原子吸收校准工作规程

原子吸收光谱仪校准工作规程文件编号：SOP-QC-004.01名称：原子吸收光谱仪的校准生效日期：页码：起草人：审核人：批准人：日期：日期：日期：目的建立原子吸收光谱仪的校准规程，确保其得以正确校准。适用范围适用于本QC实验室原子吸收光谱仪的校准。职责指导教师负责和监督本规程的有效实施；操作人员严格按照该规程进行操作。程序校准准备4.1.1外观校准前，原子吸收光谱仪仪器上应有：仪器名称、型号、出厂编号、制造厂名、制造日期、额定工作电源电压及频率，国产仪器应有制造计量器具许可证标志及编号。所有紧固件均应安装牢固，连接件应连接良好，各调节旋钮、按键和开关均能正常工作，无松动现象，电缆线的接插件应接触良好气路连接正确，不得有漏气现象，气源压力应符合出厂说明规定的指标。外观不应有影响仪器正常工作的损伤。仪表的所有刻线应清晰、粗细均匀。指针的宽度不应大于刻线的宽度，并应于刻线平行。数显部位显示清晰、完整。4.1.2校准环境温度环境：10~30℃湿度范围：≤85%RH仪器应平稳地放在工作台上，操作时不得有摇动，周围无强磁场、电场或振动源干扰，无强气流影响。4.1.3校准设备及标准物质空心阴极灯标准物质秒表最小分度值不大于0.1s波长示值误差与重复性光谱带宽偏差基线稳定性测量重复性特征浓度检出限4.2.1泵流量设定值误差Ss和流量稳定性SR泵流量设定值（mL/min）0.2~0.50.6~1.0大于1.0测定次数333流动相收集时间/min20~1010~55注：最大流量的设定值可根据用户使用情况而定；对特殊的、流量小的仪器，流量的设定可根据用户使用情况选大、中、小三个流量；流动相的收集时间则根据情况适当缩减或延长。按上表的要求设定流量，启动仪器，压力稳定后，在流动相出口处用事先称重过的洁净容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集表5-2规定时间流出的流动相，在分析天平上称重，按公式(3)计算流量实测值Fm按公式(1)、公式(2)计算Ss和SR。每一设定流量，重复测量3次。Ss=Fm式中：Fm—同一设定流量3次测量值的算数平均值，mL/minFs—流量设定值，mL/minSR=F式中：Fmax—同一设定流量3次测量值的最大值，mL/minFmin—同一设定流量3次测量值的最小值，mL/minF式中：Fm—流量实测值，mL/minW2—容量瓶+流动相的质量，gW1—容量瓶的质量，gρt—实验温度下流动相的密度，g/cm3，(不同温度下流动相的密度参见JJG705-2014附录C)t—收集流动相的时间，min。4.2.2梯度误差色谱条件：色谱柱阻尼管（4m*0.1mmD）或等效柱温40℃流动相A泵：纯水B泵：0.1%（V/V）丙酮水溶液梯度程序时间（min）A泵%B泵%Initial10005.0010005.01802010.00802010.01604015.00604015.01406020.00406020.01208025.00208025.01010030.00010030.01100035.00100035.00Stop流速2.0mL/min检测波长254nm测量次数2按照上述色谱方法运行，完成谱图采集后，画出B溶剂经由5段阶梯从0%变到100%的梯度变化曲线，如图5-1所示。求出由B溶剂变化所产生的每一段阶梯对应的响应信号值的变化值Li。重复测量2次，按公式(4)计算每一段阶梯对应的响应信号值的变化平均值Li；按公式(5)计算五段阶梯响应信号值的总平均值Li；按公式(6)计算每一段的梯度误差Gi，取GiL式中：Li—第iL1i—第i段阶梯第1L1i-1—第（i-1）段阶梯第L2i—第i段阶梯第2L2i-1—第（i-1）段阶梯第Li=i=1式中：Li—5n—梯度的阶梯数，n=5。式中：Gi—第i注：当i为1（i-1=0）时，第（i-1）阶梯响应信号值为B溶剂为0%时的响应信号值。图5-1梯度误差检定示意图温箱温度设定值误差ΔTs和柱箱温度稳定性Tc 将数字温度计探头固定在柱温箱内与色谱杜相同的部位，选择35℃和45℃(也可根据用户使用温度设定)进行检定。按议器明书操作，通电升温，待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录1次，共计7次，求出平均值。平均值与设定值之差为柱温箱温度设定值误差ΔTs，7次读数中最大值与最小值之差为柱温箱温度稳定性Tc。紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器的性能4.4.1波长示值误差和重复性将检测器和数据处理系统连接好，通电预热稳定后，用注射器将纯水注入检测池内进行冲洗后，充满检测池。待检测器示值稳定后，在(235±5)nm、(257±5)nm、(313±5)nm和(350±5)nm的波长下将示值回零，然后再用注射器将紫外分光光度计溶液标准物质(参考波长为235nm，257nm，313nm和350nm)从检测器人口注入样品池中冲洗，并将样品池充满至示值稳定。将检测器波长调到低于参考波长5nm处(例如检定257nm时，检测器波长先调到252nm)，改变检测器波长，每(5~10)s改变1nm，记录每个波长下的吸收值(吸收值变化的示意图见图5-2)，最大或最小吸收值对应的波长与参考波长之差为波长示值误差。每个波长重复测量3次，其中最大值与最小值之差为波长重复性。图5-2波长示值误差检定中吸收值变化示意图 有吸光值显示的检测器，改变波长时可直接读出吸光值，其最大(或最小)吸光值对应的波长与参考波长之差为波长示值误差。有波长扫描功能的仪器可画出标准溶液的光谱曲线，其波峰(或波谷)对应的波长与参考波长之差为波长示值误差。对于有内置标准滤光片可进行自检的仪器可直接采用其测量数据。 对改变波长有自动回零功能的紫外-可见光检测器，可采用连续进样的方法检定波长示值误差，具体做法是：用一节空管代替色谱柱将液路连通，以水做流动相，流量为(0.5~1.0)mL/min，采用步进进样方法，例如检定257nm时，从252nm开始到262nm，每2min改变1nm，用注射器注人相同体积的紫外分光光度计溶液标准物质，得到一组不同波长的色谱峰，最高(或最低)色谱峰对应的波长与参考波长之差，即为波长示值误差。4.4.2基线噪声和基线漂移选用C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外检测器的波长设定为254nm，检测灵敏度调到最灵敏挡。开机预热，待仪器稳定后记录基线30min，选取基线中噪声最大峰-峰高对应的信号值，按公式(7)计算基线噪声，用检测器自身的物理量（AU）作单位表示。基线漂移用30min内基线偏离起始点最大信号值（AU/30min）表示。Nd=KB式中：Nd—K—衰减倍数；B—测得基线峰-峰高对应的信号值，AU4.4.3最小检测浓度在4.4.2的色谱条件下，由进样系统注入（10~20）L的1.00×10-7g/mL萘-甲醇溶液，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰高，按公式（8）计算最小检测浓度CL(按20L进样量计算)C式中：CL—最小检测浓度，g/mLNd—C—标准溶液浓度，g/mL；V—进样体积，μL；H—标准物质的峰高。注：Nd和H的单位应保证一致；式中分母的“20”表示标准的进样体积，其单位为微升（μL4.4.4线性范围色谱条件：色谱柱阻尼管（4m*0.1mmD）或等效柱温40℃流动相不同浓度的丙酮—2%（V/V）异丙醇水溶液（先用0.1%浓度的丙酮—2%（V/V）异丙醇水溶液作为流动相，等待基线稳定后开始测试度数，每更换一个浓度流动相需要等仪器示值稳定之后，再记录信号响应值）不同浓度分别指的是0.1%浓度，0.2%浓度，0.3%浓度，0.4%浓度，0.5%浓度，0.6%浓度，0.7%浓度，0.8%浓度，0.9%浓度，1.0%浓度的丙酮—2%（V/V）异丙醇水溶液以5个丙酮溶液浓度（0.1%，0.2%，0.3%，0.4%，0.5%和对应的响应值作标准曲线，在曲线上找出丙酮溶液浓度大于0.5%各点的读数，与相应各浓度点的测量值做比较，量值相差5%的浓度作为检测上线CH,按照4.4.3得到的最小检测浓度为检测下限CL值，CH/CL比值为线性范围）整机性能（定性、定量重复性）将仪器各部分联接好，选用C18色谱柱，用100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，根据仪器配置的检测器，选择测量参数:紫外可见光检测器和二极管阵列检测器波长设定为254nm，灵敏度选择适中，基线稳定后由进样系统注入一定体积的1.0×10-4g/mL萘-甲醇溶液标准物质；荧光检测器激发波长和发射波长分别设定为290nm和330nm，灵敏度选在中间挡，基线稳定后注人一定体积的1x10-5g/mL萘-甲醇标准溶液；示差折光率检测器和蒸发光散射检测器灵敏度选在中间挡，注人一定体积的200ug/mL(2.0×10-4g/mL)的甲醇中胆固醇溶液标准物质。连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按公式(9)计算相对标准偏差RSD6。RSD式中：RSD6定性（定量）Xi—第iX—6次测量结果的算数平均值；i—测量序号；n—测量次数；可接受校准泵流量设定值误差Ss和流量稳定性SR泵流量设定值（mL/min）0.2~0.50.6~1.0大于1.0测定次数333流动相收集时间/min20~1010~55泵流量设定值最大允许误差Ss±5%±3%±2%泵流量稳定性SR3%2%2%柱温箱温度设定值最大允许误差：±2℃柱温箱温度稳定性：不大于1℃/h。紫外可见光检测器二极管阵列检测器基线噪声≤5×10-4AU基线漂移≤5×10-3AU/30min最小检测浓度≤5×10-8g/mL萘-甲醇溶液波长示值最大允许误差±2nm波长重复性≤2nm线性范围优于103定性定量重复性：紫外可见光检测器二极管阵列检测器定性重复性：≤1.0%定量重复性：≤3.0%？插入原子吸收光谱仪介绍视频文档作为二维码学习链接

原子吸收光谱仪校准记录实训的方法条件色谱柱型号流动相流速柱箱温度检测器类型其他：实训数据记录-流量设定误差，流量稳定性Fs泵流量设定值（mL/min）：t收集时间（min）：ρ水密度g/mL*Fm第1次第2次第3次FmFmax（mL/min）Fmin（mL/min）SSSRSS标准要求SR标准要求结论满足不满足结论满足不满足具体计算过程：*参见具体计算过程：梯度误差Gc参考本规程4.2.2色谱参数要求设置方法，由梯度控制仪器设置阶梯式的梯度洗脱程序（具体参数填写至下表中），A溶剂为纯水，B溶剂为含0.1%丙酮的水溶液。将输液泵和检测器连接，开机后以A溶剂冲洗系统，基线平稳后开始执行梯度程序。方法参数：色谱柱______________________________________________________柱温_________℃流动相A泵：________________________________________________B泵：________________________________________________梯度程序时间（min）A泵%B泵%Initial流速______mL/min检测波长_____nm测量次数2响应值数据记录项目阶段（B%）0%20%40%60%80%100%LiL1i-L1(i-1)L2iL2i-L2(i-1)LLLGi实训数据记录-柱箱温度设定值误差ΔTs，柱箱温度稳定性Tc第1次第2次第3次第4次第5次第6次第7次温度（℃）平均值ΔTs温度设定值误差Tc温度稳定性ΔTs标准要求Tc标准要求结论结论实训数据记录-基线噪声按照检定条件进行设置，记录基线30min，选取基线中噪声最大峰-峰高对应的信号值为仪器的基线噪声；实训数据记录-基线漂移按照检定条件进行设置，记录基线30min，选取基线偏离起始点最大的相应信号值为仪器的基线漂移。实训数据记录-最小检测浓度（_____检测器）按照_________测器的检定条件进行设置，待基线稳定后，用20μL进样针注入20μL浓度为______________的_________________。CL=2NdCV===线性范围试剂信息丙酮：_____________________________________________________异丙醇：_____________________________________