第四章 骨髓其他检查课件

第四章骨髓其他检查编辑制作陈婷梅第四章骨髓其他检查第一节

骨髓组织病理学检查骨髓活体组织检查（骨髓活检），是观察骨髓组织结构、补充骨髓涂片检查的一种方法。受干抽和稀释的影响小，能通晓骨髓组织病理学全貌，对某些血液疾病、骨髓局灶性病变为特征的疾病，如再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征、骨髓纤维化、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、转移瘤、淀粉样变性等，骨髓活检尤为重要。第四章骨髓其他检查骨髓穿刺和骨髓活检比较骨髓穿刺骨髓活检取材方式用骨髓穿刺针抽吸骨髓液，涂片行瑞-姬染色后备检用骨髓活检针取得一条骨髓组织，固定包埋切片后行姬姆萨等染色后备检优点1.操作较简便2.涂片中细胞分布均匀，胞体舒展，染色良好，较易分辨各系原始和幼稚细胞及其微细结构3.易于识别巨型变，巨幼样变和小巨核细胞4.细胞化学染色效果好，结果可量化1.保持造血组织的天然结构，便于判断红髓和脂肪组织的比例2.可全面了解骨髓增生程度，有核细胞密度及其布局3.可避免骨髓稀释4.对骨髓纤维化、毛细胞白血病有确诊作用，能提示骨髓增生异常综合征向急性粒细胞白血病的转化，对“干抽”有鉴别作用缺点1.造血组织的天然结构遭到破坏，无法判断红髓与黄髓的比例2.若抽吸过猛，易致骨髓液稀释3.若遇“干抽”不能分析1.有核细胞群集，不易区分原始和幼稚细胞的类型2.难以观察细胞内的微细结构3.细胞化学染色结果难以量化第四章骨髓其他检查一、骨髓活检的适应证第四章骨髓其他检查二、骨髓活检标本的制备和观察采用髂后上棘，皮肤经消毒、采用髂后上棘，皮肤经消毒局麻后，将套上针芯的的骨髓活检针加压刺过皮肤，进入骨皮质，感觉阻力减弱再推进1cm左右，抽出针芯，骨髓抽吸涂片；套上活动套管，插回针芯，再将活检针推进2~3cm，针管顺时针和逆时针各旋转3~5圈，使针管内的骨髓组织与周围脱离；拔出活检针，取出活动套管，插入针芯推出骨髓组织，标本立即放入Bouin固定液后送检。取材主要制备程序包括固定、脱水、塑料包埋以及切片。骨髓活组织切片的染色除可采用常规的Giemsa染色、MGG染色、HGF染色以及HE染色外，还可进行一些特殊染色。标本制备和染色红系在骨髓组织中成簇存在，位于小梁间区静脉窦四周，其中央有一至两个巨噬细胞。原始粒细胞和早幼粒细胞一般单个散在分布，分布于骨小梁旁区；巨核细胞位于小梁间区，在血窦附近单个存在，不发生群集现象。淋巴细胞、浆细胞、单核细胞常定位于造血组织的小动脉和小静脉四周。血细胞定位第四章骨髓其他检查三、骨髓活检切片的检查（一）切片与涂片的血细胞形态学比较由于半薄切片仅切下胞体的某一切面，在显微镜下观察骨髓切片上的单个血细胞形态时，其形态呈现与骨髓涂片不同的特点（二）骨髓活检切片的观察内容骨髓组织活检切片的观察内容主要包括骨小梁—骨髓造血组织—脂肪组织的全面观察、造血细胞的形态与定位、间质结构的观察，切片内有无人为所致的骨髓形态改变以及外来恶性细胞等。（三）骨髓活检切片观察的结论1.活检切片内出现显著的特征性改变，且与骨髓涂片完全吻合，即可得出明确的诊断性意见。2.切片见非特异性组织形态改变，而不能作肯定或否定意见，可描述组织形态学，提出补充检查建议。3.切片活组织像在正常范围内，可报告为“正常或大致正常的骨髓活组织像”。第四章骨髓其他检查四、常见血液系统疾病的骨髓活检特点（一）骨髓活检的临床价值1.全面了解骨髓的组织结构、间质成分的组织病理学全貌，准确判断骨髓增生程度、粒／红比例及骨髓内铁储存情况，对于某些血液病有明确的诊断价值。2.发现骨髓穿刺涂片检查不易发现的病理变化，对某些仅能导致骨髓局部病变为特征的疾病如骨髓纤维化、骨髓坏死、淀粉样变性、肉芽肿病及多发性骨髓瘤等，骨髓活检尤为重要。。3.为明确“干抽”原因，探讨其是否为骨髓增生低下、骨髓纤维组织增生、或髓腔因增生极度活跃引起“塞实”所致，骨髓活检具有重要意义。4．对各种急、慢性白血病和骨髓增生异常综合征的确诊和预后判断有重要价值，对骨髓转移癌、恶性组织细胞病、戈谢病和尼曼一匹克病等的诊断阳性率比骨髓涂片高。5．协助诊断慢性骨髓增生性疾病，如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症等。第四章骨髓其他检查（二）常见血液系统疾病的骨髓活检特点1.红细胞系增生异常骨髓活检标本中粒/红比值小于1.5∶1，且细胞增生明显活跃，即为红细胞系增生活跃。2.粒细胞系增生异常如果粒/红比值升高，而且骨髓切片中原始细胞占优势，以急性白血病最为常见。3.淋巴细胞系增生异常骨髓活检对恶性淋巴瘤分型以及是否累及骨髓是必不可少的，霍奇金病骨髓浸润活检可发现R-S细胞；非霍奇金淋巴瘤的瘤细胞多数呈灶状分布，浸润病变区均见纤维增生，即合并骨髓纤维化，较典型癌细胞可分为四种类型。4.其他造血系统疾病（1）骨髓增生异常综合征（MDS）（2）多发性骨髓瘤（3）恶性组织细胞病（4）骨髓纤维化第四章骨髓其他检查第二节

造血干/祖细胞体外半固体培养第四章骨髓其他检查粒-单核系祖细胞培养

体外经过分离获得的单个造血干/祖细胞在造血生长因子作用下，在半固体琼脂上形成由不同成熟阶段的粒细胞和单核细胞组成的细胞集落，称为粒-单系集落形成单位（CFU-GM）。第四章骨髓其他检查红系祖细胞培养

红系祖细胞培养包括早期红系祖细胞（BFU-E）和晚期红系祖细胞（CFU-E）。在培养体系中以甲基纤维素为支持物，在适量HGFs刺激下，使骨髓中造血干/祖细胞形成BFU-E和CFU-E，CFU-E的集落培养所用HGFs主要为EPO，BFU-E的集落培养主要联合应用EPO、IL-3。第四章骨髓其他检查巨核系祖细胞培养

巨核系祖细胞（CFU-Meg，BFU-Meg）包括幼稚巨核系祖细胞的爆式集落形成单位（BFU-MK）和成熟巨核系祖细胞的集落形成单位（CFU