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Determinationofmannanandβ-glucaninsaccharomycescerevisiaecultu—Highperformanceliquidchromatogra本文件起草单位：北京英惠尔生物技术有限公司、北京市兽药饲料监测中心、河南海瑞术有限公司、北京三元种业科技股份有限公司饲本文件主要起草人：张亚军、李贤、黄吉波、梁廷银、任泽林、王宏、姚婷、曹林、候酿酒酵母培养物中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的测定高效液相色谱法本文件中甘露聚糖和β-葡聚糖检出限为30mg/kg，定量限为100下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改GB/T6682分析实验室用水规格试样中的甘露聚糖和β-葡聚糖经水解，生成单糖甘露糖和葡萄糖，对两种）：）：），）：），）：2）：），瓶中，用水溶解并定容，混匀。2℃~8℃保存，有效期6个月。5.13混合标准系列溶液：准确移取适量混合标准储备溶液（5.12）于容量瓶中，用水稀释定容，混平行做两份试验。准确称取0.5g～1.0g试样（精确至0.0001mg），于26.0mL盐酸（5.2混匀，再加入50mL水混匀，将锥形瓶放入蒸汽灭菌锅，121℃下水解60min。取出后冷却，用氢氧化钠溶液（5.6）将溶液调为中性（pH≈7），然后用水取不同浓度的标准工作溶液和待测溶液各400µL，依a）色谱柱：C18柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5µm，b）流动相：0.1mol/L乙酸铵溶液（pH=5.5）:乙腈=73），8.3.2混合标准系列溶液和试样溶混合标准系列溶液中甘露糖PMP衍生物和葡萄糖PMP衍生物的高效液相色谱图参见在仪器的最佳条件下，试样溶液中待测物的保留时间应与混和标准系列溶液（质量浓度相对应糖的保留时间一致，其相对偏差在±2.5在相同试验条件下，以甘露糖和葡萄糖混合标准系列溶液中待测物的质量浓度为横坐标，面积为纵坐标，绘制标准曲线，其相关系数应不低于0.99。试样溶液中待测物的质量浓度应线的线性范围内。如超出范围，应将试样溶液用水稀释后衍生，重新测定。单点校准定量时液中待测物的质量浓度与标准溶液质量浓度相差不超9试验数据处理9试验数据处理V——试样溶液定容体积，单位为毫升（mL——试样质量，单位为克（g——标准曲线上查得的试样浓度，单位为微克每毫升(µg/mLV——试样溶液定容体积，单位为毫升（mL——称取试样的质量，单位为克（g测定结果以平行测定的算术平均值表示，保留3位在重复性条件下，两次独立测定结果与其算术

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