天津市五区县重点校联考2022-2023学年高二4月期中生物试题

学而优·教有方PAGEPAGE12022～2023学年度第二学期期中重点校联考高二生物学第I卷（共60分）一、选择题（本题共20小题，每题3分，共60分）1.下列有关几种发酵食品的发酵温度、发酵时间和发酵菌种等的叙述，错误的是（）A.果酒发酵时温度应控制在18-30℃B.家庭制作果酒、果醋和泡菜发酵利用的菌种都是原核生物C.向发酵液中添加前一次的发酵物可提高发酵速度D.制作果醋和泡菜过程发挥主要作用的微生物代谢类型分别为异养需氧型和异养厌氧型2.蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（）A.去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染B.过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵蓝莓醋C.过程④中的主要发酵菌种在过程⑤中已经失去了发酵能力D.过程④所需的最适温度高于过程⑤3.下列关于平板划线法和稀释涂布平板法叙述，错误的是（）A.倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行B.这两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置进行培养C.这两种方法都能在固体培养基上得到单菌落D.用平板划线法分离菌种，划线五个区域，接种环需要灼烧灭菌5次4.纤维素分解性细菌能利用分泌的纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖等并吸收利用。刚果红是一种染料，能与像纤维素这样的多糖形成红色复合物，而不能与其水解产物发生类似反应。将不能直接吸收纤维素的甲、乙两种菌分别等量接种在含纤维素和刚果红的培养基上，甲菌菌落周围无变化，乙菌菌落周围呈现透明圈。下列说法错误的是（）A.实验中所用的培养基以纤维素为唯一碳源 B.乙菌属于纤维素分解性细菌C.该实验的关键是防止杂菌污染 D.配制培养基时需先灭菌再倒平板5.某化工厂污水池中含有一种有害且难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌），实验主要步骤如图所示。有关分析错误的是（）A.以A作为唯一碳源和氮源，是为了筛选出可降解化合物A的异养微生物B.将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种C.培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量显著降低的培养液接种D.若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板法进行计数6.在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（）A.利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株B.得到“番茄—马铃薯”杂种植株C.利用基因工程培育抗棉铃虫的植株D.单倍体育种7.研究发现，生长素能够维持拟南芥bZIP59蛋白的稳定性，并增强其与LBD形成复合物的能力，bZIP59－LBD复合体直接靶向FAD－BD基因，并促进其转录，这有助于愈伤组织的形成。下列相关叙述错误的是（）A.生长素通过调控植物细胞的基因表达而影响植物细胞全能性的表达B.杂菌污染会影响植物组织培养，因此需要对培养基和离体的植物组织进行灭菌处理C.培养基中添加激素的种类和含量会影响植物细胞发育的方向D.脱分化期间一般不需要光照，再分化时需要适当光照诱导叶绿素产生8.甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功将乙品种细胞质中的可育基因引入甲品种中。下列相关叙述错误的是（）A.获得的融合原生质体需放在等渗的无菌水中B.流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇C.培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株D.杂种植株含有控制甲品种青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递9.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（）A.干细胞只存在于早期胚胎中B.将所取组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.当贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时，会发生接触抑制现象D.动物细胞培养需无菌、无毒的环境，充足的营养，适宜的温度和pH等条件10.下图表示三亲婴儿的培养过程，下列相关说法错误的是（）A.可通过显微操作的方法对乙的卵母细胞去核B.三亲婴儿细胞中的染色体不仅仅来自甲和丙C.核移植时可将乙的卵母细胞在体外培养至MII中期D.三亲婴儿的培育还需要动物细胞培养和胚胎移植等技术11.下图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是（）A.若a细胞和b细胞是动物体细胞，则c细胞经动物细胞培养可发育成个体B.若a细胞和b细胞是植物细胞，则必须要先脱分化再诱导融合C.若a细胞和b细胞来自两种生物，该过程无需考虑生殖隔离D.若a细胞和b细胞是植物细胞，则c细胞的形成与细胞膜的流动性无关12.抗体药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述不正确的是（）A.单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞特异性结合B.制备该抗体需要利用动物细胞融合和动物细胞培养等技术手段C.将选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞直接用于生产该单克隆抗体D.药物在癌细胞内释放并起作用，同时诱导溶酶体破裂，加速癌细胞的凋亡13.体外培养的胚胎干细胞存在两种不同的状态：启动态和幼稚态，两种细胞的形态特征明显不同，相对于幼稚态细胞，启动态细胞的全能性不容易表现。下图是利用食蟹猴胚胎干细胞生产嵌合体动物的流程。下列错误的是（）A.带荧光的幼稚态胚胎干细胞植入胚胎后能参与正常的胚胎发育和器官形成B.桑葚胚时期的细胞没有发生分化且胚胎体积也没有变大C.对代孕母猴需进行健康检查、超数排卵、同期发情处理、妊娠检查等处理D.嵌合体胎儿体细胞与正常食蟹猴体细胞染色体数目相同14.为了在大肠杆菌细胞中成功表达人胰岛素基因，首先需要提取细胞的mRNA，经逆转录等过程来获取目的基因。下列相关叙述错误的是（）A.逆转录过程需要四种游离的核糖核苷酸作为原料B.用于逆转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取C.经逆转录得到的目的基因可经过PCR技术进行扩增D.逆转录获取目的基因时遵循碱基互补配对原则15.研究人员利用转基因技术培育出了抗烟草花叶病毒(TMV)感染的烟草，操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）A.过程①需要的酶是逆转录酶，过程②需要限制酶和DNA聚合酶等B.①②③过程都遵循碱基互补配对原则C.过程③是基因工程的核心，目的基因需插入Ti质粒的T-DNA上D.过程④常用农杆菌转化法，过程⑤包括烟草细胞脱分化和愈伤组织再分化16.下列关于PCR的叙述，正确的是（）A.PCR技术中引物需要和各自互补的DNA单链的5'端结合B.设计引物时必须已知目的基因的全部核苷酸序列C.在高温条件下，DNA的磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链D.PCR可在PCR扩增仪中自动完成，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR产物17.经研究发现，PVY-CP基因位于某种环状DNA分子中。将PVY-CP基因导入马铃薯，使之表达即可获得抗PVY病毒的马铃薯。下图表示构建基因表达载体的过程，相关酶切位点如下表所示。下列说法错误的是（）BamHⅠHindⅢBglⅡSmaⅠA.推测Klenow酶的功能与DNA聚合酶类似B.由步骤③获取的目的基因有1个黏性末端C.步骤④应选用的限制酶是BamHⅠ和SmaⅠD.NPTⅡ基因可能是用于筛选的标记基因18.新冠病毒是一种RNA病毒，极易产生变异，其通过表面刺突蛋白（S蛋白）的受体结合域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用而感染细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，可与S蛋白RBD紧密结合，以干扰新冠病毒的感染。下列有关说法错误的是（）A.LCB1的作用效应与抗S蛋白抗体类似B.LCB1可以通过细胞中原有的基因表达产生C.LCB1的设计和合成遵循中心法则D.LCB1的设计和合成是通过蛋白质工程实现的19.下列有关病毒在生物学和医学领域应用的叙述，错误的是（）A.灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合B.噬菌体、动植物病毒在基因工程操作中可作为“分子运输车”C.经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防D.为保证病毒存活可在完全培养基中分离培养病毒20.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，正确的是（）A.将猪的红细胞置于清水中，红细胞涨破后DNA会释放出来B.在研磨液中加入等体积的预冷的酒精析出的丝状物即为粗提取的DNAC.将白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中，离心后弃去上清液D.提取到的丝状物直接加入二苯胺试剂中，沸水浴加热后变蓝第II卷（共40分）二、非选择题（本题共4小题，共40分）21.甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B．某研究小组拟利用植物体细胞杂交技术培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：（1）植物体细胞杂交的第①步是去掉______，分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用______酶等分解植物的细胞壁。（2）②过程发生，必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的物理方法是：利用______等（写一种即可）促使原生质体融合；化学方法是：用______试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法类似，不同的是还常用到______诱导动物细胞的融合。（3）③表示融合后的原生质体再产生新的细胞壁，新细胞壁的产生与细胞内______（细胞器）有密切关系。形成的融合细胞进一步经过④______形成愈伤组织，然后经过⑤______形成完整的杂种植株。从杂种细胞培养成杂种植株，这种培养技术称为______。（4）上述杂种植株属于_____倍体，上述杂种植株是______（可育/不可育）。22.单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题：（1）图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有___________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而且纯度低。（2）仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有______种类型。（3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出_____________，筛选出的细胞具有的特点是_____________________________________，筛选②的方法是对其进行______________和______________，其目的是筛选出_______________________，最后从___________或_____________中获取单克隆抗体。（4）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加_________等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是________。23.某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株，且细菌降解S后会在菌落外周形成透明圈。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。（1）实验时培养基通常采用________________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_____________。甲、乙培养基均属于___________培养基。（2）实验中初步估测M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布0.1ml稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_____倍。培养过程中定期取样并用_____________法进行菌落计数，评估菌株增殖状况，用该方法对细菌进行计数时，所统计的菌落数往往会比实际数目偏小，原因是___________________。（3）最后从平板中挑选___________的菌落，其降解S的能力较强。24.研究人员将抗盐基因转入普通烟草培育出抗盐烟草，该过程所用的质粒与含抗盐基因的DNA上相关限制酶的酶切位点分别如图1图2所示。限制性内切核酸酶BamHI、BclI、Sau3Al、HindⅢ，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC，A↓AGCTT。图3表示该过程中利用含目的基因的农杆菌进行转化作用的示意图。（1）图1质粒中没有标注出来的基本结构是_______。（2）限制酶切断的是DNA分子中特定部位的两个脱氧核苷酸之间的_____。用图中质粒和目的基因构建基因表达载体时，可以用限制酶BamHⅠ切割质粒，用限制酶___________切割含目的基因的DNA片段。（3）将上述切开的质粒与目的基因混合，加入_______酶连接后，导入受体细胞（不考虑基因突变），受体细胞的类型可以包含_______。A．抗X，抗YB．抗X、不抗YC．不抗X、抗YD．不抗X、不抗Y（4）图3过程_______（填序号）中发生了基因重组，过程②、③所用的培养基中，通常要调控好______________和_______________两类激素的比例。（5）鉴定抗盐转基因烟草是否抗盐的方法是_____________________________。

2022～2023学年度第二学期期中重点校联考高二生物学第I卷（共60分）一、选择题（本题共20小题，每题3分，共60分）1.下列有关几种发酵食品的发酵温度、发酵时间和发酵菌种等的叙述，错误的是（）A.果酒发酵时温度应控制在18-30℃B.家庭制作果酒、果醋和泡菜发酵利用的菌种都是原核生物C.向发酵液中添加前一次的发酵物可提高发酵速度D.制作果醋和泡菜过程发挥主要作用的微生物代谢类型分别为异养需氧型和异养厌氧型【答案】B【解析】【分析】果酒制作时使用的是酵母菌，酵母菌适宜在缺氧、含糖量高、呈酸性的溶液中大量繁殖，酵母菌发酵的适宜温度是18℃～30℃；果醋制作使用的是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，醋酸菌发酵的适宜温度是30℃～35℃。【详解】A、因为酵母菌生长繁殖的最适温度为18-30℃，因此果酒发酵的温度宜控制在18-30℃，A正确；B、家庭制作果酒、果醋和泡菜发酵利用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌，其中酵母菌为真核生物，B错误；C、前一次的发酵物具有浓度较高的发酵所需微生物，向发酵液中添加前一次的发酵物能快速进入发酵状态，提高发酵速度，C正确；D、参与果醋制作的是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型，D正确。故选B。2.蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（）A.去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染B.过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋C.过程④中的主要发酵菌种在过程⑤中已经失去了发酵能力D.过程④所需的最适温度高于过程⑤【答案】D【解析】【分析】参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖原都充足时醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。【详解】A、去除蓝莓枝梗应在冲洗之后，目的是防止杂菌污染，A正确；B、过程③属于果醋发酵，需要醋酸菌参与，醋酸菌在氧气、糖源充足条件下可直接发酵为蓝莓醋，B正确；CD、过程④果酒制作的菌种是来源于蓝莓上的野生酵母菌，最适温度为18~30℃，需要厌氧条件，过程⑤属于果醋发酵，所需菌种是醋酸菌，最适温度为30~35℃，需要有氧条件，过程④所需的最适温度低于过程⑤，⑤醋酸发酵产生的醋酸使PH下降，过程④中的主要发酵菌种酵母菌失去发酵能力，C正确，D错误。故选D。3.下列关于平板划线法和稀释涂布平板法的叙述，错误的是（）A.倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行B.这两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置进行培养C.这两种方法都能在固体培养基上得到单菌落D.用平板划线法分离菌种，划线五个区域，接种环需要灼烧灭菌5次【答案】D【解析】【分析】微生物常见的接种的方法：（1）平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。（2）稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、由于温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固，所以倒平板操作应等培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近进行，防止杂菌污染，A正确；B、为验证培养基是否被污染或灭菌是否合格，两种方法均需同时将接种的平板和未接种的平板倒置，在培养箱中进行培养，B正确；C、平板划线法和稀释涂布平板法是微生物常见的接种方法，都能在固体培养基上得到由单个细胞形成的单菌落，C正确；D、用平板划线法分离菌种，划线五个区域，每次接种之前需要灼烧接种环灭菌，最后划线完成也需要灼烧灭菌，共6次，D错误。

故选D。4.纤维素分解性细菌能利用分泌的纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖等并吸收利用。刚果红是一种染料，能与像纤维素这样的多糖形成红色复合物，而不能与其水解产物发生类似反应。将不能直接吸收纤维素的甲、乙两种菌分别等量接种在含纤维素和刚果红的培养基上，甲菌菌落周围无变化，乙菌菌落周围呈现透明圈。下列说法错误的是（）A.实验中所用的培养基以纤维素为唯一碳源 B.乙菌属于纤维素分解性细菌C.该实验的关键是防止杂菌污染 D.配制培养基时需先灭菌再倒平板【答案】A【解析】【分析】培养基的主要成分：①主要成分：水、碳源、氮源、无机盐。②其他成分：还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。③牛肉膏和蛋白胨：来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质。④几种微生物培养时的特殊需求：培养乳酸杆菌时，需要添加维生素；培养霉菌时，需要将培养基调至酸性；培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性；培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，以抵制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。【详解】A、以纤维素为唯一碳源的培养基可用于筛选纤维素分解菌，本实验并不是为了分离获取纤维素分解性细菌，而是为了鉴定甲、乙两种菌是否为纤维素分解性细菌，因此实验中所用的培养基不是以纤维素为唯一碳源，A错误；B、刚果红能与像纤维素这样的多糖形成红色复合物，而不能与其水解产物发生类似反应，乙菌菌落周围呈现透明圈，说明乙菌能将纤维素分解，使纤维素的水解产物无法与刚果红形成红色复合物，故乙菌属于纤维素分解性细菌，B正确；C、微生物培养的关键是防止菌污染，C正确；D、配制培养基时需先放入高压蒸汽灭菌锅中先灭菌，待取出后冷却温度适宜再倒平板，D正确。故选A。5.某化工厂污水池中含有一种有害且难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌），实验主要步骤如图所示。有关分析错误的是（）A.以A作为唯一碳源和氮源，是为了筛选出可降解化合物A的异养微生物B.将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是获得大量菌种C.培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量显著降低的培养液接种D.若要研究目的菌的生长规律，可挑取单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板法进行计数【答案】B【解析】【分析】实验室微生物筛选原理人为提供有利于目的菌生长的条件，同时抑制或阻止其他微生物的生长。在微生物学中，将允许特定种类微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。【详解】A、本实验筛选能高效降解化合物A的细菌，以A作为唯一碳源和氮源，能在该培养基上生长的即为能降解化合物A的异养微生物，A正确；B、将固体培养基得到的目的菌重复多次上述实验的目的是纯化获得的菌种，B错误；C、培养若干天后，培养瓶中化合物A含量显著降低，说明该培养瓶内的菌体降解化合物A的能力强，因此选择培养瓶中化合物A含量显著降低的培养液接种，以获得高效降解化合物A的细菌，C正确；D、若要研究目的菌的生长规律，就要计数菌体数量，故可挑取单个菌落进行液体培养，再采用稀释涂布平板法进行计数，D正确。故选B。6.在下列选项中，不需要采用植物组织培养技术的是（）A.利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株B.得到“番茄—马铃薯”杂种植株C.利用基因工程培育抗棉铃虫的植株D.单倍体育种【答案】A【解析】【分析】植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详解】A、利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，得到染色体数目加倍的植株，这属于多倍体育种，不需要采用植物组织培养技术，A正确；B、利用细胞工程技术培养“番茄—马铃薯”杂种植株时需要采用植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株，B错误；C、将转基因植物细胞培育成转基因植株需要采用植物组织培养技术，C错误；D、单倍体育种过程中，利用花药离体培养得到单倍体植株时需要采用植物组织培养技术，D错误。故选A。7.研究发现，生长素能够维持拟南芥bZIP59蛋白稳定性，并增强其与LBD形成复合物的能力，bZIP59－LBD复合体直接靶向FAD－BD基因，并促进其转录，这有助于愈伤组织的形成。下列相关叙述错误的是（）A.生长素通过调控植物细胞的基因表达而影响植物细胞全能性的表达B.杂菌污染会影响植物组织培养，因此需要对培养基和离体的植物组织进行灭菌处理C.培养基中添加激素的种类和含量会影响植物细胞发育的方向D.脱分化期间一般不需要光照，再分化时需要适当光照诱导叶绿素产生【答案】B【解析】【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。【详解】A、生长素通过促进bZlP59-LBD复合体的形成促进FAD-BD基因的转录，这有助于愈伤组织形成。愈伤组织是一团未分化的细胞，全能性较强，说明生长素通过调控植物细胞的基因表达而影响植物细胞全能性的表达，A正确；B、离体的植物组织不能灭菌处理，需消毒，保持植物组织的活性，B错误；C、生长素与细胞分裂素比例适中有助于愈伤组织形成，再分化过程中生长素与细胞分裂素比例较高时有利于生根，较低时有利于芽的发育，培养基中添加激素的种类和含量会影响植物细胞发育的方向，C正确；D、脱分化期间一般不需要光照，再分化时需要适当光照，以诱导叶绿素产生，D正确。故选B。8.甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，但属于胞质雄性不育品种。通过体细胞杂交，成功将乙品种细胞质中的可育基因引入甲品种中。下列相关叙述错误的是（）A.获得的融合原生质体需放在等渗的无菌水中B.流程中A处理可使用纤维素酶和果胶酶，B处理可使用聚乙二醇C.培养形成的愈伤组织可继续在原培养基中分化形成植株D.杂种植株含有控制甲品种青花菜优良性状的基因，并能通过父本进行传递【答案】C【解析】【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。2、诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等，化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。【详解】A、获得的融合原生质体需放在等渗的无菌水中，防止会吸水涨破，A正确；B、流程中A为去除细胞壁，可使用纤维素酶和果胶酶分解细胞壁，B过程为诱导原生质体融合，需要用聚乙二醇进行诱导，B正确；C、形成愈伤组织的脱分化培养基和形成植株的再分化培养基中细胞分裂素和生长素比例不同，C错误；D、甲品种控制多种优良性状的基因，为核基因，杂种植物细胞核内含有控制甲青花菜优良性状的基因，精子中具有一半核基因，能通过父本（精子）进行传递，D正确。故选C。9.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（）A.干细胞只存在于早期胚胎中B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其分散成单个细胞C.当贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时，会发生接触抑制现象D.动物细胞培养需无菌、无毒的环境，充足的营养，适宜的温度和pH等条件【答案】A【解析】【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。【详解】A、根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞，胚胎干细胞是哺乳动物或人早期胚胎中的细胞，成体干细胞存在于机体的各种组织器官中，A错误；B、动物细胞培养时，先用胰蛋白酶处理组织使其分散成单个细胞，制成细胞悬液，B正确；C、细胞存在接触抑制，因此在培养瓶中要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，制成悬浮液进行传代培养，C正确；D、培养动物细胞需要充足的营养、适宜的温度和pH、无菌、无毒的环境和一定的气体环境等条件，D正确。故选A。10.下图表示三亲婴儿的培养过程，下列相关说法错误的是（）A.可通过显微操作的方法对乙的卵母细胞去核B.三亲婴儿细胞中的染色体不仅仅来自甲和丙C.核移植时可将乙的卵母细胞在体外培养至MII中期D.三亲婴儿的培育还需要动物细胞培养和胚胎移植等技术【答案】B【解析】【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。【详解】A、可通过显微操作的方法对捐献者乙的卵母细胞去核，A正确；B、三亲婴儿细胞中的染色体只来自甲和丙，而细胞质基因来自捐献者乙，但线粒体中不含染色体，B错误；C、核移植时可将乙的卵母细胞在体外培养至MII中期，C正确；D、三亲婴儿的培育需要用到核移植技术、动物细胞培养和胚胎移植等技术，D正确。故选B。11.下图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是（）A.若a细胞和b细胞是动物体细胞，则c细胞经动物细胞培养可发育成个体B.若a细胞和b细胞是植物细胞，则必须要先脱分化再诱导融合C.若a细胞和b细胞来自两种生物，该过程无需考虑生殖隔离D.若a细胞和b细胞是植物细胞，则c细胞的形成与细胞膜的流动性无关【答案】C【解析】【分析】动物细胞没有细胞壁可以直接诱导两个细胞发生细胞融合，植物细胞需要去除细胞壁后诱导原生质体融合；细胞融合依赖于细胞膜的流动性。【详解】A、高度分化的动物细胞的全能性受到了限制，细胞核依然保留全能性，c细胞需要进行核移植才能发育成个体，A错误；B、诱导植物细胞融合需要先进行去除细胞壁的处理，B错误；C、通过一定的技术手段可以诱导不同的细胞进行原生质体融合，故若a细胞和b细胞来自两种生物，该过程无需考虑生殖隔离，其优点就是可以打破生殖隔离，C正确；D、细胞融合依赖于细胞膜的流动性，D错误。故选C。12.抗体药物偶联物（ADC）通过将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列叙述不正确的是（）A.单克隆抗体携带细胞毒素与肿瘤细胞特异性结合B.制备该抗体需要利用动物细胞融合和动物细胞培养等技术手段C.将选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞直接用于生产该单克隆抗体D.药物在癌细胞内释放并起作用，同时诱导溶酶体破裂，加速癌细胞的凋亡【答案】C【解析】【分析】细胞自然更新、被病原体感染的细胞的清除，都是通过细胞凋亡完成的，细胞凋亡对于多细胞生物完成正常发育，维持内部环境的稳定以及抵御外界各种因素的干扰都起着非常关键的作用。【详解】A、单克隆抗体携带细胞毒素类药物与肿瘤细胞特异性结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤，A正确；B、制备单克隆抗体需要利用动物细胞融合和动物细胞培养等技术手段，B正确；C、对于选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞，不能直接用于生成单克隆抗体，还需要进行克隆化培养和抗体阳性检测，C错误；D、药物在癌细胞内释放并起作用，同时诱导溶酶体破裂，释放水解酶，加速癌细胞的凋亡，D正确。故选C。13.体外培养的胚胎干细胞存在两种不同的状态：启动态和幼稚态，两种细胞的形态特征明显不同，相对于幼稚态细胞，启动态细胞的全能性不容易表现。下图是利用食蟹猴胚胎干细胞生产嵌合体动物的流程。下列错误的是（）A.带荧光的幼稚态胚胎干细胞植入胚胎后能参与正常的胚胎发育和器官形成B.桑葚胚时期的细胞没有发生分化且胚胎体积也没有变大C对代孕母猴需进行健康检查、超数排卵、同期发情处理、妊娠检查等处理D.嵌合体胎儿体细胞与正常食蟹猴体细胞染色体数目相同【答案】C【解析】【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理(选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理)；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存(对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段)；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。【详解】A、带荧光的幼稚态胚胎干细胞植入胚胎后，在代孕母猴体内能参与正常的胚胎发育和器官形成，A正确；B、早期胚胎发育到桑葚胚时期的细胞没有发生分化，且胚胎体积也没有变大，B正确；C、对于优良供体需要进行超数排卵、发情配种、收集胚胎；对于代孕母猴来说需要进行健康检查、同期发情处理、妊娠检查等处理，C错误；D、嵌合体胎儿体细胞的细胞核来源于食蟹猴胚胎干细胞，所以与正常食蟹猴体细胞染色体数目相同，D正确。故选C。14.为了在大肠杆菌细胞中成功表达人胰岛素基因，首先需要提取细胞的mRNA，经逆转录等过程来获取目的基因。下列相关叙述错误的是（）A.逆转录过程需要四种游离的核糖核苷酸作为原料B.用于逆转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取C.经逆转录得到的目的基因可经过PCR技术进行扩增D.逆转录获取目的基因时遵循碱基互补配对原则【答案】A【解析】【分析】细胞分化的本质是基因的选择性表达，胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，因此只有在胰岛B细胞中才能获取相关mRNA。【详解】A、逆转录过程是以RNA为模板合成DNA的过程，需要以四种游离的脱氧核糖核苷酸为原料，A错误；B、由于基因的选择性表达，胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达，所以用于逆转录的mRNA只能从胰岛B细胞中获取，B正确；C、经逆转录得到的目的基因可经过PCR技术进行扩增，获得大量的目的基因，C正确；D、逆转录获取目的基因时遵循碱基互补配对原则，即A-T、U-A、G-C、C-G，D正确。故选A。15.研究人员利用转基因技术培育出了抗烟草花叶病毒(TMV)感染的烟草，操作流程如图所示。下列相关叙述错误的是（）A.过程①需要的酶是逆转录酶，过程②需要限制酶和DNA聚合酶等B.①②③过程都遵循碱基互补配对原则C.过程③是基因工程的核心，目的基因需插入Ti质粒的T-DNA上D.过程④常用农杆菌转化法，过程⑤包括烟草细胞脱分化和愈伤组织再分化【答案】A【解析】【分析】分析题图，①表示逆转录过程，②表示获取目的基因的过程，③表示构建基因表达载体的过程，④表示将目的基因导入受体细胞的过程，⑤表示植物组织培养过程。【详解】A、过程①表示逆转录过程，需要的酶是逆转录酶；过程②表示获取目的基因的过程，需要限制酶，但不需要DNA聚合酶，A错误；B、①表示逆转录过程，②表示获取目的基因的过程，③表示构建基因表达载体的过程，过程①②③都遵循碱基互补配对原则，但配对原则不完全相同，B正确；C、过程③表示构建基因表达载体的过程，是基因工程的核心，目的基因需插入Ti质粒的T-DNA上，C正确；D、过程④表示将目的基因导入植物细胞，常用农杆菌转化法；过程⑤表示植物组织培养过程，包括烟草细胞的脱分化和愈伤组织的再分化，D正确。故选A。16.下列关于PCR的叙述，正确的是（）A.PCR技术中引物需要和各自互补DNA单链的5'端结合B.设计引物时必须已知目的基因的全部核苷酸序列C.在高温条件下，DNA的磷酸二酯键断裂形成2条DNA单链D.PCR可在PCR扩增仪中自动完成，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR产物【答案】D【解析】【分析】PCR技术：①概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；②原理：DNA复制；③条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；④方式：以指数的方式扩增，即约2n；⑤过程：高温变性、低温复性、中温延伸。【详解】A、PCR技术中引物需要和各自互补的DNA单链的3'端结合，A错误；B、仅需根据目的基因两端已知的核苷酸序列即可设计出引物，B错误；C、双链DNA在高温下解旋即使得DNA双链打开，破坏的是碱基对之间的氢键，磷酸二酯键没有断裂，C错误；D、使用PCR反应快速扩增目的基因，常在PCR扩增仪中自动完成，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR产物，D正确。故选D。17.经研究发现，PVY-CP基因位于某种环状DNA分子中。将PVY-CP基因导入马铃薯，使之表达即可获得抗PVY病毒的马铃薯。下图表示构建基因表达载体的过程，相关酶切位点如下表所示。下列说法错误的是（）BamHⅠHindⅢBglⅡSmaⅠA.推测Klenow酶的功能与DNA聚合酶类似B.由步骤③获取的目的基因有1个黏性末端C.步骤④应选用的限制酶是BamHⅠ和SmaⅠD.NPTⅡ基因可能是用于筛选的标记基因【答案】C【解析】【分析】分析题图：图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，步骤①～③是从质粒A中获取目的基因（PVY-CP）的过程；质粒B是选用的运载体；④过程需要用限制酶处理质粒B；⑤表示基因表达载体的构建过程，该过程需要DNA连接酶。【详解】A、由图可知，步骤②中用Klenow酶处理后，黏性末端变成平末端，说明Klenow酶能催化DNA链的合成，从而将DNA片段的黏性末端变成平末端，故Klenow酶的功能将DNA单链补全成双链，推测Klenow酶的功能与DNA聚合酶类似，A正确；B、据图示可知，由步骤③获取的目的基因一端平齐，一端为黏性末端，故共有1个黏性末端，B正确；C、由于目的基因只有一个黏性末端，质粒是顺时针转录，使用BamHⅠ切割会导致目的基因无法转录，需选择一种黏性末端相同的限制性内切酶，另一种选择平末端限制酶，故步骤④中选用的限制酶是BglⅡ或SmaⅠ，C错误；D、基因表达载体中除含有目的基因、启动子和终止子等组件外，还应有标记基因，据图推测，NPTⅡ基因可能是用于筛选的标记基因，D正确。故选C。18.新冠病毒是一种RNA病毒，极易产生变异，其通过表面刺突蛋白（S蛋白）的受体结合域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用而感染细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，可与S蛋白RBD紧密结合，以干扰新冠病毒的感染。下列有关说法错误的是（）A.LCB1的作用效应与抗S蛋白抗体类似B.LCB1可以通过细胞中原有的基因表达产生C.LCB1的设计和合成遵循中心法则D.LCB1的设计和合成是通过蛋白质工程实现的【答案】B【解析】【分析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。蛋白质工程能够生产自然界中不存在的蛋白质。【详解】A、LCB1能S蛋白结合，干扰新冠病毒对人体细胞的感染，说明其作用与抗体类似，A正确；B、LCB1是人工设计并合成的一种自然界不存在的蛋白质，故LCB1并不是通过细胞中原有的基因表达产生的，B错误；C、LCB1的设计和合成属于蛋白质工程，遵循中心法则，C正确；D、基因工程只能合成自然界已经存在的蛋白质，而LCB1蛋白药物是自然界不存在的，是通过蛋白质工程设计和合成的，D正确。故选B。19.下列有关病毒在生物学和医学领域应用的叙述，错误的是（）A.灭活的病毒可用于诱导动物细胞融合B.噬菌体、动植物病毒在基因工程操作中可作为“分子运输车”C.经灭活或减毒处理的病毒可用于免疫预防D.为保证病毒存活可在完全培养基中分离培养病毒【答案】D【解析】【分析】1、疫苗通常是用灭活的或减毒的病原体制成的生物制品，接种疫苗后，人体内可产生相应的抗体，从而对特定传染病具有抵抗力。2、诱导动物细胞常用的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。【详解】A、诱导动物细胞常用的方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，A正确；B、质粒、噬菌体、动植物病毒在基因工程操作中可作为“分子运输车”，B正确；C、经灭活或减毒处理的病毒可作为疫苗，用于免疫预防，C正确；D、病毒没有细胞结构，不能独立生活，必须寄生在活细胞中，因此不能用培养基单独培养病毒，D错误。故选D。20.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述，正确的是（）A.将猪的红细胞置于清水中，红细胞涨破后DNA会释放出来B.在研磨液中加入等体积的预冷的酒精析出的丝状物即为粗提取的DNAC.将白色丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液中，离心后弃去上清液D.提取到的丝状物直接加入二苯胺试剂中，沸水浴加热后变蓝【答案】B【解析】【分析】1、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol／L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的；（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下DNA遇一DNA的鉴定:在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，因此二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。【详解】A、猪是哺乳动物，其成熟的红细胞里没有细胞核，无法提取DNA，A错误;B、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，利用这一原理，在提取液中加入95%的冷冻酒精后蛋白质会与DNA分离并析出，B正确；C、DNA在不同浓度的NaCI溶液中溶解度不同，氯化钠溶液为2mol/L时，DNA溶解度最大，所以用2mol/L的氯化钠溶液溶解提取物并离心后，须保留上清液，C错误；D、将提取的丝状物加入2mol/L的NaCI溶液中溶解，再加入二苯胺试剂，混匀后将试管置于沸水中水浴加热5min，指示剂将变蓝，D错误。故选B。第II卷（共40分）二、非选择题（本题共4小题，共40分）21.甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分A，乙含有效成分B．某研究小组拟利用植物体细胞杂交技术培育同时含有A和B的新型药用植物。回答下列问题：（1）植物体细胞杂交的第①步是去掉______，分离出有活力的原生质体。目前此步骤最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用______酶等分解植物的细胞壁。（2）②过程的发生，必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的物理方法是：利用______等（写一种即可）促使原生质体融合；化学方法是：用______试剂作为诱导剂诱导融合。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导融合的方法类似，不同的是还常用到______诱导动物细胞的融合。（3）③表示融合后的原生质体再产生新的细胞壁，新细胞壁的产生与细胞内______（细胞器）有密切关系。形成的融合细胞进一步经过④______形成愈伤组织，然后经过⑤______形成完整的杂种植株。从杂种细胞培养成杂种植株，这种培养技术称为______。（4）上述杂种植株属于_____倍体，上述杂种植株是______（可育/不可育）的。【答案】（1）①.细胞壁②.纤维素酶和果胶（2）①.电融合法/离心法②.聚乙二醇##PEG③.灭活的病毒（3）①.高尔基体②.脱分化③.再分化④.植物组织培养（4）①.（异源）四②.可育【解析】【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。植物体细胞杂交技术在打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种等方面展示出独特的优势。【小问1详解】据图分析，①过程是去掉植物细胞壁；目前此步聚最常用的方法是酶解法，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故可在温和的条件下用纤维素酶和果胶酶等分解植物的细胞壁。【小问2详解】②过程是原生质体融合，人工诱导原生质体融合的方法有物理法（电融合法/离心法）和化学法（聚乙二醇），诱导动物细胞融合还可以用生物法（灭活的病毒）。【小问3详解】新细胞壁的产生与细胞内高尔基体（高尔基体能合成果胶等物质）有密切关系。形成的融合细胞进一步经过特定的培养基，脱分化（④）培养形成愈伤组织，然后经适宜配比的生长素与细胞分裂素调节，再分化（⑤）形成完整的杂种植株。从杂种细胞培养成杂种植株，这种培养技术称为植物组织培养，其原理是植物细胞具有全能性。【小问4详解】植物甲和乙都是二倍体，故上述杂种植株属于（异源）四倍体。上述杂种植株是可育的，因为在减数分裂过程中同源染色体能完成正常的联会，产生正常的配子。22.单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题：（1）图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有___________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而且纯度低。（2）仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有______种类型。（3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出_____________，筛选出的细胞具有的特点是_____________________________________，筛选②的方法是对其进行______________和______________，其目的是筛选出_______________________，最后从___________或_____________中获取单克隆抗体。（4）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加_________等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是________。【答案】（1）Ab1、Ab2、Ab3、Ab4（2）3/三（3）①.杂交瘤细胞②.既能无限增殖，又能产生特异性抗体③.克隆化培养④.抗体检测⑤.能产生所需（特定）抗体的杂交瘤细胞⑥.培养液⑦.小鼠腹水（4）①.动物血清②.95%空气和5%CO2【解析】【分析】动物细胞融合技术概念指的是使一个或多个动物细胞形成一个细胞的技术。动物细胞融合技术过程：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的皮中得到产生特定抗体的B淋巴细胞；用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上未融合的基本细胞和融合的具有同融合的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长；对上述经选择培养的杂交瘤细胞，经克隆化培养加抗体检测，经多次筛选即可获得足够数量的内分泌所需抗体的细胞；将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞，在体外条件下大规模培养或注射到小鼠腹腔内增治，从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单抗。【小问1详解】据图可知，向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物。【小问2详解】用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有B细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合、杂交瘤细胞3种类型。【小问3详解】图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的方法是用特定的选择培养基，去除同中核融合的细胞以及未融合的单核细胞，筛选出既能无限增殖，又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，筛选②是对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞，然后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【小问4详解】动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加动物血清等天然成分，因为血清中含有很多细胞增值必需的未知成分，另外需要提供95％空气和5％的CO2条件，以保证细胞的有氧呼吸和维持培养液的pH。23.某种物质S（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解S。研究人员按照下图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解S的细菌菌株，且细菌降解S后会在菌落外周形成透明圈。实验过程中需要甲、乙两种培养基，甲的组分为无机盐、水和S，乙的组分为无机盐、水、S和Y。（1）实验时培养基通常采用________________的方法进行灭菌。乙培养基中的Y物质是_____________。甲、乙培养基均属于___________培养基。（2）实验中初步估测M中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在每个平板上涂布0.1ml稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过200个，则至少应将摇瓶M中的菌液稀释_____倍。培养过程中定期取样并用_____________法进行菌落计数，评估菌株增殖状况，用该方法对细菌进行计数时，所统计的菌落数往往会比实际数目偏小，原因是___________________。（3）最后从平板中挑选___________的菌落，其降解S的能力较强。【答案】（1）①.高压蒸汽灭菌##湿热灭菌