2025年苏教版选择性必修3生物下册月考试卷含答案

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年苏教版选择性必修3生物下册月考试卷含答案考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四五总分得分评卷人得分一、选择题(共6题，共12分)1、下列有关果酒和果醋制作的叙述，正确的是（）A.在果酒的制作过程中，应先去除葡葡的枝梗，再冲洗干净B.醋酸发酵时，需要通气的原因是促进醋酸菌通过有氧呼吸产生醋酸C.为防止发酵液被污染，榨汁机和发酵瓶使用前都必须灭菌D.制作果酒时，发酵瓶装入葡萄汁后，应封闭充气口2、利用卷心菜发酵制作泡菜过程中；乳酸菌酵母菌细胞数量和pH的变化如图所示。下列叙述不正确的是。

A.酵母菌和乳酸菌均有核膜包被的细胞核B.发酵初期乳酸菌建立了明显的菌种优势C.前6天pH下降主要由乳酸菌代谢引起D.发酵中期酵母菌通过无氧呼吸进行增殖3、标准的PCR过程一般分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要的温度依次是（）A.95℃、55℃、72℃B.72℃、55℃、92℃C.55℃、92℃、72℃D.80℃、55℃、72℃4、维生素对视力、骨骼生长、免疫功能都有重要的调节作用。但是，人体不能合成维生素A，需要从食物中摄取。β-胡萝卜素是维生素A的前体，在人体内可以转化为维生素A，科学家将两个参与β-胡萝卜素合成的酶基因psy和crI转入籼稻中，使水稻的胚乳含有中富含β-胡萝卜素，由此生产出“黄金大米”。以下说法错误的是（）A.“黄金大米”的培育过程要利用植株组织培养技术B.食用“黄金大米”可以缓解维生素A缺乏症的病情C.培育“黄金大米”过程中，转入籼稻细胞中的目的基因有两个D.Psy或crI基因序列中含有构建重组质粒所用限制酶的识别序列5、限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示．下列有关说法错误的是（）

A.a酶与b酶切断的化学键相同B.能被b酶识别并切割的序列也能被a切割C.在相同的DNA分子中a酶的识别位点一般明显要比b酶多D.将大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新连接后的DNA片段不一定全都能被a切割6、随着生命科学的发展，生物工程技术已广泛应用于农业、医药卫生和环境保护等多个领域，影响着我们的生产和生活。下列有关生物工程技术在生产实践中的应用，叙述正确的是（）A.利用发酵工程从微生物细胞中提取单细胞蛋白，生产微生物饲料B.利用植物组织培养技术培育脱毒苗，获得具有抗病毒的新品种C.利用胚胎移植能充分发挥雄性优良个体的繁殖潜力，发展畜牧业D.利用蛋白质工程能生产出自然界不存在的蛋白质，满足实际需求评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)7、利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示；下列叙述正确的是（）

A.过程①需使用逆转录酶B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞8、下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（）A.培养基一般为固体培养基B.培养结果只能获得大量细胞及生物制品，而不能获得生物体C.需要氧气来满足细胞代谢的需要，不需要二氧化碳D.通过细胞培养可以检测有毒物质，判断某物质的毒性9、我国研究人员创造出一种新型干细胞——异种杂合二倍体胚胎干细胞；具体研究过程如下图所示，下列叙述正确的是（）

A.单倍体囊胚1最可能是由卵子发育预带的，单倍体ES应取自囊胚的内细胞团B.培养液中除了需要加入血清等营养物质，还需要加入抗生素等消灭病毒C.体外培养条件下ES细胞可以增殖而不发生分化D.ES细胞在形态上表现为体积大、细胞核小、核仁明显10、利用PCR技术扩增目的基因；其原理与细胞内DNA复制类似（如图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的是（）

A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连C.退火温度过高可能导致PCR得不到任何扩增产物D.每一循环都消耗引物和原料，需要在操作中及时补充11、研究人员从土壤中筛选得到酵母菌纤维素酶高产菌株；并对其降解纤维素的条件进行了研究。据图分析正确的是（）

A.筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养B.探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右C.该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃D.利用该高产菌株降解纤维素时需严格保持厌氧环境12、将单克隆抗体与前体药物的专一性活化酶藕联（简称抗体导向酶偶联）是特异性治疗肿瘤并减少对正常细胞伤害的最新研究方向。碱性磷酸酶是抗肿瘤药物多柔比星前体的专一性活化酶，医学研究中利用抗体导向酶偶联机理将碱性磷酸酶与单克隆抗体制成“生物导弹”，通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤，进而抑制以DNA为模板进行的生理活动，达到治疗肿瘤的目的。下列说法正确的是（）A.为获得单克隆抗体应首先给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，得到能产生特定抗体的B淋巴细胞B.制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程C.生物导弹综合利用了碱性磷酸酶的定向制导作用和单克隆抗体的特异性杀伤能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的细胞13、下列关于基因工程中几种工具的叙述，正确的是（）A.限制酶可水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键B.DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接起来C.DNA聚合酶能够从核苷酸片段末端延伸DNA或RNAD.作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因14、白地霉侵染是导致柑橘酸腐病的主要原因，实验证明桔梅奇酵母通过分泌普切明酸对白地霉具有生物防治能力。已知铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究配制的含有不同浓度FeCl3的培养基如下表所示。实验结果为随FeCl3浓度增大，抑菌圈红色加深但变窄，如下图所示。相关叙述正确的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水琼脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素，琼脂不是营养物质B.白地霉采用了平板划线法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.结果表明，FeCl3浓度增大，普切明酸与Fe3+结合的数量减少D.结果表明，FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果15、某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆菌细胞并表达。下列叙述正确的是（）

A.图中的质粒用酶A切割后，会产生4个游离的磷酸基团B.在构建重组质粒时，可用酶A和酶C切割质粒和目的基因C.成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长D.若用酶B和酶C切割，可以避免质粒的自身环化评卷人得分三、填空题(共6题，共12分)16、在筛选纤维素分解菌的过程中，人们发明了___________，这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。刚果红(CongoRed，简称__________)是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成____________，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红一纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的______________。这样，我们就可以通过是否产生________________来筛选纤维素分解菌。17、本课题对能分解尿素的细菌进行了初步的筛选。但是，这只是分离纯化菌种的第一步。对分离的菌种作进一步的鉴定，还需要借助生物化学的方法。在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的___________将尿素分解成了_____________。氨会使培养基的________________，pH______________。因此，我们可以通过检测培养基______________来判断该化学反应是否发生。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_____________，培养某种细菌后，如果pH升高，指示剂将变________________。18、载体具备的条件：①_____。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③______。19、概念：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成______，然后放在适宜的______中，让这些细胞______。20、请回答有关植物细胞工程的问题：

（1）在植物中，一些分化的细胞，经过________的诱导，可以脱分化失去其__________而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中，将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温_________（填：“光照”或“黑暗”）条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到_________培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中，由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到__________的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含_____的培养基上，获得所需个体。21、首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了______，方法是采用______。评卷人得分四、实验题(共3题，共6分)22、研究表明生物制剂W对不同种类动物细胞的分裂均有促进作用。有同学设计相关实验来验证这个观点。请根据以下提供的实验材料；完善该实验步骤，并预测实验结果。

实验材料：培养液；正常肝组织、肝癌组织、W、胰蛋白酶。

（要求与说明：答题时不考虑加入W后的体积变化等误差。提供的细胞均具有分裂能力；只进行原代培养且培养条件适宜）

（1）实验步骤：

①用_________分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。培养液需要中加入__________等营养物质和__________用以灭菌。

②在显微镜下用_____________直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③取灭菌后的培养瓶若干个均分为A、B两组，A组加入正常肝细胞悬液；B组加入_________。从A、B组中各取出一半培养瓶作为C、D组，分别加入_________。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入_____________后摇匀；在显微镜下计数并记录细胞数量。

⑤重复④若干次。

⑥统计并分析所得数据。

（2）预测实验结果（用坐标系和曲线示意图表示）_____________23、β-苯乙醇是具有令人愉悦的玫瑰香味的高级芳香醇；广泛用于食品和日化用品等生产领域。化学合成β-苯乙醇会产生多种杂质，而植物萃取则周期长；成本高，因此采用微生物合成天然β-苯乙醇是工业化新趋势。研究小组从玉米胚芽粕和玉米皮等淀粉加工下脚料及其肥料堆放的土壤中筛选可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株（YDF-1），实验过程如图所示。回答下列问题：

(1)该实验需制作多种培养基，这些培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、__________等物质，培养基制作后需使用__________法进行灭菌，灭菌后的培养基再添加相应浓度的β-苯乙醇。由实验目的可知，初筛、复筛及再次复筛的培养基中，添加的β-苯乙醇的浓度应__________（填“保持不变”或“逐渐增大”或“逐渐降低”），理由是__________。

(2)若取稀释倍数为104的0．1mL稀释液涂布到含2g/L的YEPD培养基后培养至菌落稳定，计算得出每毫升菌悬液中含4．5×106个菌体，则在该稀释倍数下平板上的平均菌落数是__________个。将初筛获得的菌株进行液体培养，其目的是________。

(3)若选用葡萄糖作为碳源，为确定YDF-1增殖的最佳浓度，请设计一个较为简便的实验进行探究，实验设计思路是__________。24、番茄果实在成熟的过程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成显著增加，以降解果胶使细胞壁破损，从而使果实变红变软，但不利于保鲜。科学家利用基因工程得到转基因番茄，大大延长果实保质期。操作流程如下，回答下列问题：

（1）利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因，最好从番茄的_____细胞中提取mRNA，此技术所需要的酶主要有_____。

（2）据图可知，转基因番茄主要通过抑制PG基因的_____过程；使PG合成量减少，从而延长果实保质期。

（3）图中的农杆菌。能够在含_____的培养基中生存，而在含_____的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌。

（4）图中将反向连接PC基因导入番茄细胞的方法称为_____。要检测感染农杆菌后的番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用标记的PG基因的单链作为探针进行检测，理由是_____。

（5）在将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中，培养基_____（填“要”或“不要”）添加有机营养物质，原因是_____。评卷人得分五、综合题(共4题，共32分)25、某校同学在实验室开展生物技术实践活动．请回答下列有关问题：

（1）A组同学制作泡菜。在泡菜腌制的过程中，最后要向坛盖边沿的水槽中注满水，这目的是____________。

（2）B组同学制作腐乳。在制作腐乳过程中，在腐乳表面往往会有一层致密的皮，这层皮实际上是微生物的________；对人体无害。

（3）C组同学在蓝莓果汁中直接加入某品牌活性酵母，之后先向发酵罐中通入一段时间的无菌空气，通入无菌空气的目的是______________。

（4）如果将制作好的果酒用于果醋的制作，主要是利用醋酸菌将乙醇转化为_______，然后再转化为________。26、类胡萝卜素具有抗癌；降血脂等多种生物学功能。P蛋白是催化类胡萝卜素形成的关键酶；研究者从裙带菜中克隆了P基因，按下图所示流程进行基因工程操作。

(1).研究者从裙带菜中提取了总RNA，利用逆转录方法获得_________（作为模板），设计特异性_________，利用PCR技术扩增得到P基因。将P基因与质粒载体重组时，需要使用的酶包括_________________________。流程图中①_______菌，②________________技术。

(2).随机选取9株转基因苗，利用PCR、电泳检测的结果如图2，分析结果说明没有成功转入P基因的植株是_________。检测P基因的mRNA相对含量，结果如图3，研究者选择转基因烟草植株2进行后续研究，请说明理由________________________________________。

27、甘蓝型油菜中；抑制PEP基因的表达可提高油菜籽的含油量。通过基因工程将PEP基因反向连接在启动子后，构建转反义PEP基因油菜是提高油菜籽含油量的常用技术路径。请回答下列问题：

(1)为将PEP基因反向连接在启动子后，构建反义PEP基因，需要将限制酶酶切位点设计在引物上，PEP基因的上游引物和下游引物中应分别引入________酶切位点。

(2)用激光照射油菜愈伤组织时，可在细胞膜上打出一个穿孔，转反义PEP基因表达载体由此小孔进入油菜细胞，几秒钟后小孔封闭，该过程体现了细胞膜具有____________。目的基因表达载体进入细胞后；Ti质粒上的T－DNA区段可转移到油菜细胞的基因组中。

(3)筛选时，需在油菜愈伤组织培养基中加入__________进行初步选择。在激光照射下，存活的细胞一般会发出______________。为检测反义PEP基因是否整合到染色体上，研究者通常检测细胞中是否存在ntp基因，而不检测PEP基因。不直接检测PEP基因的原因是________________。28、如图是某种动物蛋白质工程的示意图；请分析回答：

（1）目前蛋白质工程中难度最大的是图中编号__________所示的过程，实现③过程的依据有___________________________________________________________________________________。

（2）若相关蛋白质的核酸片段是从细胞质获取的，则④过程需要________酶。

（3）⑤过程中对核苷酸序列有严格要求的工具酶是________，进行⑤过程的目的是___________________________________________________________________________________。参考答案一、选择题(共6题，共12分)1、D【分析】【分析】

1.在利用酵母菌发酵时；最好是先通入足够的无菌空气，在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。

2.醋酸菌是好氧型细菌；当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。

【详解】

A；在果酒的制作过程中；应先冲洗干净，再去除葡葡的枝梗，以免杂菌污染，A错误；

B；醋酸发酵阶段需要通气的原因是醋酸菌对氧气的含量特别敏感；当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡，B错误；

C；榨汁机要清洗干净；并晾干；发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70%的酒精消毒，C错误；

D；酵母菌进行酒精发酵时需要无氧环境；因此装入葡萄汁后，应封闭发酵装置的充气口，D正确。

故选D。

【点睛】2、A【分析】【详解】

乳酸菌是原核生物，细胞内没有核膜包围的细胞核，A错误；根据曲线图中乳酸菌和酵母菌的数量变化曲线对比分析可知，发酵初期乳酸菌远多于酵母菌，所以乳酸菌成为了明显的优势菌种，B正确；结合曲线图分析，前6天，由于乳酸菌远多于酵母菌，其产生的乳酸会降低培养液的pH，所以C正确；由于整个发酵过程都是在无氧环境条件下进行的，在发酵中期（22-26天），酵母菌明显增多，酵母菌增多只能是通过无氧呼吸增殖，D正确。3、A【分析】【分析】

PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性；低温复性、中温延伸。

【详解】

标准的PCR过程一般分为变性；复性、延伸三大步；其中变性需要高温使DNA解螺旋，故为95℃；而复性是在较低温度下，两种引物和DNA单链想结合，故温度为55℃；延伸为在DNA聚合酶的作用下，合成新的DNA链，温度为72℃。A正确。

故选A。

【点睛】4、D【分析】【分析】

基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；一个基因表达载体需要含有目的基因；启动子、终止子及标记基因等，其中标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来；在构建时，需要用相同的限制酶分别切割目的基因和载体，以获得相同末端，然后用DNA连接酶将二者连接，为保证基因表达载体能有效发挥作用，在限制酶切割时不能破坏目的基因、标记基因等必需结构。

【详解】

A；“黄金大米”的培育过程要利用植株组织培养技术将含有目的基因的籼稻细胞培育成完整植株；最终获得胚乳中富含β-胡萝卜素的大米，A正确；

B；“黄金大米”的胚乳含有中富含β-胡萝卜素；β-胡萝卜素可以缓解维生素A缺乏症的病情，B正确；

C、培育“黄金大米”过程中，转入籼稻细胞中的目的基因包括两个参与β-胡萝卜素合成的酶基因psy和crtⅠ；C正确；

D、Psy和crtⅠ基因为目的基因；其基因序列中若含有用到的限制酶的识别序列，则基因结构会被破坏，因此这两个基因内均不能含有限制酶的识别位点，D错误。

故选D。5、D【分析】【分析】

分析题图：限制酶a和限制酶b的识别序列不同；但两者切割产生的黏性末端相同，因此经过两种酶切后的黏性末端可在DNA连接酶的作用下连接形成重组DNA分子。

【详解】

A、a酶与b酶切断的化学键相同；都是磷酸二酯键，A正确；

B、据图分析，酶a的识别序列是-GATC-，酶b识别序列是-GGATCC-，酶b的识别序列包含酶a的序列，故能被b酶识别并切割的序列也能被a切割；B正确；

C、a酶的识别序列比b酶短，识别序列越短，含有的识别位点就越多，因此在相同的DNA分子中b酶的识别位点明显少于a酶；C正确；

D、将大量a酶和b酶切割后的片段混合，重新连接后的DNA片段全都能被a切割，但只有部分能被b酶切割；D错误。

故选D。6、D【分析】【分析】

1；发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物；另一类是菌体本身。

2；蛋白质工程的过程：根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）；最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成。

【详解】

A；单细胞蛋白是以淀粉或纤维素的水解液；制糖工业的废液等为原料，通过发酵获得的大量微生物菌体，并不是从微生物细胞中提取得到的，A错误；

B；因为分生组织的病毒极少；甚至没有病毒，所以将分生组织（如根尖、茎尖）进行离体培养能获得脱毒植株，但不能获得抗病毒植株，B错误;

C；胚胎移植技术的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力；C错误；

D蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础；通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。因此，蛋白质工程需通过基因修饰或基因合成来改造原有蛋白质，生产出自然界中不存在的新型蛋白质分子，D正确.

故选D。二、多选题(共9题，共18分)7、A:D【分析】【分析】

过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程；过程②表示利用PCR扩增目的基因；过程③表示将重组质粒导入大肠杆菌；过程④培养并筛选转基因大肠杆菌，级工程菌。

【详解】

A；过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，故A正确；

B；过程②表示利用PCR扩增目的基因；在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，故B错；

C；利用氯化钙处理大肠杆菌；使之成为感受态细胞，故C错；

D；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中；可以采用DNA分子杂交技术，故D正确。

故选AD。

【点睛】8、A:C【分析】【分析】

1；动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

2、动物细胞培养需要满足以下条件：①无菌、无毒的环境；②营养；③温度和pH；④气体环境：95%空气+5%CO2。

【详解】

A；动物细胞一般用液体培养基来培养；需要无菌、无毒的环境、基本营养物质、适宜的温度和pH、一定量的氧气和二氧化碳等，A错误；

B；由于动物细胞分化程度高；虽然细胞核内具有该物种的全套遗传物质，但单个细胞不能形成完整生物体，所以目前还不能通过动物细胞培养获得生物体，B正确；

C；动物细胞培养过程中；需要氧气满足细胞代谢，需要二氧化碳维持培养液的pH，C错误；

D；通过动物细胞培养可以生产生物制品；可以培养皮肤移植的材料，还可以检测有毒物质等，D正确。

故选AC。9、A:C【分析】【分析】

分析题图：小鼠的卵细胞体外培养到囊胚时期；取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体ES细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体ES细胞，两种ES细胞融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞，据此答题。

【详解】

A；图中的单倍体囊胚1最可能是由小鼠的卵子（卵细胞）发育而来；所采用的技术应为早期胚胎培养技术，图中的单倍体ES应取自囊胚的内细胞团细胞，该部位的细胞具有发育的全能性，A正确；

B；培养过程中使用的培养液除含有一些无机盐和有机盐外；还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及血清等物质，为避免杂菌污染，需要加入抗生素，B错误；

CD；ES在形态上表现为体积小、细胞核大、核仁明显；且在体外培养时可以维持只增殖不分化的状态，C正确、D错误。

故选AC。10、A:B:C【分析】【分析】

PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性；低温复性、中温延伸。

【详解】

A；用PCR方法扩增目的基因时；只要知道目的基因前后的序列用以设计引物就可以了，因此不必知道基因的全部序列，A正确；

B；PCR过程中需要两种引物分子；不同引物能靠碱基互补配对而形成（部分）双链的话会造成引物不能同模板DNA结合，也就不能发生进一步的链式反应，这一点需要避免，B正确；

C；若退火温度过高；则引物与模板DNA无法形成部分双链，PCR也就不能发生，C正确；

D；PCR技术中的引物和原料是一次性添加的；不需要补充，D错误。

故选ABC。

【点睛】11、A:B【分析】【分析】

分解纤维素微生物的分离实验原理：

（1）土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。

（2）在培养基中加入刚果红；可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；筛选该高产菌株需要在纤维素为唯一碳源的培养基中培养；A正确；

B；由pH与纤维素酶活性的曲线图分析可知；当pH为9时，纤维素酶的活性最高，故在探究最适温度时应尽可能将发酵液的pH控制在9左右，B正确；

C；由温度与纤维素酶活性的曲线图分析可知；当温度为35℃时纤维素酶的活性最大，但是由于缺少35℃之后的温度实验组，故无法判断该酵母菌高产菌株产生纤维素酶的最适温度是35℃，C错误；

D；酵母菌是兼性厌氧微生物；在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，故在降解初期需要给酵母菌提高有氧环境，以保证酵母菌的数量，D错误。

故选AB。

【点睛】12、A:B【分析】【分析】

单克隆抗体的制备。

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原；然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。

（2）获得杂交瘤细胞。①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合。②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞；该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测。

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

【详解】

A；单克隆抗体制备过程中；需要给小白鼠注射肿瘤细胞表面抗原，刺激小鼠产生体液免疫，才能得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A正确；

B；制备单克隆抗体的过程中至少要经过两次原理和目的均不同的筛选过程；第一次筛选杂交瘤细胞，第二次筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确；

C；生物导弹综合利用了单克隆抗体的定向制导作用和碱性磷酸酶的特异性杀伤能力；C错误；

D；根据题干信息“通过活化多柔比星使其对DNA造成损伤；进而抑制以DNA为模板进行的生理活动”，说明多柔比星还可以抑制细胞的转录过程，而不增殖的细胞也具有转录过程，D错误。

故选AB。13、A:B:D【分析】【分析】

基因工程中的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒；噬菌体的衍生物、动植物病毒。

【详解】

A；限制酶可识别并在特定位置水解DNA上相邻核苷酸间的磷酸二酯键；A正确；

B；DNA连接酶可以连接黏性末端相同；即末端碱基互补的两个DNA片段之间的磷酸二酯键，B正确；

C；DNA聚合酶只能从核苷酸片段末端延伸DNA；而不能延伸RNA，C错误；

D；标记基因可将含有目的基因的细胞筛选出来；故作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因，D正确。

故选ABD。14、A:D【分析】【分析】

1；培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求；配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。

2；微生物常见的接种的方法：

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、维生素；琼脂是凝固剂的一种，并不是营养物质，在培养液中加入琼脂可以使液体培养基成为琼脂固体培养基，A正确；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接种都采用了涂布平板法；B错误；

C、随培养基中FeCl3浓度的增加，普切明酸与Fe3+的结合增强；抑菌圈的红色加深，C错误；

D、普切明酸与Fe3+形成红色复合物，但随培养基中FeCl3浓度的增加，抑菌圈变窄，说明FeCl3能降低桔梅奇酵母对白地霉的防治效果；D正确。

故选AD。15、A:D【分析】【分析】

分析题图：图中质粒和外源DNA都含有限制酶A；B、C的识别序列和切割位点；若用酶A切割会同时破坏质粒上的两个抗性基因。

【详解】

A；质粒中含有2个酶A的酶切位点；所以切割后会产生4个游离的磷酸基团，A正确；

B；如果用酶A和酶C同时切割质粒；会破坏质粒的标记基因，B错误；

C；根据B项分析；需要用酶B和酶C切割质粒和目的基因，导致四环素抗性基因被破坏，所以不能在含四环素的培养基中生长，C错误；

D；若用酶B和酶C切割；产生不同的黏性末端，可避免质粒自身环化，D正确。

故选AD。三、填空题(共6题，共12分)16、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】刚果红染色法CR红色复合物透明圈透明圈17、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】脲酶氨碱性增强升高pH的变化酚红指示剂红18、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】能在受体细胞中复制并稳定保存具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择19、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】组织单个细胞培养基生长和繁殖20、略

【分析】【分析】

植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度；适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例；特别是生长素和细胞分裂素的协同作用在组织培养过程中非常重要，被称为“激素杠杆”。

【详解】

（1）在植物中；一些分化的细胞，经过激素的诱导，可以脱分化失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞。

（2）胡萝卜的组织培养中；将接种后的胡萝卜组织块，放在恒温黑暗条件下培养。一段时间后，将生长良好的愈伤组织转接到分化培养基上继续培养。

（3）在植物组织培养过程中；由于培养细胞一直处于不断的分生状态，因此容易受到培养条件和外界压力的影响而产生突变。为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将种子播种在含一定浓度的盐的培养基上，获得所需个体。

【点睛】

本题考查植物组织培养的相关知识，要求考生识记植物组织培养的过程、原理及条件，掌握植物组织培养技术的相关应用，能结合所学的知识准确分析，属于考纲识记和理解层次的考查。【解析】①.激素②.特有的结构和功能③.黑暗④.分化⑤.培养条件和外界压力⑥.一定浓度的盐21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】目的基因DNA分子杂交技术。四、实验题(共3题，共6分)22、略

【分析】【分析】

1；动物细胞培养的条件：

（1）无菌；无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液；以清除代谢废物；

（2）营养物质：糖；氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等；还需加入血清、血浆等天然物质；

（3）适宜的温度和pH；

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。

2；实验操作步骤的安排一般如下：第一步：取材随机均分为几组；编号；第二步：不同组自变量的处理；第三步：把上述各组放在无关变量相同且适宜等条件下处理一段时间；第四步：观察并记录比较相应的因变量。根据题意可知，本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用，则该实验的自变量是细胞的种类及是否加入生物制剂W，因变量是细胞悬液中细胞的数目，对细胞直接计数可以采用血球板计数法。

【详解】

（1）①动物细胞培养前需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分别处理正常肝组织和肝癌组织获得分散的细胞。将两种分散的细胞加入培养液中制成两种细胞悬液。动物细胞的培养液中需要加入葡萄糖；氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；为了保证无菌的条件，一般在培养液中加入一定量的抗生素。

②在显微镜下可以采用血球计数板直接计数两种细胞悬液中细胞的数量；并进行记录。

③本实验的目的是验证生物制剂W对动物不同细胞的分裂具有促进作用；根据题干所给实验材料可知，不同细胞是指正常肝细胞和癌细胞，因此该实验应该设置四组，变量为细胞的种类及是否加入生物制剂W，具体如下：

A组：培养液中加入正常肝细胞悬液；B组：培养液中加入与之等量癌细胞悬液；从A；B组中各取出一半培养瓶作为C、D组；C、D两组：培养液中加入等量的生物制剂W。放入动物细胞培养箱在适宜条件下培养。

④该实验的因变量是计数细胞悬液中细胞的数量；因此各组样品在培养箱中培养一段合适的时间后，每组取部分样品，加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶摇匀，将细胞分散成单个，然后在显微镜下计数。

（2）预测实验结果；若较长时间培养，因为正常细胞的增殖次数有限，故A组中细胞数量最少，由于W促进细胞增殖的作用，因此C组细胞数量多于A组；而癌细胞可以无限增殖，且由于其细胞膜上的糖蛋白减少，易于扩散和转移，同时失去接触抑制，可大量培养增殖，故B；D两组中细胞数量明显更多，且由于W的促进作用，D组多于B组；由于此实验是验证实验，所以实验结果是加入生物制剂W的实验组比对照组细胞数多，同时癌细胞分裂能力比正常细胞高，故绘制坐标曲线具体如下:

【点睛】

本题考查验证实验，要求学生明确实验的目的，正确区分实验的变量，能够根据题意判断自变量和因变量，然后根据设计实验的单一变量和等量原则，同时结合题干所给的实验材料完善实验设计，并能预测实验结果和绘制相关曲线图表示实验的结果。【解析】胰蛋白酶（胶原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清抗生素血球计数板等量肝癌细胞悬液等量生物制剂W胰蛋白酶（胶原蛋白酶）23、略

【分析】【分析】

培养基是指供给微生物；植物或动物（或组织）生长繁殖的；由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、真菌培养基等。

【详解】

（1）培养基一般都含有水；无机盐、碳源和氮源等物质；以满足生物生长的需求；培养基制作后需使用高压蒸汽灭菌法进行灭菌；由于本实验的目的是获得可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株，因此实验初筛、复筛和再次复筛时培养基中添加的β-苯乙醇浓度要逐渐升高。

（2）根据计算公式：（平均菌落数）÷涂布体积×稀释倍数=每毫升菌液中的菌体数，可知：（平均菌落数）÷0．1mL×104=4．5×106个；所以平板上的平均菌落数是45个；液体培养是指将微生物直接接种于液体培养基中，并不断振荡或搅拌，可以迅速得到大量繁殖体。

（3）由实验目的可知，该实验的自变量是葡萄糖溶液的浓度，因变量是YDF-1的增殖情况，可通过显微镜直接计数这一简便的方法来确定其增殖情况，因此实验的设计思路是设置一系列浓度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分别接种等量的YDF-1，每天定时用血细胞计数板统计溶液中的菌体数量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即为YDF-1增殖的最佳浓度。【解析】(1)碳源；氮源高压蒸汽灭菌逐渐增大只有将培养基中β-苯乙醇的浓度逐渐增大；才能筛选得到可耐受高浓度β-苯乙醇的酵母菌株。

(2)45增加目的菌株浓度。

(3)设置一系列浓度梯度的葡萄糖溶液，再向其中分别接种等量的YDF-1，每天定时用血细胞计数板统计溶液中的菌体数量，增殖效果最佳的葡萄糖溶液即为YDF-1增殖的最佳浓度24、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基因；启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同；导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法；基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因−−DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA−−分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定；抗病鉴定、活性鉴定等。

【详解】

（1）利用RT—PCR技术即逆转录—多聚酶链式反应制备PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果胶使细胞壁破损，从而使果实变红变软，说明PG基因在果肉中表达量较高，所以最好从番茄的果肉细胞中提取mRNA，此技术所需要的酶主要有逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）；

（2）据图可知；转基因番茄PG基因与反向连接PG基因的转录产物mRNA1和mRNA2相结合形成双链，从而抑制PG基因的翻译过程，使PG合成量减少，从而延长果实保质期；

（3）分析表达载体的构建过程图可知；目的基因插入到图中农杆菌的四环素抗性基因上，导致农杆菌失去了四环素的抗性，所以图中农杆菌能够在含卡那霉素的培养基中生存，而在含四环素的培养基中不能生存的即为已转化的所需农杆菌；

（4）图中是利用农杆菌将反向连接PC基因导入番茄细胞的；此方法称为农杆菌转化法。不能用标记的PG基因的单链作为探针进行检测番茄细胞染色体DNA上是否插入了反向连接PC基因，理由是番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带；

（5）将转化的番茄细胞通过植物组织培养技术形成番茄幼苗过程中；需要在培养基中添加有机营养物质，原因是该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）。

【点睛】

本题结合图解，考查基因工程和植物组织培养的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤；识记植物组织培养的过程及应用，能结合图中信息准确答题。【解析】果肉逆转录酶和Taq酶（或热稳定DNA聚合酶）翻译卡那霉素四环素农杆菌转化法不能番茄细胞内原有的天然PG基因和插入的反向连接PG基因，均会与该探针形成杂交带要该培养过程中植物细胞不能进行光合作用（或光合作用很弱）五、综合题(共4题，共32分)25、略

【分析】【分析】

1；参与果酒制作的微生物是酵母菌；其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：

（1）在有氧条件下，反应式如下：

（2）在无氧条件下，反应式如下：

2；参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；参与腐乳制作的微生物主要是毛霉；其新陈代谢类型是异养需氧型．腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基。

4；泡菜制作的原理是乳酸发酵；乳酸菌是严格厌氧菌，因此发酵过程中要保证无氧环境；泡菜制作过程中，腌制的时间、温度、盐的用量等都会影响泡菜的品质。

【详解】

（1）泡菜制作过程中；向坛盖边沿的水槽中注水的目的保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。

（2）在制作腐乳过程中；毛霉的菌丝在豆腐块的表面形成一层皮，使腐乳成型，所以腐乳表面的皮是毛霉的菌丝。

（3）酵母菌是兼性厌氧型微生物；利用酵母菌酿酒时，先通入氧气的目的是：在有氧条件下使酵母菌迅速繁殖，数量增加，快速形成优势种群。

（4）利用果酒制作过程；原理是在缺少糖源时醋酸菌可以将乙醇变为乙醛，然后将乙醛变为醋酸。

【点睛】

本题考查果酒和果醋的制作、泡菜的制作、腐乳的制作等知识，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的试剂及试剂的作用、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．【解析】保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境菌丝在有氧条件下使酵母菌迅速繁殖，数量增加，快速形成优势种群乙醛醋酸26、略

【分析】【分析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取；利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤；基因表达载体包括目的基