DB22T 2929-2018 转基因玉米种cry3类基因定性检测 PCR法VIP

备案号：62774-2019DB22DB22/T2929—2018转基因玉米中cry3类基因定性检测PCR法Qualitativedetectionofcry3typegenesingeneticallymodifiedmaize—PCRmethod吉林省市场监督管理厅发布I1转基因玉米中cry3类基因定性检测PCR法警示——使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验，本标准并未指出所有可能的安全问本标准规定了PCR方法定性检测转基因玉米中cry3类基因的原理、试验条件、试剂或材料、仪GB/T6682分析实验室用水规NY/T672转基因植物及其产品检测通DB22/T2527-2016转基因玉米中cry1A基因定性检测农业部1485号公告-4-2010转基因植物及其产品成分检农业部1861号公告-3-2012转基因植物及其产品成分检测玉米内标农业部2031号公告-19-2013转基因植物及其产品成zSSIIb基因zSSIIbgeneCry3类基因cry3typegenes编码苏云金芽孢杆菌（Bacillusthuringiensis）Cry3类杀虫晶体蛋白的一类基因，在本标准中包括cry3A基因和cry3Bb基因。2加入70mL水中，缓慢滴加氢氧化钠溶液（见6.4）直至E6.4）调pH至8.0，加水定容至100mL。在103.4kPa（121℃)条件下灭菌20min。烷溶解于800mL水中，用盐酸调pH至8.0，加水定容至1000mL。在103.4kPa（121℃)条件6.7TE缓冲液（pH8.0分别胺四乙酸二钠溶液（见6.5），加水定容至1000mL。在103.4kPa（121℃)条件下灭菌20min。6.850×TAE缓冲液：称取），zSSIIb-F：5’-CTCCCAATCCTTTGACATCTGC-3’zSSIIb-R：5’-TCGATTTCTCTCTTGGTGACAGG-3’Cry3-F：5’-CTTCCTGAACACCATCTGGCCC-3’Cry3-R：5’-GAACAGCTCGCGGATGCGG-3’39.2.2cry3类基因PCR扩增水—TaqDNA聚合酶—4注1：“—”表示体积不确定，如果PCR缓冲液中含有氯化镁，则不加氯化镁溶液，根据TaqD9.3PCR产物电泳检测和凝胶成像品中检测出cry3类基因成分，表述为“样品中检测出cry3类基因成12.1.2以非转基因玉米基因组DNA作为阴性对照的模板；以转cry3类基因玉米质量分数5阳性对照PCR中，玉米内标准基因和cry3类小一致，而阴性对照中仅扩增出玉米内标准基因片段，空白对照中没有预期扩增片段，表明PCR检测6Cry3类基因特异性序列A.1转基因玉米MIR604中c1CTTCCTGAACACCATCTGGCCCAGCGAGGACCCCTGGAAGGC71GACCAGAAGATCGCCGACTACGCCAAGAACAAGGCACTGGCCGAGCTACAG141AGGACTATGTGAGCGCCCTGAGCAGCTGGCAGAAGAACCCCGCA.2转基因玉米MON863和MON8801CTTCCTGAACACCATCTGGCCCTCCGACGCCGACCCCTGGAA71ATCGACAAGAAGATCGAGGAGTACGCCAAGTCCAAGGCCC