病微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，包括病毒、细菌、真菌、原生动物和蠕虫等，其中以细菌和病毒的危害性最大。致病微生物可以通过空气、体液、食品、水等传播途径，致病微生物由于看不见、摸不着，难于防范，且存在传染性，因而危害极大。目前对致病微生物最好的防护措施还是疫苗的研究和使用。四、实验题(共4题，共16分)20、略

【分析】【分析】

1；选择培养基：人为提供有利于目的菌株生长的条件；同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基。

2；根据题意分析；金黄色葡萄球菌可破坏哥伦比亚血平板上菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。

【详解】

（1）金黄色葡萄球菌具耐高盐的特性；可用7.5％NaCl（高盐）肉汤培养基进行选择培养，可进一步提高金黄色葡萄球菌的浓度。

（2）振荡培养的目的是使微生物与营养物质充分接触，增加O2浓度；更有利于微生物生长。

（3）因为无菌脱纤维羊血上有红细胞；而高温会破坏红细胞。故添加无菌脱纤维羊血是在高压蒸汽灭菌之后。

（4）根据图中最右边的图示可知；接种方法是平板划线法。已知金黄色葡萄球菌可破坏菌落周围的红细胞，产生透明的溶血圈。故若要初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌，则血平板上要均出现周围出现透明溶血圈的菌落。本实验缺乏对照组，实验不完善，还需要设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组。

【点睛】

本题旨在考查学生理解选择培养基的原理和应用、平板划线法的使用要点，把握知识的内在联系并应用相关知识综合解决问题的能力。【解析】选择金黄色葡萄球菌的浓度使微生物与营养物质充分接触/增加O2之后防止高温破坏红细胞平板划线法周围出现透明溶血圈设置不加（鲜）牛奶但其他操作和培养条件均相同的对照组21、略

【分析】【分析】

微生物的接种方法包括稀释涂布平板法和平板划线法，二者都可以用于筛选单菌落，但是前者可以用于计数，后者不行。培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。微生物培养基需要为微生物繁殖提供碳源、氮源、水、无机盐等营养物质，此外还要满足微生物对特殊营养物质，pH和O2的需求。稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释；然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。利用稀释涂布平板法得到数值往往偏小，因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

【详解】

（1）在实验室分离纯化培养微生物时；常见的对照实验有两种，当用不同的培养基作为自变量进行对照实验时，常用来检测所配制的培养基是否具有选择作用，例如以牛肉膏蛋白胨培养基和以尿素为唯一氮源的培养基进行对照实验，可以后者筛选分解尿素的微生物，验证其起到选择培养基的作用；当用同一种培养基进行接种和不接种微生物的对照实验时，则可检验培养基灭菌是否合格，若未接种的空白培养基上生长出部分菌落，说明该培养基灭菌不合格。

（2）由实验结果可知；当碳源为葡萄糖时，菌株C的细胞干重最大，为3.12g/L，因此，菌株C生长的最适碳源是葡萄糖。当碳源为制糖废液时，S产量最大，为0.18g/L，因此菌株C生产S的最适碳源是制糖废液。

微生物生长所需的营养物质包括碳源；氮源、无机盐、水等。

（3）碳源为淀粉时菌株C细胞干重为0.01g/L；几乎不能生长，其直接原因是该菌细胞内不含有分解淀粉的酶，因此无法分解淀粉作为碳源，根本原因是菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

（4）若要探究生产S的最适制糖废液的浓度；则实验自变量为不同浓度的制糖废液，因变量为S产量，因此需要配制一系列不同浓度梯度的制糖废液为唯一碳源的培养基，接种菌株C，然后将其置于相同且适宜的环境中进行培养，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为生产S的最适碳源浓度。

（5）微生物接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法，后者可以用于计数，前者不行，在进行稀释涂布平板法计数微生物时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该计数方法得到的菌落数往往比活菌的实际数目少。【解析】(1)选择培养基是否具有选择性接种与不接种。

(2)葡萄糖制糖废液氮源；无机盐、水。

(3)菌株C缺少合成淀粉酶的基因。

(4)分别配制一系列不同浓度梯度的以制糖废液为唯一碳源的培养基；培养菌株C，其他条件相同且适宜，一段时间后，测定并比较不同浓度制糖废液中的S的产量，S产量最高时对应的制糖废液浓度即为生产S的最适碳源浓度。

(5)稀释涂布平板法当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落22、略

【分析】【分析】

1；克隆动物概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

2；原理：动物细胞核的全能性。

3；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低；恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。

【详解】

（1）体细胞分化程度高；表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度低，表现全能性容易，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。

（2）去核前应保证采集的卵母细胞在体外培养至减数分裂II中期；去核是指去除纺锤体—染色体复合物；核移植前需用灭活的仙台病毒对体细胞进行短暂处理，在此过程中，灭活的仙台病毒的作用是诱导体细胞与去核卵母细胞融合。目前动物细胞核移植技术普遍使用的去核方法是显微操作法，核移植的具体操作是将体细胞注入去核卵母细胞，从而得到重构胚，使其具有发育成完整个体的能力；体外培养重构胚时，培养液中除应含有细胞所需要的各种营养物质外，通常需要加入动物血清等一些天然成分，并将其置于含有95%空气和5%CO2混合气体的CO2培养箱中培养；培养过程中需要定期更换培养基，并创造无菌；无毒环境。胚胎移植前还需对代孕母猴进行同期发情处理，这样可以使移植的胚胎获得相同的生理环境，以保证胚胎能够继续发育。

（3）通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型相同，细胞质基因来源于受体细胞；为了验证这5只基因敲除猕猴是否存在昼夜节律紊乱问题，该实验的自变量是BMAL1基因是否敲除，因变量是是否出现睡眠紊乱症状。所以对照组的设置应为与克隆猕猴生理状态相同的正常的猕猴个体(或不存在BMAL1缺失）。在研究人类疾病致病机制、研发人类新药时，因为猴与人的亲缘关系更近，故选用“模型猴”更优于“模型鼠”。【解析】(1)胚胎细胞分化程度低；表现全能性相对容易。

(2)MⅡ纺锤体-染色体复合物诱导细胞融合发育成完整个体无菌；无毒的环境；温度、pH、渗透压，气体环境。

(3)相同与克隆猴生理状态相同的正常个体（或不存在BMAL基因缺失个体）猴与人的亲缘关系更近23、略

【分析】【分析】

参与果酒的制作的微生物主要是酵母菌；其新陈代谢的类型为异养兼性厌氧型，较适宜的发酵温度为18~30℃。在无氧的环境中酵母菌把糖类分解为酒精和二氧化碳。在果酒制作过程中检测发酵液是否含有酒精，取样后滴加适量酸性重铬酸钾溶液并振荡，若观察到溶液颜色的变化是橙色变成灰绿色，则说明发酵液中含有酒精。

【详解】

（1）传统发酵酿酒与现代工业发酵酿酒都是利用了酵母菌的无氧呼吸。酵母菌属于真核生物；其代谢类型是兼性厌氧型，在有氧条件下进行大量增殖，在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精。

橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与乙醇（即酒精）发生化学反应；变成灰绿色，该实验目的是验证发酵过程中产生了酒精，因此实验自变量是是否加入发酵液，因变量为溶液颜色变化。对照组中应加入酒精作为阳性对照。实验过程中应遵循等量原则；单一变量原则等，因此实验思路是：取两支试管分别标号A、B，A试管中各加入2ml发酵液，作为实验组，B试管中各加入2ml酒精，作为对照组，两试管中都加入适量酸性重铬酸钾，振荡后观察试管中颜色变化，AB两试管都变为灰绿色，即可验证发酵过程中产生了酒精。

（2）传统发酵技术一般不进行严格灭菌操作；因此其发酵菌种为天然的混合菌种。现代工业发酵酿制果酒不同于自制果酒，需要经过沉淀；过滤、灭菌、装瓶等过程才能获得成品酒。

（3）25×16型的血细胞计数板计算公式：酵母细胞个数/1mL=1个中方格中酵母菌数×25×10000×稀释倍数，因此该实验中每毫升发酵液中酵母菌数量=9×25×10000×1000=2.25×109。

（4）酿酒利用酵母菌的无氧呼吸，需要关闭充气口，酿醋利用醋酸菌，醋酸菌是需氧型微生物，因此需向充气孔中充入无菌空气。【解析】(1)酵母菌是兼性厌氧微生物；在无氧条件下将葡萄糖分解为酒精实验思路：取两支试管分别标号A；B，向A试管中各加入2ml发酵液，向B试管中各加入2ml酒精，向AB两试管各滴加0．5ml溶有0．1g重铬酸钾的浓硫酸溶液（或酸性重铬酸钾），并轻轻震荡，观察试管中溶液颜色变化。

(2)混合菌种沉淀；过滤、灭菌。

(3)2.25×109

(4)酿酒时需关闭充气口，酿醋时则需向充气孔中充入无菌空气五、综合题(共4题，共20分)24、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

1；目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

2；基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

3；将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

4；目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）启动子；终止子都是一段DNA序列；故其基本单位为脱氧核苷酸。启动子是RNA聚合酶识别和的结合位点，能启动基因的转录。

（2）分析引物的碱基序列和限制酶识别序列切割位点；引物5'端是SmaⅠ的识别序列CCCGGG和SacⅠ的识别序列GAGCTC，SmaI和SacI能识别并切割质粒，故构建载体2时选用的限制酶是SmaⅠ和SacⅠ。

（3）构建载体③时要将35S启动子切掉；将Rd29A启动子连接在T-DNA上，故由载体1和2可得，选用BclⅠ酶和SacⅠ酶成功率较高。构建载体4导入大肠杆菌的优点是可以稳定保存；准确复制、方便取用。故选①②④。

（4）将目的基因导入植物细胞用的方法是农杆菌转化法，故载体5需先转入农杆菌后再转化苜蓿，载体5含有的neor是新霉素抗性基因；是标记基因，转化后应在培养基中添加新霉素筛选转化成功的愈伤组织。

（5）MtActin基因（一种骨架蛋白基因）在各种细胞中都有表达并且表达相对恒定；故选MtActin基因转录水平作为参照。自来水条件下AmDHN基因不转录，20%PEG条件下AmDHN基因转录，说明干旱能诱导Rd29A启动子启动转录。

【点睛】

本题结合图示，考查基因工程的原理和技术，意在考查学生对所学知识的理解与掌握程度，培养了学生分析图示、获取信息、解决问题的综合应用的能力。【解析】脱氧核苷酸RNA聚合酶SmaI和SacIBclI和SacI①②④农杆菌新霉素干旱能诱导Rd29A启动子启动转录25、略

【分析】【分析】

基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。DNA连接酶分为两类：E．coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

(1)

限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；用于切割DNA分子，经限制性内切核酸酶切割后能形成两种类型的末端，即平末端和黏性末端。

(2)

限制酶能识别特定的核苷酸序列；并在特定的位点切割，所以该限制酶能识别的碱基序列是ACCGGT，切点在C和A之间，形成2个黏性末端，其特点是碱基序列完全相同。由图可知，此限制酶识别特点是只能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中