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备案号：56317-2017DB22DB22/T2704—2017牛卵形巴贝斯虫病检测方法PCR法PCRassayfordetectionofbovineBabesiaovata2017-09-30发布2017-11-30实施吉林省质量技术监督局发布I1GB/T6682—2008分析实验室过人工合成的特异性寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链，再利用25’-GCCCGCAGGTCATCATAAAGT-3’5’-CATTTTGTGCCAGCGTTTTG-3’5.4.1PCR扩增仪,温度范围：4℃~100℃。3模板外其余组分及PCR反应条件与6.2相同。以未感染卵形巴贝斯虫牛血液中提取的DNA作为标准阴性对将所有样品、标准阳性对照、标准阴性对照及空白对照的PCR产物按编号加入到1%琼脂凝胶板的各孔中，将凝胶的边孔中加入标准分子量DNAMarker，将凝胶在150V恒定电压下电泳30min后，凝胶成4A.1.2TAE缓冲液（50×)的配制见表A.2。表A.2TAE缓冲液（50×)配制5冷却到50℃左右，加入10mg/m67标准对照见图C
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