DB32T 1798-2011 秤锤树组织培养繁殖技术规程VIP

ICS65.020.40备案号：DB32TechnicalRegulationsofmicropr江苏省质量技术监督局发布IDB32/T1798—2011本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的规定编写。本标准由江苏省林业局提出并归口。本标准起草单位：江苏省林业科学研究院。本标准主要起草人：蒋泽平、黄利斌、窦全琴、张敏、蒋春。DB32/T1798—2011秤锤树组织培养繁殖技术规程本标准规定了秤锤树组织培养繁殖中外植体选择与灭菌、初代培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、繁殖代数、炼苗移栽、移栽成活苗管理等要求。本标准适用于秤锤树组织培养规模化繁殖。2外植体选择与灭菌2.1外植体选择当年生健壮植株枝条或萌条的半木质化新梢长5cm～10cm。2.2外植体处理将半质化枝条切割成每段2cm～3cm的带芽茎段。2.3外植体灭菌枝条去叶毛，用软毛刷蘸液体皂轻刷干净，流水冲洗30min。将处理好的外植体在超净工作台上用70%酒精溶液浸泡30s～50s，然后转移至0.1%升汞溶液中消毒8min～10min，最后用无菌水冲洗3次~5次，接种于培养基中。3初代培养3.1培养基MS基本培养基附加BA2.0mg.L-1+IBA0.05mg.L-1。3.2培养条件温度25℃,光照强度2000lx，每日光照12h，培养40d后进入增殖培养。3.3接种将经过灭菌的外植体，按芽朝上的方向插入培养基。4增殖培养4.1培养基MS基本培养基附加BA1.0mg.L-1+TDZ0.05mg.L-1＋IBA0.05mg.L-1＋VC50mg.L-1＋S3%。4.2培养条件2DB32/T1798—2011温度(25±2)℃,光照强度3000lx，每日光照14h。4．3培养方法在培养过程中，试管苗生长较弱时,将BA换成相同浓度的ZT使用。5壮苗培养5.1培养基MS基本培养基附加BA0.5mg.L-1+TDZ0.05mg.L-1+IBA0.1mg.L-1+VC50mg.L-1＋S3%。5.2培养条件温度(27±2)℃,光照强度3000lx，每日光照14h。5.3培养方法在培养过程中，试管苗生长较弱时,将BA换成相同浓度的ZT使用。6生根培养6.1培养基1/2MS（大量元素减半，其他成分不变）基本培养基附加NAA0.3mg.L-1+IBA0.5mg.L-1+VC100mg.L-1＋S2%。6.2培养条件温度(23±2)℃,光照强度3000lx，每日光照14h。6.3培养方法培养7d～15d长出0.5～1.0cm长的新根时，开始炼苗。7繁殖代数连续繁殖25代～30代，不能继续繁殖。需取外植体重新接种培养。8炼苗移栽8.1移栽温室温室使用前彻底消毒，用硫磺、百菌清烟雾剂熏蒸3-4次，温室使用后3个月左右用来苏水消毒。8.2炼苗在生根培养7d～15d长出0.5～1.0cm长的新根时开始炼苗，打开瓶口室内炼苗3d。8.3移栽基质蛭石:珍珠岩:泥炭=6:3:1（体积）的混合基质。DB32/T1798—20118.4移栽方法先将试管苗取出，在流动的清水中冲洗。移栽至含有蛭石:珍珠岩:泥炭=6:3:1（体积）的混合基质的营养钵中。8.5移栽条件控制温度25℃~30℃,相对湿度85%-90%,保湿15d～20d,其间采用遮光率80%～90%遮光网遮荫,35d后成活。9移栽成活苗管理9.1大田栽植时间试管苗移栽后60天大田栽植。9.2肥、水管理在手中指间不滴水为原则，喷水与施肥相结合。9.3病虫害防