专题21细胞工程和胚胎工程-2023年高考生物一模试题分项汇编

专题21细胞工程和胚胎工程(2023届安徽省黄山市高三一模理综)11.新冠病毒是RNA病毒，病毒的S蛋白（刺突蛋白）是决定病毒入侵易感细胞的关键蛋白，可与宿主细胞的受体结合。下面为两种针对新冠病毒的疫苗研发方法，回答下列问题。方法技术路线基因工程疫苗S蛋白基因→基因表达载体→大肠杆菌→S蛋白→人体腺病毒载体重组疫苗S蛋白基因→腺病毒基因表达载体→人体（1）基因表达载体的组成除了S蛋白基因外还必须有标记基因、启动子、___________（答出2点）等。基因表达载体的构建有利于目的基因完成转化，转化是指___________。（2）基因工程疫苗制备过程中需要分离和提纯大肠杆菌，通常情况下，我们需要对培养基进行___________灭菌，当采用平板划线法分离大肠杆菌时，第二次及以后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是___________。（3）除研制疫苗外，还可对新冠病毒进行免疫学检测以阻断传播途径，其过程是：①向小鼠体内注射新冠病毒S蛋白后分离产生的B淋巴细胞，并与小鼠的骨髓瘤细胞融合，常用的融合方法有____________（答出1种）；再多次筛选、检测，最终获得所需杂交瘤细胞，该种细胞的特点是___________。②获得的杂交瘤细胞可在体外条件下做大规模培养，或注射到___________内增殖，获得大量可与S蛋白特异性结合的单克隆抗体作为诊断试剂。【答案】（1）①.终止子、复制原点②.目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程（2）①.高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）②.使微生物的数目随着划线次数的增加而减少（保证接种环上的细菌来自上一次划线的末端）（3）①.PEG融合法（灭活病毒诱导融合）②.既能迅速大量繁殖，又能产生与S蛋白特异性结合的专一抗体③.小鼠腹腔【解析】【分析】单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。【小问1详解】基因表达载体包括复制原点、启动子、终止子、标记基因、目的基因等。基因表达载体的构建有利于目的基因完成转化，转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。【小问2详解】为防止杂菌污染，对培养基往往要进行高压蒸汽灭菌；采用平板划线法分离大肠杆菌时，第二次及以后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是使微生物的数目随着划线次数的增加而减少（保证接种环上的细菌来自上一次划线的末端）。【小问3详解】①诱导动物细胞融合的方法有电融合法、聚乙二醇、灭活病毒等诱导；经过多次筛选、检测，最终获得的所需杂交瘤细胞既能迅速大量繁殖，又能产生与S蛋白特异性结合的专一抗体。②杂交瘤细胞可在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。(2023届广东省惠州市高三第三次调研考试)20.我国在抗击新冠肺炎领域取得了举世瞩目的成就，三类具有自主知识产权的疫苗都有较好的安全性和免疫源性（能引起免疫应答的性能），阅读下面材料回答问题：疫苗1：灭活疫苗（Vero细胞）。是将用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）培养扩增后的活病毒通过物理和化学的方法杀灭以后，经过系列纯化技术制备的疫苗。疫苗2：复制缺陷型腺病毒载体疫苗。将新冠病毒的S蛋白基因整合到复制缺陷型腺病毒DNA中，形成能表达S蛋白的重组复制缺陷型腺病毒，作为疫苗注射到健康人体内。疫苗3：重组新型冠状病毒疫苗（CHO细胞）。将新冠病毒S蛋白基因重组到中国仓鼠卵巢细胞（CHO）基因组内，经CHO细胞表达形成S蛋白作为疫苗。（1）疫苗1的免疫源性要稍高于另外两种疫苗的原因是_____。从疫苗生产过程的角度看：疫苗1的生产车间的安全等级高于另外两种疫苗的原因是_____。（2）从生物工程的角度看，生产过程中需要用到基因工程技术的是？_____（用“疫苗1/疫苗2/疫苗3”作答）﹔都要用到细胞培养技术的是：_____（用“疫苗1/疫苗2/疫苗3”作答）；（3）培养抗原表达细胞系（Vero细胞或CHO细胞）时，培养基中要加入糖类、氨基酸等有机物，作用是_____；培养箱中CO2浓度为5%。作用是_____。在培养过程中，Vero细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，长成致密的单层，这种现象称为_____；若需要进行传代培养，需要用_____酶等处理后再收集细胞制成新的细胞悬液。【答案】（1）①.它的抗原成分是灭活的全病毒②.用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）培养扩增的是活病毒，有更易传染的风险（2）①.疫苗2和疫苗3②.疫苗1、疫苗2和疫苗3（3）①.为细胞提供营养和能源物质②.维持培养液的pH③.接触抑制④.胰蛋白##胶原蛋白【解析】【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）动物细胞培养条件：气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【小问1详解】疫苗1是将活病毒通过物理和化学的方法杀灭以后，经过系列纯化技术制备的疫苗，它的抗原成分是灭活的全病毒，疫苗2和疫苗3利用的只是新冠病毒的S蛋白的免疫源性，因此疫苗1的免疫源性要稍高于另外两种疫苗。用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）培养扩增的是活病毒，有更易传染的风险，因此疫苗1的生产车间的安全等级高于另外两种疫苗。【小问2详解】疫苗2和3都是将新冠病毒的S蛋白基因重组到某一细胞中，用到基因工程技术。疫苗1用Vero细胞（非洲绿猴肾细胞）培养扩增后的活病毒、疫苗2中构建能表达S蛋白的重组复制缺陷型腺病毒后需要用活细胞培养得到大量的疫苗，疫苗3将新冠病毒S蛋白基因重组卵巢细胞，因此三者用到细胞培养技术。【小问3详解】培养抗原表达细胞系（Vero细胞或CHO细胞）时，培养基中要加入糖类、氨基酸等有机物，作用是为细胞提供营养和能源物质；培养箱中CO2浓度为5%。作用是维持培养液的pH。在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，长成致密的单层，这种现象称为细胞的接触抑制。传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，然后收集细胞制成新的细胞悬液分瓶继续培养，让细胞继续增殖。(2023届河南省安阳市高三一模理综)12.中国科学家团队成功构建了世界首例人—猴嵌合胚胎，即同时具有人和猴细胞来源的胚胎，为解决异种嵌合效率低下等问题提供新的思路，对器官再生研究具有指导意义。如图是嵌合胚胎培育的部分过程，请回答下列问题：（1）嵌合胚胎早期发育所依据的原理是___________。图中①为扩展潜能干细胞（EPSCs），其功能与胚胎干细胞相似，都具有___________性。培养EPSCs时，需要定期更换培养液，目的是___________。（2）图中②时期胚胎发育是在最外层的____________内进行的，沿其内壁扩展和排列的、个体较小的滋养层细胞，它们将来发育成___________。（3）研究嵌合胚胎的目的是培养与人类似的同种器官，以缓解器官移植供体不足的困境。目前器官移植中的最大技术难题是___________。（4）研究人员将图中嵌合胚胎在体外进行培养时，培养液中除一些无机盐和有机盐类外，还需添加氨基酸、___________（至少答出3种）等物质。此时科研人员观察到了嵌合现象，但科研人员并未进行体内胚胎移植实验，这是为了规避人们最担心的类似于克隆人的___________问题。【答案】（1）①.细胞分裂和分化

②.全能③.以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害（2）①.透明带②.胎膜和胎盘（3）存在免疫排斥（4）①.核苷酸、维生素、激素、血清②.伦理争议【解析】【分析】胚胎早期发育过程：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚。囊胚中滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，内细胞团细胞将来发育成胎儿的各种组织。胚胎干细胞存在于早期胚胎，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能，具有全能性。动物细胞培养的条件：营养（+血清），无菌、无毒的环境（定期更换），温度、pH和渗透压，气体环境（95%空气和5%CO2）。【小问1详解】胚胎早期发育过程：受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚。囊胚期细胞开始分化，囊胚之前细胞未发生分化。细胞分裂方式为有丝分裂。所以嵌合胚胎早期发育所依据的原理是细胞分裂和分化；胚胎干细胞存在于早期胚胎，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能，具有全能性，扩展潜能干细胞（EPSCs），其功能与胚胎干细胞相似，也具有全能性；培养EPSCs时，需要定期更换培养液，目的是以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害；【小问2详解】图②时期是囊胚器，最外侧是透明带，内壁扩展和排列的、个体较小的是滋养层细胞，聚集在一端的细胞形成内细胞团。滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，内细胞团细胞将来发育成胎儿的各种组织；【小问3详解】在器官移植中要尽可能减少免疫排斥反应，才能保证移植的器官能执行正常的功能；【小问4详解】早期胚胎培养用的成分一般都比较复杂，培养液中除含有一些无机盐外，还需要维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等物质。克隆人有悖于伦理道德，更何况这种嵌合胚胎。(2023届黑龙江省大庆市高三第一次教学质量检测)25.研究发现，无机盐离子的特殊配比可促使犬早期胚胎的基因组激活，而添加新鲜的维生素、组织液提取物等物质则可帮助犬早期胚胎维持正常的形态和细胞分化。下列有关胚胎工程的叙述，错误的是（）A.可对犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵来获得多个犬卵母细胞B.可选择桑葚胚、囊胚和原肠胚时期的胚胎进行胚胎分割以获得多个胚胎C.早期胚胎的体外培养液中还要注意气体条件且应该加入血清等成分D.囊胚期胚胎细胞开始分化出现了内细胞团和滋养层细胞【答案】B【解析】【分析】胚胎的早期培养：（1）培养目的：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。（2）培养液成分：除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。（3）当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存。不同动物胚胎移植的时间不同（牛、羊一般要培育到桑葚胚或囊胚阶段才能进行移植，小鼠、家兔等实验动物可在更早的阶段移植，人的体外受精胚胎可在4个细胞阶段移植）。【详解】A、为获得多个犬卵母细胞，可对犬注射一定量的促性腺激素使其超数排卵，A正确；B、进行胚胎分割时，应选择囊胚或之前的桑葚胚进行，B错误；C、早期胚胎的体外培养液中还应该加入有机盐和血清等成分并需控制好温度和气体条件，C正确；D、早期胚胎包括桑葚胚、囊胚和原肠胚等，囊胚期开始出现细胞分化，出现了内细胞团和滋养层细胞，D正确。故选B。(2023届黑龙江省大庆市高三第一次教学质量检测)33.人们可以运用植物体细胞杂交技术获得抗线虫病的杂种萝卜一油菜植株，已知萝卜具有抗线虫病基因，而油菜容易被胞囊线虫侵染造成减产。科研人员以萝卜和油菜为亲本进行体细胞杂交，以获得抗线虫病的杂种植株，具体操作流程如图所示。下列说法错误的是（）A.过程③中施加的生长素的含量要高于细胞分裂素的B.对杂种植株接种胞囊线虫进行个体水平上的鉴定C.可通过观察是否含有叶绿体来对融合细胞进行初步筛选D.过程④中需要进行适当的光照以促进细胞中叶绿素的合成【答案】A【解析】【分析】题图分析，图中①过程为酶解法去除细胞壁获得原生质体的过程，②原生质体融合成为杂种细胞的过程，③是杂种细胞脱分化形成愈伤组织的过程，④过程表示再分化成为杂种植株的过程。【详解】A、过程③中施加的生长素的和细胞分裂素比例适中，可以诱导产生愈伤组织，A错误；B、对杂种植株接种胞囊线虫进行个体水平上的鉴定，进而检测杂种植株是否达到预期，B正确；C、由于用于融合的叶肉细胞中有叶绿体，而根细胞中没有叶绿体，因此，可通过观察是否含有叶绿体来对融合细胞进行初步筛选，C正确；D、过程④为脱分化形成再生植株过程，该过程中需要进行适当的光照以促进细胞中叶绿素的合成，D正确。故选A。(2023届黑龙江省大庆市高三第一次教学质量检测)34.科研人员制备能产生双抗体的双杂交瘤细胞的实验过程如下：先制备两种杂交瘤细胞，每种杂交瘤细胞产生的抗体与抗原的结合情况如图1、2所示；然后再让两种杂交瘤细胞融合，经过筛选最终得到可以产生双抗体（同时抗a、β两种抗原，如图3所示）的双杂交瘤细胞。抗体由两条重链和两条轻链组成，重链和轻链均分为恒定区和可变区，两条重链依赖于A1或B1进行组装（A1与B1相同），重链与轻链的组装依赖于恒定区的A2、a或B2、b（a与b相同）。下列叙述错误的是（）A.制备产生如图1所示单抗的杂交瘤细胞时需要经过两次筛选且目的不同B.双杂交瘤细胞的筛选需要进行克隆化培养和抗体检测C.图3中的1、2、3、4、5、6可分别对应A2、B2、a、b、a、βD.双杂交瘤细胞产生的抗体可与α、β两种抗原同时结合，说明该抗体不具备特异性【答案】D【解析】【分析】单克隆抗体的制备过程：首先用特定抗原注射小鼠体内，使其发生免疫，小鼠体内产生具有免疫能力的B淋巴细胞，利用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，在经过两次筛选：①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群；两次抗体检测：专一抗体检验阳性，获得能产生特异性抗体、又能大量增殖杂交瘤细胞，最后从培养液或小鼠腹水中提取单克隆抗体。【详解】A、在制备杂交瘤细胞的过程中需要经过两次筛选，第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选的目的是筛选产生专一性抗体的杂交瘤细胞，A正确；B、根据单克隆抗体的制备过程可知：杂交瘤细胞的筛选均需要进行克隆化培养和抗体检测，经过多次筛选可以获得足够数量的能够分泌抗体的细胞，B正确；C、一种抗体能同时与抗原α与β结合称为双特异性抗体，由于图3抗体是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体，可变区的重链1和2位置存在A2或B2，若1是A2，则2为B2，根据图1信息判断：a与A2在可变区并结合α，图2信息判断：b与B2在可变区并结合β，而图3中3与1（A2）在可变区并结合5，故3对应a，5对应α，同时4与2（B2）在可变区并结合6，故4对应b，6对应β，因此1、2、3、4、5、6分别对应A2、B2、a、b、a、β，C正确；D、根据题意可知：图3中是双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体，可与两种抗原同时发生特异性结合，D错误。故选D。(2023届湖北省高三高考仿真模拟测试)18.如图所示，将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子，在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体，简称双抗。下列说法错误的是（）A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞【答案】D【解析】【分析】单克隆抗体的制备过程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确；B、根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确；C、在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成两种抗体，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C正确；D、同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。故选D。(2023届湖北省高三高考适应性模拟测试（三）)18.下图为单克隆抗体制备过程的示意图。下列相关叙述，正确的是（）A.每个脾B淋巴细胞可产生多种抗体B.细胞融合可使用灭活病毒，灭活病毒的抗原结构依然存在C.细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上相同D.克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象【答案】B【解析】【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞，诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、脾B淋巴细胞只能产生针对相应抗原的抗体，每个脾B淋巴细胞只能产生一种抗体，A错误；B、灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，故灭活病毒的抗原结构依然存在，B正确；C、细胞筛选时获得杂交瘤细胞需要在选择培养基上筛选，细胞融合时所用的培养液需要再加入诱导剂，两者的成分上有差异，C正确；D、杂交瘤细胞具有无限增殖的特点，无接触抑制现象，因此该细胞克隆化培养过程中不会出现接触抑制，D错误。故选B。(2023届湖南省岳阳市华容县高三新高考适应性考试)21.如图是克隆猴的培育过程。回答下列问题：（1）图中培育克隆猴应用的技术手猴A胚胎成段为_____，猴B提供的卵母细胞在体外培养到_____期，b过程为_____，a过程为将_____注入去核的卵母细胞，c过程是通过电融合法使两细胞融合，形成M，即_____。（2）体细胞与受精卵相比，细胞核中的DNA基本相同，但表观遗传修饰不同，因此基因表达也有所差异，于是体细胞细胞核转移入去核卵母细胞后，无法正常“指挥”生长发育过程。研究人员将组蛋白去甲基化酶的mRNA注入了图中M细胞，可使胚胎的发育率和妊娠率提高，推测原因是_____。（3）科研人员欲由细胞M发育成的早期胚胎得到多个基因相同的克隆猴，可采取_____技术，这种技术在对囊胚进行操作时需注意_____。【答案】（1）①.动物体细胞核移植技术##动物细胞培养、胚胎移植②.MⅡ③.显微操作去核④.供体细胞⑤.重构胚（2）组蛋白去甲基化酶的mRNA注入M细胞后，可以形成去甲基化酶，解除与胚胎发育和妊娠有关基因的甲基化，使胚胎的发育率和妊娠率提高（3）①.胚胎分割和胚胎移植②.将内细胞团均等分割【解析】【分析】1、细胞核移植概念：将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。2、目前核移植技术中普遍使用的去核方法是显微直接去除法还有人采用密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法。【小问1详解】图中培育克隆猴应用的技术手段为动物体细胞核移植技术（或动物细胞培养、胚胎移植），猴B提供的卵母细胞在体外培养到MⅡ期，b过程为显微操作去核，a过程为将供体细胞注入去核的卵母细胞，c过程是通过电融合法使两细胞融合，形成M，即重构胚。【小问2详解】体细胞与受精卵相比，细胞核中的DNA基本相同，但表观遗传修饰不同，因此基因表达也有所差异，于是体细胞细胞核转移入去核卵母细胞后，无法正常“指挥”生长发育过程。研究人员将组蛋白去甲基化酶的mRNA注入了图中M细胞，可使胚胎的发育率和妊娠率提高，推测原因是组蛋白去甲基化酶的mRNA注入M细胞后，可以形成去甲基化酶，解除与胚胎发育和妊娠有关基因的甲基化，使胚胎的发育率和妊娠率提高。【小问3详解】科研人员欲由细胞M发育成的早期胚胎得到多个基因相同的克隆猴，可采取胚胎分割和胚胎移植技术。胚胎分割要求将内细胞团均等分割。(2023届湖南省株洲市高三教学质量统一检测（一）)12.科研人员用电融合的方法诱导母羊的乳腺上皮细胞与另一只羊的去核卵细胞融合，然后将重构胚移植到到代孕母羊的体内，最终培育出了克隆羊多莉，下表是科学家获得的部分实验数据，下列叙述错误的是（）实验组序号①②核供体细胞277发育到第9天的早期胚胎细胞融合成功细胞数29385早期发育成功胚胎数90移植后成功怀孕母羊数/代孕母羊数1/1314/27出生并成活羔羊数1（多莉）4A.两组羔羊的性状基本与核供体母羊相同B.本实验涉及到细胞培养、核移植和胚胎移植技术C.②组比①组成功率高，可能因为胚胎细胞分化程度低D.①移植成功率较低可能是代孕母羊对胚胎产生了免疫排斥反应【答案】D【解析】【分析】胚胎移植的基本程序：对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛进行超数排卵处理）；配种或人工授精；对胚胎的收集、检查、培养或保存；对胚胎进行移植；移植后的检查。【详解】A、由于遗传物质主要在细胞核中，所以两组羔羊性状主要与核供体母羊相同，A正确；B、本实验涉及到细胞培养、核移植和胚胎移植技术，B正确；C、胚胎细胞分化程度低，全能性强，②组比①组成功率高，可能因为胚胎细胞分化程度低，C正确；D、代孕母羊一般不会对移植来的胚胎产生免疫排斥反应，D错误。故选D。(2023届吉林省白山市高三二模联考理综)11.犬细小病毒（CPV）主要感染幼犬，传染性极强，死亡率也高。利用小鼠制备抗CPV单克隆抗体的基·本流程如图所示。回答下列问题：（1）制备单克隆抗体依赖的生物学技术有__________和__________。步骤①中，用灭活的CPV免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是___________。（2）经过步骤②后获得的是多种类型的杂交细胞，原因是__________。对杂交细胞用特定的选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞，对杂交瘤细胞进行__________，经过多次筛选才能获得足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞。（3）体外培养杂交瘤细胞后从培养液中提取到抗CPV单克隆抗体。杂交瘤细胞的培养液中有各种营养物质，还需要添加__________以补充细胞生长所需的未知营养物质。（4）对疑似感染CPV的幼犬进行确诊时，可用获得的抗CPV单克隆抗体进行___________检测。【答案】（1）①.动物细胞培养②.动物细胞融合③.加强免疫，刺激小鼠机体产生更多已免疫的B淋巴细胞（2）①.细胞融合是随机的②.克隆化培养、抗体检测（3）血清等—些天然成分（4）抗原—抗体杂交【解析】【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【小问1详解】制备单克隆抗体依赖的生物技术有动物细胞培养和动物细胞融合（诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合）等技术；步骤①中，用灭活的CPV免疫小鼠需要在一定时间内间隔注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多已免疫的B淋巴细胞。【小问2详解】步骤②是诱导细胞融合，由于该过程中细胞融合是随机的，故可能得到多种类型的杂交细胞，如可能得到B细胞B细胞型、骨髓瘤骨髓瘤细胞型等；最终筛选得到足够数量的能分泌抗CPV抗体的细胞需要经过两次筛选过程，分别是选择培养基培养（第一次筛选）和克隆化培养、抗体检测（利用抗原抗体的特异性结合原理，出现阳性反应的即可）。【小问3详解】为补充细胞生长所需的未知营养物质和防止杂菌污染，需要在培养液中添加血清等—些天然成分，因血清含有细胞所必需的物质，可补充细胞生长所需的未知营养物质。。【小问4详解】对疑似感染CPV的幼犬进行确诊时，可用获得的抗CPV单克隆抗体进行抗原—抗体杂交检测，若出现杂交带，则证明感染。(2023届江苏省南京市、盐城市高三第一次模拟考试)12.下列有关胚胎工程的叙述，正确的是（）A.移入子宫的外来胚胎，在受体体内会发生免疫排斥反应B.自然条件下，哺乳动物的精子获能发生在睾丸的曲细精管内C.受精过程中，透明带处会出现阻止多精入卵的生理反应D.对桑椹胚进行胚胎分割移植时，应将内细胞团均等分割【答案】C【解析】【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。【详解】A、受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是胚胎在受体内能够存活的生理基础，A错误；B、哺乳动物受精前，精子必须在雌性动物生殖道发生相应的生理变化后，才能获得受精能力，该过程被称为精子获能，故精子获能的场所是雌性动物生殖道，B错误；C、受精作用过程中，透明带反应是阻止多精入卵的第一道屏障，卵黄膜反应是阻止多精入卵的第二道屏障，C正确；D、胚胎分割的对象是桑椹胚或囊胚，在对囊胚分割时，应注意将内细胞团均等分割，D错误。故选C。(2023届江苏省南京市、盐城市高三第一次模拟考试)14.下图是生产抗新冠病毒的单克隆抗体的过程。下列有关叙述正确的是（）A.②过程经细胞融合，获得的杂交瘤细胞只有一种B.③过程经过选择培养后，只有自身融合的细胞死亡C.④过程进行抗体检测，若结果为阴性，则应重新实验D.为保证获得足量相应的B淋巴细胞，①过程应给小鼠注射大量的新冠病毒【答案】C【解析】【分析】题图分析：图示是生产抗新冠病毒的单克隆抗体过程，其中①表示给小鼠注射特定抗原，②表示细胞融合，③表示筛选出杂交瘤细胞，④表示专一抗体检测和克隆化培养。【详解】A、②过程融合形成的杂交瘤细胞有多种，A错误；B、③过程经过选择培养后自身融合细胞和未融合的细胞都死亡，B错误；C、④过程若进行专一抗体检测结果为阴性，说明细胞融合失败，需要重新实验，C正确；D、为保证获得相应的B淋巴细胞，①过程应给小鼠注射适量的新冠病毒的相应抗原，D错误。故选C。(2023届江苏省南京市、盐城市高三第一次模拟考试)18.草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列有关叙述错误的是（）A.方法一中，甲常选用茎尖，原因是其几乎未感染病毒B.通常采用95％的酒精和5％次氯酸钠溶液对甲进行消毒处理C.A、C两个过程属于植物组织培养，都经过脱分化和再分化D.判断两种选育方法的效果都需要通过病毒接种实验【答案】BD【解析】【分析】植物组织培养的过程是离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成根，芽，最终发育成植物体。根据题图，方法一是采用植物组织培养的方法培育脱毒苗，方法二是通过基因工程手段获得的抗病毒草莓。【详解】A、植物的分生区附近(如茎尖)的病毒极少，几乎不含病毒，因此对茎尖进行植物组织培养，可以获得脱毒植株，A正确；B、在植物组织培养中，需要用75％的酒精和5％次氯酸钠溶液对甲进行消毒处理，保证植物组织培养的成功，B错误；C、A、C两个过程属于植物组织培养，都经过脱分化形成愈伤组织和再分化形成根芽，最终发育成植株，C正确；D、方法一获得的无病毒苗应根据植株性状检测，不需要接种病毒；方法二获得的抗病毒草莓需要通过接种病毒检测，D错误。故选BD。(2023届辽宁省沈阳市高三教学质量监测（一）)13.植物细胞工程在农业、医药等方面有着广泛的应用，并且取得了显著的社会效益和经济效益。下列相关叙述错误的是（）A.取草莓茎尖进行植物组织培养可获得脱毒苗B.玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株能稳定遗传C.红豆杉细胞经植物细胞培养技术可工厂化生产紫杉醇D.可采用诱变处理烟草愈伤组织的方法来获得烟草抗盐碱突变体【答案】B【解析】【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详解】A、培育脱毒苗时，一般选取茎尖（或芽尖或根尖）作为外植体，因为植物分生区附近（茎尖）病毒极少，甚至无病毒，再利用植物组织培养技术将外植体培育成幼苗，A正确；B、玉米花粉粒经花药离体培养得到的植株属于单倍体，不能稳定遗传，B错误；C、植物细胞工程可用于细胞产物的工厂化生产，红豆杉细胞经植物细胞培养技术可工厂化生产紫杉醇，C正确；D、愈伤组织细胞分裂能力强，易受外界环境条件影响，可采用诱变处理烟草愈伤组织并筛选得到烟草抗盐碱突变体，D正确。故选B。(2023届辽宁省沈阳市高三教学质量监测（一）)20.线粒体脑肌病是由线粒体DNA异常而引起的人类遗传病，“三亲婴儿”技术的应用可避免该遗传病基因传递给子代，培育过程如下图，下列相关叙述正确的是（）捐赠者卵母细胞A.该过程涉及细胞核移植、体外受精、胚胎移植等技术B.卵母细胞在MII期与获能后的精子受精C.“三亲婴儿”胚胎早期发育依次经历了受精卵、囊胚、桑葚胚、原肠胚阶段D.“三亲婴儿”的遗传物质来自于自己的父亲、母亲和捐献者【答案】ABD【解析】【分析】核移植技术指的是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体；用核移植的方法得到的动物称为克隆动物，原理是动物细胞核的全能性；动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。【详解】A、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经移植后产生后代的技术，图示表示三亲婴儿的培育过程，由图可知，三亲婴儿的培育采用了细胞核移植、体外受精、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术等技术，A正确；B、精子与卵子结合前，受精过程若想顺利进行必须满足两个条件：来自父方的精子要进行精子获能；来自母方的卵子要培养至培养至减数第二次分裂中期，B正确；C、胚胎发育的过程为受精卵→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体，所以哺乳动物胚胎的早期发育依次经历桑葚胚、囊胚、原肠胚等不同发育阶段，C错误；D、分析题意可知，“三亲婴儿”的细胞核基因一半来自母亲，一半来自父亲，线粒体基因来自于卵母细胞捐献者，D正确。故选ABD。(2023届山东省临沂市高三一模)15.疫情防控政策调整后，许多居民采用抗原试剂盒进行新冠病毒检测。试剂盒中一种抗PDL1单克隆抗体能与新冠病毒表面的PDL1特异性结合，发挥诊断作用。利用小鼠制备抗PDL1单克隆抗体的流程如图，下列叙述错误的是（）A.制备抗PDL1单克隆抗体使用的B淋巴细胞取自注射过PDL1的小鼠脾脏B.放入96孔板的细胞为多种杂交瘤细胞，均能大量增殖，其中部分还能产生所需抗体C.杂交瘤细胞在培养过程中一般无接触抑制现象，不需要用胰蛋白酶处理D.将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗PDL1单克隆抗体【答案】B【解析】【分析】将抗原注射入小鼠中，获得免疫小鼠，从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞，将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞通过PEG融合成杂交瘤细胞，再用特定的选择培养基培养筛选，最终获得能在体外大量繁殖的同时能产生抗PDL1抗体的细胞。【详解】A、将新冠病毒表面的PDL1注射入小鼠，获得免疫小鼠，免疫小鼠可以产生抗PDL1的抗体，从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞，B淋巴细胞可以产生抗PDL1的抗体，A正确；B、将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后，放入特定的选择培养基筛选，只有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞能大量增殖，其他类型的杂交瘤细胞不能正常生存，B错误；C、杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞的特征，细胞表面缺少粘连蛋白，培养过程中一般无接触抑制现象，不需要用胰蛋白酶处理，C正确；D、图中细胞群a在加入PDL1后呈阳性，说明细胞群a产生了抗抗PDL1的抗体，因此将图中细胞群a在体外大规模培养，可以提取出大量的抗PDL1单克隆抗体，D正确。故选B。(2023届陕西省渭南市高三一模)26.索马甜是从非洲竹芋中提取的一种天然甜味蛋白，具有甜度高、能量低等优点。研究人员利用生物技术，让索马甜基因在微生物和动植物细胞中表达来获得索马甜。回答下列问题：（1）将索马甜基因导入大肠杆菌前，需用______处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞：若要从牛乳汁中获得索马甜，构建基因表达载体时，应将索马甜基因和______重组在一起，并且选用牛的______作为受体细胞。（2）若将目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的____________中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的________上。利用农杆菌转化植物细胞时，______（填“正常”或“受损”）的植物细胞更有利于农杆菌的侵染。（3）导入索马甜基因的植物细胞可通过脱分化形成____________，然后经过再分化形成转基因植株。为避免外源基因通过花粉传播给其他植物造成基因污染，可将外源基因导入植物细胞的______（填“细胞质”或“细胞核”）中。【答案】（1）①.Ca²⁺（或氯化钙）②.乳腺蛋白基因启动子③.受精卵（2）①TDNA片段②.染色体DNA③.受损（3）①.愈伤组织②.细胞质【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因—DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA—分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质—抗原—抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【小问1详解】将目的基因导入大肠杆菌前，要用Ca²⁺（或氯化钙）处理大肠杆菌，使其处于感受态，即可以从周围环境中吸收DNA；启动子是RNA聚合酶识别与结合的位点，用于驱动基因的转录，若要从牛乳汁中获得索马甜，则要使目的基因能够在牛乳腺细胞中表达，故而构建基因表达载体时，要将索马甜基因和乳腺蛋白基因启动子重组在一起；将目的基因导入动物细胞时，常用的受体细胞是受精卵。【小问2详解】农杆菌转化法是将目的基因插到Ti质粒的TDNA上，目的是利用TDNA的可转移的特点将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上，将目的基因通过农杆菌转化法导入植物细胞，先将目的基因插入到农杆菌Ti质粒的TDNA中，然后用该农杆菌感染植物细胞，通过DNA重组将目的基因插入植物细胞的染色体DNA上；用农杆菌感染时，应优先选用受损的植物细胞与含重组质粒的农杆菌共同培养，因为受损的植物细胞释放出大量酚类物质，可吸引农杆菌移向这些细胞。【小问3详解】植物组织培养技包括脱分化和再分化两个基本过程，所以将导入索马甜基因的植物细胞诱导脱分化形成愈伤组织，然后再分化形成转基因植株；花粉发育过程中含有细胞核，基本不含有细胞质，从而可避免花粉扩散时把细胞质中外源基因传播进人其他植物。(2023届四川省成都市高新区高三上学期一诊模拟考试理综)12.体外受精技术又称试管婴儿技术，第一代试管婴儿的操作流程如图所示。请分析回答下列问题：（1）将收集的精子放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是____________________________。（2）超数排卵技术的处理措施是对母体注射______________。从母体内获得的卵母细胞需要培养到______________（填时期）才能与精子结合。（3）受精过程中防止多精入卵的生理反应包括______________反应和______________反应。（4）进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和______________。（5）一般将受精卵培养至______________时期进行胚胎移植。【答案】①.诱导精子获能②.一定的激素（促性腺激素）③.减数第二次分裂中期（MⅡ中期）④.透明带⑤.卵细胞膜⑥.人的血清⑦.桑椹胚或囊胚【解析】【分析】1、对精子进行获能处理：包括培养法和化学诱导法。对于啮齿动物、家兔和猪等动物的精子，一般采用培养法，即将取自附睾的精子，放入人工配置的获能液中，培养一段时间后，精子就可获能；对于牛、羊等家畜的精子常采用化学法，即将精子放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液。2、受精过程为：顶体反应→穿越放射冠→穿越透明带（透明带反应）→卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用）→卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体→雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂开始。3、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体．用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。【详解】（1）将收集的精子放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是使精子获能。（2）对母体注射一定的促性腺激素可促使其超数排卵；从母体内获得的卵母细胞不能立即用于受精，要在体外经人工培养至减数第二次分裂中期才具备受精能力。（3）防止多精入卵的生理反应包括透明带反应和卵细胞膜反应。（4）进行早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还要添加激素和人体血清，模拟体内环境。（5）体外受精得到的受精卵一般需要培养至桑椹胚或囊胚时期才能进行胚胎移植。【点睛】本题考查胚胎工程的相关知识，要求考生识记胚胎工程的相关技术及操作工程，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记层次的考查。(2023届云南省曲靖市高三第一次教学质量检测理综)6.随着三胎政策的落地，辅助生殖技术也逐渐被越来越多的人所熟知，下图是试管婴儿技术的主要操作流程示意图，下列叙述正确的是（）A.采集到的精子和卵母细胞可直接用于体外受精B.在取卵前可让女方口服性激素诱发其超数排卵C.①、②、③分别表示体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植D.胚胎移植前可从内细胞团取样做基因检测进行遗传病的筛查【答案】C【解析】【分析】体外受精联合胚胎移植技术：又称试管婴儿，是指分别将卵子与精子取出后，置于试管内使其受精，再将胚胎前体即受精卵移植回母体子宫内发育成胎儿。试管婴儿是用人工方法让卵子和精子在体外受精并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。【详解】A、采集到的精子和卵母细胞不能直接用于体外受精，参与体外受精的精子要进行获能处理，卵母细胞也需要培养至减Ⅱ中期才能进行受精作用，A错误；B、在取卵前可让女方注射促性腺激素可诱发其超数排卵，B错误；C、图中①、②、③分别表示体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植过程，这是试管婴儿培育过程的三个重要环节，C正确；D、胚胎移植前可从滋养层细胞取样做基因检测进行遗传病的筛查，不能选择内细胞团细胞做检测，因为内细胞团受到破坏会影响胚胎的发育，D错误。故选C。(2023届浙江省十校联盟高三第三次联考)18.下列有关“多莉”羊克隆过程的叙述，错误的是（）A.代孕的母羊一般不会对植入的胚胎产生免疫排斥反应B.重组卵细胞在体外培养过程中需定期用胰酶处理防止其贴壁生长C.“多莉”羊的形成过程与试管动物的培育过程会用到相同的技术D.“多莉”羊有不只一个亲本的遗传物质，表现出两个亲本的某些性状【答案】B【解析】【分析】体细胞核移植：又称体细胞克隆，作为动物细胞工程技术的常用技术手段，即把体细胞移入去核卵母细胞中，使其重组并能发育为新的胚胎，这个胚胎最终发育为动物个体。用核移植方法获得的动物称为克隆动物。【详解】A、受体对移入子宫的外来胚胎一般不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植成功的原因之一，A正确；B、重组卵细胞在培养过程中不需要用胰酶处理成细胞悬液进行传代培养，而是需要用早期胚胎培养技术获得早期胚胎，并在适宜的时期进行胚胎移植，B错误；C、“多莉”羊的形成过程与试管动物的培育过程都会用到胚胎移植技术，C正确；D、克隆羊“多莉”是将白面绵羊的乳腺细胞核移植到黑面绵羊的去核卵细胞中，形成重组细胞后，经过一系列培育过程而成，细胞质中基因来自黑面羊，细胞核中基因来自白面羊，因此“多莉”遗传了两个亲本的性状，D正确。故选B。(2023届浙睿talk原创联盟高三第二次适应性模拟考试)16.我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞(AdESCs)，具体流程如下图。下列有关叙述错误的是（）A.该项技术能突破生殖隔离获得哺乳动物远亲物种的杂种细胞B.AdESCs的获得涉及动物细胞融合技术和早期胚胎培养技术等C.AdESCs的染色体数目与大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞的相同D.图中囊胚中的所有细胞都不存在同源染色体【答案】C【解析】【分析】分析题图：小鼠的卵母细胞体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雌单倍体胚胎干细胞，取大鼠的精子体外培养到囊胚时期，取内细胞团细胞培养成孤雄单倍体胚胎干细胞，两种胚胎融合成异种杂合二倍体胚胎干细胞（AdESCs）。【详解】A、图示是将大鼠、小鼠的单倍体胚胎干细胞诱导融合形成AdESCs，说明该项技术能突破生殖隔离获得哺乳动物远亲物种的杂种细胞，A正确；B、图示将生殖细胞培养为单倍体囊胚利用了早期胚胎培养技术，将大鼠、小鼠的单倍体胚胎干细胞诱导融合形成AdESCs，利用了动物细胞融合技术，B正确；C、AdESCs的染色体是由大鼠、小鼠体细胞中各一半的染色体数组成的，而大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞内的染色体是由大鼠、小鼠的体细胞内染色体数之和构成的，因此AdESCs的染色体数目与大鼠—小鼠体细胞融合的杂种细胞的不相同，C错误；D、根据题意“利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异源二倍体胚胎干细胞(AdESCs)”，说明大鼠、小鼠的单倍体胚胎干细胞都只含一个染色体组，因此图中囊胚中的所有细胞都不存在同源染色体，D正确。故选C。(2023届浙睿talk原创联盟高三第二次适应性模拟考试)18.病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，导致果蔬产量和品质退化。通过植物组织培养技术，利用茎尖可以快速培育出脱毒苗。下列有关叙述正确的是（）A.配制MS固体培养基时，经高压蒸汽灭菌后再调pHB.植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达C.切取的植株茎尖用70%的酒精消毒后，需放在清水中反复清洗D.脱毒苗培育是否成功，最终还需要通过接种病毒进行个体水平的检测【答案】B【解析】【分析】MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。【详解】A、配制MS固体培养基时，先调pH再高压蒸汽灭菌，否则容易引起杂菌污染，A错误；B、病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达，B正确；C、切取的植株茎尖用70%的酒精消毒后，需放在无菌水中反复清洗，C错误；D、通过植物组织培养技术培育脱毒苗，是用茎尖等没有被病毒感染的组织培养植株，可以提高产量，其基因并没有改变，所以不可能有抗病毒的性状，脱毒苗培育是否成功，不需要通过接种病毒进行个体水平的检测，D错误。故选B。(2023届重庆市渝中区重点中学高三二轮复习综合卷)24.为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如下图1所示。（1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自___________________。（2）步骤①常用方法包括_________融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等。（3）步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和_________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是_________________________。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行_____培养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处于__________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是_________与5％二氧化碳的混合气体，二氧化碳的主要作用是________。在使用合成培养基时通常需加入血清，血清的作用是__________________________。（4）单克隆抗体的优点是________________________。单克隆抗体是ADC中的______（填“a”或“b”）部分。（5）研究发现，ADC在患者体内的作用如下图2所示。①单克隆抗体除了运载药物外，还有_____________等作用。②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的溶酶体可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致_____________。③ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，是因为单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，该过程依赖于__________________原理。【答案】（1）人的乳腺癌细胞（2）PEG（3）①.抗体检测②.能大量增殖，又能产生特定抗体③.体外④.无菌无毒⑤.95%的空气⑥.维持培养液的pH⑦.补充未知成分，利于动物细胞生长（人们对细胞所需营养物质尚未全部研究清楚）（4）①.特异性强、灵敏度高、可大量制备②.a（5）①.作为诊断试剂、治疗疾病②.癌细胞凋亡③.抗原抗体特异性结合【解析】【分析】据图分析，抗体上带有药物，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把药物一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡。【小问1详解】为获得治疗乳腺癌的抵抗力抗体，给小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞。【小问2详解】诱导动物细胞融合的方法主要有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法。【小问3详解】获得杂交瘤细胞必须进行③克隆化培养和专一抗体检测，才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生特定抗体；得到的杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养；动物细胞培养的关键是无菌操作，故体外培养时，首先应保证其处于无菌无毒的环境；动物细胞培养的气体条件是95%的空气和5％二氧化碳的混合气体，其中二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH；在动物细胞体外培养过程中，由于血清等含有一些未知的成分，在使用合成培养基时通常需加入血清等天然成分，补充培养基中缺乏的物质，利于细胞生长。【小问4详解】单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备；ADC药物是利用单克隆抗体的导向作用，对应图中的a部分。【小问5详解】①ADC中的单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，让药物作用于乳腺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低乳腺癌治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应，可以有效地治疗疾病；单克隆抗体还可以作为诊断试剂，如检测相关基因有没有表达成蛋白质，或检测抗原的有无，故单克隆抗体除了运载药物外，还有作为诊断试剂、治疗疾病等应用。②由图2可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。③单克隆抗体能与细胞表面的抗原特异性结合，能精确地定位乳腺癌细胞，原理是抗原抗体特异性结合。(安徽省阜阳市20222023学年高三下学期开学考试理综)11.回答下列（一）、（二）小题：（一）甜瓣子是豆瓣酱的重要成分之一，其生产工艺如下图所示：回答下面相关问题：（1）甜瓣子生产技术属于传统发酵技术。传统发酵技术利用的微生物通常来源于_____________。（2）发酵工程与传统发酵技术相比，产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。原因是：通过纯培养来获得微生物纯培养物，常用的方法有______________和______________；进行纯培养时，人们按照微生物对营养物质的不同需求配制培养基；无菌技术围绕防止_____________而展开，主要包括______________。（二）新冠病毒核酸检测一般流程如下图，请回答下面相关的问题：（3）检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取qPCR法。为确保检测的准确性，在设计PCR引物时必须注意：用于PCR的引物长度通常为20～30个核苷酸，过短会导致_____________，过长则会使反应体系有关步骤温度提高，从而超过______________酶的最适温度；引物3'端的碱基最佳选择是_____________（填“G和C”或“A和T”），这样形成的碱基配对比较稳定，引物的“5'”端，可以被修饰，如附加限制酶位点等。（4）常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。获得蛋白疫苗一般需要用到动物细胞培养技术。进行动物细胞培养需要满足的条件有：营养条件；无菌、无毒的环境；适宜的____________；适宜的____________。【答案】（1）原材料中天然存在的微生物或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物（2）①.稀释涂布平板法②.平板划线法③.杂菌污染④.消毒和灭菌（3）①.特异性差②.耐高温的DNA聚合/Taq（酶）③.G和C（4）①.温度、pH（酸碱度）和渗透压②.气体环境【解析】【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【小问1详解】传统发酵技术利用的微生物通常来源于原材料中天然存在的微生物或利用前一次发酵保存下来的发酵物中的微生物。【小问2详解】发酵工程中获得纯培养物的方法有平板划线法（进行连续划线，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落）和稀释涂布平板法（将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落）；无菌技术的关键是防止杂菌污染，主要通过消毒和灭菌实现。【小问3详解】PCR是一项体外扩增DNA的技术，该技术的前提是要有一对引物，引物可以通过碱基互补配对的方式与模板和子代DNA进行配对和连接，有特异性，故设计PCR引物时必须注意：用于PCR的引物长度通常为20～30个核苷酸，过短会导致特异性差；酶作用的发挥需要适宜的温度，引物过长则会使反应体系有关步骤温度提高，从而超过耐高温的DNA聚合/Taq酶的最适温度；由于DNA分子中A和T之间有2个氢键，G和C之间有3个氢键，G和C含量越多，DNA越稳定，故引物3'端的碱基最佳选择是G和C这样形成的碱基配对比较稳定。【小问4详解】进行动物细胞培养需要满足的条件有：营养条件；无菌、无毒的环境；适宜的温度、pH（酸碱度）和渗透压；适宜的气体环境（95%的空气和5%的二氧化碳）。(广东省六校20222023学年高三下学期第四次联考)12.CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能够与巨噬细胞膜上的受体结合，并抑制其吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6—5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步探究其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列分析正确的是（）A.可用灭活病毒诱导②过程两种细胞融合，该方法也适用于植物体细胞的杂交B.③过程可利用CD47糖蛋白筛选出目标杂交瘤细胞C.抗CD47单克隆抗体与巨噬细胞结合，增强其吞噬作用D.在肿瘤细胞培养液中加入抗CD47抗体将抑制肿瘤细胞的增殖【答案】B【解析】【分析】1、单克隆抗体：由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体。具有特异性强、灵敏度高，并可能大量制备的特点。2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。3、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点；②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。【详解】A、植物体细胞杂交过程可用物理或化学法诱导，但不能用灭活的病毒诱导，灭活病毒可诱导动物细胞的融合，A错误；B、筛选步骤的目的就是从未融合的效应B细胞、两个效应B细胞融合形成的细胞、未融合的骨髓瘤细胞、两个骨髓瘤细胞融合形成的细胞及骨髓瘤细胞与效应B细胞融合形成的细胞，所组成的细胞群中筛选出骨髓瘤细胞与效应B细胞融合形成的细胞，可利用CD47糖蛋白特异性结合的功能筛选目标杂交瘤细胞，B正确；C、实验组中加入了单克隆抗体，抗体与肿瘤细胞表面的CD47发生特异性结合，从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，吞噬细胞的吞噬指数显著高于对照组，C错误；D、利用抗CD47抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性，可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞，不能抑制肿瘤细胞的增殖，D错误。故选B。(广东省六校20222023学年高三下学期第四次联考)16.新冠病毒抗原检测试剂盒可以作为核酸检测补充手段，用于特定人群的筛查。它的外观如图A所示，只需要将采集制备的样液滴在点样口（S）处，15分钟后，若T线和C线处同时显示横杠即阳性，要即时隔离、核查就医。它的内部结构如B所示（胶体金法），结合垫，T线和C线处分布有不同种类抗体，其中抗体1、3均能与待测抗原结合，抗体2能与抗体4结合，如果有被聚集沉淀的胶体金则会显色，出现横杠。下列关于该抗原检测试剂盒的推测，不正确的是（）A.使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性B.抗体1和抗体3与待测抗原的结合部位是相同的C.点样后，结合垫的抗体1和2能随样液向右扩散D.与抗原检测相比，核酸检测更适用于早期诊断且准确性高【答案】B【解析】【分析】根据题干可知，T线和C线处同时显示横杠，即阳性，若样品中不含病毒，样品经过结合垫时由于不存在病毒抗原，则不存在抗原抗体特异性结合，显色组分仍会随样品继续向前运动，由于不存在病毒抗原，抗体3不能与待测抗原结合，故在T线不会显色即不显示横杠；在到达C线时，抗体2能与抗体4结合从而显色，C线出现横杠，即为阴性。【详解】A、单克隆抗体的特异性强，灵敏度高，使用单克隆抗体可以保障检测的特异性与灵敏性，A正确；B、抗体1、3均能与待测抗原结合，抗体1位于结合垫位置，先与抗原结合，抗体3位于T线位置，后与抗原结合，抗体1、3均能与待测抗原（同一种抗原）结合，说明抗体1和抗体3与待测抗原的结合部位是不同的，B错误；C、吸水垫在右侧，点样后，结合垫的抗体1和2能随样液向右扩散，C正确；D、抗体检测是利用抗原抗体杂交的原理检测病毒的有无，若病毒表达量低则误差较大，而核酸检测是检测病毒的RNA，通过RNA逆转录形成的DNA，再对其进行荧光定量PCR，检测荧光含量，由于PCR可以对核酸进行扩增，因此即使病毒含量少也能检测出来，适用于病毒早期的检测，且准确率高于抗体检测，D正确。故选B。(广东省清远市清新区部分学校20222023学年高三2月联考)3.常用的核移植方法主要有细胞质内注射法和透明带下注射法两种。前者是用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出注入去核卵母细胞质内；后者是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后促使两个细胞融合，从而具有发育的全能性。我国科学家于2017年底培育出的体细胞克隆猴“中中”和“华华”采用的就是后者。下列有关叙述正确的是（）A.供体细胞注入卵母细胞透明带内后，就可自行进入卵母细胞B.“中中”和“华华”的性状由多个亲本共同决定，属于有性生殖C.相比之下，透明带下注射法对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小D.“中中”和“华华”核DNA均来自供体细胞，质DNA均来自去核卵母细胞【答案】C【解析】【分析】动物核移植是指将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎。在体外将采集到的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期才成熟，可以通过显微操作技术去除卵母细胞的细胞核和第一极体，核移植时，对提供细胞核和细胞质的奶牛不需要进行同期发情处理，使用电刺激等方法可以激活重组细胞使其完成细胞分裂和发育。【详解】A、供体细胞注入卵母细胞透明带内后，还需要电融合法诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，A错误；B、体细胞克隆猴“中中”和“华华”的形成属于无性繁殖，B错误；C、微型注射针将供体细胞的细胞核吸出可能会破坏细胞核，而透明带下注射法是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小，C正确；D、“中中”和“华华”是由透明带下注射法形成的，核DNA均来自供体细胞，但质DNA来自去核卵母细胞和供体细胞，D错误。故选C。(广东省汕头市潮南区20222023学年高三下学期期初摸底考试)21.2017年CART疗法获批可用于癌症治疗。其核心是将具有肿瘤识别功能的CAR基因整合到人体T淋巴细胞，形成能准确定位并杀死癌细胞的CART细胞，请回答下列问题：（1）已知CAR基因的全部序列，科研人员通过________法和PCR技术可获得大量该基因片段。在PCR反应体系中除模板外还需加入____________。（2）治疗基本过程是：分离患者T细胞并构建CAR慢病毒运载体→体外基因转移形成CART细胞→筛选、培养CART细胞→输入患者体内，该疗法属于________治疗，该运载体进入人体细胞的方式通常是________。该方法采用的是自身T细胞，而不用异体T细胞，其原因是_________。（3）为检查CAR基因能否在T细胞中翻译成蛋白质，可采用________法检测，CART细胞培养所需CO2的主要作用是________，传代培养时，贴满瓶壁的细胞需要用________处理后再进行分瓶培养。【答案】（1）①.人工合成（或化学合成）②.引物、耐高温的DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷酸（2）①.体外基因②.胞吞③.避免发生排斥反应（3）①.抗原抗体杂交②.维持培养液的pH③.胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）【解析】【分析】1、获得目的基因通常有两种办法，如果目的基因的序列是已知的，我们可以用化学方法合成目的基因，或者用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因；如果目的基因的核苷酸序列是未知的，我们可以建立一个包括目的基因在内的基因文库，把DNA分子的所有基因都包括在这个基因文库里面。2、基因治疗把正常基因导入病人体内有缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，分为体内基因治疗和体外基因治疗两种类型。先从病人体内获得某种细胞，进行培养，然后在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内，这种方法称为体外基因治疗。直接向人体组织细胞中转移基因的治病方法叫做体内基因治疗。【小问1详解】由于CAR基因的全部序列已知，科研人员可以用人工合成（或化学合成）或者PCR技术获得大量该基因片段。在PCR反应体系中加入作为模板的DNA序列、与计划获得的目的基因双链各一端序列相互补的两个DNA引物、耐高温的DNA聚合酶和4种脱氧核糖核苷酸。【小问2详解】用CART疗法治疗癌症的基本过程可知，该疗法属于体外基因治疗。该运载体进入人体细胞的方式通常是胞吞。该方法采用的是自身T细胞，而不用异体T细胞，其原因是避免发生排斥反应。【小问3详解】为检查CAR基因能否在T细胞中翻译成蛋白质，可从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。CART细胞属于动物细胞，培养所需CO2的主要作用是维持培养液的pH。传代培养时，贴满瓶壁的细胞需要用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理后再进行分瓶培养。(河北省邯郸市部分学校20222023学年高三下学期开学考试)18.研究发现，通过特定的信息分子诱导雌性小鼠的胚胎干细胞逐步分化，最终能产生大量与卵巢体细胞类似的胚胎卵巢体细胞。这些细胞与来自小鼠胚胎干细胞的卵母细胞放在一起共同培养时产生了卵巢卵泡结构，而卵母细胞在该结构中发育成了有活力的卵子。这些体外培养的卵子可以完成受精，将受精后的卵子移植到雌性小鼠子宫内，小鼠繁殖出了健康的后代。下列相关叙述正确的是（）A.动物的胚胎干细胞具有细胞核大，核仁明显和蛋白质合成旺盛等特点B.体外培养胚胎干细胞时，培养液中通常添加动物血清、蔗糖等营养成分C.在分化诱导因子诱导下，小鼠的胚胎干细胞经基因选择性表达而形成卵泡结构D.卵母细胞在卵泡结构中发育成了有活力卵子的过程中其染色体数目会减半【答案】ACD【解析】【分析】动物细胞培养条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：哺乳动物多以36.5℃为宜，最适pH为7.27.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH。）【详解】A、胚胎干细胞是一类具有全能性的细胞，具有细胞核大、核仁明显和蛋白质合成旺盛等特点，A正确；B、体外培养胚胎干细胞时，培养液中通常加入动物血清、葡萄糖等成分，早期胚胎培养的培养液一般不用蔗糖，B错误；C、在分化诱导因子诱导下，小鼠的胚胎干细胞经基因选择性表达而形成卵泡结构，即胚胎干细胞发生了分化，C正确；D、卵母细胞在卵泡结构中进行减数分裂，发育成了有活力的卵子，该过程中由于DNA分子复制一次，细胞连续分裂两次，故染色体数目减半，D正确。故选ACD。(河北省石家庄市部分学校20222023学年高三下学期开学考试)23.血友病主要是由人体缺乏一种合成凝血因子的基因导致的。血友病发病时间和程度与患者血浆中凝血因子Ⅷ的活性水平有关。目前常采用基因疗法治疗血友病，方法如下图所示。回答下列有关问题：（1）血友病的出现是因为X染色体上发生了____________。男性血友病患者的致病基因只能从母亲那里得来，以后只能传给女儿，这种遗传特点在遗传学上叫作____________。（2）凝血因子Ⅷ主要存在于人体的________中。通过上述基因治疗，治愈的女性患者生殖细胞中____________（填“含”或“不含”）致病基因。（3）有一对正常的夫妇生了一个患血友病的儿子，他们希望通过设计试管婴儿的方法生一个健康的孩子。设计试管婴儿的基本程序：首先为女性注射________，实现控制性排卵，然后从卵巢中吸取卵母细胞，培养至减数第二次分裂中期；再让成熟的卵子与获能的精子经受精作用形成受精卵，然后将受精卵移入发育培养液中继续培养