《洗涤用纤维素酶制剂》

1QB/TXXXX—XXXX洗涤用纤维素酶制剂本文件规定了洗涤用纤维素酶制剂的感官和理化指标、微生物指标等要求，描述了相应的试验方法，规定了检验规则、标志、包装、运输、贮存和保质期的内容，给出了便于技术规定的产品分类。本文件适用于微生物发酵、提纯等工艺制得的洗涤用纤维素酶制剂的生产、检验和销售。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T191包装储运图示标志GB/T4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB/T4789.3食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数GB/T6368表面活性剂水溶液pH值的测定电位法GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB15258化学品安全标签编写规定GB/T42239.1—2022洗涤用酶制剂第1部分：碱性蛋白酶3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1纤维素酶cellulase在各种酶组分的协同作用下，能降解纤维素，使之变成纤维寡糖、纤维二糖和葡萄糖的酶。3.2纤维素酶活力cellulaseactivity1g固体酶（或1mL液体酶），在50℃,pH为7.00条件下，1min水解羧甲基纤维素钠释放出相当于1μg葡萄糖的还原糖量为一个酶活力单位。4产品分类按产品形态分为液体剂型和固体剂型。5要求5.1感官和理化指标产品的感官和理化指标应符合表1的规定。2QB/TXXXX—XXXX表1感官和理化指标白色、灰白色或黄褐色或其他颜 ——a酶活力标示值由供需双方按合同规定或生产商明示，酶活力值测定按附录A仲裁。酶活力只适用于对同5.2微生物指标适用于食品用洗涤剂的酶制剂，微生物指标应符合表2规定。表2微生物指标6试验方法6.1通则除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和GB/T6682中规定的三级或以上的水。6.2外观取适量样品，置于干燥洁净的透明实验器皿内，在非直射光条件下进行观察。6.3酶活力按附录A进行。6.4干燥失重按GB/T42239.1—2022中6.5进行。6.5pH按GB/T6368的规定进行。6.6粒度按GB/T42239.1—2022附录C进行。6.7菌落总数按GB4789.2的规定进行。3QB/TXXXX—XXXX6.8大肠菌群按GB4789.3的规定进行。7检验规则7.1检验分类7.1.1出厂检验出厂检验项目为表1规定的外观、酶活力。当适用于食品用洗涤剂产品时，增加表2规定的项目。7.1.2型式检验型式检验为表1规定的全部项目，当适用于食品用洗涤剂产品时，增加表2规定的项目。在下列情况下应进行型式检验：a)正常生产时，应定期进行型式检验，一般情况每年一次；b)生产工艺、生产设备、原材料、催化剂等变化或不正常，以及生产管理要素（包括人员素质）的变化可能影响产品质量和性能时；c)长期停产后再恢复生产时；d)出厂检验结果与上次的型式检验有较大差异时；e)市场监督管理机构、使用单位提出型式检验要求时。7.2组批与抽样原则7.2.1组批产品按批交付和抽样验收，一次交付的同一类型、规格、批号的产品组成交付批。7.2.2检验产品应经生产厂的质量检验部门按本文件规定的检验方法检验合格，并出具产品质量检验合格证方可出厂。收货单位应在到货一个月内，凭合格证验收，必要时可按7.2.3抽样验收。7.2.3抽样根据批量大小，按表3确定样本大小，从批中随机抽取样本单位。取样前应将选定的样本包装中的样品混合均匀，在保证均匀的前提下方可取样。表3成品抽样的样品量23>50047.3判定规则与复检外观指标检验不合格，可重新抽样检验，复检结果仍不合格则判该批产品不合格。理化指标检验结果按修约值比较法修约后与指标比较判定合格与否，如有一项指标不合格，可重新取两倍箱样本采取样品，对不合格项进行复检，复检结果仍不合格，则判该批产品不合格。交收双方因检验结果不同，不能取得协议时，可商请仲裁检验，仲裁检验结果为最后依据。产品质量监督检验及仲裁机构抽查检验时不进行二次抽样。7.4仲裁4QB/TXXXX—XXXX收货单位如发现产品质量不符合本文件规定的要求，应在到货1个月内向生产者交涉。若因检验结果不同，不能取得协议时，双方应按7.2.3取样。取样总量不应少于450g，将选取的试样仔细混匀后,分别装入3个洁净干燥的样品瓶中，签封。标签上应注明产品名称、规格、批号、生产者名称、取样日期、取样人。交收双方各执一份，第三份签封后，备仲裁检验用。样品存放于暗处，按照建议贮存温度贮存，保存期1个月。仲裁检验结果为最后依据。8标志、包装、运输、贮存和保质期8.1标志产品的外包装使用符合GB/T191要求的标志。产品的包装上应贴有牢固的标签。标签内容应包括产品名称、净含量、生产者和（或）经销者的名称、地址和联系方式、生产日期和保质期、贮存条件、批号及其他需要标示的内容。化学品安全标签内容应符合GB15258的要求。8.2包装产品的内包装和（或）包装容器的内涂料应符合相关规定。8.3运输产品在运输过程中应轻拿轻放，不应倒置，严防雨淋和曝晒，不应在箱上踩踏和堆放重物。运输工具应清洁、无毒、无污染。严禁与有毒、有害、有腐蚀性的物质混装混运。8.4贮存产品应贮存在阴凉干燥的环境下。不应与有毒、有害、有腐蚀性的物质同存。堆垛要采取必要的防护措施，堆垛高度要适当，避免损坏运输包装。8.5保质期保质期由生产企业自定。在规定的运输和包装贮存条件下，保质期内的酶活力不应低于标示酶活力。超过保质期的产品仍具有使用价值，使用时重新测定酶活力。5QB/TXXXX—XXXX（规范性）酶活力的测定A.1方法概要在一定温度和pH条件下，纤维素酶水解纤维素产生单糖和寡糖。具有还原性末端的寡糖和有还原基团的单糖在沸水浴条件下与3,5－二硝基水杨酸（DNS）试剂发生显色反应，用分光光度计于波长540nm下测定溶液的吸光度。酶活力与吸光度成正比，由此可计算纤维素酶活力。A.2试剂A.2.1羧甲基纤维素钠（CMC，RnOCH2COONa），25℃时2%（质量分数）的水溶液，黏度为800mPa∙s~1200mPa∙s。因底物影响较大，每批羧甲基纤维素钠使用前要进行自控。A.2.23，5－二硝基水杨酸（C7H4N2O7）。A.2.3酒石酸钾钠（KOCO(CHOH)2COONa·4H2O）。A.2.4无水亚硫酸钠（Na2SO3）。A.2.5苯酚（C6H5OH）。A.2.6氢氧化钠（NaOH）。A.2.7磷酸二氢钾（KH2PO4）。A.3仪器A.3.1恒温水浴锅：精度为±0.2℃。A.3.2移液器。A.3.3pH计：精度为0.01pH单位。A.3.4磁力加热搅拌器。A.3.5磁力搅拌器。A.3.6分析天平：精度为0.0001g。A.3.7分光光度计：10mm比色皿。A.4溶液A.4.1磷酸缓冲液（pH=7）称取磷酸二氢钾6.8g，加1mol/L氢氧化钠溶液29.1mL，用蒸馏水稀释至1000mL即得。A.4.210mg/mLCMC溶液配制称取CMC1.0g（称准至0.001g），缓慢加入缓冲液（A.4.1）60mL，溶解8h，稀释完全后定容到100mL容量瓶中，标记为10mg/mLCMC溶液，同时标记配制日期。4℃条件下保存，有效期7d。A.4.310mg/mL标准葡萄糖溶液配制称取在105℃条件下烘干至恒重的无水葡萄糖1.0g（称准至0.001g），置于80mL缓冲液（A.4.1）中搅拌溶解，待完全溶解后定容至100mL。标记为10mg/mL的标准葡萄糖溶液，同时标记配制日期，4℃条件下保存。A.4.4DNS试剂的配制6QB/TXXXX—XXXX称取3,5－二硝基水杨酸31.50g（称准至0.001g），缓慢加入5000mL蒸馏水中，不断搅拌，水浴加热至45℃,逐步加入1000mL氢氧化钠溶液（200gNaOH,用水溶解定容到1000mL），不断搅拌至溶液清澈透明（在加入氢氧化钠溶液过程中，溶液温度不应超过48℃)。再逐步加入四水酒石酸钾钠910.0g、苯酚25.0g、无水亚硫酸钠25.0g，继续45℃水浴加热，同时补水3000mL，不断搅拌，至上述物质完全溶解后，冷却至室温，并定容至10000mL。用滤布过滤，将滤液储存于棕色瓶中，标识配制日期和名称，避光，室温保存7d后可使用，有效期6个月（可按照自己的需求按比例缩小配制）。A.5标准曲线的绘制取8支试管按表A.1加入相关试液后再加入1.5mLDNS试剂，充分摇匀，置沸水浴中反应5min。迅速冷却至室温，用缓冲液（A.4.1）定容至5.0mL，用0号试管试液作为对照，在540nm波长下测其他各试管试液的吸光度。以吸光度为纵坐标，以葡萄糖含量为横坐标绘制标准曲线。表A.1葡萄糖标准溶液的配制01234567缓冲液加入量(μL）葡萄糖标准液加入量(μL）0葡萄糖含量(μg/mL）0A.6样品溶液的制备液体酶：用缓冲液稀释原酶液，控制待测酶液的吸光度落在0.29~0.33之间，所测得的酶活数据相对稳定。固体酶：称取固体酶颗粒1.0g（称准至0.001g）溶于80mL缓冲液（A.4.1）中（稀释倍数小于等于500倍的直接用缓冲液溶解）；室温磁力搅拌10min；用100mL容量瓶定容。6000r/min离心5min，取上清液测试，控制待测酶液的吸光度落在0.29~0.33之间，所测得的酶活数据相对稳定。A.7试验步骤A.7.1取四支试管各加入0.5mLCMC底物，与待测酶液一起于（50±0.2）℃水浴锅中预热5min。A.7.2在第一、二、三支试管中各加入0.5mL待测液，并计时，于（50±0.2）℃水浴锅中反应15min。A.7.3反应完后在四支试管中均加入1.5mL的DNS试剂，取出并摇匀.A.7.4将待测酶液与四支试管一起放在沸水浴中反应5min。A.7.5取出试管后，在第四支试管中补加0.5mL的待测酶液。A.7.6迅速冷却之室温，用缓冲液（A.4.1）定容到5.0mL。以第四支试管试液为对照，在540nm波长条件下测第一、二、三支试管试液的吸光度，吸光度在0.29~0.33之间为宜。若不在此范围，应改变稀释倍数重新测定。或按照图A.1所列步骤分别进行空白和样品试验。QB/TXXXX—XXXXA.8结果计算从标准曲线上