VLP形式的跨膜蛋白在CAR-T免疫治疗方面的研究进展

VLP形式的跨膜蛋白在CAR-T免疫治疗方面的研究进展前

言膜蛋白是与细胞膜磷脂双分子层结合的蛋白质，在生命活动中具有重要作用，人类的许多疾病与膜蛋白功能异常有关，据统计目前50%的小分子药物的受体为膜蛋白，所以膜蛋白是重要的药物靶点。义翘神州已搭建基于HEK293表达系统的VLP技术平台，能够将目的膜蛋白完整展示在VLP表面，已上线的产品GPRC5D、Claudin18.2、Claudin6等，与抗体结合均展示出良好的活性。义翘神州还可为有需求的客户提供定制服务，助力药物研发。01跨膜蛋白与VLP技术平台跨膜蛋白具有多种生理功能，包括蛋白连接、识别、转运、锚定和转导等，其功能的异常与诸多的疾病相关，是重要的药物靶点。然而表达量低、体外不溶、纯化不稳定、难保持天然构象等问题的存在，限制了跨膜蛋白在药物开发方面的进程。病毒样颗粒（virus-likeparticles,VLPs）是由病毒的衣壳蛋白通过自组装而形成的纳米级颗粒（直径约100～300纳米），不含病毒核酸，不能进行自主复制，生产操作过程中较为安全。VLPs最初应用在原子水平上分析病毒结构，随后研究发现其能够将完整天然构象的膜蛋白展示在类病毒颗粒表面，产生非常适合免疫和抗体筛选的全长跨膜蛋白。义翘神州聚焦于膜蛋白产品的开发，搭建了基于HEK293表达系统的VLP技术平台，能够将目的膜蛋白完整展示在VLP表面，使其能够像普通可溶蛋白一样用于免疫和抗体筛选检测，助力药物研发。02跨膜蛋白在CAR-T研究中的应用四次跨膜蛋白：ClaudinClaudins（CLDN）是一类存在于上皮和内皮中的整合素膜蛋白，主要功能有细胞间黏附、维持细胞稳态、调节细胞通透性、调节细胞增殖及分化。Claudin蛋白为4次跨膜蛋白。Claudin的异常表达导致多种肿瘤的发生和发展，如Claudin1与结肠癌、Claudin10与肝癌、Claudin18与胃癌。Claudin作为细胞表面蛋白，可用于多种治疗策略的靶点或评估预后价值。Claudin蛋白结构的描述（源自参考文献）1:Claudin18.2Claudin18.2作为一个高度特异性的细胞表面分子，在正常胃组织中仅表达于已分化的上皮细胞，但在原发性胃癌、转移性胃癌、胰腺癌、食管癌、卵巢癌、肺癌等多种实体瘤中高表达，例如50%-80%的胃癌患者中存在Claudin18.2的表达。Claudin18.2暴露的胞外结构可与抗体结合，使其成为理想的单克隆抗体开发靶点，尤其是实体瘤免疫治疗。CT041是一种CAR-T细胞疗法，目前已在晚期胃腺癌或胰腺癌患者中开展临床试验。2：Claudin6Claudin6是继Claudin18.2之后，CLDN家族中另一个癌症治疗的潜力靶点。Claudin6由上皮细胞表达，在组织发育、维持紧密连接完整性、上皮组织的通透性等方面发挥作用。研究发现Claudin6在多种癌症和实体瘤中特异性高表达，在正常组织中不表达或低表达，有作为癌胚抗原和治疗靶点的潜力。BNT211是一种靶向Claudin6的CAR-T细胞疗法，在BioNTech的早期临床开发中用于治疗实体瘤，目前处于临床I/II期。七次跨膜蛋白：GPCRG蛋白偶联受体（GPCR），也称为七次跨膜受体或七螺旋受体，是真核生物中最大和最多样化的膜受体蛋白家族。对这些受体的研究和发现极大地影响了现代医学，据估计，目前市场上约50%的药物靶点是GPCRs。GPCRs结构及信号通路概述（源自参考文献）1：GPRC5DGPRC5D属于GPCRs的一种孤儿受体，其配体和信号传导机制尚未确定。在正常组织中GPRC5D仅表达于有免疫赦免性的毛囊区域，但在原代多发性骨髓瘤（MM）细胞表面高表达。数据显示65%的MM患者（54/83）中GPRC5D的表达超过阈值，表明GPRC5D是MM治疗的潜在靶点。作为候选药物靶向CAR-T细胞治疗MM时安全有效，其体内活性等同于抗BCMA的CAR-T细胞。BCMA抗原丢失导致的肿瘤复发模型中，靶向GPRC5D的CAR-T细胞具有抗肿瘤活性。2：SSTR2生长抑素Ⅱ型受体SSTR2属于GPCR，可阻止原癌基因的激活，抑制细胞的增殖，也可通过MAPK途径使酪氨酸激酶失活，从而阻止细胞的增殖。近年来SSTR2在肢端肥大症、消化道出血和神经内分泌肿瘤、神经母细胞瘤等治疗方面应用广泛。SSTR2在神经内分泌肿瘤（NETs）中过表达，是诊断和治疗的重要靶点。在小鼠模型中，抗SSTR的CAR-T细胞对NET细胞系具有靶向细胞毒性，可有效减缓肿瘤的生长速度，特异性杀伤肿瘤细胞。3：CXCR4CXCR4是一种趋化因子受体，同样属于GPCR，对肿瘤的生长、侵袭、血管生成、转移和对治疗药物的耐药性起着重要作用，而且CXCR4过度表达还与许多癌症亚型的不良预后相关。CXCR4广泛表达于实体肿瘤和癌症干细胞，在肿瘤细胞上具有较高的自我更新能力和强致瘤性。抑制CXCR4可加强T细胞和NK细胞浸润，减少癌症相关成纤维细胞募集，是增强CAR-T和CAR-NK细胞治疗的潜在策略。✦义翘神州全长跨膜蛋白产品义翘神州搭建了基于HEK293表达系统的VLP技术平台，用于生产全长多次跨膜蛋白，已成功开发GPRC5D、Claudin6、Claudin18.2、SSTR2等蛋白，与抗体结合展示出良好的活性，具有如下优势：01全长蛋白，构象完整02免疫原性高，适合抗体筛选03可用于多种检测，如ELISA、SPR、BLI等产品验证数据HumanGPRC5D-VLPProtein,Cat:24447-HNAH高活性ImmobilizedHumanGPRC5D-VLP(FullLength)Protein(Cat:24447-HNAH)at5μg/mL(100μL/well)canbindanti-GPRC5DAntibody,theEC50

is3-10ng/mLHumanClaudin18.2-VLPProtein,Cat:30025-HNAH高活性ImmobilizedHumanClaudin18.2-VLP(FullLength)Protein

(Cat:30025-HNAH)

at5μg/mL(100μL/well)canbindAnti-Human

Claudin18.2

Antibody,HumanIgG1,theEC50

is5-20ng/mL.更多VLP跨膜蛋白货号靶点种属活性（EC50）24447-HNAHGPRC5DHuman3-10ng/mL24447-HNAH-BGPRC5DHuman4-12ng/mL16658-HNAHClaudin6Human2-10ng/mL30025-HNAHClaudin18.2Human5-20ng/mL30097-HNAHSSTR2Human5-20ng/mL11644-HNAHSSTR2Human10-30ng/mL11325-HNAH

CXCR4Human10-30ng/mL17646-HNA