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文档简介
第2课时微生物的选择培养和计数题组一选择培养基和微生物的选择培养1.(2023·四川成都高二月考)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3供植物吸收和利用。以下说法错误的是()A.土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成脲酶B.能分解尿素的细菌也能以尿素的分解产物CO2作为碳源C.为了筛选可分解尿素的细菌,在配制培养基时应选择尿素作为唯一氮源D.筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4的作用是提供无机盐和维持pH2.平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物的两种常用方法,下列叙述正确的是()A.采用稀释涂布平板法获得的菌落数往往多于实际的活菌数B.平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环连续划在固体培养基表面C.稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基中进行培养D.与平板划线法相比,稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好3.油烟污染由多种有害物质组成,不易降解。某同学从长期受到油烟污染的环境中分离出油烟降解菌,其筛选分离过程如图所示。下列叙述正确的是()A.图中①~③的过程为梯度稀释B.在培养基中加入油烟污染物,其作用是为微生物提供碳源和能源C.④使用的是固体培养基,需加入琼脂作为微生物生长繁殖的营养物质D.过程④可采用稀释涂布平板法或平板划线法分离菌种并进行计数4.(2023·黑龙江哈尔滨高二期中)原油中含有大量有害的、致癌的多环芳烃。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源,在培养基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污,某小组同学设计了相关实验。下列有关实验的叙述,不正确的是()A.应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用B.配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培养基C.将土壤稀释液灭菌后接种到选择培养基上D.在选择培养基上能形成分解圈的即为所需菌种5.如图为选育高产β胡萝卜素的布拉霉菌的过程。随β胡萝卜素含量增加,菌体颜色从黄A.过程①属于诱变育种B.过程②可采用平板划线法接种C.过程③应选择黄色菌株进行富集培养D.培养基中添加β紫罗酮起选择作用题组二微生物的数量测定6.(2023·江苏无锡高二质检)养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸,这两种物质可由硝A.需要配制添加一定浓度铵盐的牛肉膏蛋白胨培养基,以筛选硝化细菌B.应对采集底泥使用的工具进行灭菌,全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行C.采用平板划线法进行分离和计数时,还需与未接种的空白培养基同时培养D.若空白对照组上长出了菌落,需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数7.下列有关稀释涂布平板法计数和显微镜直接计数法的叙述,不正确的是()A.利用血细胞计数板计数属于显微镜直接计数法,其缺点是不能区分死菌与活菌B.两种计数方法,其统计值与实际值相比,均有差异,但产生差异的原因不同C.两种计数方法均能在计数的同时观察到所研究微生物的形态特征D.当菌落数目稳定时,一般选取菌落数在30~300的且差异不大的平板进行计数8.某研究小组为了探究覆盖保鲜膜对西瓜表面微生物的种类和数量的影响,他们将覆盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液,再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是()A.应用液体培养基接种浸出液进行培养B.应采用平板划线法对浸出液进行计数C.每组至少设置三个平板,确保实验结果的准确性D.只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照9.(2021·山东,14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪A.甲菌属于解脂菌B.实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源C.可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力10.(2023·河北衡水高二期中)精氨酸依赖型菌株不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长,但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图。下列相关叙述不正确的是()A.野生型菌液的培养皿中不会出现菌落B.乙培养基与甲相比可能缺少了精氨酸C.紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生可遗传变异D.乙中的菌落A为鸟氨酸发酵的优良菌种11.图甲所示是稀释涂布平板法中的部分操作,图乙所示是平板划线法的操作结果。下列相关叙述不正确的是()A.图甲中涂布前要将涂布器灼烧,冷却后才能涂布菌液B.对于浓度较高的菌液,若图甲中的最高稀释倍数仅为102,则所得到的菌落不一定是由单一的细胞繁殖而成的C.图乙所示培养皿中每个划线区域都可得到符合要求的菌落D.图乙中连续划线的起点是上一次划线的末端(除第一次划线外)12.(2022·上海长宁区高二阶段练习)筛选是分离和培养微生物新类型常用的手段,下列有关技术中不能筛选成功的是()A.在全营养的LB培养基(普通培养基)中,筛选大肠杆菌B.在尿素固体培养基中,筛选能够分解尿素的微生物C.用以纤维素为唯一碳源的培养基,筛选能分解纤维素的微生物D.在培养基中加入不同浓度的氯化钠,筛选抗盐突变体的微生物13.某生物兴趣小组试图探究山羊瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能降解尿素的细菌(目的菌)。实验步骤如图所示。请回答下列问题:稀释倍数103104105106107菌落数5003672483618(1)该实验中所用培养基在成分上的特殊要求是______________________;培养基中的KH2PO4和Na2HPO4的作用有______________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)实验中采用的分离纯化细菌的方法是________________________________________________________________。实验过程中,除了需将接种后的平板放在适宜的环境中培养一段时间后观察,还需要设置在相同条件下培养的__________________________,作为对照实验,其目的是_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)为了计数细菌,将取自瘤胃中的液体进行稀释,接种在培养基上,放置在37℃恒温培养箱中培养24~48h,统计菌落数,结果如上表。其中________倍的稀释倍数比较适合计数。有同学认为,该计数方法统计的细菌数目会比实际数目________,他的理由是_____________________________________________________________________________________________。14.(2023·天津河西区高二期末)某种在田间广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能有效降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度一定,该除草剂的培养基不透明,培养皿中会残留少量无菌空气)。回答下列问题:(1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行________处理。(2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,从物理性质、营养成分的角度要求上述培养基具备的特点是________________________________________________________。若需要调节培养基pH,应在灭菌________(填“前”或“后”)进行。对培养基进行灭菌,常采用_______________法。(3)图中形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源可能是________________,有透明带菌落利用的氮源主要是________________,据此可筛选出目的菌。(4)若对活菌进行计数,常用的接种方法为____________________。为了测定微生物的数量,一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL,培养后菌落数目分别为155、160、176、149,则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为________个。
第2课时微生物的选择培养和计数1.B[能分解尿素的细菌是一种分解者,属于异养型生物,不能以尿素的分解产物CO2作为碳源,B错误。]2.D[由于两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,所以利用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际的活菌数,A错误;平板划线法不需要稀释菌液,是将菌液通过接种环连续划在固体培养基表面,B错误;稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基中进行培养,C错误。]3.B[图中①~③的过程中加入油烟污染物作为唯一碳源,能够初步筛选出能分解油烟的微生物,故该过程称为选择培养,A错误;配制固体培养基时加入琼脂,其作用是作为凝固剂,而不是为微生物生长提供碳源,C错误;分离菌种常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法,但对活菌进行计数时常用稀释涂布平板法而不能用平板划线法,D错误。]4.C[若将土壤稀释液进行灭菌,则不能筛选出能高效降解原油的菌株,C错误。]5.C[过程①表示利用紫外线诱导基因突变,故过程①属于诱变育种,A正确;过程②可采用平板划线法或稀释涂布平板法接种,B正确;菌体随β胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色,所以进行过程③时,应选取橙红色的菌落接种至液体培养基进行富集培养,C错误;结合题意“未突变菌不能在含有β紫罗酮的培养基上生长”可知,只有突变菌株可以在添加了一定浓度的β紫罗酮的培养基上生长菌落,因此该培养基具有选择功能,D正确。]6.B[要分离硝化细菌,应该用以铵盐为唯一氮源的培养基,培养基中不能加入牛肉膏蛋白胨,A错误;平板划线法不能用于菌落计数,C错误;若空白对照组上长出了菌落,则说明培养基被污染了,实验数据无效,需重新实验,D错误。]7.C[显微镜直接计数法无法区分死菌和活菌,A正确;稀释涂布平板法计数时,当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,故而统计值比实际值小;显微镜直接计数法计数时不能区分死菌和活菌,故测定的微生物数量往往大于实际的活菌数,因此两种计数方法其统计值与实际值相比,均有差异,但产生差异的原因不同,B正确;稀释涂布平板法观察到的是菌落的形态特征,而不是微生物的形态特征,显微镜直接计数法观察到的是微生物的形态特征,C错误。]8.C[要探究微生物种类和数量的变化,应采用固体培养基,用稀释涂布平板法进行接种,液体培养基无法观察到菌落,不便区分微生物种类,平板划线法不能对微生物进行计数,A、B错误;每组至少设置三个平板,避免偶然性,确保实验结果的准确性,C正确;对照组还需要设置接种没有覆盖保鲜膜的西瓜的瓜瓤浸出液的平板,D错误。]9.B[根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”,说明甲菌可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸,脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色,因此甲菌属于解脂菌,A正确;乙菌落周围没有出现深蓝色,说明乙菌落不能产生脂肪酶,不能利用脂肪为其供能,但乙菌落也可以在培养基上生存,说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源,B错误;可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比,更加直观,C正确;可以利用该平板来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力,观察指标可以是菌落周围深蓝色圈的大小,D正确。]10.D[由图观察可知,乙中的菌落A是野生型菌种,菌落B为精氨酸依赖型菌株,B可作为鸟氨酸发酵的优良菌种,D错误。]11.C[平板划线法中多次划线的目的是降低菌种浓度,经过连续划线才有可能得到由单一的细胞繁殖而成的菌落,这种菌落才符合要求,C错误。]12.A[在全营养的LB培养基(普通培养基)中,几乎所有细菌都能生长,不能筛选大肠杆菌,A符合题意;在尿素固体培养基中,只有能分解尿素的微生物才能生长,不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生长,能够筛选分解尿素的微生物,B不符合题意;在以纤维素为唯一碳源的培养基中,只有能分解纤维素的微生物才能生长,不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长,能够筛选分解纤维素的微生物,C不符合题意;在培养基中加入不同浓度的氯化钠,只有抗盐的微生物才能生长,故可用于筛选抗盐突变体的微生物,D不符合题意。]13.(1)以尿素为唯一氮源为细菌生长提供无机盐、作为缓冲液维持培养液的pH(2)稀释涂布平板法未接种的空白培养基检测培养基是否被污染(3)105或106偏小当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落14.(1)稀释(2)以除草剂为唯一
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