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…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页,总=sectionpages22页第=page11页,总=sectionpages11页2025年沪教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷630考试试卷考试范围:全部知识点;考试时间:120分钟学校:______姓名:______班级:______考号:______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共7题,共14分)1、如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图.以下相关叙述;正确的是()
A.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异B.③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上C.④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状D.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶两种酶参与2、如图为蛋白质工程操作的基本思路;下列叙述不正确的是()
A.代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤B.代表中心法则内容的是①②C.①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表DNA合成D.蛋白质工程的目的是对基因的结构进行分子设计,通过基因合成或改造实现。3、下面关于植物细胞工程的叙述,正确的是()A.叶肉细胞脱分化后可形成定形状态的薄壁细胞B.叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织C.融合植物叶肉细胞时,应先去掉细胞膜D.叶肉细胞离体培养时,可以表现出全能性4、某生物兴趣小组的同学测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对小鼠的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行培养。下列说法正确的是A.利用胃蛋白酶处理两种肝组织块后可得到肝细胞悬液B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞的呼吸C.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中,乙会出现停止增殖的现象D.该试验中用到的培养液也能用来培养乙肝病毒5、下列实验目的不能实现的是()A.利用双缩脲试剂检测蛋白质是否变性B.利用PCR技术快速检测新冠病毒感染C.利用酵母菌和醋酸菌进行果醋发酵D.利用核移植和胚胎移植繁育良种家畜6、下列关于试管婴儿和克隆猴的叙述,正确的是()A.都有很高的成功率B.都需进行胚胎移植C.都属于无性生殖D.体外受精和细胞核移植过程都发生了基因重组7、有研究人员体外诱导小鼠的皮肤细胞,获得诱导多能干细胞(iPS细胞),并将这种iP5细胞放置在特殊的孵化器中培养,得到了一种类似原肠胚的结构。现在,用iPS细胞治疗阿尔茨海默病、心血管疾病等领域的研究也取得了新进展。下列叙述错误的是()A.可用小分子化合物诱导形成iPS细胞B.特殊的孵化器可能模拟了子宫的特殊环境C.正常原肠胚的外胚层将发育成胎盘和胎膜D.利用自身体细胞诱导的iPS细胞治疗,可避免免疫排斥反应评卷人得分二、多选题(共8题,共16分)8、下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图;没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药,可抑制DNA和RNA的合成,对正常细胞也有一定毒性。下列相关说法正确的是()
A.单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的B.活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程C.在治疗中,应先注射非活化的磷酸酶,再注射生物导弹D.单克隆抗体特异性强,能减轻阿霉素对正常细胞的伤害9、格瓦斯是一种广泛流传于东欧的低度酒精饮料。制作过程:①将发酵面包制成的面包液、糖化液装入发酵罐,加入保加利亚乳酸菌、酵母菌进行发酵;②发酵液经过严格的过滤;③过滤液经5~8s迅速升温到127℃进行高温杀菌,冷却后即可饮用。酵母菌产生酒精的能力差异较大,其产酒精能力与其耐受酒精的能力有关。下列说法正确的是()A.保加利亚乳酸菌和酵母菌都能同时进行有氧呼吸和无氧呼吸B.面包液、糖化液可为微生物的生长提供碳源、氮源以及水和无机盐等营养物质C.若想得到产酒精能力比较强的酵母菌,可向培养基中添加较高浓度的酒精进行筛选D.过程③中瞬时高温灭菌可使微生物蛋白质空间结构迅速破坏,从而达到灭菌效果10、为探究原生质体制备的最佳溶壁酶反应时间,研究人员在高渗溶液中进行了相关实验,结果如下图所示。下列叙述正确的有()
A.与杂交育种相比,原生质体融合育种能扩大亲本的选择范围B.可用光学显微镜观察细胞形态变化,检测原生质体的形成情况C.每隔一段时间,可取反应液直接滴加到血细胞计数板进行计数D.据图中数据推测,在高渗溶液中有原生质体的裂解11、黄粉虫可以吞食;降解塑料;利用黄粉虫肠道微生物对白色污染进行生物降解,是一种绿色环保的处理工艺。下图是从黄粉虫肠道中分离、纯化目的微生物的过程,相关叙述正确的是()
A.富集培养基中含有酵母膏、蛋白胨、琼脂等,蛋白胨能提供所需的碳源、氮源和维生素B.分离、纯化目的微生物的选择培养基中需加入PVC塑料膜作为唯一碳源C.将转接至固体斜面培养基上的不同菌落置于4℃的冰箱长期保存D.与传统填埋、焚烧相比,黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会造成二次污染12、传统发酵食品的制作需要各种各样的微生物。下列相关叙述正确的是()A.腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵B.制作腐乳利用了微生物产生的蛋白酶C.制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生酒精D.制作果醋利用了醋酸菌在无氧条件下产生乙酸13、关于现代生物工程技术应用的安全性,下列说法正确的是()A.对待生物武器的态度应明确而坚定,即坚决禁止生物武器B.对转基因植物的外源DNA要认真选择,避免产生对人体有害或过敏的蛋白质C.我国不反对治疗性克隆,允许有限制地进行克隆人实验D.一旦发现转基因生物出现了安全性问题,要马上停止实验,并销毁重组生物14、某植物有甲、乙两品种,科研人员在设计品种乙组织培养实验时,参照品种甲的最佳激素配比(见下表)进行预实验。为确定品种乙的II阶段的最适细胞分裂素浓度,参照表中α2(α2>2.0μmol·L-1),以0.5μmol·L-1为梯度,设计5个浓度水平的实验,其中细胞分裂素最高浓度设为M。下列有关叙述正确的是()。品种甲组织培养阶段细胞分裂素/(μmol·L-1)生长素/(μmol·L-1)I诱导形成愈伤组织α1b1II诱导形成幼芽α2b2Ⅲ诱导生根α3b3
A.表中发生基因选择性表达的是II和Ⅲ阶段B.实验中共配制了2种不同的培养基,即生根培养基和生芽培养基C.确定品种乙II阶段最适细胞分裂素浓度的实验中,M为α2+2μmol·L-1D.生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素15、克隆动物常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内;后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内,然后促使两个细胞融合。世界首例体细胞克隆北极狼的供体细胞来自哈尔滨极地公园的一只野生北极狼的皮肤样本,卵母细胞来自一只处于发情期的母犬,代孕母体则是一只比格犬。下列叙述错误的是()A.克隆北极狼的性状由野生北极狼、发情期的母犬和比格犬的基因共同决定B.相比之下,透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小C.供体细胞注入卵母细胞透明带内后,就可自行进入卵母细胞D.细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程中发生了基因重组评卷人得分三、填空题(共7题,共14分)16、生化武器散布途径:将病原体_____或者通过_____、_____等散布到敌方,会对军队和平民造成大规模杀伤后果。17、本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选。但是,这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验,纤维素酶的发酵方法有___________和___________发酵两种。纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的__________进行________的测定。18、获取目的基因的方法______、______、______19、利用DNA和蛋白质等其它成分在___________中的溶解度不同,选择适当的盐浓度就能使_______充分溶解,而使___________沉淀,或相反。20、今年年初;爆发了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明,新型冠状病毒通过其表面的S-蛋白与人细胞膜上的ACE2相互识别,感染人的呼吸道上皮细胞。请分析回答问题:
(1)新型冠状病毒表面的S-蛋白作为_________剌激淋巴细胞,使机体产生_________性免疫反应,人细胞膜上的ACE2的化学本质是_________。
(2)感染病毒后,免疫系统对肺细胞强烈攻击引发肺炎,此时可通过适度使用_________对病人进行治疗;使其免疫功能下降,以避免肺部严重受损。
(3)科学家采集了感染新型冠状病毒并已康复的甲、乙两人的血液,检测相关抗体的水平,结果如图1。据此分析,应选取_________的B淋巴细胞用以制备单克隆抗体(单抗)。
(4)将制备的多种单抗分别与病毒混合,然后检测病毒对宿主细胞的感染率,结果如图2。据此分析,对病毒抑制效果最好的单抗是__________号。
(5)患者康复后一段时间,若再次受到该病毒的攻击,机体内相应的__________细胞迅速增殖分化,产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。21、蛋白质工程在生物制药上有广泛的应用。如果已经确认某种新蛋白质可能具有特殊的抗癌功能,其氨基酸序列也已经确认,如何通过蛋白质工程生产这种新药?如果回答有困难,可以向老师请教或通过互联网查找答案。_____22、有时还需进行______的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现______。评卷人得分四、实验题(共2题,共14分)23、科研人员以病毒表面S蛋白作为主要的病毒抗原;利用基因工程研制疫苗用于接种预防,简要过程如图所示。回答下列问题:
(1)新冠病毒是一种RNA病毒,一般先通过_____________________得到cDNA,再经PCR技术获取大量S蛋白基因,PCR的中文全称是_____________________。
(2)PCR技术还需用到_____________________酶,该酶能够使脱氧核苷酸从引物的_____________________端开始连接,据下图分析,可选择的引物是_____________________。
(3)为了验证表达的S蛋白与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性;请设计简单的检测方案并预期检测结果。
方案:_________________________________。
结果:_________________________________。24、黏多糖贮积症是由IDUA基因突变导致的遗传病。科研人员对此病的治疗进行相关研究。
(1)黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因由于碱基对___________造成突变,转录出的mRNA长度不变但提前出现终止密码子,最终导致合成的IDUA酶分子量___________;与正常IDUA酶的空间结构差异显著而失去活性,积累过多的黏多糖无法及时清除,造成人体多系统功能障碍。
(2)抑制性tRNA(sup-tRNA)与普通tRNA的结构、功能相同,但它的反密码子可以与终止密码子配对。在上述这一类突变基因的翻译过程中,加入sup-tRNA可以发挥的作用是___________;从而诱导通读获得有功能的全长蛋白。
(3)不同的sup-tRNA可以携带不同氨基酸;为比较它们的通读效果,科研人员进行了相关研究,实验结果如图。
注:“-”代表未加入。
据图分析,实验组将___________基因导入受体细胞,并采用___________技术检测导入基因的表达情况。据结果分析,携带酪氨酸的sup-tRNA能___________。
(4)科研人员利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠及IDUA基因敲除小鼠进行治疗,检测肝脏细胞IDUA酶活性和组织黏多糖的积累量,与不治疗的小鼠相比较,实验结果为_____________,表明携带酪氨酸的sup-tRNA可以治疗黏多糖贮积症。评卷人得分五、综合题(共3题,共12分)25、人血清白蛋白(HSA)是血浆中含量最丰富的蛋白质,具有重要的医用价值。下图是通过基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。回答下列问题:
(1)为获取HSA基因,首先提取人血细胞中的mRNA,利用_______________法合成总cDNA。再利用_______________技术扩增HSA基因,该技术所用到的关键酶是_______________,扩增得到的HSA基因_______________(填“含有”或“不含有”)启动子。
(2)HSA基因导入受体细胞前,需要实施基因工程的核心步骤:_______________。
(3)途径Ⅱ选用大肠杆菌作为受体细胞具有繁殖快、遗传物质少等优点。但相比于途径1,利用大肠杆菌获得的rHSA存在无活性的缺点,试从细胞结构的角度进行分析_______________。26、基因工程是新品种花卉培育中的一种重要技术手段。研究发现普通矮牵牛花因缺乏蓝色色素合成所需的转座酶而不能开蓝色花,因此研究人员尝试将从蔷薇花瓣细胞中分离提取的转座酶F35H基因转入普通的矮牵牛中,以期获得蓝色矮牵牛新品种,该过程所用的质粒与含转座酶F35H基因的DNA片段上相关限制酶的酶切位点分别如图1、图2所示。限制性内切核酸酶BamHI、Sau3AI、HindIII识别的碱基序列和酶切位点分别为
请回答下列问题:
(1)图1质粒中没有显示的结构是______,启动子的功能是______________。
(2)基因工程中除质粒外,______也可以作为运载体。若用图中质粒和转座酶F35H基因构建基因表达载体时,最好选用______两种限制酶来切割质粒和含目的基因的DNA片段,理由是________。
(3)将构建好的重组质粒转入土壤农杆菌,最终成功导入蓝色素基因的农杆菌,在含氨苄青霉素培养基、含四环素培养基、同时含氨苄青霉素和四环素的培养基上的生存状况应该是_______________。
(4)检测转座酶F35H基因是否成功在普通矮牵牛细胞中转录,常采用的检测技术是______。
(5)通过基因工程,将转座酶F35H基因导入普通矮牵牛中,获得蓝色矮牵牛花新品种的育种原理是__________________。相比传统的花卉育种方法,利用基因工程育种的优点是_________(答出2点即可)。27、果胶甲酯酶具有催化水解果胶的作用;为获得高产;高纯度的胞外果胶甲酯酶,下图表示某科研小组设计的黑曲霉工程菌的构建和发酵流程图。
回答下列问题:
(1)科研小组从基因数据库中获得果胶甲酯酶基因序列后,需要根据果胶甲酯酶基因设计_______________,以扩增出大量果胶甲酯酶基因片段。利用农杆菌进行转化,在构建重组基因表达载体时,应将果胶甲酯酶基因插入Ti质粒上的______________之间,确保侵染黑曲霉菌后能成功表达。为提高构建重组表达载体的成功率,在构建重组表达载体过程中加入缓冲液,其目的是______________。
(2)获得转基因的黑曲霉后,可以通过______________获得纯培养物,该过程需要______________作为对照。为判断高产果胶甲酯酶黑曲霉工程菌是否构建成功,可对单位量的转基因黑曲霉进行发酵产酶实验,即通过检测并比较转基因黑曲霉_______________。因黑曲霉自身某种蛋白质的物理和化学性质与果胶甲酯酶相似,造成提取产物纯度不高,可通过_______________;避免该蛋白产生,实现获得高纯度的果胶甲酯酶。
(3)获得的黑曲霉工程菌需先进行活化和______________培养后才能接种到发酵罐中进行大型发酵,以缩短发酵时间。发酵过程需保持______________(至少写两点);适宜pH、充足的氧气等条件;保证发酵过程不受杂菌污染和菌体能正常生长。
(4)发酵结束后将发酵液进行离心处理,取______________进行果胶甲酯酶的分离和纯化工作。在分离过程中使用一定浓度的硫酸铵处理发酵液后获得有活性的果胶甲酯酶沉淀物,原因是在一定浓度的硫酸铵条件下______________。参考答案一、选择题(共7题,共14分)1、A【分析】【分析】
基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶。农杆菌特点:易感染双子叶植物和裸子植物;对大部分单子叶植物没有感染力;Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。目的基因导入受体细胞后需要进行检测和鉴定,才能确定其是否导入或成功表达。
【详解】
A;⑤只要表现出抗虫性状就表明抗虫基因表达了;即发生了可遗传变异,A正确;
B;③侵染植物细胞后;重组Ti质粒上的T-DNA整合到植物细胞的染色体上,B错误;
C;若受体细胞的染色体上含抗虫基因;并不代表该基因就一定成功表达,因此不能确定⑤是否表现出抗虫性状,C错误;
D;重组质粒的构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与;D错误。
故选A。2、D【分析】【分析】
1.蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础;通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求.(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质)
2.蛋白质工程的基本原理:它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构;又称为第二代的基因工程。
【详解】
A;④过程是根据蛋白质的结构推测相应的氨基酸序列;进而通过⑤过程推测应有的基因序列,进而合成相关的基因,即代表蛋白质工程操作思路的过程是④⑤,A正确;
B;图中①代表转录;②代表翻译,显然,属于中心法则内容的是①②,B正确;
C;根据蛋白质的设计思路可知;图中①代表转录,②代表翻译,④代表分子设计,⑤代表DNA合成,C正确;
D;蛋白质工程的目的是对蛋白质的结构进行分子设计;通过基因合成或修饰实现,D错误。
故选D。
【点睛】3、D【分析】【分析】
植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性;其过程为:离体的植物组织,器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织(高度液泡化,无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松;无规则的组织),愈伤组织经过再分化过程形成胚状体,进一步发育成为植株。
【详解】
A;叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞愈伤组织;A错误;
B;叶肉细胞经脱分化过程可形成愈伤组织;B错误;
C;融合植物叶肉细胞时;应先去掉细胞壁,C错误;
D;叶肉细胞wanzhe以形成一个完整的植株;表现出全能性,D正确。
故选D。4、C【分析】【分析】
1;动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
2;细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上;称为细胞贴壁.细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。
【详解】
A、处理肝组织块获得到肝细胞悬液用胰蛋白酶,A错误;
B、细胞培养应在含5%CO2,CO2用于维持培养液的pH值,B错误;
C、正常细胞不具有无限增殖能力,培养一段时间后会停止分裂,C正确;
D;病毒只能寄生在活细胞中;不能用培养液直接培养,D错误。
故选C。5、A6、B【分析】【分析】
试管婴儿是精子和卵细胞进行体外受精;然后通过胚胎早期培养;胚胎移植技术获得,属于有性生殖的范畴;而克隆猴是利用细胞核移植技术和胚胎移植技术获得的,属于无性生殖的范畴,并且体现了细胞核的全能性。
【详解】
A;试管婴儿和克隆猴的成功率都比较低;A错误;
B;试管婴儿和克隆猴的获得都需要利用胚胎移植技术;B正确;
C;试管婴儿是精子和卵子进行体外受精;然后通过早期胚胎培养、胚胎移植等获得的,属于有性生殖的范畴,C错误;
D;体外受精和细胞核移植都没有涉及基因重组;D错误。
故选B。7、C【分析】【详解】
A;科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞;包括借助载体将特定基因导入细胞中,直接将特定蛋白质导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞,A争取;
B;根据题干“将这种iP5细胞放置在特殊的孵化器中培养;得到了一种类似原肠胚的结构”,推测特殊的孵化器可能模拟了子宫的特殊环境,B正确;
C;原肠胚外胚层发育成神经系统、感觉器官、表皮及其附属结构;囊胚滋养层细胞;将发育成胎膜和胎盘,C错误;
D;iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞;将它移植回人体内后,理论上可以避免免疫排斥反应,D正确。
故选C。二、多选题(共8题,共16分)8、A:B:D【分析】【分析】
单克隆抗体的制备。
(1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的抗原;然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。
(2)获得杂交瘤细胞:
①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合;
②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞;该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。
(3)克隆化培养和抗体检测;
(4)将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖;
(5)提取单克隆抗体:从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。
【详解】
A;单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的;A正确;
B;根据题意可知;“阿霉素可抑制DNA和RNA的合成”,因此活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程,B正确;
C;在治疗中;应将非活化磷酸阿霉素和生物导弹同时注射,C错误;
D;单克隆抗体特异性强;能减轻阿霉素对正常细胞的伤害,D正确。
故选ABD。9、B:C:D【分析】1;酵母菌的新陈代谢类型为异养兼性厌氧型;在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖,再隔绝氧气进行发酵;酒精发酵的最佳温度是在18℃~25℃,pH最好是弱酸性。
2;乳酸菌的代谢类型是异养厌氧型;在无氧条件下乳酸菌能够将葡萄糖分解为乳酸。
【详解】
A;乳酸菌为严格厌氧菌;只能进行无氧呼吸,A错误;
B;面包液、糖化液主要成分为糖类;也含有其他物质,可为微生物的生长提供碳源、氮源、水和无机盐等营养物质,B正确;
C;酵母菌产酒精能力与其耐受酒精的能力有关;利用选择培养基,向培养基中添加较高浓度的酒精筛选出产酒精能力比较强的酵母菌,C正确;
D;过程③中瞬时高温会破坏微生物的蛋白质空间结构;进而将微生物杀死达到灭菌效果,D正确。
故选BCD。10、A:B:D【分析】【分析】
植物体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞;能克服远缘杂交不亲和的障碍。
【详解】
A;与传统的杂交育种相比;植物体细胞的杂交能克服远缘杂交不亲和的障碍,因此,与杂交育种相比,原生质体融合育种能扩大亲本的选择范围,A正确;
B;原生质体为显微结构;可用光学显微镜来检测原生质体的形成情况,B正确;
C;每隔一段时间;从试管中吸出反应液进行计数前,需将试管轻轻振荡数次,目的是使培养液中的原生质体均匀分布,减少误差,C错误;
D;据图中数据推测;随着溶壁酶反应时间的延长,原生质体浓度先升高后降低,可推测在高渗溶液中有原生质体的裂解,导致原生质体的浓度降低,D正确。
故选ABD。11、B:D【分析】【分析】
1;分离菌株的思路:
(1)自然界中目的菌株的筛选:
①依据:根据它对生存环境的要求;到相应的环境中去寻找。
②实例:PCR技术过程中用到的耐高温的TaqDNA聚合酶;就是从热泉中筛选出来的Taq细菌中提取出来的。
(2)实验室中目的菌株的筛选:
①原理:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养;温度、pH等);同时抑制或阻止其他微生物生长。
2;统计菌落数目的方法:
(1)稀释涂布平板法(间接):
①当样品的稀释庋足够高时;培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。
②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有的活菌数。
(2)利用显微镜直接计数。
【详解】
A;富集培养基为液体培养基;不应含有琼脂,A错误;
B;分离、纯化能降解PVC塑料膜的微生物的选择培养基中需加入PVC塑料膜作为唯一碳源;B正确;
C;转接至固体斜面培养基上的不同菌落置于4℃的冰箱临时保存;对于需要长期保存的菌种,可用甘油管藏的方法,C错误;
D;如果对白色污染进行传统填埋、焚烧容易造成二次污染;黄粉虫肠道微生物对白色污染的降解不会,D正确。
故选BD。12、A:B:C【分析】【分析】
1;参与果酒制作的微生物是酵母菌;其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。
2;参与果醋制作的微生物是醋酸菌;其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理:当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。
3;参与腐乳制作的微生物主要是毛霉;其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理:毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。
4;泡菜的制作原理:泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下;乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
【详解】
A;在无氧条件下;乳酸菌能将葡萄糖分解成乳酸,腌制泡菜利用了乳酸菌的乳酸发酵,A正确;
B;参与腐乳制作的微生物主要是毛霉;制作腐乳利用了毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸,B正确;
C;酵母菌在无氧条件下;可通过无氧呼吸产生酒精和二氧化碳,制作果酒利用了酵母菌在无氧条件下产生酒精,C正确;
D;醋酸菌是好氧型生物;制作果醋利用了醋酸菌在有氧条件下产生醋酸,D错误。
故选ABC。13、A:B:D【分析】【分析】
1;生物武器是利用生物战剂杀伤人员、牲畜、毁坏植物的武器。生物武器又是生物制剂、载体和分散手段的综合利用。生物武器自诞生以来;给人类的生存安全构成了严重威胁。
2;转基因生物的安全性问题包括食物安全、生物安全和环境安全。
3;“治疗性克隆”将使人胚胎干细胞(简称ES细胞)造福于人类的一种非常重要的途径。治疗性克隆是指把患者体细胞移植到去核卵母细胞中构建形成重组胚胎;体外培养到一定时期分离出ES细胞,获得的ES细胞定向分化为所需的特定类型细胞(如神经细胞、肌肉细胞和血细胞),用于治疗。
【详解】
A;对待生物武器的态度应明确而坚定;即在任何情况下都不发展、不生产、不储存生物武器,坚决禁止生物武器,A正确;
B;转基因要注意基因安全;对外源DNA要进行认真选择,避免产生对人体有害的或过敏的蛋白质,B正确;
C;中国对于克隆人的态度是不反对治疗性克隆;禁止进行克隆人的实验,C错误;
D;一旦发现转基因生物出现了安全性问题;包括食品安全、生物安全和生态安全,要马上停止试验,并销毁重组生物,D正确。
故选ABD。14、A:B:D【分析】【分析】
植物组织培养中植物激素使用:物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素;同时使用生长素和细胞分裂素时;两者用量的比例影响植物细胞的发育方向;先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂又分化。
【详解】
A;Ⅰ阶段为脱分化;II阶段和Ⅲ阶段为再分化,Ⅰ、II、Ⅲ阶段中会发生基因的选择性表达,A错误;
B;实验至少配制了3种不同的培养基;即形成愈伤组织的培养基、生根培养基和生芽培养基,B错误;
C、由于参照品种B的激素配比(a2>2.0),以0.5μmol/L为梯度,设计5个浓度水平的实验,则细胞分裂素浓度依次为a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L,可见细胞分裂素的最高浓度M应设为a2+1.0μmol/L;C错误;
D;生长素和细胞分裂素的配比是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素;D正确。
故选ABD。15、A:C:D【分析】【分析】
动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核;移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育成为动物个体。
【详解】
A;克隆北极狼的供体细胞来自野生北极狼;卵母细胞来自发情期的母犬,因此性状由野生北极狼、发情期的母犬的基因共同决定,比格犬只是代孕母体,不提供遗传物质,A错误;
B;透明带下注射法不抽取供体细胞的细胞核;操作简单且对供体细胞核损伤小,同时注射的位置是卵母细胞外的透明带,然后诱导两个细胞融合,对卵母细胞的损伤小,B正确;
C;供体细胞注入卵母细胞透明带内后;还需要电融合法等诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚,C错误;
D;细胞分裂、分化形成克隆胚胎的过程是有丝分裂过程;而基因重组发生在减数分裂过程,D错误。
故选ACD。三、填空题(共7题,共14分)16、略
【分析】【详解】
生物武器种类:包括致病菌、病毒、生化毒剂,以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方,可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。【解析】①.直接②.食物③.生活必需品17、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】液体发酵固体发酵葡萄糖定量18、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】基因文库人工合成PCR技术19、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】不同浓度的NaCL溶液DNA杂质20、略
【分析】【分析】
分析图1:表示多年前感染EV并已康复的甲;乙两人的血液中抗EV-GP抗体的水平。根据曲线图可知;多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组。
分析图2:表示单抗与病毒混合后病毒对宿主细胞的感染率。根据柱形图可知;单克隆抗体和病毒混合,加入单抗Ⅲ;Ⅴ后,病毒对宿主细胞的感染率明显低于其他组别。
【详解】
(1)由题意可知;新型冠状病毒表面的S-蛋白作为抗原刺激淋巴细胞,使机体产生特异性免疫反应,人细胞膜上的ACE2的化学本质是蛋白质。
(2)免疫系统对被新冠病毒感染后肺细胞强烈攻击引发肺炎;此时可通过适度使用免疫抑制剂对病人进行治疗,使其免疫功能下降,以避免肺部严重受损。
(3)由图1可知;多年前感染EV并已康复的甲的血液中抗EV-GP抗体水平明显高于乙和对照组,故应选取甲的B细胞用以制备单克隆抗体。
(4)由图2可知;单克隆抗体和病毒混合,加入单抗Ⅲ后,病毒对宿主细胞的感染率较低。因此抑制效果最好的单抗是Ⅲ。
(5)患者康复后一段时间;若再次受到该病毒的攻击,机体内相应的记忆细胞迅速增殖分化,产生大量的浆细胞和细胞毒性T细胞。
【点睛】
本题结合图解,考查病毒、单克隆抗体的制备等,要求考生识记病毒的结构,明确病毒没有细胞结构;识记单克隆抗体的制备过程,掌握其优点及相关应用,能结合图中信息准确答题【解析】①.抗原②.特异③.糖蛋白(或蛋白质)④.免疫抑制剂⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.记忆21、略
【分析】【详解】
蛋白质工程的基本途径:从预期的蛋白质功能出发,设计预期的蛋白质结构,推测应有的氨基酸序列,找到相对应的脱氧核苷酸序列,以下按照基因工程的一般步骤进行。该蛋白质的氨基酸序列已知,因此通过蛋白质工程,生产该蛋白质新药的基本过程为:根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药。【解析】根据已知的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成该蛋白质新药基因→将获得的目的基因与质粒构建形成基因表达载体→将重组质粒导入受体菌→获得工程菌→生产该蛋白质新药22、略
【分析】【分析】
【详解】
略【解析】个体生物学水平抗虫性状。四、实验题(共2题,共14分)23、略
【分析】【分析】
PCR原理:在解旋酶作用下;打开DNA双链,每条DNA单链作为母链,以4种游离脱氧核苷酸为原料,合成子链,在引物作用下,DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链,即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物,其主要原因是DNA聚合酶只能从3'端延伸DNA链。
【详解】
(1)利用RNA得到相应DNA的方法为逆转录;起作用的酶为逆转录酶。在体外将DNA扩增的技术是PCR,中文名称为多聚酶链式反应。
(2)PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术;该过程需要热稳定DNA聚合酶(Taq酶),热稳定DNA聚合酶(Taq酶)能够使脱氧核苷酸从引物的3'端开始连接,使子代DNA从5'向3'延伸;进行扩增时,还应选择一对方向相反的引物,且与模板的3'端结合,据图可知,应选择Ⅱ;Ⅲ。
(3)细胞内是否合成了由目的基因控制的蛋白质,使用抗原-抗体杂交法检测,为了检验表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性,可用S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行抗原-抗体杂交实验来进行检测,本实验是验证性实验,实验结果是唯一的,因此本实验结果是出现杂交带。【解析】(1)逆转录多聚酶链式反应。
(2)热稳定DNA聚合酶##Taq酶3'II;Ⅲ
(3)用表达的S蛋白与新冠病毒肺炎康复患者血清进行抗原-抗体杂交实验出现杂交带24、略
【分析】【分析】
基因突变是指DNA分子中发生碱基对的替换;增添和缺失;而引起的基因结构的改变。翻译是指在核糖体上,以mRNA为模板、以氨基酸为原料合成蛋白质的过程,该过程还需要tRNA来运转氨基酸。
密码子由位于mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻的碱基组成。终止密码子的作用是终止翻译过程。
基因工程中检测目的基因在受体细胞内是否成功表达可以用抗原-抗体杂交技术。
【详解】
(1)由题干信息可知;黏多糖贮积症患者细胞中IDUA基因突变后,转录出的mRNA长度不变,说明其没有发生碱基对的增添和缺失,因为这两者改变会导致转录出的mRNA长度改变,因此推测其基因突变是由于碱基对替换。由于终止密码子提前出现,导致翻译提前终止,肽链变短,IDUA酶分子量变小,空间结构改变而失活。
(2)由题干可知;抑制性tRNA(sup-tRNA)可以最终诱导核糖体通读mRNA上的遗传信息合成具有功能的全长蛋白,并且抑制性tRNA(sup-tRNA)与普通tRNA的结构;功能相同,据此推测该抑制性tRNA可以携带氨基酸至核糖体并与终止密码子碱基配对使翻译过程继续。
(3)本实验目的是比较携带不同氨基酸的sup-tRNA的通读效果;需要保证实验组细胞含有突变IDUA基因,即其不能合成具有正常功能的IDUA酶(防止正常IDUA酶对实验结果产生干扰),同时保证在不同的实验组细胞中可以转录出携带不同中氨基酸的sup-tRNA,因此实验组中受体细胞中应该含有导入携带不同氨基酸的sup-tRNA基因和突变IDUA基因。若要判断各个实验组细胞中携带不同氨基酸的sup-tRNA是否成功诱导了具有功能的IDUA酶,可以采用该酶的特异性抗体对其进行检测,即进行抗原-抗体杂交。分析题图可知,与对照组(含正常IDUA基因的组)相比,含携带酪氨酸的sup-tRNA的受体细胞中表达的全长IDUA蛋白量比其他实验组都多,说明其能有效恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成,且效果最好。
(4)由以上实验可知,携带酪氨酸的sup-tRNA能有效诱导核糖体对突变IDUA基因转录出的mRNA进行通读,进而产生具有正常功能的IDUA酶,因此利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA突变基因纯合小鼠进行治疗,与不进行治疗的IDUA突变基因纯合小鼠相比,治疗组小鼠的IDUA酶活性高,组织黏多糖积累量少;同时,利用携带酪氨酸的sup-tRNA对IDUA基因敲除小鼠进行治疗,与不进行治疗的IDUA基因敲除小鼠相比,由于二者都不含有IDUA基因,则其细胞内都没有相应mRNA,因此携带酪氨酸的sup-tRNA无法发挥作用,最终导致治疗组与不治疗组的IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异。【解析】(1)替换减少。
(2)识别终止密码子并携带氨基酸至核糖体使翻译过程继续。
(3)携带不同氨基酸的suptRNA基因和变IDUA抗原一抗体杂交恢复细胞中全长IDUA蛋白的合成;且效果最好。
(4)IDUA突变基因纯合小鼠IDUA酶活性高,组织黏多糖积累量少;IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性与组织黏多糖积累量无明显差异五、综合题(共3题,共12分)25、略
【分析】【分析】
1;分析题图:图中Ⅰ表示采用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞;培育转基因植物;Ⅱ表示采用感受态细胞法将目的基因导入微生物细胞。
2;基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取;利用PCR技术扩增和人工合成。
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤;基因表达载体包括目的基因;启动子、终止子和标记基因等。
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同;导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法;基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
【详解】
(1)利用mRNA为模板合成cDNA的过程为逆(反)转录;获得的cDNA一般采用PCR技术进行扩增,扩增时需要有一段已知目的基因的核苷酸序列,该技术需要用到热稳定DNA聚合酶,以催化合成DNA子链。由于启动子具有(物种及组织)特异性,所以构建在胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时;需要选择水稻胚乳细胞启动子,而不能选择其他物种和组织细胞的启动子,故扩增得到的HSA基因不含有启动子。
(2)HSA基因导入受体细胞前;需要实施基因表达载体的构建步骤,此步骤是基因工程的核心步骤。
(3)大肠杆菌是原核生物,具有繁殖快、单细胞、遗传物质少等优点,常作为基因工程的受体细胞;但是大肠杆菌没有生物膜系统,无内质网和高尔基体,不能对rHSA进一步修饰加工,获得的rHSA可能没有生物活性。
【点睛】
本题的关键是识记基因工程的原理及操作步骤,掌握各操作步骤的相关细节,能结合所学的知识和题干要求准确答题。【解析】反转录PCR热稳定DNA聚合酶(Taq酶)不含有基因表达载体的构建大肠杆菌无内质网和高尔基体,不能对rHSA进一步修饰加工26、略
【分析】【分析】
基因工程的基本操作程序:1;目的基因的获取:原核基因采取直接分离获得、真核基因是人工合成;人工合成目的基因的常用方法有反转录法、化学合成法、PCR技术扩
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