2025年西师新版选修1生物上册月考试卷含答案

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①石灰水浸泡→②漂洗→③压榨→④过滤→⑤静置→⑥再次过滤→橘皮油A.由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，使用水中蒸馏会导致原料焦糊，所以一般采用压榨法B.①石灰水浸泡1h可以防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率C.③压榨时加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4D.⑥再次过滤的目的是用滤纸除去的少量水分和果蜡等杂质2、下列关于果胶酶的叙述中，全部正确的一组是（）

①果胶酶是一类催化剂；可以改变反应速度。

②果胶酶是果胶分解酶的简称。

③果胶酶可使果胶分解成可溶性的小分子物质；使浑浊的果汁变澄清。

④果胶酶能瓦解植物的细胞壁和胞间层；使榨取果汁变得容易。

⑤植物；霉菌、酵母菌和细菌均能生产果胶酶；动物也能产生果胶酶。

⑥果胶酶包括半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等A.①③④B.①②③④⑥C.①②③④D.①③④⑥3、下列有关传统发酵产物、所用微生物及其发酵条件的叙述，正确的是（）。选项发酵产物所用微生物发酵条件A果酒酵母菌30～35℃，无氧B果醋醋酸菌18～25℃，有氧C腐乳毛霉15～18℃，有氧D泡菜乳酸菌阳光直射，无氧

A.AB.BC.CD.D4、有关牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备，错误的是()A.制备过程包括计算、称量、溶化、灭菌、倒平板五步B.溶化琼脂时要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂C.培养基在压力为100kPa、温度为121℃条件下，灭菌15～30minD.培养基灭菌后立即倒入培养皿中，待平板冷却凝固后倒过来放置5、在果酒、腐乳及泡菜制作过程中,所用原料的有机物总量及有机物种类的变化分别是()A.减少、增加B.减少、减少C.增加、增加D.增加、减少6、某生物兴趣小组以菊花为材料进行组织培养；操作步骤如图所示。下列叙述错误的是（）

A.X常用未开花植株的茎上部新萌生的侧枝B.若X为菊花茎段，可不必添加植物激素C.将菊花茎段随机插入培养基中可不必考虑其形态学上下端D.接种后在18～22℃恒温避光条件下培养7、下图为用取自基因型为AaBb的胡萝卜韧皮部细胞培育出胡萝卜小苗的过程；下列叙述中不正确的是（）

A.a→b过程是通过细胞有丝分裂完成的B.b→c→d过程发生了细胞分化C.a→b过程中所需的营养来自培养基D.通过图示过程获得的许多小苗长成的植株，其基因型、表现型肯定相同8、下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，不正确的是（）A.提取红细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA，可去除蛋白质C.血红蛋白的提取和分离过程中进行透析可以去除溶液中的DNAD.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)9、如图是围绕加酶洗衣粉洗涤效果进行的研究结果；下列有关叙述，正确的是（）

A.两类洗衣粉的最佳使用温度都为t1B.温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活C.本研究的自变量分别是温度和洗衣粉是否加酶D.图中的纵坐标可以是污渍的残留量10、下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是（）A.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长B.条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小D.将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量11、菜籽粕含有35%～45%蛋白质，是畜禽饲料的重要原料，但其中的单宁等抗营养因子限制了菜籽粕的应用。研究者将不同菌种接种到菜籽粕与麸皮制成的固体培养基中发酵48h，测定菜籽粕中单宁的含量，结果如下图。下列相关叙述错误的是（）

A.乳酸菌和黑曲霉菌均属于原核生物B.为防杂菌污染，接种后需对培养基进行灭菌C.黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想D.可用不接种微生物的固体培养基作对照组12、如图是围绕加酶洗衣粉洗涤效果进行的研究结果；下列有关叙述，正确的是（）

A.两类洗衣粉的最佳使用温度都为t1B.温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活C.本研究的自变量分别是温度和洗衣粉是否加酶D.图中的纵坐标可以是污渍的残留量13、啤酒是以麦芽汁为原料，经酿酒酵母发酵制得。传统啤酒酿造过程中，发酵在敞开式发酵池中进行，麦芽汁中接入酵母后通入大量无菌空气，之后会产生大量气体翻腾逸出，在麦芽汁表面形成25～30cm厚的气泡层（泡盖），然后停止通气，进入静止发酵阶段。一段时间后可得啤酒。下列说法错误的是（）A.用赤霉素溶液浸泡大麦种子可以有效促进α-淀粉酶合成，增加麦芽汁中可发酵糖的含量B.可将酿酒酵母接种到试管固体斜面培养基后立即放入4℃冰箱中临时保藏菌种C.泡盖的形成是由于酵母菌有氧呼吸产生CO2，能将麦芽汁与空气隔绝D.麦芽汁仅能为酿酒酵母的发酵过程提供碳源和水14、我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”意思是瓮中酒液凉了不再起泡，米有未消耗完的，就是酒曲的力量用尽了。下列叙述正确的是（）A.用酒曲酿酒过程中，为加快微生物代谢需不断通入O2B.酒液温度的变化与酒曲中微生物呼吸作用释放热量有关C.起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放形成的D.“曲势尽”可能是瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致15、小李尝试制作果酒；他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（见图10），恰当的做法是（）

A.加入适量的酵母菌B.一直打开阀b通气C.一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟D.把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验16、下列关于植物组织培养的叙述，错误的是（）A.进行植物组织培养时，操作者的双手和工作台要进行灭菌处理B.用二倍体植株进行花药离体培养后得到的植株高度不育C.植物组织培养过程中发生了基因重组和染色体数目变异D.外植体在诱导形成愈伤组织期间，每天必须进行适当时间和强度的光照17、下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理的叙述，错误的是（）A.为了防止血液凝固，应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠B.SDS能使蛋白质完全变性，使电泳迁移率完全取决于电荷的性质和多少C.利用0.9%的NaCl对血红蛋白溶液透析12小时，可以去除小分子杂质D.在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品评卷人得分三、填空题(共9题，共18分)18、蛋白质的分离。

分离过程中，仔细观察________在洗脱过程中的移动情况。如果色谱柱装填成功、分离操作正确，能清楚地看到红色区带狭窄、平整、均匀一致地随着洗脱液缓慢移动；如果红色区带歪曲、散乱、变宽，说明分离效果不好，与______________有关。19、凝胶色谱法也称做__________，是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。20、果胶酶能够分解___________，瓦解植物的____________及___________，使榨取果汁变得更容易，而果胶分解成可溶性的______________，也使得浑浊的果汁变得澄清。果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括_______________、__________________和_________________等。21、蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于它_________________和_________________等因素。22、利用____________不溶于酒精，但是细胞中的某些____________则溶解于酒精，可以使DNA和蛋白质进一步分离。23、萃取的效率主要取决于萃取剂的____________和___________，同时还受到原料颗粒大小、紧密程度、_______________、萃取的_____________和时间等条件的影响。一般来说，原料颗粒小、萃取温度高、时间长，需要提取的物质就能够充分________________，萃取效果就好。24、玫瑰精油是制作高级香水的主要成分，能使人产生愉悦感。实验室玫瑰精油的粗提取，将玫瑰花瓣与清水的质量按_____，用___________法进行提取。玫瑰精油的化学性质稳定，_________溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏。25、天然香料的主要来源是动物和植物，微生物中的___________也可以产生芳香化合物。26、透析袋一般是用硝酸纤维素（又称玻璃纸）制成的，能使______自由进出，而将______保留在袋内。透析可以去除样品中相对分子量较____的杂质，或用于更换样品的______。评卷人得分四、实验题(共4题，共40分)27、生物技术拥有巨大的发展空间；给人们的生活带来了深刻的变化。某兴趣小组翻阅资料发现橙皮精油和乳酸菌素都具有抑菌的效果，如图为制备橙皮精油和乳酸菌素的流程及其抑菌实验结果，回答下列问题：

（1）筛选乳酸菌A时；所用培养基需经________法进行灭菌。将某种细菌接种到培养基上并均匀分布形成菌膜，最可能采用的接种方法是_____________。

（2）图中；橙皮精油或乳酸菌素接种在培养基上____________________所在的位置。

（3）橙子的果肉可用于制备果酒和果醋。为监测发酵状况；可用________________法对发酵菌种进行计数，一段时间后统计结果分析可发现，培养液中的菌种种群数量的增长曲线变化规律是种群数量经过一定时间的增长后，趋于稳定。

（4）用蒸馏法提取玫瑰精油时；如果想提取较高品质的产品，对温度和时间的要求是_________________。

（5）果胶酶是分解果胶的酶的总称；包括____；果胶分解酶和果胶酯酶。

（6）凝胶色谱法是根据________分离蛋白质的有效方法。“血红蛋白的释放”步骤中，在_______________的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。28、Ⅰ．酸雨主要是大气中所含的S02造成的。研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌；进行了相关实验。回答下列问题：

（1）采集菌种：在某热电厂烟囱周围区域采集土样；取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要____________。将采集的土样进行稀释处理后，接种到培养基上进行培养。

（2）分离目的菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中，边搅拌边持续通入S02，驯化几分钟后接种到固体培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通S02的时间；与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的目的菌具有较强的____________的能力。

（3）活菌计数:为获得大量目的菌用于生产；在培养过程中需连续取样进行计数。____________法常用来统计样品中的活菌数目。通常情况下，用此方法得到的活菌数目往往比实际数目____________（填“高”或“低”）。

（4）检测目的菌对抗生素的敏感性:取该单菌落适当稀释后的液体2滴；接种于固体培养基表面，并用___________使菌液均匀分布。在37℃培养箱中培养24小时后，将大小相同且分别含有不同抗生素的圆纸片均匀置于该平板的不同位置，再培养一段时间，结果如下图所示（圆纸片周围的白色区域表示没有菌落分布），据此实验结果推测，五种抗生素中对该菌抑制作用最强的是_____________________（答序号和名称）。

（5）菌种保存:采用平板划线法分离纯化得到了脱硫细菌；可以采用____________的方法，对菌种长期保存。

Ⅱ．“树橘柚者；食之则甘，嗅之则香”，每年的10月，正是柑橘大量上市的季节。橘子全身都是宝；不仅果肉的营养价值高，药用价值也高，其皮；核、络、叶都是“地道药材”。回答下列问题：

（1）常采用压榨法提取橘皮精油。若采取水蒸气蒸馏法提取；由于橘皮精油的有效成分会发生______；若采用水中蒸馏法又会产生_________的问题所以一般采用压榨法。

（2）提取橘皮精油的实验流程为：①石灰水浸泡→②_______→③压榨→④______→⑤静置→⑥再次过滤→橘皮油。其中，③过程一般加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4；其目的是利于橘皮精油___________。

（3）若想利用橘子生产果酒需要用到酵母菌。果汁发酵后是否有酒精产生；可用___________来检验。

（4）若想利用橘子生产果醋需要用到醋酸菌。醋酸菌的最适生长温度为___________。

Ⅲ．(1)如图为腐乳制作的流程示意图,请据图分析回答下列问题.

卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的,卤汤中的酒可以选用料酒；黄酒、米酒、高粱酒等,含量一般控制在12%左右；所加酒的作用之一是能使腐乳具有________________________。

（2）回答下列有关泡菜制作的习题：

制作泡菜时，为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是___________________；泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行___________的过程；泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度、__________和__________等。29、纳豆是一种大豆经纳豆杆菌发酵而成的健康食品。纳豆杆菌能分泌纳豆激酶等。回答下列问题：

纳豆激酶能够水解血栓中水不溶性的纤维蛋白；所以具有溶解血栓的作用。提纯纳豆激酶可用于制备药物。为提取纯化纳豆激酶，可进行下列实验：

（1）接种具有高纤溶活性的菌落到液体发酵培养基。37℃；摇床振荡，发酵3天。

（2）收集发酵液；离心，分层，取_____________（上清液或沉淀物）作为提取纳豆激酶的材料。

（3）透析法分离：将上述离心所得样品装入透析袋；置于25mmo/L磷酸盐缓冲液中透析，以便达到_____________的目的。

（4）凝胶色谱法（凝胶是一些微小的多孔球体；大多数是由_____________化合物构成的，如葡聚糖或琼脂糖）纯化：将透析液进行柱层析，用磷酸盐缓冲液进行洗脱，试管连续收集。用此法分离蛋白质时，对分子质量较大的蛋白质先从层析柱中洗脱出来。

（5）SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定纯度：此过程中分子的迁移速度取决于_____________。

（6）装填凝胶柱，不得有气泡的存在，原因是气泡的存在会_____________，降低分离效果。30、凝胶色谱技术是六十年代初发展起来的一种快速而又简单的分离技术；由于设备简单；操作方便，不需要有机溶剂，对高分子物质有很好的分离效果，目前已被生物化学，分子免疫学等有关领域广泛应用。请根据血红蛋白的提取和分离流程图及操作装置图回答问题。

（1）凝胶色谱法是根据_______________________________________分离蛋白质的有效方法；也称作___________________。

（2）样品处理中红细胞的洗涤要使用_______________________反复冲洗；离心；直到__________________________，表明红细胞已洗涤干净。实验流程图中A操作要用到的试剂是________________________。

（3）血红蛋白粗分离阶段；透析的目的是__________________________。

（4）甲图中，实验流程B代表______________。进行乙图操作时，如果_____________________，说明色谱柱制作成功。其中，C试剂是______________。评卷人得分五、非选择题(共3题，共9分)31、近年来；纪录片《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中多次讲述了利用不同微生物的发酵作用制作的美味食品。请分析回答下列问题：

（1）在果醋制作时；运用醋酸菌在供应________和糖源充足时，将果糖分解成醋酸；在糖源不充足时，也可以利用酒精生成醋酸，请写出该过程的反应式：_____________________。

（2）腐乳生产过程有多种微生物的参与；其中起主要作用的是________。腐乳制备过程中，加盐可以________________________________________________________________________，使豆腐块变硬。

腐乳制作的流程是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。用盐腌制时；应注意控制__________________；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在________%左右。

（3）制作泡菜的原理是________________________。蔬菜在腌制过程中，会产生亚硝酸盐，在___________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生________________反应后，再与N­1­萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色染料。32、乳酸菌等微生物与我们生活息息相关。请回答下列相关问题。

（1）若要纯化培养乳酸菌，在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，一般还要加入琼脂，它是一种从红藻中提取的多糖，加入琼脂作为_______。在制作此培养基时还要满足微生物对特殊营养物质的需求，例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加_______，制备培养基的操作顺序是：计算→称量→_______→倒平板，培养基中的(NH4)2CO3是否能为乳酸菌提供碳源并说明原因___________________________。

（2）纯化微生物时；可采用___________________两种最常用的方法进行接种。为了能鉴别乳酸菌菌落，往往在配制培养基时加入碳酸钙，推测其原因是______________________________________。有些鉴别培养基可在培养基中加入指示剂，例如分解尿素的细菌在添加_____指示剂的培养基上会显示出特定的颜色；在鉴定大肠杆菌时在培养基中加入_______。制作泡菜时，要检测亚硝酸盐的含量，其原理为在盐酸酸化的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生_____反应，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成______色染料。纯化后的菌可在-20℃长期保存时，应采用______的方法对菌种进行长期保藏。

（3）若甲同学选取一定体积的乳酸菌菌液，进行梯度稀释，若将103倍的稀释样液接种在固体培养基上培养一段时间后，统计三个平板上菌落数分别是200、180、220。如果需要据此计算出乳酸菌的密度，还需要知道的一个重要数据是_______。另一同学乙涂布了4个平板，数值为177,193,185；其中一个空白对照平板出现了12个菌落，乙同学将173（185-12）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法是否正确，并说明你的原因。___________________________________________。33、某实验小组以洋葱组织为实验材料；进行DNA粗提取和鉴定的实验，实验主要过程如下图，回答下列问题：

（1）步骤一中需加入一定量的洗涤剂和____对洋葱组织进行处理；加入前者是为了瓦解细胞膜结构，加入后者的目的是____。将搅拌和研磨后的物质进行过滤，即可得到含有DNA的滤液。

（2）步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤；可以采用以下几种不同的方法：

①滤液中NaCl浓度在0.14mol／L时可分离出DNA，若要再次提纯，需要将其溶解在____mol／L的NaCl溶液中；

②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉；其目的是____；

③将得到的DNA粗提取物放在60～75℃水浴中保温10～15min，蛋白质被破坏，但仍能得到纯度较高的DNA，说明了DNA____.

（3）步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是________，依据的原理是____。得到纯净的DNA后，可利用DNA与____在沸水浴条件下发生显色反应，来对其进行鉴定。评卷人得分六、综合题(共3题，共21分)34、布鲁氏菌病是由布鲁氏菌属的细菌侵人机体；引起人畜共患的传染性疾病。研究人员无菌选取病料样本，将其接种到10%马血清布氏肉汤培养基(该培养基能促进布鲁氏菌的生长并抑制其他杂菌生长)中，置于培养箱中培养．观察液体培养基混浊程度，然后取变混浊的肉汤接种到10%马血清布氏培养基中培养并观察菌落生长情况。请回答下列有关问题：

（1）适于布鲁氏菌生长的培养基中的营养成分一般含有_________水和无机盐；此外培养基还需要满足有利于日的菌生长的特殊营养物质；温度、pH等条件。病料样本初次接种到10%马血清布氏肉汤培养基中，并置于一定环境中连续培养7d的目的是_______________；从功能上看，培养布鲁氏菌的培养基属于_______________，在前面培养基的基础上还应加人_______________才能观察到菌落的生长情况。向试管内分装该培养基时，若试管口黏附有培养基，则需要用酒精棉球擦净。原因是_______________。

（2）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，可在显微镜下用_______________直接计数，也可采用稀释涂布平板法统计活菌数目p对比这两种方法可知，稀释涂布平板法测得的微生物数目较低，其原因是_______________。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养--段时间，这样做的目的是_______________。35、在缤彩纷呈的生物世界；微生物似乎显得过于微小与沉寂，它们在自然界却作用非凡很多生命现象都与微生物有着千丝万缕的联系。

(1)幽门螺杆菌是急慢性胃炎的主要致病菌，可以通过微生物培养对其进行检测和诊断。将患者体内采集的样本制成菌液，培养在以尿素为唯一氮源的___________(填“选择”或“鉴别”)培养基上进行“浓缩”。若培养基中加入酚红指示剂，则该菌落周围会出现___________环带，这与菌体内___________酶的作用密切相关。

(2)大肠杆菌数目是否超标可以作为食品卫生和水源污染度的检测指标，大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定：将一定体积的样品过滤后，将滤膜放在添加___________试剂的培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________色；根据该菌落的个数判定饮用水是否污染。

(3)酿造葡萄酒时，葡萄皮上有少量醋酸菌，在酒精发酵的旺盛阶段，醋酸菌___________(填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸。原因主要有两方面：___________、___________。36、2022年3月15日；央视“3．15”晚会报道的某酸菜原料一事引起全网轰动。中国酸菜历史悠久，早在北魏的《齐民要术》中就记载了用白菜等原料腌制酸菜的多种方法。下图是贵州老百姓腌制酸菜的流程图，请回答下列问题。

(1)酸菜制作主要利用乳酸菌，腌制过程中没有额外加入乳酸菌，乳酸菌主要来自___________。

(2)酸菜制作过程中会有亚硝酸盐产生，亚硝酸盐一般不会危害人体健康，但如果人体摄入过量，会发生中毒，甚至死亡。某生物研究小组进行酸菜腌制实验，跟踪检测酸菜在制作过程中亚硝酸盐含量的变化（单位：mg/kg），结果如下表所示：。食盐用量/Y亚硝酸盐含量/腌制时间/d135791113155%3．84．010．135．725．711．55．72．110%3．64．15．917．325．323．813．63．815%3．33．43．54．98．412．911．23．4

该实验的自变量为_______。据表分析，最理想的酸菜腌制条件是_______。

(3)科研工作者以酸菜为材料从中筛选出产酸高的乳酸菌菌株并进行分离与纯化，以便进一步提升酸菜的口味。实验所用固体培养基的制备过程包括配制培养基、灭菌、_____。若下图甲是接种培养后的菌落分布图，其接种方法是_______。图甲中的③区更容易得到单菌落，单菌落是指一般是由单个微生物繁殖形成的______。

参考答案一、选择题(共8题，共16分)1、B【分析】【分析】

制取橘皮精油时；为了提高出油率，首先将橘皮去水干燥，然后用石灰水浸泡，经漂洗；压榨得到压榨液后，用布袋过滤除去固体物和残渣，对滤液进行离心进一步除去较小的残留固体物，再用分液漏斗或吸管将上层的橘皮精油分离出来，然后在5℃～10℃下静置5～7天，使果蜡等杂质沉淀，用吸管吸出上层澄清橘皮油，其余部分通过滤纸过滤，滤液与吸出的上层橘皮油合并后成为最终的橘皮精油。

【详解】

A；由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解；使用水中蒸馏会导致原料焦糊，所以一般采用压榨法，A正确；

B；①由于橘皮中含有大量的果蜡和果胶；压榨时容易滑脱，用石灰水浸泡10h以上是为了破坏细胞结构，分解果胶，防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率，B错误；

C、③压榨时加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4；并调节pH值至7-8，C正确；

D；⑥再次过滤的目的是用滤纸除去的少量水分和果蜡等杂质；D正确。

故选B。

【点睛】2、A【分析】【分析】

果胶酶是能够分解果胶的一类酶的总称；包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶等，果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使果汁变得澄清。

【详解】

①酶能降低化学反应的活化能；因此果胶酶是一类催化剂，可以改变反应速度，①正确；

②果胶酶特指分解果胶的一类酶的总称；包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶等，②错误；

③果汁中含有大量的果胶；并且该物质不溶于水，果胶酶能够分解果胶，使果胶分解成半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变的澄清，③正确；

④果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一；因此果胶酶可以将其瓦解，使榨取果汁变得容易，④正确；

⑤产生果胶酶的生物有植物；霉菌、酵母菌和细菌等；动物不能产生果胶酶，⑤错误；

⑥果胶酶是能够分解果胶的一类酶的总称；包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶等，⑥错误；

正确的有①③④；A正确，BCD错误。

故选A。3、C【分析】【分析】

传统发酵技术中四种常用菌种的比较：。酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类真核生物原核生物真核生物原核生物代谢类型异养兼性厌氧型异养需氧型异养需养型异养厌氧型发酵条件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧无氧生长适宜温度18～25℃30～35℃15～18℃室温生产应用酿酒、发面酿醋制作腐乳制作酸奶、泡菜

【详解】

A；酵母菌属于异养兼性厌氧型真核生物；进行果酒发酵时的条件是18～25℃，无氧，A错误；

B；醋酸菌属于异养需氧型原核生物；进行醋酸发酵时的条件是30～35℃，有氧，B错误；

C；毛霉菌属于异养需养型真核生物；进行腐乳发酵时的条件是15～18℃，有氧，C正确；

D；乳酸菌属于异养厌氧型原核生物；进行泡菜发酵时无氧，但泡菜坛应该置于阴凉处，避免阳光直射温度升高导致其他细菌大量繁殖，腌制失败，D错误。

故选C。4、D【分析】【分析】

制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作顺序为计算；称量、溶化（注意：要不断用玻璃棒搅拌；防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）、灭菌、倒平板，据此分析。

【详解】

A.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算；称量、溶化、灭菌、倒平板；A正确；

B.在熔化琼脂时；需要控制火力并不断用玻棒搅拌，以免发生焦糊导致烧杯破裂，B正确；

C.高压蒸汽灭菌是在压力为100kPa；温度为121℃条件下，灭菌15至30min，C正确；

D.待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板，待平板冷却凝固后倒过来放置，D错误。5、A【分析】【分析】

果酒制作菌种是酵母菌；代谢类型是异养兼性厌氧型真菌，前期需氧，后期不需氧；果醋制作的菌种是醋酸菌，代谢类型是异养需氧型细菌，发酵过程一直需氧；制作泡菜起作用的是乳酸菌，其代谢类型为异养厌氧型。

【详解】

果酒、果醋及泡菜制作过程中，有机物不断被微生物氧化分解，同时也形成很多中间产物，因此所用原料的有机物总量减少，但有机物种类增加，A正确。6、D【分析】【分析】

1；植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性；其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。

2；植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用比例对植物细胞发育的影响：生长素用量比细胞分裂素用量；比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成。比值适中时，促进愈伤组织的形成。

3；由图分析可知；X是离体组织，Y是分化形成的结构，A是脱分化，B是再分化。

【详解】

A；X常用未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；有利于细胞全能性的体现，A正确；

B；菊花组织培养过程中；自身内源激素即可调节其生长，无需添加植物激素，但每日必须12h的日光灯照射，B正确；

C；接种时；无须考虑菊花茎段的上下端，但是必须确保外植体与培养基紧密接触，C正确；

D；培养条件一般pH在5.8左右；温度为18～22℃，每天12h光照，D错误。

故选D。

【点睛】7、D【分析】【分析】

离体的胡萝卜韧皮部细胞；在培养一段时间后，脱分化，通过细胞分裂，形成愈伤组织；脱分化的愈伤组织继续培养，又可重新分化成根或芽等器官；再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植物体，说明高度分化的植物细胞具有全能性。

【详解】

A、a→b过程是脱分化过程形成愈伤组织；该过程的细胞分裂方式是有丝分裂，A正确；

B、b→c→d过程为再分化过程；形成根或芽等器官，发生了细胞分化，B正确；

C、a→b过程植物不能进行光合作用；所需的营养来自培养基，培养基应含有机碳源和氮源，C正确；

D；图中植物组织培养过程的细胞分裂方式是有丝分裂；杂合植株经上述过程获得的幼苗的基因型与亲本相同，仍然为杂合子，但表现型是基因型和环境共同决定的，环境不同表现型也可能不同，D错误。

故选D。8、C【分析】【分析】

DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小；提取较纯净的DNA时可加入95%的冷却的酒精；由于DNA不溶于酒精，DNA会从溶液中析出；DNA溶液中加入二苯胺试剂加热后才会变成蓝色；电泳法，根据各种分子带电性质的差异以及分子本身大小；形状的不同来分离蛋白质或其它物质。

【详解】

A；提取红细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞；A正确；

B；用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA；然后过滤出蛋白质，再降低NaCl溶液的浓度，析出DNA，B正确；

C；透析用以除去小分子物质；DNA是大分子物质，C错误；

D；电泳法是常规分离纯化的方法；比如用十二烷基磺酸钠，可以根据其分子大小及所带电荷性质进行分离纯化，D正确。

故选C。

【点睛】

本题考查了DNA粗提取技术的原理、蛋白质提取与分离，重点考查学生对操作过程的分析、判断能力，从题目实验看出，该实验题目是探究不同材料对DNA和蛋白质提取的影响。二、多选题(共9题，共18分)9、B:C:D【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

2；影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量；衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中，水温是要研究的对象，而其他因素应在实验中保持不变。

3；据图分析：该实验的自变量是温度和洗衣粉的种类；因变量是洗衣粉的去污效果。

【详解】

A、加酶洗衣粉的最佳使用温度都为t1，而普通洗衣粉在t1时的洗涤效果没有t2时好；A错误；

B、由于温度过高，加酶洗衣粉中的酶可能失活，由图可知，温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活；B正确；

C；图中曲线显示本实验的自变量有温度和洗衣粉的种类；即洗衣粉是否加酶，C正确；

D；本实验研究的因变量可能是污渍的残留量或污渍消失所需的时间长短等；D正确。

故选BCD。

【点睛】10、A:B:C【分析】【分析】

果酒、果醋制作原理与发酵条件。

果酒制作

果醋制作

菌种

酵母菌

醋酸菌

菌种

来源

附着在葡萄皮上的酵母菌

变酸酒表面的菌膜

发酵

过程

有氧条件下，酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖：C6H12O6＋6O26CO2＋6H2O；无氧条件下，酵母菌通过无氧呼吸产生酒精：C6H12O62C2H5OH＋2CO2

氧气、糖源充足时：

C6H12O6＋2O22CH3COOH＋2CO2＋2H2O；

缺少糖源、氧气充足时：

C2H5OH＋O2CH3COOH＋H2O

温度

一般酒精发酵18～25℃，

繁殖最适为20℃左右

最适为30～35℃

气体

前期：需氧，后期：无氧

需要充足的氧气

【详解】

果酒发酵后期；酵母菌活动逐渐减弱，产生的二氧化碳逐渐降低，放气时间间隔可延长，A正确。当氧气；糖源都充足时，醋酸菌可将葡萄汁中的果糖分解成醋酸，B正确。果酒发酵过程中因为营养物质的消耗，有氧呼吸过程中也有水的产生，故发酵液的密度减小，C正确。制作腐乳时是逐层加盐，瓶口处需加大用盐量，以减小被杂菌污染的可能性，D错误。故选：ABC。

【点睛】

解答本题关键在于对果酒、果醋的制作原理的理解应用。11、A:B【分析】【分析】

由柱形图分析可知；枯草芽孢杆菌处理的组总单宁含量最高，黑曲霉菌处理的组中单宁含量最低，根据单宁含量推测可知，对单宁分解能力由强到弱的排序为：H＞R＞N＞K，这说明黑曲霉菌对单宁的分解作用最强。

【详解】

A；乳酸菌为细菌；属于原核生物，黑曲霉为真菌，属于真核生物，A错误；

B；对培养基灭菌应在接种前；接种后再灭菌，菌种将被全部杀死，B错误；

C；据图可知；与对照组相比，黑曲霉菌发酵菜籽粕中单宁含量最低，说明黑曲霉菌对单宁的去除效果最为理想，C正确；

D；对照组为不接种微生物的固体培养基；目的是作为对照，说明微生物去除单宁的作用，D正确。

故选AB。12、B:C:D【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉；目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中，应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

2；影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温、水量、水质、洗衣粉的用量；衣物的质料、大小及浸泡时间和洗涤的时间等。在这些因素中，水温是要研究的对象，而其他因素应在实验中保持不变。

3；据图分析：该实验的自变量是温度和洗衣粉的种类；因变量是洗衣粉的去污效果。

【详解】

A、加酶洗衣粉的最佳使用温度都为t1，而普通洗衣粉在t1时的洗涤效果没有t2时好；A错误；

B、由于温度过高，加酶洗衣粉中的酶可能失活，由图可知，温度超过t2后加酶洗衣粉中的酶可能失活；B正确；

C；图中曲线显示本实验的自变量有温度和洗衣粉的种类；即洗衣粉是否加酶，C正确；

D；本实验研究的因变量可能是污渍的残留量或污渍消失所需的时间长短等；D正确。

故选BCD。

【点睛】13、B:D【分析】【分析】

啤酒发酵利用的菌种是酵母菌；其无氧呼吸可以产生酒精，有氧呼吸可以大量繁殖；题干信息显示，在发酵过程中，并没有做隔绝空气处理，而是先通入大量的无菌空气让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，该过程产生了大量的气体形成了较厚的气泡层（泡盖），隔绝了空气，因此停止通气后酵母菌只能进行无氧呼吸产生酒精了。

【详解】

A；赤霉素能促进种子萌发；制作麦芽汁之前用含有赤霉素的溶液浸泡大麦种子，可以有效促进α-淀粉酶合成，将淀粉水解为麦芽糖，进而增加麦芽汁中可发酵糖的含量，A正确；

B；对于频繁使用的菌种；可以采用临时保藏的方法，一般是接种到试管的斜面培养基上，等到菌落长成后，放入冰箱低温保藏，B错误；

C；泡盖是由于酵母菌有氧呼吸产生的二氧化碳形成的；较厚，可以将麦芽汁与空气隔绝，C正确；

D；麦芽汁不仅能为酿酒酵母的发酵过程提供碳源和水；还能提供氮源、无机盐，D错误。

故选BD。14、B:C:D【分析】【分析】

用酒曲酿酒菌种是酵母菌；代谢类型是兼性厌氧型真菌，属于真核细胞，条件是18～25℃；前期需氧，后期不需氧。

【详解】

A、用酒曲酿酒是利用了微生物细胞呼吸的原理，进行的是酵母菌的无氧发酵，不能一直通入O2；A错误；

B；由于呼吸作用会产热；故会导致酒液温度产生变化，B正确；

C、起泡是由微生物进行呼吸作用产生的CO2释放到发酵液中形成的；C正确；

D；“曲势尽”可能是随着发酵的进行瓮中液体pH降低、酒精浓度过高导致酵母菌大量死亡；D正确。

故选BCD。15、A:C【分析】【详解】

制作果酒依赖于酵母菌的无氧呼吸，所以应加入适量的酵母菌，应控制无氧环境和适宜的温度，每隔一定时间应释放产生的二氧化碳，避免抑制无氧呼吸，所以应一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟。

故选AC。16、A:C:D【分析】【分析】

植物组织培养概念（广义）又叫离体培养；指从植物体分离出符合需要的组织。器官或细胞，原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。植物组织培养概念（狭义）指用植物各部分组织，如形成层；薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株，也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养，愈伤组织再经过再分化形成再生植物。

【详解】

A；植物组织培养需要在严格的无菌和无毒条件下进行；因此要用酒精等对操作员的手、操作的操作台、植物组织培养的外植体等进行消毒处理；用于植物组织培养的培养基需要进行高压蒸汽灭菌处理，A错误；

B；用二倍体植株花药离体培养获得单倍体植株；高度不育，B正确；

C；植物组织培养过程中；细胞通过有丝分裂方式增殖，不会发生基因重组，C错误；

D；植物细胞组织培养时现脱分化形成愈伤组织；这段时间要无菌、恒温、避光，D错误。

故选ACD。17、B:C:D【分析】【分析】

血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：样品处理：①红细胞的洗涤；②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白溶液。粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【详解】

A；为了防止血液凝固；应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠，A正确；

B；在一定pH下；使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质-SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小，B错误；

C；利用磷酸缓冲液对血红蛋白溶液的透析12小时；可以去除小分子杂质，C错误；

D；在凝胶柱中加入蛋白样品后；等样品完全进入凝胶层后才能连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品，D错误。

故选BCD。三、填空题(共9题，共18分)18、略

【分析】【详解】

蛋白质的分离过程中，仔细观察红色区带在洗脱过程中的移动情况。如果色谱柱装填成功、分离操作正确，能清楚地看到红色区带狭窄、平整、均匀一致地随着洗脱液缓慢移动；如果红色区带歪曲、散乱、变宽，说明分离效果不好，与凝胶色谱柱的装填有关。【解析】红色区带凝胶色谱柱的装填19、略

【分析】【详解】

分离蛋白质分子的一种常用方法是凝胶色谱法，也称做分配色谱法，是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。【解析】分离色谱法相对分子质量20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】果胶细胞壁胞间层半乳糖醛酸多聚半乳糖醛酸酶果胶分解酶果胶酯酶21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】所带净电荷的多少分子质量的大小22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】DNA蛋白质23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】性质使用量含水量温度溶解24、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】1：4水蒸气蒸馏难25、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】真菌26、略

【分析】【详解】

血红蛋白溶液装入透析袋中透析12小时。透析袋一般是用硝酸纤维素（又称玻璃纸）制成的，能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。透析可以去除样品中相对分子量较小的杂质，或用于更换样品的缓冲液。【解析】小分子大分子小缓冲液四、实验题(共4题，共40分)27、略

【分析】【分析】

单菌落分离法包含划线分离法和涂布分离法；常用于分离获得单菌落。培养基，是指供给微生物；植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。芳香油是植物体新陈代谢的产物，由细胞原生质体分泌产生，大多具挥发性，有芳香的气味，故又称挥发油，在香料工业中又称精油。植物芳香油的主要成分：主要包括萜类化合物及其衍生物。植物芳香油的提取方法：蒸馏法、压榨法和萃取等。蛋白质凝胶电泳分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质—SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

【详解】

（1）培养基需经高压蒸汽灭菌法进行灭菌；以避免杂菌污染。微生物接种常用平板划线法和稀释涂布平板法，图中进行抑菌实验时，接种的方法最可能是稀释涂布平板法。

（2）图中；橙皮精油或乳酸菌素作为抑菌物质，最终可通过比较透明圈的直径（大小）来比较其抑菌效果，因此接种在培养基上透明圈所在的位置。

（3）检测培养液中的菌种种群数量变化可以采用显微镜直接计数法(抽样检测)；对发酵菌种进行计数。

（4）用蒸馏法提取玫瑰精油时；由于蒸馏时会导致原料焦糊，因此如果想提取较高品质的产品，温度不宜过高，且适当延长时间。

（5）果胶酶是分解果胶的酶的总称；包括多聚半乳糖醛酸酶；果胶分解酶和果胶酯酶。

（6）凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。“血红蛋白的释放”步骤中；加入甲苯的目的是溶解细胞膜，且在蒸馏水作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。

【点睛】

熟记、理解各种实验原理和识记方法步骤是解答本题的关键。【解析】高压蒸汽灭菌稀释涂布平板法透明圈显微镜直接计数法(抽样检测)温度不宜过高，适当延长时间多聚半乳糖醛酸酶相对分子质量大小蒸馏水和甲苯28、略

【分析】【分析】

根据实验目的可知；实验需要获得“烟气脱硫的脱硫细菌”，因此需要使用选择培养基将该菌筛选出，即题中的“驯化”。微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养；在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。橘皮精油无色透明，主要储存在橘皮部分，由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解，又会产生原料焦糊问题，所以一般采用压榨法提取，其提取过程为：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮精油。参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理是其进行的有氧呼吸和无氧呼吸。参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。在腐乳的制作过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

【详解】

Ⅰ．（1）为了防止杂菌的污染；取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要灭菌。

（2）根据驯化过程可知，驯化过程中不断通入SO2，并且延长时间，与此同时逐步降低培养基的pH，因此分离得到的脱硫细菌具有较强的利用SO2和耐酸的能力。

（3）稀释涂布平板法常用来统计样品中的活菌数目；由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上观察到的只是一个菌落，因此用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

（4）用稀释涂布平板法接种时所用的涂布工具是涂布器；据图分析；青霉素圆纸片周围的透明圈最大，说明五种抗生素中对该菌抑制作用最强的是青霉素。

（5）长期保存菌种一般采用甘油管藏法；即将菌液与灭菌的甘油混匀，放在-20℃的冰箱中保存一年。

Ⅱ．（1）提取橘皮精油时；若采取水蒸气蒸馏法提取，橘皮精油的有效成分会发生部分水解；若采用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题，因此提取橘皮精油常常用压榨法。

（2）提取橘皮精油的实验流程为：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油，其中压榨步骤加入相当于橘皮质量0.25%的NaHCO3和5%的Na2SO4的目的是让橘皮精油与水分离。

（3）酵母菌无氧呼吸产生的酒精可以用酸性重铬酸钾进行检测。

（4）醋酸菌生长的最适宜温度为30-35℃。

Ⅲ．（1）腐乳制作过程中；卤汤中加入料酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。

（2）陈泡菜液含有较多的乳酸菌；可为泡菜发酵提供更多的菌种，因此为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液；乳酸发酵是利用了乳酸菌的无氧呼吸；泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有温度；食盐用量和腌制时间等。

【点睛】

解答本题的关键是掌握微生物的分离和计数、果酒和果醋的制作、泡菜和腐乳的制作原理和过程，根据题目要求逐一分析答题。【解析】灭菌利用SO2稀释涂布平板低涂布器青霉素甘油管藏部分水解原料焦糊漂洗过滤与水分离酸性重铬酸钾30—35℃独特的香味增加乳酸菌数量无氧呼吸食盐用量腌制时间29、略

【分析】【分析】

血红蛋白的提取和分离：

1；原理：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的有效方法；相对分子质量小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量大的蛋白质不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此相对分子质量不同的蛋白质得以分离。

2；用磷酸缓冲液处理的目的是让血红蛋白处在稳定的pH范围内；维持其结构和功能。

3；分离血红蛋白溶液时；将搅拌好的混合液转移到离心管中，经过中速长时离心后，可明显看到试管中溶液分为4层，从上往下数，第1层为甲苯层，第2层为脂溶性物质的沉淀层，第3层为血红蛋白水溶液，第4层为杂质沉淀层。

4；气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序；降低分离效果。

5；血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤；②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白溶液。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

6；电泳法是利用待测样品中各种分子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同；使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离或鉴定。

【详解】

（2）由题意可知；纳豆激酶存在于存在于细胞外，可直接利用纳豆菌的发酵液的上清液，进一步分离；提纯，获得，并对其化学成分进行鉴定。

（3）将纳豆激酶粗提取液装入透析袋中；置于pH适宜的磷酸缓冲液中进行透析处理，可除去其中分子量较小的杂质。

（4）在凝胶色谱法中；所用凝胶的化学本质大多为多糖类化合物构成的，比如葡聚糖或琼脂糖等多糖类化合物构成的微小多孔球体。

（5）电泳时待分离样品的迁移速度主要决定于分子的带电性质及分子大小和形状。

（6）在凝胶色谱法中；气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果，因此，装填凝胶柱，不得有气泡的存在。

【点睛】

掌握蛋白质的提取和分离，清楚透析法分离、凝胶色谱法等的原理和操作流程，并能用其变通应用于新情境，解决问题。【解析】上清液除去分子量较小的杂质多糖类分子的带电性质及分子大小和形状搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序30、略

【分析】【分析】

1；血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤；②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

2；凝胶色谱法（分配色谱法）原理：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙；路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。

3；据图分析：A表示血红蛋白的释放；B表示样品的加入和洗脱。

【详解】

（1）凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法；也称作分配色谱法。

（2）样品处理中红细胞的洗涤要使用生理盐水反复冲洗；离心；直到离心后的上清液中没有黄色，表明红细胞已洗涤干净。实验流程图中A血红蛋白的释放操作要用到的试剂是蒸馏水和甲苯。

（3）血红蛋白粗分离阶段；透析的目的是除去小分子杂质。

（4）甲图中；实验流程B代表样品的加入和洗脱，进行乙图操作时，如果红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。其中，C试剂是20mmol/L的磷酸缓冲液。

【点睛】

本题考查蛋白质的提取和分离，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验操作步骤、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累。解题的关键是强化学生对相关实验操作流程的识记、理解与运用。【解析】相对分子质量的大小分配色谱法生理盐水上清液中没有黄色蒸馏水和甲苯除去小分子杂质样品的加入和洗脱红色区带均匀一致地移动磷酸缓冲液五、非选择题(共3题，共9分)31、略

【分析】【分析】

试题分析：参与果醋制作的微生物是醋酸菌；其新陈代谢类型是异养需氧型.果醋制作的原理：当氧气；糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将Z醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

腐乳制作的原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉；毛霉是一种丝状真菌，常见于土壤、水果、蔬菜、谷物上，具有发达的白色菌丝；毛酶等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。

【详解】

（1)在果醋制作时，选用醋酸菌，当氧气和糖源供应充足时，将糖分解成醋酸；在糖源不充足时，可以利用酒精生成醋酸，该过程的化学反应式为：C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。

（2）参与豆腐发酵的微生物有青霉；酵母、曲霉、毛霉等多种；其中起主要作用的是毛霉，腐乳制作用盐腌制时，加盐可以析出豆腐中的水分，不过应注意控制盐的用量；配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在12%左右。

（3）制作泡菜的原理是：乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖；将葡萄糖分解成乳酸。在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发重氮化反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

【点睛】

本题考查果酒和果醋的制作、腐乳的制作、泡菜的制作等，要求考生识记果酒和果醋制作、腐乳的制作、泡菜的制作的相关知识，尤其是果醋制作的原理、腐乳的制作流程和泡菜制作过程中亚硝酸盐的鉴定方法，能根据题干要求选出正确的答案，属于考纲识记层次的考查。【解析】氧气C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O毛霉析出豆腐中的水分盐的用量12乳酸菌在无氧的环境下大量繁殖，将葡萄糖分解成乳酸盐酸酸化重氮化玫瑰红32、略

【分析】【分析】

1；微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐；此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求，对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。

2；微生物常见的接种的方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

（1）在配制牛肉膏蛋白胨固体培养基时，一般还要加入琼脂，其目的是作为凝固剂；乳酸杆菌的培养基中需要加入维生素；制备培养基的操作顺序是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板；异养生物只能利用含碳有机物，因此(NH4)2CO3是不能为乳酸菌提供碳源。

（2）微生物常见的接种的方法有①平板划线法；②稀释涂布平板法；乳酸呈酸性；乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈，故在配制培养基时加入碳酸钙就能鉴别乳酸菌菌落；分解尿素的细菌在添加酚红的指示剂的培养基上会显示出特定的颜色；在鉴定大肠杆菌时在培养基中加入伊红-美蓝，呈现黑色菌落的即为大肠杆菌；亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。纯化后的菌可在-20℃长期保存时，应采用甘油管藏的方法对菌种进行长期保藏。

（3）统计出平板上的菌落数量后还需知道接种时所用样液的体积；两者相除才能求出密度；乙同学一个空白对照平板出现了12个菌落，空白培养基上出现菌落说明被污染需重新制作培养并计数，用来计数是不正确的。

【点睛】

易错点：亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料；纯化后的菌可在-20℃长期保存时，采用的是甘油管藏的方法对菌种进行保藏。【解析】凝固剂维生素溶化→灭菌不能，乳酸菌为异养生物只能利用含碳有机物平板划线法或稀释涂布平板法乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙，形成透明圈酚红伊红-美蓝重氮化玫瑰红甘油管藏接种时所用样液的体积不正确，空白培养基上出现菌落说明被污染需重新制作培养并计数33、略

【分析】（1）进行DNA粗提取和鉴定时；步骤一中需加入一定量的洗涤剂和食盐（氯化钠）对洋葱组织进行处理，加入前者是为了瓦解细胞膜结构，加入后者的目的是溶解DNA，将搅拌和研磨后的物质进行过滤，即可得到含有DNA的滤液。

（2）步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤；可以采用以下几种不同的方法：

①利用DNA在浓度为0.14mol／L的NaCl溶液中溶解度最低可分离出DNA；若要再次提纯；需要将其溶解在2mol／L的NaCl溶液中。

②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉；由于嫩肉粉中含有蛋白酶，可破坏其中的蛋白质。

③由于DNA具有较高的稳定性（或耐较高温度）；将得到的DNA粗提取物放在60～75℃水浴中保温10～15min，则蛋白质被破坏，可得到纯度较高的DNA。

（3）由于DNA不溶于酒精；但