2025年牛津译林版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年牛津译林版选择性必修3生物下册阶段测试试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五六总分得分评卷人得分一、选择题(共7题，共14分)1、果酒、果醋、泡菜都是通过传统发酵技术生产的产品。下列哪项不是果酒、果醋和泡菜发酵制作的共同点（）A.利用微生物的代谢活动将有机物质转化成产品B.使用的菌种都没有细胞核和线粒体等具膜结构C.发酵过程的主要反应都在微生物的细胞内进行D.通过人工接种菌种均可提高发酵产品的质量2、2011年4月，JMCB（《分子细胞生物学报》）在线出版了“干细胞”主题专辑，集中刊载了干细胞研究领域的多项最新研究成果。医学上常用器官移植来治疗人类的某些疾病，而利用人类胚胎干细胞可以解决器官移植中的很多问题。下列叙述错误的是（）A.胚胎干细胞具有体积小、核大、核仁明显、蛋白质合成旺盛等特点B.胚胎干细胞除了可以来自内细胞团外，还可来自原始的性腺C.胚胎干细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中能够维持不分化的状态D.若用胰岛素基因作探针对胚胎干细胞和胰岛B细胞的mRNA进行检测，均能形成杂交带3、甲、乙、丙是三种微生物，下表I、Ⅱ、Ⅲ是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在Ⅲ中正常生长繁殖；甲能在I中正常生长繁殖，而乙和丙都不能；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，甲、丙都不能。下列说法正确的是（）。粉状硫10gK2HPO44gFeSO40．5g蔗糖10g（NH4）2SO40．4gH2O100mlMgSO49．25gCaCl20．5gⅠ++++-+++Ⅱ+++-++++Ⅲ++++++++

A.甲、乙、丙都是异养微生物B.甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物C.甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物D.甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物4、在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止杂菌微生物污染，有关叙述正确的是（）A.果酒发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入，放完气后要迅速拧紧B.腌制腐乳的卤汤中应含有12%左右的食盐以抑制细菌的增殖C.利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压蒸汽灭菌D.将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口部分的盐要铺薄一些5、影印培养法是工程菌筛选的一种常用方法，基本过程是：把长有许多菌落的培养皿倒置于包有灭菌丝绒布的木圆柱（直径略小于培养皿）上，然后把“印章”上的细菌接种到不同的选择性培养基平板上培养，对各皿相同位置上的菌落作对比，就可选出适当的工程菌。图1是将人生长激素基因导入细菌B制造工程菌示意图，影印培养法筛选结果如图2所示，其中数字表示不同的菌落。下列说法错误的是（）

A.培养基甲中必须含有氨苄青霉素B.培养基乙中必须含有四环素C.切割质粒A和人生长激素基因的限制酶必须是同种酶D.继续培养筛选工程菌必须挑取培养基甲中的菌落1和46、通过大量试验，在多种候选基因中筛选得出Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc（简称SKOM）4种基因。将这些基因导入高度分化的体细胞，可使其重编程，形成类似胚胎干细胞（ES细胞）的一种细胞类型，称为iPS细胞。下列说法正确的是（）A.不同类型的干细胞分裂和分化潜能基本相同B.胚胎干细胞因需要从胚胎中获取涉及伦理问题而限制了其应用C.诱导产生iPS细胞的过程中需用到基因工程技术和核移植技术D.iPS细胞和ES细胞具有相同的基因组成且都能体现出细胞的全能性7、科学家构建了含有大洋鳕鱼抗冻蛋白基因启动子和大鳞鲑鱼生长激素基因的表达载体，并将其导入了大西洋鲑的细胞中，获得了生长速度加快的转基因大西洋鲑。相关叙述正确的是()A.转基因大西洋鲑体内抗冻蛋白明显增加B.构建基因表达载体需要限制酶和DNA聚合酶C.大鳞鲑鱼生长激素基因不能通过PCR技术扩增获得D.转基因大西洋鲑生长激素含量增加导致生长速度加快评卷人得分二、多选题(共7题，共14分)8、胎牛血清(FBS)是天然的培养基；能够在多种动物卵母细胞的成熟过程中提供足够的营养物质，起到非常好的促进效果。下表是后期胚胎培养液(CR2后液）中添加不同浓度FBS对牛核移植胚胎发育的影响情况，下列叙述正确的是。

血清的不同浓度水平对牛核移植胚胎发育的影响。组别培养液卵裂率/%囊胚率/%对照组CR2前液+CR2后液59.17±1.3413.53±2.04试验组1CR2前液+10%FBSCR2后液62.14+1.7813.78±2.77试验组2CR2前液+20%FBSCR2后液68.95±4.1526.09±2.20试验组3CR2前液+30%FBSCR2后液62.02±8.648.78±3.20A.囊胚中内细胞团发育成胎膜和胎盘B.添加20%FBS是促进核移植胚胎发育的最适浓度C.从卵巢采集的卵母细胞需在体外培育成熟D.添加不同浓度的FBS对卵裂率和囊胚率均有促进作用9、苯丙酮尿症是一种严重的单基因遗传病。图1是某患者的家族系谱图，其中部分成员Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1和Ⅱ2的DNA经限制酶MspⅠ酶切，产生不同的片段，经电泳后与相应探针杂交结果见图2.下列分析正确的是（）

A.个体Ⅱ1是杂合体的概率为2/3B.个体Ⅱ2与一杂合体婚配生患病孩子的概率为0C.个体Ⅱ3是隐性纯合体，有19kb探针杂交条带D.个体Ⅱ4可能为杂合体，有2个探针杂交条带10、下列关于基因工程中几种工具的叙述，正确的是（）A.限制酶可水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键B.DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接起来C.DNA聚合酶能够从核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因11、勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果；研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是（）

A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状12、研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌，下列相关表述正确的是（）A.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利B.这种培养基是一种选择培养基C.利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤D.相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌13、下图是利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白的操作流程；其中细胞①已导入人血清白蛋白基因。相关叙述正确的是（）

A.细胞①的培养液中需要加入胃蛋白酶B.“卵母细胞”应在体外培养成熟C.图示“细胞②→早期胚胎”发生输卵管中D.该技术与试管牛培育的主要原理不同14、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)15、体细胞核移植技术存在的问题：

克隆动物存在着健康问题、表现出______缺陷等。16、（1）致病菌：第二次世界大战期间，侵华日军在中国领土上修建了几十座_____工厂，曾用数千名中国人做实验，还曾在中国20多个地区使用了_____；造成了几十万中国老百姓死亡。日本战败投降时，侵华日军又一次把培养的细菌释放出来，在中国造成传染病大流行。

（2）生化毒剂：如_____分子可以阻滞神经末梢释放_____；从而引起肌肉麻痹。

（3）病毒：如_____病毒；在年轻人普遍都没有接种天花疫苗的情况下，若有人用天花病毒或某些动物的痘病毒作为生物武器，后果不堪设想。

（4）基因重组致病菌：这些致病菌是人类的_____致病菌，可让大批受感染者突然发病，而又无药可医。17、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。18、目的基因是指：______19、去除DNA中的杂质，可以在滤液中加入2mol/L浓度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再调节NaCL溶液浓度为0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用浓度为2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________20、我国政府同样禁止进行治疗性克隆实验。（选择性必修3P108）()评卷人得分四、判断题(共4题，共8分)21、从牛卵巢中采集的卵母细胞可直接用于体细胞核移植。（选择性必修3P53）()A.正确B.错误22、利用基因工程技术建立移植器官工厂是目前基因工程取得实际应用成果非常多的领域。（选择性必修3P90）()A.正确B.错误23、治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。（选择性必修3P106）()A.正确B.错误24、如果转基因植物的外源基因源于自然界，则不会存在安全性问题。()A.正确B.错误评卷人得分五、实验题(共2题，共4分)25、厨余垃圾废液中的淀粉；蛋白质、脂肪等微溶性物质可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物数量相对较少，存在发酵周期长、效率低等缺点，极易对环境造成污染。

（1）为探究圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理某厨余垃圾废液的最佳接种量比；用于制备微生物菌剂，研究者做了如下实验：

①将两种菌液进行不同配比分组处理；如下表所示：

。编号R0R1R2R3圆褐固氮菌∶巨大芽孢杆菌1∶00∶11∶12∶1将等量上表菌液分别接种于100mL_____中进行震荡培养。本实验中对照组的处理应为_____。

②培养3天后测定活菌数。取各组菌液采用_____法接种于基本培养基中，培养一段时间后选取菌落数在_____范围内的平板进行计数；并依据菌落的形态特征对两种菌进行区分，实验结果见图。

由实验结果可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是______________。接种量比例为_____________时；废液中两菌的有效活菌数最多。

（2）为进一步探究菌种比例对该厨余垃圾废液中蛋白质；脂肪等有机物的降解效果；测得15天内废液中蛋白质、脂肪的含量变化如下图所示：

由实验结果可知，对该厨余垃圾废液中蛋白质、脂肪的降解效果最好的两种菌接种比分别为_____、_____。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维、蛋白质、淀粉等物质，可以通过蒸发、碾磨、干燥等方式进行加工，使加工后的产物在微生物的作用下形成有机复合肥等肥料；收集微生物处理后的厨余垃圾残渣，经晾晒干后制成蛋白饲料；通过以上处理可实现_____（选填选项前的符号）。

A．物质循环再生B．能量多级利用C．提高能量传递效率26、人的血清白蛋白（HSA）在临床上需求量很大；通常从人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重，如果应用基因工程等技术，将人的血消白蛋白基因转入奶牛细胞中，那么利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其大致过程如下：

I．采用良种供体奶牛的卵母细胞和精子；通过体外受精，形成受精卵；

II．将人血消白蛋白基因导入奶牛受精卵；形成重组细胞；

III．电脉冲刺激重组细胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ．将胚胎移植到受体母牛的子宫中；最终发育成转基因小牛。

请回答下列问题：

（1）实验步骤Ⅰ中，受精时，防止多精入卵的生理反应包括____________________。

（2）实验步骤Ⅱ中，需先构建基因表达载体，将HSA基因与__________等调控组件重组在一起；再导入奶牛受精卵。

（3）实验步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加__________。培养过程需要定期更换培养液，目的是__________。

（4）实验步骤Ⅳ中，应选择性别为__________的奶牛胚胎进行移植；对早期胚胎（如囊胚）进行性别鉴定的常用方法是____________________。移植前还需要检测目的基因是否成功导入受精卵，检测方法是采用__________技术。评卷人得分六、综合题(共4题，共20分)27、琼脂是一种多糖类物质；由于很少有微生物能将其降解而成为配制固体培养基时常用的凝固剂之一；某实验室在处理一批已进行过微生物培养的废弃固体培养基时发现，几乎全部培养基上的微生物都已死亡，但在其中一个培养基上存在一个正常生长的菌落。对此，研究人员做出了以下假说：①此培养基内的营养未被消耗殆尽；②形成此菌落的为自养型微生物；③形成此菌落的微生物能利用琼脂。

（1）从研究人员所作的假说可以推测①所说的“营养”最可能是_____（填“碳源”“氮源”或“无机盐”）。

（2）配制牛肉膏蛋白胨培养基的步骤包括计算、称量、_____、灭菌、倒平板。倒平板所用的培养皿和培养基所用的灭菌方法依次是_____和_____。

（3）为了检验上述假说①是否正确，研究人员分别使用两种培养基对上述微生物进行培养其中一种为牛肉膏蛋白胨培养基（a），则另一培养基b中不能加入下列的_____（填字母）

A．牛肉膏B．蛋白胨C．氯化钠D．琼脂。

（4）用上述a、b培养足够时间，菌落生长情况为_____时；证明假说①正确。

（5）若上述实验否定了假说①，为进一步检验假说②和③，研究人员想要配制一种新的培养基c，并通过b与c上是否出现菌落作为观察指标，则与b相比，c的成分需要做出的变化是_____。28、某研究人员设计了下列技术路线；以期获得甘蓝和萝卜体细胞杂交植株。

请回答下列问题：

(1)制备原生质体时，常用两种酶处理，分别是__________。诱导原生质体融合常用的化学诱导剂是____________________。原生质体融合成功的标志是________________。植物体细胞杂交技术最大的优点是________________。

(2)植物组织培养的核心步骤包括____________和____________两步，前者就是让已经分化的细胞经过诱导后，失去其特有的____________从而转变为未分化细胞的过程。图中X是____________________。为诱导融合体产生不定芽，通常应在培养基中加入两类植物激素，其中起主要作用的是____________。

(3)若想获得抗盐植株，可选用融合原生质体作为人工诱变的材料，原因是_______________，且需在含较高浓度的NaCl培养基中筛选。29、目前采用RT-PCR技术（逆转录荧光PCR技术）进行新冠毒核酸检测；操作流程：从密接者组织中提取RNA→将RNA逆转录为cDNA→PCR扩增cDNA→DNA分子杂交进行核酸检测→通过荧光强度判断是否含有病毒核酸。“核酸检测试剂盒实际上是盛放有几种关键试剂的盒子，比如：特异性的荧光DNA探针（特异性的带荧光的病毒核酸序列）逆转录酶；PCR相关试剂等。

（1）PCR相关试剂指四种游离的脱氧核苷酸、_____和_____。

（2）DNA分子杂交指用_____与扩增的cDNA进行杂交；若杂交成功，体系中的荧光信号就会增强。

（3）若荧光DNA探针的序列特异性不强，可能会出现“假阳性”（非感染者也能检测到一定的荧光强度），原因是_____。

（4）若能提取到新冠病毒蛋白外壳，也可以用_____方法进行检测。提取出的蛋白质外壳还可以用于_____。30、双酚A（BPA）是一种含碳有机物；是重要的工业原料，在环境中不易降解，科研人员对土壤中细菌等微生物降解BPA进行了相关研究。

(1)BPA由多种途径进入环境，沿着________________在生态系统中传递；并逐级积累，产生富集现象。

(2)为探究BPA对土壤中的细菌数量及种类的影响；科学家进行了以下实验。

①首先测定不同浓度BPA对土壤细菌生长情况的影响，结果如图1所示，实验结果表明______________。

（注：电泳条带宽度与细菌相对数量的多少有直接关系）

②16SrDNA基因存在于所有细菌中，该基因包含多个恒定区和可变区，恒定区序列在所有细菌间无显著差异，可变区序列具有种的特异性。为探究BPA对细菌群落多样的影响，利用16SrDNA基因的“恒定区”序列设计引物，PCR扩增16SrDNA片段，电泳结果如图2。如图A、B、C条带是各处理所共有的，说明各处理土壤中具有相同的细菌种类。不同浓度BPA处理出现了特有条带，如d，e，f，g和h条带，说明_____________。且共有条带中宽度不同（如C），可推测不同浓度BPA导致不同细菌的_____________发生改变，由此推测该细菌群落在发生_____________。

(3)经过筛选，科研人员得到3株具有降解BPA能力的菌株，下列叙述哪些是正确的_____________。A．分离BPA降解菌的培养基需要以BPA为唯一碳源B．培养基中营养物质浓度越高，对微生物生长越有利C．依据菌落的形状、大小、颜色等可进行菌种的初步鉴定D．比较3株菌株降解BPA能力后，剩余菌液可直接倒掉参考答案一、选择题(共7题，共14分)1、B【分析】【分析】

果酒；果醋、腐乳和泡菜发酵制作比较：

【详解】

A；果酒发酵的主要微生物是酵母菌；果醋发酵的主要微生物是醋酸菌，泡菜发酵的主要微生物是乳酸菌，果酒、果醋和泡菜都是利用微生物的代谢活动将有机物质转化成产品，A不符合题意；

B；酵母菌是真核生物；具有细胞核和线粒体等具膜结构，B符合题意；

C；果酒、果醋、泡菜的发酵制作过程的主要反应都是在微生物的细胞内进行的；C不符合题意；

D；通过人工接种菌种；短时间内使得相应菌种成为优势种群，从而提高相应发酵产品的质量，D不符合题意。

故选B。2、D【分析】【分析】

胚胎干细胞：（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来；（2）胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。（3）胚胎干细胞可用于治疗人类的某些顽症，如帕金森综合症；还可培育出人造器官，解决目前临床上存在的供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。

【详解】

A；胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性；在形态上表现为体积小、核大、核仁明显、蛋白质合成旺盛等特点，A正确；

B；哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞；除了可以来自内细胞团外，还可来自原始的性腺，B正确；

C；胚胎干细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中可以增殖而维持不分化的状态；C正确；

D；胚胎干细胞的胰岛素基因不表达；若用胰岛素基因作探针对胚胎干细胞的mRNA进行检测，不能形成杂交带，D错误。

故选D。3、C【分析】【分析】

根据表格分析；乙能在Ⅰ中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，而Ⅰ培养基缺氮，说明甲能够自身固氮，属于固氮微生物；丙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲和乙都不能，Ⅱ培养基中没有有机碳源，说明丙能够合成有机物，属于自养微生物；而甲不能在Ⅰ培养基中生长，说明不能固氮；又不能在Ⅱ培养基中生长，说明不能合成有机物，只能在Ⅲ培养基中生长，说明属于异养微生物。

【详解】

A；根据以上分析可知；丙属于自养型微生物，A错误；

B；乙能够在Ⅰ中正常生长繁殖；但是不能在Ⅱ培养基中生长繁殖，说明其为异养微生物，同理可推知，甲仅能在Ⅲ培养基中生长，甲也为异养微生物，根据分析，丙为自养型微生物，B错误；

C；根据以上分析可知；甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物，C正确；

D；根据上述分析；乙是固氮微生物，甲、丙是异养微生物，D错误。

故选C。4、A【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。

2；参与果醋制作的微生物是醋酸（杆）菌；其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：若氧气、糖源充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；若缺少糖源、氧气充足，醋酸菌将乙醇变为乙醛，乙醛变为醋酸。

.3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

A；果酒制作需要无氧环境；因此果酒发酵阶段应封闭充气口，为防止杂菌进入，放完气后要迅速拧紧，A正确；

B；腌制腐乳的卤汤中应含有12%左右的酒以调味和抑制细菌的增殖；B错误；

C；利用自然菌种发酵果酒时；不能将封有葡萄汁的发酵瓶进行高温高压灭菌，否则会杀死葡萄汁中的野生酵母菌，C错误；

D；将长满毛霉的豆腐放在瓶中；并逐层加盐，由于越接近瓶口，被杂菌污染的机会越大，因此接近瓶口部分的盐要铺厚一些，D错误。

故选A。5、C【分析】【分析】

图1表示将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的过程。质粒A上含有四环素抗性基因和氨苄青霉素抗性基因；构建基因表达载体后，破环了质粒A的四环素抗性基因，但氨苄青霉素抗性基因正常，所以导入重组质粒或普通质粒的细菌都能抗氨苄青霉素，但导入重组质粒的细菌不能抗四环素。

【详解】

A；重组质粒时抗氨苄青霉素基因未破坏；而抗四环素基因被破坏。因此可在培养细菌B的培养基中加入氨苄青霉素，若在培养基上观察到大量的细菌B的菌落，表明该细菌已经导入了外源质粒，故培养基甲中必须含有氨苄青霉素，A正确；

B；在甲培养基（氨苄青霉素）上观察到大量的细菌B的菌落；表明该细菌已经导入了外源质粒，但不能说明外源质粒是否成功插入目的基因，重组质粒中四环素抗性基因插入了目的基因，不能表达，细菌对四环素无抗性，故培养基乙必须含四环素，用来说明细菌B中已经导入了插入目的基因的重组质粒，起到筛选作用。

C；质粒作为载体必须具备标记基因；所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，为了避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可以使用不同的限制酶来切割，C错误；

D；在甲培养基（氨苄青霉素）上能生长的是导入重组质粒的细菌和导入普通质粒的细菌；能在培养基乙上生长的是导入普通质粒A的细菌，重组质粒不能生长。培养基甲和乙对比，消失的是菌落1和4，故继续培养筛选工程菌必须挑取培养基甲中的菌落1和4，D正确。

故选D。

【点睛】6、B【分析】【分析】

胚胎干细胞(简称ES)是早期胎或原始性腺中分离出来的一类细胞；它具有体外培养无限增殖；自我更新和多向分化的特性，无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。

【详解】

A；不同类型的干细胞；它们的分化潜能是有差别的，如胚胎干细胞的分化潜能大于多能干细胞，A错误；

B；胚胎干细胞全能性较高；仍会涉及伦理问题，其在医学上的应用还是有一定的限制，B正确；

C；根据题意将Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因导入高度分化的体细胞可使其重编程；形成iPS细胞，需要用到基因工程，没有核移植技术，C错误；

D；ES直接从胚胎提取；iPS是通过体细胞导入Sox2、Klf4、Oct4、c-Myc基因诱导产生，基因组成不同，但是都能体现出细胞全能性，D错误。

故选B。7、D【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成；（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

转基因大西洋鲑体内抗冻蛋白有所增加，但是不会明显增加，A错误；构建基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶，B错误；大鳞鲑鱼生长激素基因能通过PCR技术扩增获得，C错误；转基因大西洋鲑生长激素含量增加导致生长速度加快，D正确；故选D。二、多选题(共7题，共14分)8、C【分析】囊胚中内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，A错误；表中信息显示：添加20%FBS的试验组2，其卵裂率和囊胚率都高于对照组和其它试验组，说明促进核移植胚胎发育的最适浓度范围在为20%FBS左右，但20%FBS不一定是最适浓度，B错误；从卵巢采集的卵母细胞不具有受精能力，需在体外培育成熟后，才能与获能的精子受精，C正确；表中信息显示：各试验组的卵裂率均高于对照组，说明添加不同浓度的FBS对卵裂率均有促进作用，试验组1、2的囊胚率高于对照组，试验组3的囊胚率低于对照组，说明在一定浓度范围内，随添加的FBS浓度的升高对囊胚率均有促进作用，但超过该浓度范围却起抑制作用，D错误。9、B:C:D【分析】苯丙酮尿症是一种严重的单基因遗传病，假设该病受一对等位基因A、a控制，分析图1，Ⅰ1、Ⅰ2都无病，但其女儿Ⅱ3却有病，所以该病为常染色体隐性遗传病，Ⅱ3基因型为aa，Ⅰ1和Ⅰ2的基因型都为Aa，再结合图2的酶切结果可知，Ⅰ1、Ⅰ2、Ⅱ1的基因型相同，因此Ⅱ1的基因型为Aa，Ⅱ2表现正常，且从酶切结果看，Ⅱ2与Ⅱ1基因型（Aa）不同，所以Ⅱ2的基因型为AA，由此可以推知，23kb探针杂交条带对应正常显性基因A，19kb探针杂交条带对应隐性基因a。

【详解】

A、由分析可知，个体Ⅱ1的基因型为Aa；杂合体的概率为1，A错误；

B、由分析可知，个体Ⅱ2的基因型为AA；与杂合体Aa婚配，生患病孩子aa的概率为0，B正确；

C、个体Ⅱ3是患者，是隐性纯合体，故有19kb探针杂交条带；C正确；

D、个体Ⅱ4是Ⅰ1（Aa）和Ⅰ2（Aa）所生的表现正常的后代；基因型可能是AA或Aa，若为杂合体就有2个探针杂交条带，D正确。

故选BCD。10、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶可识别并在特定位置水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键；A正确；

B；DNA连接酶可以连接黏性末端相同；即末端碱基互补的两个DNA片段之间的磷酸二酯键，B正确；

C；DNA聚合酶只能从核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C错误；

D；标记基因可将含有目的基因的细胞筛选出来；故作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因，D正确。

故选ABD。11、A:C:D【分析】微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；平板划线无法得知稀释倍数；不能用于活菌计数，故统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A错误；

B；除图中操作外；还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确；

C；由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个、甚至几个活菌，C错误；

D；由于菌落肉眼可见；故初步判断培养基上菌种的类型，可用肉眼观察菌体的形态特征，D错误。

故选ACD。12、B:C:D【分析】【分析】

在微生物学中；将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。

【详解】

A；培养基中的营养物质浓度过高会导致微生物不能从培养基中吸水；将出现失水过多而死亡的现象，对生长不利，A错误；

B；这种培养基以石油为唯一碳源；只有石油降解菌可在该培养基上正常存活，因此是一种选择培养基，B正确；

C；被石油污染的土壤通气性极差；利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤，C正确；

D；根据生物与其生存环境相适应的特点；未被污染的土壤中几乎不含石油分解菌，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌，D正确。

故选BCD。13、B:D【分析】【分析】

题图分析：图示操作流程为“利用牛的乳腺细胞生产人体血清白蛋白”；因此首先需要将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛乳腺细胞，形成细胞①；取出细胞①的细胞核，注入去核牛卵母细胞中，形成细胞②，该过程采用了核移植技术，其原理是动物细胞的细胞核具有全能性；要形成转基因克隆奶牛还需要采用早期胚胎培养技术和胚胎移植技术。

【详解】

A；为了得到单个细胞；在细胞①的培养液中需要加入胰蛋白酶，不能使用胃蛋白酶，A错误；

B；图中卵母细胞应该在体外培养到减数第二次分裂中期；此时的次级卵母细胞具有受精能力，B正确；

C；图示“细胞②→早期胚胎”为体外培养胚胎的过程；该过程在体外完成，C错误；

D；图示克隆牛的培育主要采用了核移植技术和胚胎移植技术；属于无性生殖；试管牛的培育主要采用了体外受精和胚胎移植技术，属于有性生殖，因此两者产生犊牛的生殖方式不相同，D正确。

故选BD。14、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】三、填空题(共6题，共12分)15、略

【解析】遗传和生理16、略

【分析】【详解】

（1）早在第二次世界大战中；侵华日军就组建了从事细菌战的731部位和100部队，并在中国领土上修建了几十座细菌武器工厂，大量培养鼠疫；霍乱、伤寒、炭疽和菌痢等一系列能使人致命的传染性疾病。曾用数千名中国人做实验，还曾在中国20多个地区使用了细菌武器，造成了几十万中国老百姓死亡。日本战败投降时，侵华日军又一次把培养的细菌释放出来，在中国造成传染病大流行。

（2）某些国家或恐怖组织大量生产肉毒杆菌毒素；肉毒杆菌毒素分子可以阻滞神经末梢释放乙酰胆碱，从而引起肌肉麻痹。

（3）1978年天花就已经在地球上消灭；但是某些国家至今保留着天花病毒菌株，今天，在年轻人普遍都没有接种天花疫苗的情况下，若有人用天花病毒或某些动物的痘病毒作为生物武器，后果不堪设想。

（4）目前，有一些国家对重组基因技术制造全新的致病菌表现了极大的兴趣，这些人类从来没有接触过的致病菌，可以让大批受感染者突然发病，而又无药可医。【解析】①.细菌武器②.细菌武器③.肉毒杆菌毒素④.乙酰胆碱⑤.天花⑥.从未接触过17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】是人们所需要转移或改造的基因19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】不容的杂质析出DNA过滤溶液中的杂质DNA20、略

【分析】【详解】

中国政府的态度：禁止生殖性克隆，不反对治疗性克隆，该表述错误。【解析】错误四、判断题(共4题，共8分)21、B【分析】【详解】

从牛卵巢中采集到卵母细胞后；接着对其进行的操作是先在体外培养到减数第二次分裂中期，再通过显微操作去除卵母细胞中的细胞核，获得去核的卵母细胞，再经核移植获得重组的受体细胞。

故该表述错误。22、B【分析】【详解】

基因工程技术可以使建立移植器官工厂的设想成为现实；说明并未开始实际应用。

故题中描述错误。23、A【分析】【详解】

治疗性克隆是指利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，用它们来修复或替代受损的细胞、组织和器官，从而达到治疗疾病的目的。本说法正确。24、B【分析】【详解】

来源于自然界的目的基因导入植物体后，可能破坏原有的基因结构，具有不确定性，外源基因也可能通过花粉传播，使其他植物成为“超级植物"等，所以如果转基因植物的外源基因来源于自然界，也可能存在安全性问题。本说法错误。五、实验题(共2题，共4分)25、略

【分析】【分析】

常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。在统计菌落数目时；为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。

【详解】

（1）①要探究圆褐固氨菌和巨大芽孢杆菌处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比；故需要将不同配比的菌液接种在100mL某餐厨垃圾废液中，为了保证氧气供应及目的菌与培养液充分接触，需要进行振荡培养。另外为了减小误差，还需要设置对照组，接种等量无菌水，在相同的条件下培养。

②测定活菌数；需要利用稀释涂布平板法，接种时故需要取一定量菌液进行梯度稀释，然后分别取0.1mL的菌液采用涂布法接种于基本培养基中培养。可以根据菌落的形态区分两种菌，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数，根据实验数据可知，两种菌混合接种时有效菌落数均大于单独接种，从代谢产物角度分析，原因可能是两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质。当两菌种接种量比例为1：1时，废液中两种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。

（2）由实验数据可知，R3接种组随着时间的延长，蛋白质的含量下降最明显；R1接种组随着处理时间的延长；脂肪的含量下降最明显，即脂肪的降解效果最好。

（3）固态厨余垃圾因富含粗纤维；蛋白质、淀粉等物质；可加工形成有机复合肥、蛋白饲料等，利用了物质循环再生、能量多级利用的生态工程的原理，AB正确。故选AB。

【点睛】

本题结合图形和表格，主要考查微生物的分离和培养的相关知识，要求考生掌握稀释涂布平板法的操作流程，识记微生物计数的方法，能结合所学知识和图形信息准确答题。【解析】某厨余垃圾废液加入等量无菌水稀释涂布平板法30~300两种菌可以相互利用对方的代谢产物作为营养物质（一种菌的代谢产物是另一种菌的营养物质）1:1R3（或2:1）R1（或0:1）AB26、略

【分析】1；体外受精过程包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、体外受精；其中卵母细胞的采集和培养的方法：

（1）主要方法是：用促性腺激素处理；使其超数排卵，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子体外受精。

（2）第二种方法：从已屠宰母畜的卵巢中采集卵母细胞。

（3）第三种方法：是直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞；叫活体采卵。

2；受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。

【详解】

（1）受精时；往往一个卵母细胞只能和一个精子结合，透明带反应是阻止多精入卵的第一道屏障，卵细胞膜反应是阻止多精入卵的第二道屏障。

（2）该实验是利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白；因此实验步骤Ⅱ中构建基因表达载体时，需要先将HSA基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，再导入奶牛受精卵。

（3）动物早期胚胎的体外培养时；培养液中除了含有各种无机盐和有机盐类；维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和动物血清。培养过程需要定期更换培养液，清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。

（4）血清白蛋白要从乳汁中提取；只有雌性奶牛才能产生乳汁，因此胚胎移植时，必须选取雌性奶牛的胚胎进行移植；对早期胚胎（如囊胚）进行性别鉴定的常用方法是取滋养层细胞进行染色体检查或DNA分析；移植前还需要检测目的基因是否成功导入受精卵，通常采用DNA分子杂交技术进行检测。

【点睛】

解答本题的关键是掌握体外受精、受精过程、基因工程等知识，要求考生识记体外受精技术的过程及方法、受精作用的过程、基因工程的操作步骤及应用，并能够联系实际答题。【解析】透明带反应和卵细胞膜反应乳腺蛋白基因的启动子激素和动物血清清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害雌性取滋养层细胞进行染色体检查或DNA分析DNA分子杂交六、综合题(共4题，共20分)27、略

【分析】【分析】

实验室常用的灭菌方法：

（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具；如接种环；接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。

（2）干热灭菌：能耐高温的；需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管；培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。

（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内；为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。

【详解】

（1）由三个假说分析可知；三个假说所涉及微生物的碳源是不同的，故①所说的“营养”指的最可能是碳源。

（2）配制牛肉膏蛋白胨培养基的步骤包括计算；称量、溶化、灭菌、倒平板。倒平板所用的培养皿和培养基所用的灭菌方法依次是干热灭菌、高压蒸汽灭菌。

（3）蛋白胨和牛肉膏来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，通常用来作为培养基中的碳源和氮源。培养基a中已经添加有牛肉膏和蛋白胨，b培养基是为了排出依靠这类物质作为碳源存活的微生物，故b培养基中不能再添加这两类物质；故选AB。

（4）用上述a、b培养足够时间，菌落生长情况为a培养基上长出菌落，b培养基上不长菌落时；证明假说①正确。

（5）由题干信息可知，很少有微生物能将琼脂降解，从而成为配制固体培养基时常用的凝固剂之一，若要通过b与c上是否出现菌落作为观察指标；来判断该微生物是否能利用琼脂作为碳源，则只需要将琼脂换成无机（或不是有机物的）凝固剂即可。

【点睛】

本题考查微生物的分离和培养，要求考生识记培养基的制作和不同成分对微生物生长的影响，意在考查考生的综合分析能力和信息获取能力。【解析】碳源溶化干热灭菌高压蒸汽灭菌A、Ba上有（或长出或出现）菌落，b上无（或不长或不出现）菌落将琼脂换成无机（或不是有机物的）凝固剂28、略

【分析】【分析】

植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞；并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。

(1)诱导融合的方法：物理法包括离心；振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂；

(2)细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成；

(3)植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株；而不是形成杂种细胞就结束；

(4)杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征；原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。

【详解】

（1）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶；所以制备原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁分解，诱导原生质体融合常用的化学诱导剂是PEG(聚乙二醇)。原生质体融合成功的标志是杂种细胞再生成细胞壁；植物体细胞杂交技术最大的优点是克服了不同种植物远缘杂交不亲合的障碍，