DB21T 3093-2018 犬冠状病毒病诊断技术规范_第1页
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DB21Thetechnicalspecificationsfordiagnosistechnologyofcaninecoronavirusdisease辽宁省市场监督管理局发布I 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 3 4 4 4淼、张旭、章春燕、俞向前、张建平、马强、高静荐1犬冠状病毒病诊断技术规范本标准规定了犬冠状病毒病诊断的技术方法、步骤和结果判件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改版本）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范3.1犬冠状病毒Caninecoronavir属于冠状病毒科冠状病毒属，呈圆形或椭圆形，有囊膜，囊膜表面有纤突，病毒核酸为单股RNA病3.2犬冠状病毒病Caninecoronavirusd3.4CRTCapillaryfil疫学（CCV胶体金检测试纸）和分子生物学（RT-PCR病毒基4.1流行病学诊断24.1.1病犬和带毒犬是主要传染源，病犬和带毒犬粪便中含有大量CC4.1.3本病一年四季均可发生，但冬季多发；该病的发生和严重程度常与断乳、运输、气温骤变、饲4.2临床症状诊断4.2.5腹泻：呕吐的同时，出现腹泻，粪便由糊状、半糊状变至水样，其颜色由暗绿色或灰绿色逐渐两前肢触地，低头拱背而坐的姿势，后期，肛门括约肌松弛，4.2.7血常规检查：白细胞计数大多正常或偏低，也有少数升高者，时有淋巴细胞增高或出现变异型4.2.8全身变化：发病后期，病犬眼球深陷，CRT时间延长，呼/create/edit/?eid=6034396&sid=6247400&secid=64.3病理学诊断4.3.2组织学变化：表现为小肠绒毛萎缩变短并融合，粘膜固有层细胞成份增多，隐窝加深，上皮细4.4应用现代免疫学（CCV胶体金检测试纸）诊断用棉签取适量新鲜粪便；将棉签浸入样品3将未开封的试纸卡和检测样品恢复至室温；将试纸卡水平放置，用滴管向试纸卡孔缓慢逐滴阳性：C线显示红色色带，T线也4.5.1检测试剂和仪器预冷）、DEPC水（1000mL双蒸水中加入1mLDEPC，室温下持续搅拌过夜，121℃高压灭菌25min）、RNA酶抑制剂（40U/μL）、TaqDNA聚合酶（5U/μL）、dNTP(2.5mmol羟甲基氨基甲烷-乙酸电泳缓冲液、溴化乙锭、DL2000DNA本规范中使用的设备：PCR扩增仪，高速冷冻离心机，核酸电泳仪和水平电泳槽，组织均浆机或研4.5.2病料采集与处理：按照NY/T541兽医4上游引物：5’-TCCAGATATGTAATGTTCGG-3’下游引物：5’-TCTGTTGAGTAATCACCAGCT-3’被检样品电泳出现40

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