2025年粤教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷

…………○…………内…………○…………装…………○…………内…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………※※请※※不※※要※※在※※装※※订※※线※※内※※答※※题※※…………○…………外…………○…………装…………○…………订…………○…………线…………○…………第=page22页，总=sectionpages22页第=page11页，总=sectionpages11页2025年粤教版选择性必修3生物下册阶段测试试卷47考试试卷考试范围：全部知识点；考试时间：120分钟学校：______姓名：______班级：______考号：______总分栏题号一二三四总分得分评卷人得分一、选择题(共9题，共18分)1、下图为动物成纤维细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（）

A.步骤①的操作不需要在无菌环境中进行B.步骤②中用盐酸溶解细胞间物质使细胞分离C.步骤③到④的分瓶操作前常用胰蛋白酶处理D.步骤④培养过程中不会发生细胞转化2、下列微生物参与豆腐发酵的是（）

①青霉②酵母菌③毛霉④曲霉⑤小球菌A.①②④⑤B.①②③④C.①③④⑤D.②③④⑤3、下列关于制作葡萄酒和葡萄醋的叙述，正确的是（）A.使用的菌种都具有细胞核、核糖体、DNA和RNAB.制作葡萄酒时，葡萄汁可以不灭菌不接种C.醋酸发酵前，必须先将葡萄汁进行酒精发酵D.酵母菌和醋酸菌的呼吸作用类型完全相同4、Sanger法（双脱氧链终止法）是核酸序列测定的一种方法。实验所用的反应体系包括待测序的单链DNA模板；引物、四种脱氧核苷酸（其中一种用放射性同位素标记）和DNA聚合酶。整个实验分为四组；每组按一定比例加入一种底物类似物（ddATP、ddGTP、ddCTP、ddTTP），它能随机掺入合成的DNA链，一旦掺入后DNA合成立即终止，获取DNA片段的电泳（其分离原理仅依据分子量大小）结果如图所示。下列分析错误的是。

A.该测定过程需要借助PCR技术完成B.图中①②处分别为ddTTP和ddATPC.据图可知，本次测序凝胶电泳的方向为从上往下D.终止DNA合成的原因是底物类似物不能与下一个脱氧核苷酸形成磷酸二酯键5、细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列与此有关的说法正确的是（）A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B.固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基C.琼脂中的多糖是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质D.以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌6、动物细胞培养是动物克隆的基础，如下图所示，a、b、c表示现代生物工程技术，①、②、③分别表示其结果，请据图回答，下列说法正确的是（）

A.a如果是核移植技术，则①体现了动物细胞的全能性B.b如果是体外受精技术，②的产生属于有性生殖，该技术为良种家畜快速大量繁殖提供了可能C.c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表型一定相同D.①②③中的受体（代孕母体）均需经过一定的激素处理，以达到超数排卵和同期发情的目的7、下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（）A.菊花茎段培养前需用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液消毒B.菊花组织培养的全过程都要在有光条件下进行C.切取幼嫩的菊花茎段进行培养是因为该部位容易诱导形成愈伤组织D.组培苗常移植到蛭石中锻炼是因为蛭石带菌量低且营养丰富8、中国的许多传统美食制作过程蕴含了生物发酵技术。下列叙述正确的是（）A.泡菜制作过程中，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸和CO2B.腐乳制作过程中，毛霉等微生物产生了蛋白酶C.面包制作过程中，酵母菌进行无氧呼吸产生H2OD.酸奶制作过程中，醋酸菌的生长需要氧气的供应9、动物生物反应器和研究开发重点是动物乳腺反应器；可把人体相关基因导入到哺乳动物的卵细胞中，使生出的转基因动物长大后产生的乳汁中含有人类所需要的不同蛋白质。培育作为“生物反应器”的动物涉及的现代生物技术有（）

①基因工程②体外受精③胚胎移植④早期胚胎培养A.①②③B.②③④C.①③④D.①②③④评卷人得分二、多选题(共9题，共18分)10、下列关于人早期胚胎发育过程中桑椹胚和囊胚的叙述中，正确的是（）A.囊胚与桑椹胚相比，每个细胞内DNA总量增加B.囊胚期出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变C.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起D.桑椹胚的形成在卵巢，囊胚的形成在输卵管11、利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示；下列叙述正确的是（）

A.过程①需使用逆转录酶B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞12、我国制作泡菜历史悠久。《中馈录》中记载：“泡菜之水，用花椒和盐煮沸，加烧酒少许。如有霉花，加烧酒少许。坛沿外水须隔日一换，勿令其干。”下列说法错误的是（）A.“泡菜之水，用花椒和盐煮沸”的目的是彻底灭菌B.“霉花”主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往来自蔬菜C.“坛沿外水须隔日-换，勿令其干”的目的是保证坛内适宜湿度D.制作泡菜的时间越长，亚硝酸盐的含量越高13、地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶。研究者从牛的瘤胃中筛选产生纤维酶的纤维素分解菌，其筛选过程如图1所示。将丙中的菌悬液转接于含有稻草作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用刚果红处理，看到如图2所示情况，下列有关叙述，错误的是（）

A.②过程是涂布器取乙中的菌液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面B.甲、乙试管中的液体都属于液体培养基，主要作用是稀释菌种C.Ⅰ号、Ⅱ号培养基都属于固体培养基，配置时先灭菌后调节pHD.可挑取图2中周围出现透明圈的菌落，用平板划线法继续纯化14、下列关于DNA粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理的叙述正确的是（）A.利用DNA不溶于酒精，但蛋白质均溶于酒精的原理，可分离DNA与蛋白质B.利用在一定温度下DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色的原理对粗提取的DNA进行鉴定C.PCR技术利用了DNA的热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合D.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理15、勤洗手是预防病毒感染的有效措施。某公司在防控新型冠状病毒期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果；研究人员检测了用凝胶洗手前后手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。下列叙述错误的是（）

A.统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是平板划线法B.除图中操作外，还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养C.培养基上的一个菌落只可能来源于样品稀释液中的一个活菌D.初步判断培养基上菌种的类型，需要用显微镜观察菌体的形状16、自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自身固氮菌拌种后播种，可显著提高产量并降低化肥的使用量。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。以下叙述正确的是（）

A.步骤①土样应取自当地表层土壤；步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍B.自生固氮菌是自养型生物，不可用血细胞计数板来计数土壤悬浮液中的菌体数C.步骤②需充分振荡20min，主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中D.步骤④所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源17、利用基因工程技术可使大肠杆菌生产人的胰岛素原。下列相关叙述中，错误的是（）A.人和大肠杆菌在合成胰岛素原时，转录和翻译的场所是相同的B.DNA连接酶能催化磷酸与脱氧核糖形成化学键C.通过检测发现大肠杆菌中没有胰岛素原产生，则可判断重组质粒未导入受体菌D.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原有较高的生物活性18、2019年，中国科学院神经科学研究所利用CRISPR—Cas9基因编辑技术，用基因敲除的猴的体细胞通过克隆技术培育出5只克隆疾病猴。下列相关叙述错误的是（）A.克隆猴基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰B.受精卵经基因编辑后形成的胚胎都成功发育为克隆疾病猴C.克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物D.可以运用该基因编辑技术进行生殖性克隆人的研究评卷人得分三、填空题(共5题，共10分)19、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。20、两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：

①相同点：都缝合______键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。21、目的：使目的基因在受体细胞中_____，并且可以______，使目的基因能够______作用。22、来源：主要是从______中分离纯化出来的。23、在____________的温度范围内，DNA的双螺旋结构解体，双链分开，这过程成为__________。评卷人得分四、实验题(共3题，共15分)24、某化工厂为了处理排出污水中的一种有害的；难以降解的有机化合物A；其研究团队用化合物A、磷酸盐镁盐和微量元素等配制了培养基，成功地筛选出能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答问题。

（1）在培养基中加入化合物A的目的是______________，这种培养基属于____________培养基。

（2）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量__________的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量____________。

（3）若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用______方法进行计数。请你预测目的菌的种群数量会发生怎样的变化。

（4）将目的菌用于环境保护实践时，还有哪些问题需要解决？_______

（5）有人提出，可以通过改造细菌的基因来获得能够降解化合物A的细菌，请分析这种方法是否可行。_______25、面对新冠疫情；我国一直坚持严格防控措施，“零容忍”彰显人民立场制度优势。坚持中高风险地区的大面积核酸检测；适龄人群接种疫苗构建免疫屏障是严格防控的主要措施。新冠病毒核酸检测常采用RT﹣PCR检测法，技术流程如下图，①②③④⑤表示相关步骤。

回答下列问题：

(1)步骤①需要的酶是________，步骤④需要的酶是________，引物A和引物B是根据________序列合成的。

(2)步骤③的目的是________，如果该步骤出现失误，对检测结果的影响是________。

(3)新冠病毒抗体检测可作为核酸检测的补充，抗体检测的原理是________。对某人进行检测时发现，其核酸检测为阴性，抗体检测呈阳性，原因可能是________。26、我国有近一亿公顷的盐碱地，大部分植物无法在此生存，而耐盐植物藜麦却能生长。通过研究藜麦叶片结构后发现，其表皮有许多盐泡细胞，该细胞体积是普通表皮细胞的100倍以上，里面没有叶绿体，Na+和Cl-在盐泡细胞的转运如下图所示。请回答问题。

（1）据图推测，藜麦的耐盐作用机制是通过_________的方式，将Na+和Cl-运送到表皮盐泡细胞的________（细胞器）中储存起来；从而避免高盐对其他细胞的影响。

（2）下表为藜麦盐泡细胞和其他几种普通植物的叶肉细胞膜中部分蛋白的相对表达量。其中______（填下列选项字母）更可能是藜麦，理由是_______________________。

。

ABCDNa+载体蛋白812511Cl-载体蛋白2646葡萄糖转运蛋白38286668（3）藜麦根系从土壤中吸收盐分是主动运输还是被动运输？有同学设计实验进行了探究。

①实验步骤：

a．取甲、乙两组生长发育基本相同的藜麦幼苗植株，放入适宜浓度的含有Na+、Cl-的溶液中。

b．甲组给予正常的细胞呼吸条件，乙组加入______________。

c．一段时间后测定两组植株根系对Na+、Cl-的吸收速率。

②预测实验结果及结论：若乙组_______________；说明藜麦从土壤中吸收盐分的方式是主动运输。

（4）研究人员尝试将藜麦中的耐盐基因转移到其他植物体内，从而培育新型耐盐植物。若要从分子水平上检测耐盐基因是否成功转入受体细胞，请写出两种常用的检测方法_________、___________。从经济价值和生态价值角度考虑，培育耐盐植物的主要意义是_______________（写出两条）。参考答案一、选择题(共9题，共18分)1、C【分析】【分析】

动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞；制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养。

【详解】

A；动物细胞培养过程需要无菌操作；故步骤①的操作需要在无菌环境中进行，A错误；

B；动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织；分散成单个细胞，制成细胞悬液，B错误；

C；传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞；使之分散成单个细胞，再分瓶培养，C正确；

D；步骤④为传代培养过程；该过程中部分细胞可能发生细胞转化，核型改变，D错误。

故选C。2、B【分析】【分析】

腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。让豆腐上长出毛霉：将豆腐块平放在笼屉内；将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度。约48h后，毛霉开始生长，3d之后菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝。现代科学研究表明，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉；酵母菌、曲霉和毛霉等，豆腐块上生长的微生物来自空气中的微生物繁殖体如毛霉的孢子。

【详解】

现代科学研究表明；多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉；酵母菌、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。

故选B。

【点睛】3、B【分析】【分析】

果酒制作：

1；酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌。

2；在有氧条件下；酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。

3；20℃左右最适宜酵母菌繁殖；酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃。

4；在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌。葡萄酒呈现深红色的原因：在发酵过程中,随着酒精浓度的提高,红葡萄皮的色素也进入发酵液,

在缺氧；呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到制约。

果醋制作：

1；醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂；

醋酸菌是一种好氧细菌；只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。

2；当氧气、糖源都充足时；醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。

3；醋酸菌的最适生长温度为30℃-35℃；

【详解】

A；果酒的制作是由酵母菌完成的；而果醋的制作是由醋酸菌完成的，醋酸菌没有细胞核，A错误；

B；酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖进行酒精发酵；葡萄表面有野生的酵母菌，果酒制作时，葡萄汁可以不灭菌不接种，B正确；

C；当氧气、糖源充足时；醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸，C错误；

D；酵母菌是兼性厌氧型菌；乳酸菌是厌氧菌，呼吸作用类型不完全相同，D错误。

故选B。4、B【分析】【分析】

基因检测是指通过检测生物体中的DNA序列，以了解生物体基因状况的技术手段。Sanger双脱氧链终止法是DNA测序的基本方法；其原理是：核酸模板在核酸聚合酶；带有3′-OH末端的单链核苷酸引物、四种dNTP存在的条件下复制或转录时，如果在反应系统中分别引人单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3′位置缺少一个羟基，故不能同后续的dNTP形成磷酸二酯键），只要ddNTP掺入链端，该链就停止延长，链端掺入dNTP的片段可继续延长。

【详解】

A；该过程需要借助DNA扩增的技术和原理；故需要借助PCR技术完成，A正确；

B；结合题意“组按一定比例加入一种底物类似物；它能随机掺入合成的DNA链，一旦掺入后DNA合成立即终止”，且据图可知，ddCTP会在C位点终止，ddGTP会在G位点终止，故①对应的终止字母为A，故①为ddATP，同理②为ddTTP，B错误；

C、Sanger法测序中；通过电泳将不同长度的片段分开，DNA片段越小，距离起点越远，故据图可知，本次测序凝胶电泳的方向为从上往下，C正确；

D；终止DNA合成的原因是底物类似物的碳上不是羟基；不能与下一个脱氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯键，D正确。

故选B。5、D【分析】【分析】

微生物培养基的成分有水；无机盐、碳源、氮源和生长因子；不同的生物有不同的碳源和氮源，如尿素分解菌以尿素为唯一氮源，某些碳源、氮源也可以提供能源，如牛肉膏蛋白胨培养基。

【详解】

A；乳酸菌是异养型微生物；需要有机碳源，而硝化细菌是自养型微生物，需要的碳源是二氧化碳，A错误；

B；固体培养基中去除琼脂（凝固剂）才可制成液体培养基；B错误；

C；培养基中的琼脂是凝固剂；不会被微生物利用，C错误；

D；自生固氮微生物可以利用大气中的氨气作为氮源；因此以尿素为唯一氮源的培养基上长出的不都是尿素分解菌，D正确。

故选D。6、B【分析】【分析】

动物细胞核移植技术表面动物细胞核具有全能性；体外受精包括精子的采集和获能；卵母细胞的采集和培养、体外受精；该技术产生的动物称为试管动物；胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。

【详解】

A；a如果是核移植技术；则①体现了动物细胞核的全能性，A错误；

B、b如果是体外受精技术；②的产生属于有性生殖，该过程可获得大量的胚胎，因而可为良种家畜快速大量繁殖提供了可能，B正确；

C；胚胎分割技术所得个体的基因型完全相同；但表现型不一定完全相同，因为表现型还受环境的影响，即c如果是胚胎分割技术，③中个体的基因型相同，但表型不一定相同，C错误；

D；①②③过程中均需要胚胎移植技术；其中的受体均需注射性激素，以达到同期发情的目的，为移入的胚胎提供几乎相同的环境，D错误。

故选B。7、C【分析】【分析】

植物组织培养过程是：离体的植物器官；组织或细胞脱分化形成愈伤组织；然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。

【详解】

A；流水冲洗后的外植体先用酒精消毒；无菌水清洗后再用次氯酸钠消毒，A错误；

B；诱导愈伤组织期间一般不需要光照；B错误；

C；幼嫩的菊花茎段分裂旺盛；因而容易诱导形成愈伤组织，C正确；

D；移植到蛭石中炼苗主要是因为蛭石保水透气；可优化土壤结构，有利于植物根系的生长和小苗的稳定发育，D错误。

故选C。8、B【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖氧化为乳酸。

2；在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖；再隔绝氧气进行发酵。

3；豆腐的主要营养成分是蛋白质和脂肪；难以消化、吸收，毛霉、酵母菌等多种微生物分泌的蛋白酶，能将蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸，在多种微生物的协同下，豆腐转变成腐乳。制作过程中需要加盐腌制。

【详解】

A；乳酸菌发酵产物只有乳酸；没有二氧化碳，A错误；

B；腐乳制作过程中利用的微生物有酵母菌、曲霉和毛霉等；毛霉等微生物产生了蛋白酶，将蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，B正确；

C；酵母菌无氧呼吸产生酒精和二氧化碳；没有水，C错误；

D；酸奶制作过程中利用的微生物是乳酸菌；乳酸菌在无氧条件下产生乳酸，D错误。

故选B。9、D【分析】【分析】

题意分析；要培育作为“生物反应器”的动物，产生许多珍贵的医用蛋白，说明需要根据人们的意愿进行定向改造，因而需要用到基因工程技术；获得的重组DNA需要用显微注射法导入受精卵；经动物细胞培养形成早期胚胎，再进行胚胎移植，以获得具有“生物反应器”的动物。

【详解】

培育作为“生物反应器”的动物需要的技术流程为；首先将所需要的不同蛋白质的相关基因通过基因工程技术导入动物的受精卵中，该受精卵可通过体外受精获得，而后将转基因成功的受精卵经早期胚胎培养和胚胎移植，而后培育出能生产所需要的不同蛋白质的动物，该动物称为生物反应器，即D正确。

故选D。

【点睛】二、多选题(共9题，共18分)10、B:C【分析】【分析】

胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂；数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

【详解】

A；由桑椹胚发育到囊胚进行的是有丝分裂；形成的每个细胞内DNA总量不变，A错误；

B；囊胚期细胞出现了细胞分化；但细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此其遗传物质未发生改变，B正确；

C；囊胚期内细胞团和滋养层细胞的差异不是DNA复制水平上的差异；而是转录水平上的差异，即基因的选择性表达，C正确；

D；受精卵在输卵管中形成；后在子宫中发育，故胚胎发育的早期不可能在卵巢，D错误。

故选BC。11、A:D【分析】【分析】

过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程；过程②表示利用PCR扩增目的基因；过程③表示将重组质粒导入大肠杆菌；过程④培养并筛选转基因大肠杆菌，级工程菌。

【详解】

A；过程①是以mRNA为模板合成DNA的过程；即逆转录过程，需要逆转录酶的催化，故A正确；

B；过程②表示利用PCR扩增目的基因；在PCR过程中，不需要解旋酶，是通过控制温度来达到解旋的目的，故B错；

C；利用氯化钙处理大肠杆菌；使之成为感受态细胞，故C错；

D；检测目的基因是否成功导入受体细胞的染色体DNA中；可以采用DNA分子杂交技术，故D正确。

故选AD。

【点睛】12、A:C:D【分析】【分析】

1；泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌．在无氧条件下；乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。2、在制作泡菜时所配制的泡菜盐水要煮沸，以杀灭盐水中的微生物，防止杂菌污染。泡菜制作过程中，温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短、容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。

【详解】

A；“泡菜之水；用花椒和盐煮沸”的目的提升泡菜味道、减少水中的溶氧量和消毒杀菌防止杂菌污染，A错误；

B；“霉花”是指泡菜坛表面的一层白膜；主要由酵母菌繁殖形成，酵母菌往往来自蔬菜，B正确；

C；“坛沿外水须隔日一换；勿令其干”的目的是保证坛内的无氧环境，C错误；

D；制作泡菜的过程；亚硝酸盐的含量呈先上升后下降的趋势，D错误。

故选ACD。13、A:B:C【分析】分解纤维素的微生物的分离实验的原理：①土壤中存在着大量纤维素分解酶；包括真菌；细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。

【详解】

A；根据Ⅰ号培养基上菌落分布均匀可知；②过程是用涂布器取乙中的样品稀释液均匀的涂布在Ⅰ号培养表面，即乙中是分解纤维素菌的样品稀释液，不是菌液，A错误；

B；液体培养基的作用是让菌体增殖；而不是稀释菌种，甲、乙试管中的液体都是样品稀释液，捕食液体培养基，B错误；

C；配置固体培养基的基本步骤是计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板；故需要先调pH，再灭菌，C错误；

D；刚果红能与纤维素形成红色复合物；若菌落周围出现透明圈，说明纤维素分解菌将纤维素进行了分解，可挑取该菌落用平板划线法继续纯化该菌体，D正确。

故选ABC。14、B:C:D【分析】【分析】

DNA粗提取和鉴定的原理：

（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶；高温和洗涤剂的耐受性。

（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

【详解】

A；DNA不溶于酒精溶液；但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离，A错误；

B；在沸水浴的条件下；DNA遇二苯胺会被染成蓝色，B正确；

C；PCR是一种体外扩增DNA片段的技术；利用了DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合，包括：高温变性（解链）→低温复性→中温延伸三个步骤，C正确；

D；由于同性相斥、异性相吸；带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动，电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，D正确。

故选BCD。15、A:C:D【分析】微生物常见的接种方法（稀释涂布平板法可用于微生物的计数）：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；平板划线无法得知稀释倍数；不能用于活菌计数，故统计洗手前手部细菌的数量，选择的接种方法是稀释涂布平板法，A错误；

B；除图中操作外；还需要设置一组未接种的空白培养基进行培养，以验证培养基是否被杂菌污染，B正确；

C；由于当两个或多个细胞连在一起时；平板上显示的只是一个菌落，故培养基上的一个菌落可能来源于样品稀释液中的一个、甚至几个活菌，C错误；

D；由于菌落肉眼可见；故初步判断培养基上菌种的类型，可用肉眼观察菌体的形态特征，D错误。

故选ACD。16、A:C:D【分析】【分析】

微生物常见的接种的方法。

（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板；接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。

（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后；均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

【详解】

A；自生固氮菌是需氧型生物；步骤①土样应取自表层的土壤，步骤③中的稀释梯度分别为10，100，1000倍，所以土壤悬浮液稀释了1000倍，A正确；

B；自生固氮菌是异养型生物；可用血细胞计数板或稀释涂布平板法来计数土壤悬浮液中的菌体数，B错误；

C；步骤②需充分振荡20min；主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，C正确；

D；步骤④为稀释涂布平板法接种；所用的接种工具是涂布器，该选择培养基的特点是不添加氮源，利用的是空气中的氮气，D正确。

故选ACD。17、A:C:D【分析】【分析】

大肠杆菌是原核生物；原核细胞与真核细胞相比，最大的区别是原核细胞没有被核膜包被的成形的细胞核（没有核膜；核仁和染色体）；原核细胞只有核糖体一种细胞器；原核细胞中，转录和翻译在相同时空中进行，而真核生物的转录和翻译过程在不同时间和空间进行。

【详解】

A；人体胰岛细胞是真核细胞；在合成胰岛素原时，转录在细胞核中进行，翻译在细胞质的核糖体上进行，原核细胞没有细胞核，A错误；

B；DNA连接酶能在两个相同黏性末端配对后的磷酸与脱氧核糖之间形成化学键（磷酸二酯键）；B正确；

C；通过检测；大肠杆菌中没有胰岛素原产生，不能判断重组质粒未导入受体菌，也可能是导入后没有表达，C错误；

D；大肠杆菌是原核生物；没有内质网和高尔基体，不能对胰岛素原进行加工，因此人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原没有生物活性，D错误。

故选ACD。18、B:D【分析】【分析】

动物细胞核移植技术是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中；使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。

【详解】

A；5只克隆疾病猴是由猴的体细胞通过克隆技术（属于无性繁殖）获得的；所以其基因组成差异小，可减少个体差异对实验的干扰，A正确；

B；经基因编辑后形成的胚胎不一定都能发育成克隆疾病猴；B错误；

C；克隆疾病猴有助于研究该疾病致病机制和开发相应药物；C正确；

D；不能利用该技术进行克隆人的研究；D错误。

故选BD。

【点睛】三、填空题(共5题，共10分)19、略

【解析】①.接种②.平板划线法③.稀释涂布平板法20、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】磷酸二酯21、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】稳定存在遗传至下一代表达和发挥22、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】原核生物23、略

【分析】【分析】

【详解】

略【解析】80—100℃变性四、实验题(共3题，共15分)24、略

【分析】【分析】

分析题干信息；该实验的目的是筛选出高效降解化合物A的细菌，在以化合物A为唯一碳源的培养基中只有能降解化合物A的微生物才能以化合物A为碳源和氮源生长繁殖，不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源和氮源，无法生长繁殖。

【详解】

（1）由题意可知；本实验是分离出降解的有机化合物A的菌种，所以培养基中加入化合物A的目的是筛选降解的有机化合物A的菌种，这种培养基属于选择培养基。

（2）由于“目的菌”有降解的有机化合物A的作用；所以培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量低的培养基，接入新的培养液中连续培养，使“目的菌”的数量进一步增加。

（3）若研究“目的菌”的群体生长规律；将单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板方法进行计数。培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分；空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降。

（4）将目的菌用于环境保护实践之前；还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等。

（5）可以利用基因工程的方法；将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性。

【点睛】

本题考查了微生物分离与培养的有关知识，要求考生能够识记培养基的成分和培养条件，掌握微生物分离与纯化的方法与步骤，再结合所学知识准确判断。【解析】筛选出能降解化合物A的细菌选择低增多稀释涂布平板培养液中目的菌的种群数量在开始一段时间范围内，由于营养充分、空间充裕，种群数量类似于“J”形增长，随着营养物质的消耗，种群增长速率逐渐下降，最终会达到K值，继续培养，由于营养物质缺乏、有害代谢物积累、pH改变等，种群数量将会下降将目的菌用于环境保护实践之前，还要对目的菌进行研究，检测其是否会产生对环境有害的代谢物；当使用大量目的菌时会不会使目的菌成为优势菌群，对其他微生物的生存构成威胁，从而打破微生物菌群的平衡等可以利用基因工程的方法，将能降解化合物A的基因导入受体菌中来实现。但在使用之前要检验其安全性25、略

【分析】【分析】

PCR扩增目的基因可分为以下几步：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至90℃以上一定时间后；使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的复性：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至50℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：当温度上升到72℃左右时，DNA模板--引物结合物在热稳定DNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。

(1)

步骤①从病毒RNA到病毒cDNA的过称为逆转录；需要的酶是逆转录酶；步骤④为延伸过程，需要的酶是热稳定DNA聚合酶；利用PCR技术扩增目