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文档简介
野鲤种质鉴定微卫星法吉林省质量技术监督局发布I1野鲤种质鉴定微卫星法25.121g/L硝酸银(AgNO₃)染色液:将AgNO₃0.5.15提取液:Tris饱和酚+氯仿+异戊醇(25+24+1,体积比)。5.16乙醇溶液:乙醇+水(7+3,体积比)。5.19阴性对照品:30尾建鲤DNA提取物,用TE(pH8.0)溶解至50ng/μL,4℃保存备用。7取样38试验步骤液抽提3次,加入无水乙醇1ml于-20℃过夜沉淀,离心,弃去上清液,再用0℃预冷的乙醇溶液洗8.2DNA测定8.2.1DNA纯度测定分别于260nm波长和280nm波长下测定产物(或产物稀释液)的紫外吸收值。确定A₂go/Azs比值在稀释倍数检测前DNA吸光度值达到允许范围0.1-0.8时所需要稀释的倍数。8.3微卫星引物配制8.4PCR扩增8.4.1PCR反应体系4反应体系正向引物(2pmol/μL)阶段时间1234515μLTEMED,用搅棒混匀溶液(不得有气泡),将制好的胶板斜放45度角,然后用玻棒引流缓缓灌型(如AA,AB,AC或BB等),建立各个群体的等位基因型数据阵列。69鉴定结果评价7引物序列重复
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