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文档简介

范微流滴数字PCR法Technicalguidelinesforquantitativedetectionofgeneticallymodifiedplantsandderivedproducts—Dropletdigi2018-11-07发布2018-12-01实施I本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由天津市农村工作委员会提出并归口。本标准起草单位：天津市农业质量标准与检测技术研究所、中国农业科学院生物技术研究所、天津市东丽区产品质量监督检验所。本标准主要起草人：兰青阔、兰璞、李亮、赵新、沈晓玲、王成、宛煜嵩、陈锐、黄凤军、李文、李益歌。1转基因植物及其产品成分定量检测技术规范微流滴数字PCR法1范围2术语和定义3实验室资质——转基因植物数字PCR检测方法研制人员应具备转基因生物安全检测工作相关业务24技术要求4.1方法的建立4.1.2PCR反应体系和反应程序优化通过试验确定适合的反应体系(模板量、引物、探针浓度等)及反应程序(退火温度、循环数等),4.1.4方法灵敏度测试4.1.5方法适用性测试4.2.1线性度4.2.2精密度线性动态范围内的精密度用重复性相对标准偏差RSDr表示，应≤25%。4.2.5再现性3由两个不同操作人员，在两个不同时间段，对包含不同质量分数的同批样品(至少包括阳性样品、阴性样品和定量限样品)进行测试。测试结果与预期偏差RSD应≤25%,表明方法再现性符合要求。否4.3.1经实验室内方法确认符合要求后，组织多家实验室对检测方法的特异性、灵敏度和再现性进行4.3.2实验室间方法确认样品应包括阳性对照样品、阴性对照样品、特异性测试样品和灵敏度测试样4.3.3特异性测试样品应包括：4.3.4灵敏度测试样品应包括定量限样品。4.3.5至少重复3次试验，每次试验至少设置3个平行。4.3.6实验室间方法确认不少于6个实验室提供有效数据。且至少重复3次试验，每次试验至少设置3个平行。4.3.7线性度、精密度、正确度按照5.2要求。4.3.8依据验证单位出具的验证报告

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