《药物分析与检验技术》课件-色谱法测定药物含量的计算

色谱法测定药物含量的计算色谱法测定药物含量常用的方法色谱法测定药物含量的计算一二色谱法测定药物含量的计算:一、色谱法测定药物含量常用的方法（一）外标法以被测物质的纯品作为对照品，在相同色谱条件下，以对照品和样品的响应信号进行比较定量的方法。一、色谱法测定药物含量常用的方法（二）内标法以非被测物的另一物质的纯品作为内标物，加入到准确称量的试样中，根据被测物和内标物的质量以及相应峰面积比与相对响应值，测定待测组分含量的方法。二、色谱法测定药物含量的计算（一）外标法按各品种项下规定，精密称（量）取对照品和供试品，分别配成对照品溶液和供试品溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品溶液和供试品溶液中待测成分的峰面积（或峰高），计算供试品溶液的浓度。计算公式：二、色谱法测定药物含量的计算01原料药含量计算实例解析示例1高效液相色谱外标法测定盐酸环丙沙星（C17H18FN3O3

HCl

H2O）的含量及结果计算。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L枸橼酸溶液-乙腈（82∶18）用三乙胺调节pH至3.5为流动相，流速为1ml/min，柱温30℃，检测波长为277nm，理论板数按环丙沙星峰计算不低于2000，环丙沙星峰和相邻杂峰间分离度应符合要求。测定方法按无水物计算，含C17H18FN3O3不得少于88.5%规定供试品的测定精密称取本品51.24mg，置100ml量瓶中，加流动相使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密取10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取环丙沙星对照品51.07mg，同法测定。本品的水分为2.0%，对照品水分为1.8%。已知AR＝14325，AX＝13004；mx＝50.24mg；mR＝51.07mg。测定数据实例解析示例1高效液相色谱外标法测定盐酸环丙沙星（C17H18FN3O3

HCl

H2O）的含量及结果计算。示例1高效液相色谱外标法测定盐酸环丙沙星（C17H18FN3O3

HCl

H2O）的含量及结果计算。实例解析解析：示例1高效液相色谱外标法测定盐酸环丙沙星（C17H18FN3O3

HCl

H2O）的含量及结果计算。实例解析解析：盐酸环丙沙星含量%=示例1高效液相色谱外标法测定盐酸环丙沙星（C17H18FN3O3

HCl

H2O）的含量及结果计算。实例解析符合规定（规定：按无水物计算，含C17H18FN3O3不得少于88.5%）。结果二、色谱法测定药物含量的计算02片剂含量测定与计算实例解析示例2高效液相色谱外标法测定三唑仑片的含量及结果计算。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（55∶45）为流动相；检测波长为220nm，理论板数按三唑仑峰计算不低于2000。测定方法本品含三唑仑（C17H12Cl2N4）应为标示量的90.0%～110.0%。规定实例解析示例2高效液相色谱外标法测定三唑仑片的含量及结果计算。供试品溶液：取本品（规格:0.25mg/片）50片，称定总重量为0.2010g，研细，精密称取细粉0.09811g，置100ml量瓶中，精密加50%甲醇溶液稀释至刻度，滤过，取续滤液20µl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取三唑仑对照品12.10mg，置100ml量瓶中，精密加50%甲醇溶液稀释至刻度（必要时超声处理），同法测定。实例解析示例2高效液相色谱外标法测定三唑仑片的含量及结果计算。解析：实例解析示例2高效液相色谱外标法测定三唑仑片的含量及结果计算。三唑仑片标示量%=解析：实例解析示例2高效液相色谱外标法测定三唑仑片的含量及结果计算。符合规定[规定：本品含三唑仑（C17H12Cl2N4）应为标示量的90.0%～110.0%]。结果二、色谱法测定药物含量的计算03注射液含量计算实例解析示例3高效液相色谱外标法测定己酸羟孕酮注射液的含量及结果计算。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（85∶15）为流动相；检测波长为254nm，取己酸羟孕酮对照品与戊酸雌二醇对照适量，用甲醇溶解并稀释制成每1ml中各含20µg的混合溶液，进行测试，己酸羟孕酮峰与戊酸雌二醇峰的分离度应符合要求。测定方法实例解析示例3高效液相色谱外标法测定己酸羟孕酮注射液的含量及结果计算。用内容量移液管紧密量取本品（规格：2ml:0.25g）2ml置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取己酸羟孕酮对照品适量，用甲醇溶解并定量稀释成20.15µg/ml溶液，同法测定。测定法实例解析示例3高效液相色谱外标法测定己酸羟孕酮注射液的含量及结果计算。解析：己酸羟孕酮注射液标示量%=实例解析示例3高效液相色谱外标法测定己酸羟孕酮注射液的含量及结果计算。符合规定。[规定：本品含己酸羟孕酮（C27H40O4）应为标示量的90.0%～110.0%]结果二、色谱法测定药物含量的计算（二）内标法按各品种项下的规定，精密称取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量注入仪器，记录色谱图。测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子f：S：内标物R：对照品X：供试品二、色谱法测定药物含量的计算01原料药含量计算-内标法实例解析示例4高效液相色谱内标法测定丙酸倍氯米松的百分含量及结果计算。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（74∶26）为流动相；检测波长为240nm，理论板数按丙酸倍氯米松峰计算不低于2500，丙酸倍氯米松峰和内标峰的分离度应大于4.0。测定方法按干燥品计算，含C28H37ClO7应为97.0%～103.0%规定实例解析示例4高效液相色谱内标法测定丙酸倍氯米松的百分含量及结果计算。精密称定睾酮适量，加流动相制成浓度为0.1223mg/ml的溶液。内标溶液精密称取本品12.73mg，置100ml量瓶中，加甲醇74ml使溶解，用水稀释至刻度，摇匀；精密量取该溶液10ml与内标溶液5ml，置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，取20µl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取丙酸倍氯米松对照品12.50mg，同法测定。测定法实例解析示例4高效液相色谱内标法测定丙酸倍氯米松的百分含量及结果计算。AS＝2027，AR＝4346，AS

΄＝2042，AX＝4487。干燥失重=0.22%。测定数据解析实例解析示例4高效液相色谱内标法测定丙酸倍氯米松的百分含量及结果计算。解析丙酸倍氯米松含量%=实例解析示例4高效液相色谱内标法测定丙酸倍氯米松的百分含量及结果计算。符合规定。（规定：按干燥品计算，含C28H37ClO7应为97.0%～103.0%）结果二、色谱法测定药物含量的计算02片剂含量计算-内标法03注射液含量计算-内标法实例解析示例5高效液相色谱内标法测定十一酸睾酮注射液的含量及结果计算。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-异丙醇-水（43:43:14）为流动相；流速为1.5ml/min；检测波长为240nm，理论板数按丙十一酸睾酮峰计算不低于4000，十一酸睾酮峰和内标峰的分离度应符合要求。测定方法实例解析示例5高效液相色谱内标法测定十一酸睾酮注射液的含量及结果计算。内标溶液的制备：精密称定苯丙酸诺龙适量，加甲醇制成浓度为0.6113mg/ml的溶液。实例解析示例5高效液相色谱内标法测定十一酸睾酮注射液的含量及结果计算。供试品的测定：用内容量移液管精密量取本品（2ml:0.25g）1ml，置50ml量瓶中，用乙醚分数次洗涤移液管内壁，洗液并入量瓶中，加乙醚稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml至10ml具塞离心管中，在温水浴中使乙醚挥散；实例解析示例5高效液相色谱内标法测定十一酸睾酮注射液的含量及结果计算。供试品的测定：用甲醇振摇提取4次（5ml、5ml、5ml、3ml），每次振摇10分钟后离心15分钟，合并甲醇提取液，置25ml量瓶中，精密加内标溶液5ml，用甲醇稀释至刻度，摇匀，取10µl注入液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取十一酸睾酮对照品61.08mg，置25ml量瓶中，精密取该溶液与内标溶液各5ml置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，同法测定。实例解析示例5高效液相色谱内标法测定十一酸睾酮注射液含量及结果计算。AS＝6388，AR＝