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DB41DB41/T1525—2018猪圆环病毒Ⅱ型实时荧光PCR检测方法2018-01-03发布2018-04-03实施河南省质量技术监督局发布I1猪圆环病毒Ⅱ型实时荧光PCR检测方法2.1.2酚/氯仿/异戊醇混合液(25:24:1)、0.01mol/L(pH7.2)的磷酸盐缓冲),2.1.3消化液Ⅱ、阳性对照、阴性对照(见附录A),置-20℃保存。实时荧光定量PCR仪,高速冷冻离心机(12000×g以上二级生物安全柜,恒温水浴锅,2℃~,-采集疑似PCV2感染猪的肺脏、肝脏、肾脏、脾脏用无菌注射器自耳静脉或前腔静脉采集血液3mL~5mL,待血清析出后直接吸取至无菌Eppend管中,编号备用;用无菌注射器先吸入抗凝剂(阿氏液)2mL~3mL2采集的样品密封后,采用保温壶或保温桶加冰密封,尽快运送到实验室。样品在2℃~8℃条件上清液,将无菌离心管倒置于吸水纸上,吸干液体;不同无菌离心管应在吸3在质量控制标准成立的前提下,样品Ct值>32.0或无,且无特定扩增曲线,判定为PCV2核酸阴在质量控制标准成立的前提下,样品29.0<Ct值≤32.04试剂的配制A.60.01mol/L(pH7.2)的磷酸盐缓冲):A.6.30.01mol/LPBS的配制:A液14mL,565'-FAM-TTACCAGCAATCAGACCCCGTT7(资料性附录)PCV2实时荧光PCR检测方法扩增图PCV2实时荧光PCR检测方法的扩

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