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DB12Determinationofaminoacidsinfeeds-Ionexchangechromatography天津市市场监督管理委员会发布I本标准依据GB/T1.1-2009给本标准主要起草人：杨鸿雁、梁世岳、李玉鹏、陈龙宾、范寰、1饲料中氨基酸的测定离子交换色谱法本标准适用于饲料原料、配合饲料及浓缩饲料中氨基酸含量GB/T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品GB/T6682分析实验室用水规格测定。水解中，色氨酸全部被破坏，不能测量，4试剂和材料4.1本标准所用试剂和水，在没有注）：4.5pH系列缓冲液、再生液：按仪器说明书配制2）：4.11氢溴酸（48%）：分析纯。4.14磺基丙氨酸-蛋氨酸砜标准储备液：准确称取磺基丙氨酸（纯度≥99.0%）105.7（纯度≥99.0%）113.3mg，用水溶解并定容至250mL,浓度均为2.50µmol/mL，2℃~8℃保存，有效4.15色氨酸标准储备液：准确称取色氨酸标准品（色谱纯）127.5mg，加少许水和数滴0.1氢氧化钠溶液使之溶解，用水定容至250ml，浓度为2.50µmol/mL，2℃~8℃保存，有效期1年。4.16混合氨基酸标准工作液：准确吸取氨基酸混合标准储备液、磺基丙氨酸-蛋氨酸砜标准储备液和为100nmol/mL，2℃~8℃保存，有效期3个月。5.1样品粉碎机。5.4恒温鼓风干燥箱。5.5氮吹仪。5.6旋涡混合仪。mL盐酸溶液，充氮气约1min后拧紧瓶盖，将水解管放入110℃±1℃恒温干燥箱，水解22h～24h。冷却至室温，混匀。3称取试样50mg～100mg（约含蛋白质7.5mg～25mg，精确至0.1mg）于25mL水解管中，冰水浴4℃冰箱中，反应16h，加入0.3mL氢溴酸，振摇后放回冰浴静置30min，取出盐酸溶液，充氮气约1min后拧紧瓶盖，将水解管放入110℃±1℃恒温干燥箱，水解22h～24h。冷却至室温，用水将内容物转移到25mL容量瓶，定称取试样50mg～100mg（约含蛋白质7.5mg～25mg，精确至0.1mg）于10mL聚四氟乙烯水解管冷却至室温，用水将内容物转移到25mL容量瓶中，用盐酸溶液中和至pH值为6～7将上述水解液过滤，取0.5mL滤液于小试管中，置于氮吹仪，65℃吹干，必要时加少许水重复蒸干2次～3次。准确加入2mL～5mL柠檬酸钠缓冲液，旋涡混合仪混匀，用0.2按照仪器使用说明书放置茚三酮溶液与pH系列缓冲液、再生液，设置仪器色谱条件，将混合氨基准品峰面积对比，计算分析，得出各氨基酸的含量4W——某氨基酸的含量，%；M——试样质量，mg。0.5%时，相对偏差不大

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