畜肉中龙胆紫含量的测定-液相色谱串联质谱（LC-MSMS）法

2畜肉中龙胆紫含量的测定液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法本文件描述了畜肉品中龙胆紫及其代谢物隐性龙胆紫液相色谱-串联质谱测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、试验步骤、试验数据处理、回收率、精密度本文件方法检出限为0.5μg/kg，方法定量GB/T6682分析实验室用水规格试样中的龙胆紫及其代谢物隐性龙胆紫用乙腈（1%甲酸）提取，混合阳离子固相柱净化，液相色）：）：5.72%甲酸-水溶液：取甲酸（5.35.9乙酸铵溶液（5mmol/L，pH7.0取乙酸铵（5.5）0.385g5.11乙酸铵-乙腈溶液：取乙酸铵溶液（5.9）100mL5.120.1%甲酸-乙酸铵溶液：取甲酸（5.335.15混合标准中间工作溶液：分别准确称取适量标准物质（5.13精确至0.1mg用乙腈（5.2））；）；0℃~4℃以下避光保存，有效期1个月）。）；）；ng/mL的混合内标标准工作液（于0℃~4℃以下避光保存，有效期1个月）。5.19滤膜：孔径为0.22µm的聚四氟乙烯滤200μL，混合15s，加入两粒陶瓷均质子，在振荡器振荡5min，使试样均匀分散于乙腈中；用超声超声10min，于5000r/min离心5min，将上清液转移至25mL的比色管中；再向离心管加入11mL乙腈上清液合并至上述比色管中，用乙腈（5.2）定容至25.0mL，摇匀，作为备用445℃氮气吹至近干后，用乙酸铵-乙腈溶液（5.11）定容至2.0mL，涡旋混匀，过滤膜后重四极杆质谱联用仪测定。a）色谱柱：C18柱，2.7µm，100mm×2.1mm（内径），或相当者；b）流动相：0.1%甲酸-乙腈（5.2）溶液和5mmol/L的乙酸铵（0.1%甲酸）水溶液（5.12），梯度0）；h）监测方式：多反应监测（MRMj）母离子、子离子、锥孔电压及碰撞电压见表2。母离子m/z子离子m/z5100和1000μL混合系列标准工作溶液（5.15），加入40μL混合内标工作液（5.16），和50μg/L的系列基质匹配标准工作溶液（现配现用），按照液相色谱和质谱参考工作条件（7.3.1和7.3.2）进行测定，以定量离子色谱峰的峰面积为纵坐标，与其对应的溶液浓度为横坐标作图按液相色谱和质谱参考工作条件（7.3.1和7.3.2）测定7.2得到的试样溶液，如果出色谱之内，超出线性范围的试样溶液可用乙酸铵-AAiA'isCsCisV1VX=（1）AisAsC'isV2m X—试样中龙胆紫和隐性龙胆紫的残留量，单位为微克每千克(μg/kgAi—试样溶液中龙胆紫和隐性龙胆紫的峰面积；Ais—试样溶液中龙胆紫和隐性龙胆紫内标的峰面积；As—基质匹配标准溶液中龙胆紫和隐性龙胆紫的峰面积；A'is—基质匹配标准溶液中龙胆紫和隐性龙胆紫内标的峰面积；Cis—试样溶液中龙胆紫和隐性龙胆紫内标浓度，单位为微克每升(μg/LCs—基质匹配标准溶液中龙胆紫和隐性龙胆紫浓度，单位为微克每升(μg/L）；C'is—基质匹配标准溶液中龙胆紫和隐性龙胆紫内标浓度，单位为微克每升(μg/L）；6V—上机前定容的体积，单位为毫升（mLV1—备用液定容体积，单位为毫升（mL）；V2—过柱备用液的体积，单位为毫升（mLm—试样的质量，单位为克（g）；计算结果扣除空白值，测定结果用平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。本方法的批内相对标准偏差≤15%，批间相对标准偏差≤20%。7龙胆紫、隐性龙胆紫和内标物的英文名称、分子式、CAS