白骨壤幼苗对不同盐浓度处理的响应分析

白骨壤幼苗对不同盐浓度处理的响应分析目录TOC\o"1-2"\h\u23218引言 I摘要：盐胁迫是影响植物生长、作物产量和植被分布最重要的世界性问题之一。探究不同盐浓度对红树幼苗生理的影响，为深入探究红树的盐胁迫适应机制提供理论基础。本研究以三月龄的红树植物白骨壤(Avicenniamarina)为研究对象，分别在0(对照，CK)、250、500和700mmol/LNaCl处理0h、6h、12h、24h和48h后，测定超氧化物歧化酶、过氧化物酶以及过氧化氢酶的活性，并检测叶绿素含量。在500mmol/LNaCl胁迫处理下，通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定超氧化物歧化酶和过氧化氢酶合成基因在各时间点的表达状况，以便深入了解其在胁迫环境中的反应与调控机制。结果表明，三项抗氧化物酶类的活性随着盐浓度的增加呈现先上升后下降的趋势；在500mmol/LNaCl处理时超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性最大，显著高于CK；在700mmol/LNaCl处理时过氧化物酶和过氧化氢酶活性受到抑制，低于CK；在250mmol/LNaCl处理时白骨壤幼苗叶绿素含量最高，显著高于其他处理组；4个基因在盐胁迫下的转录变化有所差异。结果表明白骨壤在盐浓度为500mmol/L时可以获得较好的实验结果。本研究可为白骨壤应答盐胁迫机理研究及相关基因表达调控规律提供理论参考。关键词：白骨壤；盐胁迫；超氧化物歧化酶；过氧化物酶；过氧化氢酶引言盐胁迫是影响植物生长、作物产量和海岸植被分布最重要的世界性问题之一。我国现有盐碱土地面积9913万公顷,大约占世界盐碱地总面积的十分之一REF_Ref24707\r\h[26]。由于全球气候变暖、人类活动增加、农业生产的不合理灌溉和生态环境进一步恶化，盐碱地面积呈逐年扩大的趋势。土壤盐碱化使土壤通透性变差，不利于植物生长，农业可持续发展因此受到严重制约。深入探究盐胁迫对植物生长发育及生理方面的影响，旨在增进对植物盐胁迫适应机制的理解，为相关理论的完善和实践应用的指导提供有力依据。白骨壤(Avicenniamarina)，学名海榄雌，是地理分布跨度最广且耐盐性较强的一种红树，其生态价值高，在促淤保滩、生态调控等方面起重要作用REF_Ref25096\r\h[6]REF_Ref25102\r\h[7]REF_Ref25115\r\h[8]。白骨壤种子在盐度0~10的条件下表现出较高的萌根率和良好的幼苗生长状况REF_Ref25226\r\h[27]。低盐度(10‰和20‰)对白骨壤几乎没有负面影响，但在高盐度(30‰和40‰)下生长的幼苗受到显著抑制，与淡水培养的白骨壤相比，在咸潮预培养的幼苗中观察到更高的耐盐性，表明适度的盐预处理可能有利于植物抵抗高盐度REF_Ref27081\r\h[15]。白骨壤的编码MnSOD2的基因(AmSOD2)在1个月大的白骨壤幼苗的根、茎和叶中表达，在对NaC1、H2O2、Ni2+和Cd2+的反应中，该基因在叶片中的表达显著增强REF_Ref25308\r\h[14]。在长期与环境的相互作用中，白骨壤已适应高盐分的生长环境，然而其盐胁迫适应机制却仍未被阐明。鉴于上述重要性，以白骨壤作为研究目标，致力于深入探究其应对盐胁迫的生理机制，这不仅有助于进一步理解其盐胁迫响应的分子适应机制，还为植物耐盐育种工程提供了理论依据。此项研究具有深远的理论意义和不可忽视的实际价值。盐胁迫对植物的多个层面，包括生理生化过程、生长和发育，均产生显著的影响。为了应对外界盐碱环境，植物在漫长的进化过程中逐渐发展出了一系列精细的调节机制，以缓解盐胁迫带来的负面影响。这些机制包括离子选择性吸收、渗透调节以及活性氧清除等，它们共同确保植物能从环境中有效汲取所需的水分和营养物质，从而维持其正常的生长发育和生理代谢过程REF_Ref25458\r\h[1]REF_Ref25468\r\h[2]。叶绿素，作为色素蛋白复合体的关键组成部分，在盐胁迫环境下其含量往往会降低REF_Ref25576\r\h[3]。研究表明，盐胁迫导致叶片气孔关闭和蒸腾速率降低，抑制小麦(Triticumaestivum)正常光合生理代谢，造成小麦幼苗的光合色素含量显著降低，影响植物体内各种色素蛋白复合体的合成，进一步影响光能的吸收转换及电子传导REF_Ref25634\r\h[22]。盐胁迫对植物的影响不仅仅局限于光合作用，其主要的受害部位还包括膜系统。植物的膜系统具备调节盐分运输和分配的功能，当植物遭受盐害时，其细胞膜结构往往会受到破坏，导致细胞膜透性增大REF_Ref25706\r\h[16]。在盐胁迫环境下，细胞内活性氧代谢的平衡会被打破，引发氧自由基的过量积累。这会导致膜脂过度氧化，进而对细胞膜系统和代谢过程造成伤害，并可能损害蛋白质和核酸等生物分子REF_Ref25778\r\h[17]。丙二醛(MDA)作为膜脂过度氧化的产物，它的存在会进一步增加植物细胞膜的通透性，加剧脂质过氧化作用。当为了应对细胞内活性氧和自由基的增加，植物会启动一系列保护酶的作用机制。这些保护酶，如超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)和过氧化物酶(peroxidase,POD)等发挥着关键作用，它们能够有效清除细胞内的活性氧，进而维护细胞的稳态和结构完整性，从而显著提升植物的抗逆性REF_Ref25876\r\h[18]REF_Ref25883\r\h[19]。研究发现，不同植物品种对盐胁迫的响应存在差异。例如，耐盐马铃薯(Solanumtuberosum)在NaCl处理下会表现出SOD活性的升高，而盐敏感马铃薯则没有显著变化REF_Ref30177\r\h[4]。小麦POD活性随盐浓度增加而升高，品种间存在差异，耐盐品种通常表现出更高的酶活性REF_Ref25958\r\h[20]。盐胁迫处理水稻(Oryzasativa)幼苗之后，叶片中APX、SOD等酶活性明显升高REF_Ref30268\r\h[5]。植物通过调节保护酶的活性来应对盐胁迫，不同品种间存在差异，这可能与它们的耐盐性有关。在面临NaCl胁迫时，海马齿(Sesuviumportulacastrum)的生长受到明显抑制，然而其生理机制表现出积极的适应反应。具体而言，其中抗氧化酶如SOD、POD和APX的活性得到显著增强，同时，渗透调节物质如可溶性糖和脯氨酸的含量也明显上升。这些生理响应有效地减轻了盐胁迫对海马齿造成的伤害，进而显示出其一定程度的耐盐能力。然而，值得注意的是，海马齿的耐盐性并非毫无限制。当面临800mmol/LNaCl的高盐胁迫时，相较于400mmol/LNaCl处理，其酶活性出现了一定程度的降低，这表明海马齿在高盐环境下的适应能力存在局限性。此外，耐盐相关基因SOS1、CIPK8、AHA1和CBL10在盐胁迫下均呈现上调表达的趋势，且在800mmol/LNaCl胁迫下的表达量高于400mmol/LNaCl处理，这进一步表明这些基因在海马齿适应高盐胁迫的过程中扮演着至关重要的作用REF_Ref26052\r\h[21]。到目前为止，有关白骨壤盐胁迫适应的研究和盐胁迫响应基因的鉴定尚有报道REF_Ref26128\r\h[9]REF_Ref26134\r\h[10]，然而其盐胁迫适应机制尚有待阐明。因此，本研究将针对白骨壤幼苗开展不同盐浓度处理，通过检测盐胁迫前后植株叶片中叶绿素含量、保护性酶类活性和保护酶合成基因表达水平，以期在生理生化水平和基因表达水平初步明确白骨壤适应盐胁迫的生理机制，为进一步开展白骨壤盐胁迫响应分子机理研究提供支持。1材料与方法实验材料与处理实验用的白骨壤幼苗购自东寨港红树林研究所育苗基地。选取滩涂育种的3月龄（约4片真叶）白骨壤幼苗，并将幼苗重新移植到品氏泥炭土：蛭石3：1的营养土中，于温室（25-30℃，12h光照/12h黑暗）恢复培养一周。将对照组和实验组幼苗分别浸没在含0、250、500和700mmol/LNaCl的蒸馏水中，每个处理设置三个生物学重复，每个生物学重复12棵幼苗，分别在处理0、6、12、24和48h取叶片，用液氮速冻，然后将其储存于-80℃冰箱备用。白骨壤抗氧化物酶活性测定利用超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutase,SOD)试剂盒（WST8法）进行SOD测定；利用过氧化物酶体(Peroxidase,POD)试剂盒进行POD测定；利用过氧化氢酶(Catalase,CAT)试剂盒进行CAT测定；具体操作步骤按照说明书进行。白骨壤叶绿素含量测定取0.2g的新鲜叶片，剪切成约0.2cm长的细丝或小碎片，置于10ml的离心管中；向装有待提取叶绿素的离心管中加入10ml的96%乙醇溶液，避光存放过夜，期间每隔一段时间上下颠倒离心管以混合溶液，大约3-4次，直至叶片组织变为白色。在黑暗环境中分别在波长665nm、649nm和470nm处测定各叶绿素提取液的吸光值A。白骨壤RNA的提取与反转录用RNAprepPure多糖多酚植物总RNA提取试剂盒（天根，中国）进行RNA提取，具体操作流程按说明书步骤进行。琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性，超微量紫外可见分光光度计检测RNA的浓度和纯度。用TransScriptOne-StepgDNARemovalandcDNASynthesisSuperMix试剂盒（全式金，北京）进行反转录，具体操作流程按说明书步骤进行。使用内参基因18SrRNA定量引物进行PCR扩增，将得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳，以检测cDNA的质量。超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)合成基因的qPCR检测以绿豆(Vignaradiata)、番茄(Solanumlycopersicum)的SOD基因和桉树(Eucalyptus)的CAT基因的CDS序列为query，通过BLASTN同源比对白骨壤核酸数据库，筛选出4个SOD基因(AM09G203、AM17G186、AM21G464、AM28G387)，分别命名为AmSOD1-4；3个CAT基因(AM22G426、AM22G424、AM03G1278)，分别命名为AmCAT1-3。将白骨壤的SOD和CAT基因用软件Primerpremier5设计qPCR引物（表1），内参基因为18SrRNA。用2×MagicGreenTaqSuperMix试剂盒（吐露港，中国）进行PCR扩增，操作流程按说明书进行，将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳以检测引物特异性。qPCR反应体系及运行程序参照ChamQUniversalSYBRqPCRMasterMix（诺唯赞，中国）试剂盒说明书配制和进行。使用RocheLightCycler480IISystem进行qPCR反应，采用2-△△Ct方法对基因表达量进行计算REF_Ref28093\r\h[12]，并用Origin2021软件进行可视化。数据分析利用Excel2023对不同时间及盐胁迫下的生理生化指标数据进行整理分析。利用SPSSStatistics22软件对生理指标数据进行描述统计及相关性分析。利用Origin2021绘制柱状图。采用SPSSStatistics22软件进行差异性显著性分析,单因素ANOVA检验和LSD多重比较检验差异显著性(p<0.05)。表1白骨壤SOD和CAT基因qPCR引物序列编号基因IDGenename引物名称序列（5′-3′）Primersequence1AM09G203qAmSOD1-FqAmSOD1-RCTAAGATCGTTCCCTCTTGGGTGGTGGTGGAGCTGCATGAT2AM17G186qAmSOD2-FqAmSOD2-RCACTTCATTCCTCCTTCCAAGGGCAGCGACGACGGTGAGT3AM21G464qAmSOD3-FqAmSOD3-RCCAGCAGTCATTGCCAGTCTGGCTTTCTGAACTTCCCGAT4AM28G387qAmSOD4-FqAmSOD4-RCCACCCTAACCATCTCAACAATCAAAGTGCACCTGAAACACAAT5AM22G426qAmCAT1-FqAmCAT1-RTGTCCCTCCAGTTCGTTCAATCCTCTCACGAGTAAAATGGGC6AM22G424qAmCAT2-FqAmCAT2-RCCGTCCATCGAGTGCGTTCTTCAATGAGGATTGGGCCT7AM03G1278qAmCAT3-FqAmCAT3-RTGCGTTCAATTCACCTTTTATGCCTTGGCACTGGCACCTC2结果与分析2.1盐胁迫对白骨壤叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响由图1A可知，随着盐胁迫处理的持续进行，在相同的盐浓度下，白骨壤叶片中的SOD活性表现出先上升后下降的趋势。在处理时间为12小时时，250、500和700mmol/LNaCl处理下的SOD活性均达到峰值，其中500mmol/LNaCl处理下的活性最高，达到CK的1.66倍，与CK相比存在显著差异。而在250和700mmol/LNaCl处理下，SOD活性分别为CK的1.50倍和1.49倍。随着处理时间的进一步延长，SOD活性开始逐渐降低。在24小时和48小时时，SOD活性的排序为：500mmol/LNaCl处理下最高，其次是250mmol/LNaCl处理，最后是700mmol/LNaCl处理，但所有处理组的SOD活性均保持高于CK。仅在6小时时，700mmol/LNaCl处理下的SOD活性超过了其他两个盐胁迫处理组。在盐胁迫的生长环境中，白骨壤的SOD活性展现出一定程度的升高，这显示出植株在盐胁迫下增强了其抗逆性。2.2盐胁迫对白骨壤叶片过氧化物酶(POD)活性的影响由图1B可知，在相同盐浓度条件下，随着盐胁迫处理时间的递增，白骨壤叶片中的POD活性表现出先升后降的趋势。当处理时间达到6小时时，250、500和700mmol/LNaCl处理组的POD活性均达到其最大值，并且与CK相比具有显著差异。其中，以250mmol/LNaCl处理下的POD活性最高，其值是对照的1.54倍；而500和700mmol/LNaCl处理下的POD活性则分别为对照的1.3倍和1.08倍。然而，随着处理时间的进一步增加，POD活性逐渐降低。在12小时、24小时和48小时时，250mmol/LNaCl处理条件下的POD活性最高，其次是500mmol/LNaCl处理，且所有处理组的POD活性均高于CK。在700mmol/LNaCl处理条件下，POD活性显著低于CK。说明一定浓度的盐胁迫处理可以提高白骨壤叶片中的POD活性，但是当NaCl浓度超过一定的阈值时会抑制POD活性，可能与膜渗透性增大，内容物外渗有关。2.3盐胁迫对白骨壤叶片过氧化氢酶(CAT)活性的影响由图1C可知，随着盐胁迫处理的延长，在相同盐浓度处理下，白骨壤叶片中CAT活性呈现先上升后下降的趋势。6h时250、500和700mmol/LNaCl处理条件下的CAT活性达到峰值，与CK相比具有显著差异。其中，500mmol/LNaCl处理条件下的CAT活性最高，为CK的2.02倍，而250和700mmol/LNaCl处理下的CAT活性分别为CK的1.96倍和1.4倍。然而，随着时间的进一步推移，CAT活性开始逐渐降低。在处理12小时、24小时和48小时时，CAT活性在500mmol/LNaCl处理下仍然是最高的，其次是250mmol/LNaCl处理，而且所有处理组的CAT活性都高于CK。但在700mmol/LNaCl处理下，CAT活性明显低于CK。这一趋势反映出，随着NaCl浓度的增加，CAT对H2O2的清除能力起初会显著增强，但当浓度超过一定范围后，其清除能力会大幅下降，从而抑制了CAT的活性。2.4盐胁迫对白骨壤叶片叶绿素含量的影响盐浓度过高会影响植物的正常生理代谢，而光合作用是植物最重要的生理代谢之一REF_Ref26389\r\h[25]。由图1D可知，随着处理时间的延长，不同盐浓度处理的白骨壤幼苗中叶绿素含量变化幅度较小。随着处理时间的延长，在CK和250mmol/LNaCl处理条件下白骨壤幼苗叶绿素含量缓慢增加，其中在250mmol/LNaCl的处理条件下，叶绿素含量达到最高峰值。在500和700mmol/LNaCl的处理条件下，叶绿素含量则呈现出明显的下降趋势。在处理48小时后与CK这种差异变得尤为显著，且NaCl的浓度越高，叶绿素含量的减少就越为明显。这一现象表明，在250mmol/LNaCl的处理下，白骨壤幼苗的光合作用效果相对较好，但随着盐胁迫处理浓度的增强，叶绿素含量出现下降趋势，光合作用效果较差，从而抑制了植株的正常生长过程。图1盐胁迫下白骨壤幼苗叶片SOD(A)、POD(B)、CAT(C)活性和叶绿素(D)含量变化注：在相同处理时间内使用不同大写字母进行标识，表示盐浓度之间存在0.05水平的显著性差异；而在相同的盐浓度条件下使用不同小写字母进行标识，则表示处理时间之间在0.05水平存在显著性差异。2.5白骨壤RNA、cDNA质量检测及qPCR引物特异性检测结果显示白骨壤RNA琼脂糖凝胶电泳结果显示各样品RNA的完整性较好，满足后续实验要求。图2A所示，目的条带大小正确，说明cDNA模板质量可用于qPCR。由图2B可知，除基因AmSOD3、AmSOD4和AmCAT2外，其他基因的扩增产物均为100bp左右的单一条带，引物具有特异性可用qPCR实验。图2白骨壤RNA、cDNA的质量检测及qPCR引物的特异性检测注：(A)白骨壤叶组织cDNA扩增产物琼脂糖凝胶电泳图。M：Marker；泳道1-5分别为胁迫处理0h，12h，24h，48h白骨壤叶片cDNA；(B)PCR扩增检测引物特异性。M:Marker；泳道1-7分别为基因AmSOD1，AmSOD2，AmSOD3，AmSOD4，AmCAT1，AmCAT2，AmCAT3。2.6qPCR检测相关生理指标基因在白骨壤叶片中的表达情况挑选引物特异性较强的4个基因，通过qPCR验证其在0(CK)和500mmol/LNaCl胁迫处理0h、6h、12h、24h和48h下表达水平的变化（如图3）。与CK相比，盐胁迫处理6h、12h、24h和48h时，AmCAT1基因的表达量均显著下调，在盐胁迫处理48h时，AmCAT1基因的表达量相较于6h、12h和24h有所上升。同样地，AmCAT3基因在盐胁迫处理6h、12h、24h和48h时表达量也明显下调，在处理12h时，其表达量相较于6h、24h和48h有所上升。这些结果表明，AmCAT1和AmCAT3基因在盐胁迫条件下受到抑制。AmSOD1和AmSOD2基因在盐胁迫处理下均呈现先上升后下降的表达趋势，但它们的表达峰值出现时间不同。具体来说，AmSOD1基因在处理24h时达到峰值，为CK的1.06倍，而AmSOD2基因则在处理12h时达到峰值，为CK的1.16倍。这种上调表达可能意味着AmSOD1和AmSOD2基因在白骨壤应对盐胁迫的生物过程中起到了积极的调控作用。图3qPCR验证SOD和CAT基因在白骨壤叶片中的盐胁迫响应情况3主要结论与讨论在正常生理条件下，植物体内活性氧处于不断产生和清除的动态平衡之中REF_Ref24883\r\h[38]。一旦植物遭受逆境胁迫，这种平衡就会被打破，导致活性氧水平显著上升REF_Ref26500\r\h[28]。为了应对和修复外界非生物胁迫带来的损伤，植物发展出一套完善的抗氧化防御机制，以维持体内活性氧产生与清除之间的平衡REF_Ref26529\r\h[24]。在盐胁迫条件下，植物通过提高SOD、POD和CAT等关键抗氧化酶的活性，有效调控活性氧的代谢平衡，从而保护细胞膜结构的完整性REF_Ref26568\r\h[23]。这些抗氧化酶的含量水平能够直接反映植物体内活性氧清除能力或抗氧化能力的强弱REF_Ref26598\r\h[29]。本研究结果显示，随着胁迫时间的延长和NaCl浓度的递增，SOD、POD和CAT的活性均展现出先上升后下降的趋势。这与先前盐胁迫下紫甘蓝REF_Ref26389\r\h[25]和豇豆幼苗REF_Ref26820\r\h[30]的抗氧化物酶活性变化相近，进一步印证了盐胁迫对抗氧化酶活性的复杂调控作用。当NaCl浓度为500mmol/L时，SOD和CAT的活性均达到峰值；而在250mmol/LNaCl浓度下，POD活性则达到最大。随后，这些酶的活性均呈现逐渐下降的趋势。这一发现揭示了在不同浓度的NaCl胁迫过程中，植物体内各种抗氧化酶并非同步发挥作用REF_Ref26820\r\h[30]。在NaCl浓度为700mmol/L处理条件下的白骨壤幼苗中抗氧化物酶活性表现为：SOD活性显著降低，但仍然高于CK，可能与白骨壤SOD在较宽的NaCl浓度范围内均表现出催化活性有关REF_Ref26960\r\h[13]；在盐胁迫持续12小时后，CAT的活性受到显著抑制，与CK相比存在明显差异。这一现象表明，高浓度的盐胁迫对白骨壤造成了不利影响，导致其清除体内氧自由基的能力降低，进而降低了CAT的活性。此外，CAT的失活还可能降低其对过氧化氢的亲和力，进一步削弱了其抗氧化能力REF_Ref27055\r\h[31]。CAT与SOD在植物体内协同工作，共同消除超氧阴离子，有效防止细胞膜系统发生过氧化反应，进而强化植物的抗逆能力，使其能够更好地应对各种环境挑战REF_Ref27101\r\h[11]；POD活性在12h后受到抑制，与CK相比具有显著差异。在250mmol/LNaCl胁迫处理条件下的叶绿素含量达到最大且显著高于CK；当NaCl浓度为500和700mmol/L时叶绿素含量逐渐下降且显著低于CK。表明250mmol/LNaCl浓度的胁迫可以作为一种外源信号刺激物，通过调节植物的生理和代谢过程来促进植物的生长和适应能力REF_Ref27140\r\h[34]。这可能涉及植物的逆境响应途径，如调节抗氧化系统的活性以及增加抗逆酶的合成等REF_Ref27172\r\h[35]。当NaCl浓度为500和700mmol/L时叶绿素含量下降，可能是由于盐胁迫一方面抑制了叶绿素的从头合成过程，另一方面又破坏了叶绿素的结构，进而导致了叶绿素含量的降低，类似的结果还出现在关于番茄REF_Ref32580\r\h[36]，玉米REF_Ref32613\r\h[37]等植物中。本研究显示，在低盐胁迫条件下，植物具备一种自我保护机制，即通过显著增强抗氧化酶的活性，高效清除细胞内积聚的冗余活性氧，从而显著减少盐胁迫所带来的不利影响与伤害。但在高盐胁迫下(≥500mmol/LNaCl)，白骨壤幼苗体内酶活性降低，氧化还原平衡被打破，说明白骨壤自身的抗氧化能力是有一定限度的，这与盐胁迫下杠柳幼苗REF_Ref27241\r\h[33]和棉花幼苗REF_Ref27270\r\h[32]研究结果相近。面临盐胁迫的挑战时，植物为强化其清除活性氧的能力，须激活相关抗氧化物酶的活性，而这一过程又依赖于相关基因表达水平的提升，进而确保植物能够在盐胁迫环境中维持其生理稳态。为深入研究白骨壤在盐胁迫下的基因转录变化，分析白骨壤SOD基因和CAT基因在盐胁迫下的转录变化发现：AmSOD1和AmSOD2的表达模式存在差异，随着时间的延长，AmSOD1表达水平呈逐渐上升后下降，而AmSOD2呈先上升后逐渐下降的趋势，分别在24h和12h时上调表达，这两种基因在清除活性氧方面可能起着重要作用。在盐胁迫下，白骨壤幼苗中AmCAT1和AmCAT3的相对表达水平低于CK，表达下调，表明其转录活动受到了抑制。这些发现为理解白骨壤在盐胁迫下的适应机制提供了线索。本研究剖析了白骨壤的耐盐特性，揭示其在低盐胁迫环境下能够精准地调动一系列生理调控机制，展现出了卓越的氧自由基清除能力，显著提升了细胞的通透性和抗氧化防御效能，进而有效缓解了活性氧造成的潜在损害。这些发现不仅印证了白骨壤幼苗对低盐胁迫的较强抗性，更彰显了其出色的耐盐适应性，为深入理解其生理生态特性提供了重要线索；通过分析白骨壤抗氧化物酶在盐胁迫下活性的变化规律，可以推断在500mmol/L浓度的盐胁迫处理下，可以获得较好的实验结果。本研究初步了解白骨壤幼苗的耐盐性机制和适应策略，为进一步研究植物在盐胁迫下生理指标及相关基因表达调控规律提供理论依据。同时，为解决土壤盐碱化问题提供新思路和新方法。参考文献DeinleinU,StephanAB,HorieT,etal.Plantsalt-tolerancemechanisms.TrendsPlantSci,2014,19(6):371-379.GargAK,KimJK,OwensTG,etal.Trehaloseaccumulationinriceplantsconfershightolerancelevelstodifferentabioticstresses.ProcNatlAcadSciUSA,2002,99(25):15898-15903.ChaumS,KirdmaneeC.Effectofglycinebetaineonproline,wateruse,andphotosyntheticefficiencies,andgrowthofriceseedlingsundersaltstress.TurkJAgricFor,2014,34(6):455-479.RahnamaH,EbrahlmzadehH.TheeffectofNaClonantioxidantenzymeactivitiesinpotatoseeding.BiolPlantarum,2005,49(1):93-97.NounjanN,NghiaTP,TheerakulpisutP.Exogenousprolineandtrehalosepromoterecoveryofriceseedlingsfromsalt-stressanddifferentiallymodulateantioxidantenzymesandexpressionofrelatedgenes.JPlantPhysiol,2012,169(6):596-604.SpaldingM,KainumaM,CollinsL.Worldatlasofmangroves.London,UK:Earthscan,2010.HogarthPJ.Thebiologyofmangrovesandseagrasses.UniversityofYork,UnitedKingdom:OxfordUniversityPress.2015.TomlinsonPB.Thebotanyofmangroves.CambridgeUniversity,UnitedKingdom:CambridgeUniversityPress,2016.NguyenHT,StantonDE,SchmitzN,etal.GrowthresponsesofthemangroveAvicenniamarinatosalinity:developmentandfunctionofshoothydraulicsystemsrequiresalineconditions.AnnBot,2015,115:397-407.NaidooG.ThemangrovesofSouthAfrica:Anecophysiologicalreview.SAfrJBot,2016,107101-113.JiaX,XiaoguangD,JunY,etal.CoupledexpressionofCu/Zn-superoxidedismutaseandcatalaseincassavaimprovestoleranceagainstcoldanddroughtstresses.PlantSignalBehav,2013,8(6):e24525.LivakKJ,SchmittgenTD.Analysisofrelativegeneexpressiondatausingreal-timequantitativePCRandthe2-ΔΔCtmethod.Methods,2001,25:402-408.KantiRS,MoumitaB,MoumitaSB,etal.ComprehensivecharacterizationandmolecularinsightsintothesalttoleranceofaCu,Zn-superoxidedismutasefromanIndianMangrove,Avicenniamarina.SciRep,2022,12(1):1745-1745.HamidA,AzarS.FunctionalcharacterizationofamanganesesuperoxidedismutasefromAvicenniamarina:insightsintoitsroleinsalt,hydrogenperoxide,andheavymetaltolerance.SciRep,2024,14(1):406-406.ChengH,InyangA,LiCD,FeiJ,ZhouYW,WangYS.SalttoleranceandexclusioninthemangroveplantAvicenniamarinainrelationtorootapoplasticbarriers.Ecotoxicology.2020;29(6):676-683.宋明月.滨