DB37T 2038-2012 牛尿苷酸合酶缺乏症(DUMPS)分子检测技术规程　_第1页
DB37T 2038-2012 牛尿苷酸合酶缺乏症(DUMPS)分子检测技术规程　_第2页
DB37T 2038-2012 牛尿苷酸合酶缺乏症(DUMPS)分子检测技术规程　_第3页
DB37T 2038-2012 牛尿苷酸合酶缺乏症(DUMPS)分子检测技术规程　_第4页
DB37T 2038-2012 牛尿苷酸合酶缺乏症(DUMPS)分子检测技术规程　_第5页
已阅读5页，还剩9页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

DB37DB37/T2038—2012牛尿苷酸合酶缺乏症（DUMPS）分子检测技术规程Technicalspecificationofdetectionfordeficiencyofuridinemonophophatesynthaseinbovine2012-02-09发布2012-03-01实施山东省质量技术监督局发布I1GB/T6682-2008分析实验室用NY/T1672-2008绵羊多胎主效基因FecB分子尿苷酸合酶缺乏症deficiencyofuridinemonoph尿甘酸合酶缺乏症是由于牛体内尿苷酸合酶（UridineMonophophateSynthase，UMPS）基因的C-DNA：脱氧核糖核酸（deoxyribo2尿甘酸合酶缺乏症是由于奶牛体内尿苷酸合酶（UMPS）基因的C-末端405处的密码子存在一个点突胚胎早期死亡。基于这个点突变设计引物对该区域进行PCR扩增以及RFLP分析，由于野生型与突变型个除另有规定，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T6682-2008的双蒸水下游引物：5'-GCTTCTAACTGAACTCCT3PCR扩增反应总体积为20μL，其中10×PCRBuff0.5μL，10pmol/μL的上、下游引物各0.5μL，TaqDNA聚合酶1U，DNA模板100ng，加双蒸水至20PCR扩增条件：94℃预变性3min；94℃变性20s，60℃退火20s，72℃延伸30s，35个循环；72℃终溶液澄清透明，室温下冷却至60℃左右时，加入溴化乙锭并混匀，使其终浓度为0.5μg/mL，即得1%2000bpDNAMarker作参45主要仪器设备A.2单道可调移液器：2μL，10μL，20μL，100μL，200μL，1000A.5恒温振荡器：0r/min～200r/min，0℃~60℃6称取SDS2g，加超纯水18mL，加热至68℃助溶，B.60.5mol/LEDTA(10mmol/LTris.Cl（pH8.0）、0.1mol/7﹪（B.1730﹪丙烯酰胺（49：1）丙烯酰胺147g和N，N′-亚甲双丙烯酰胺3g溶解于400mL水中，将溶液加热至37℃溶解，完全溶解后89C.7加入1mL75﹪的冰乙醇（-20℃)洗涤DNA沉淀2次，12000rpm、4℃离心3min。D.3加入等体积酚:氯仿:异戊醇(D.5取上清，加入2倍体积的无水乙醇（-20℃),沉淀DNA，12000rpm、4℃离心2min。D.6加入1ml75%的冰乙醇（-20℃)洗涤DNA2次。立即插入相应的点样梳，将胶板水平放置，室温静置20-60min以待凝胶聚合，在此过程中，添加

人人文库> 全部分类> 行业资料 > 各类标准

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论