2020年输血科标准操作规程SOP文件

输血科标准操作规程SOP文件

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血库标准操作规程(SOP)

-01修订

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目录

第一章血库仪器标准操作规程

第一节Dianafuge标准操作规

程.........................3

第二节80-2离心机标准操作规

程........................3

第三节CU600型电热恒温水箱标准操作程

序...................4

第四节SANYOMBR-107D(H)贮血冰箱标

准操作程序.............4

第五节Haier低温冰箱标准操作程

序.......................4

第六节海尔冰箱标准操作程

序.........................5

第七节医院血库管理软件应用标准操作规

程...................5

第八节SJW系列数码恒温血小板振荡保存箱标

准操作规程............6

第九节WGH-I型数码恒温解冻箱标准

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操....................6

第二章血库项目标准操作规程

第一节血样采集和送检、血型复查及血源组

织标准操作程序...........7

第二节ABO&Rh（D）血型复检标准操作规

程..................8

第三节Rh血型鉴定标准操作程

序.......................9

第四节红细胞血型抗体筛查标准操作规

程...................11

第五节抗人球蛋白试

验...........................14

第六节血液交叉配血试验标准操作规

程....................15

第七节血液出库（发血）标准操作规

程....................17

第八节数据记录及费用收取标准操作规

程...................17

第九节血液申领、入库、核对、贮存标准操

作规程...............19

第十节血液报废（失效）标准操作规

程.....................19

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第十一节输血反应处理标准操作规

程......................20

第十二节实验室消毒和污物处理标准操作规

程..................21

第十三节血库交接班标准操作规

程.......................21

第十四节血液质量管理标准操作规

程......................22

第十五节血库夜班操作规

范..........................23

第十六节应急预案操作规

程..........................24

第十七节贮存式自身输血（PABD）标准操作规

程.................26

第十八节临床医师用血申请操作规

程......................28

第十九节临床护士输血操作规

程........................28

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血库标准操作规程

第一章血库仪器标准操作规程

第一节Dianafuge标准操作规程

一、Dianafuge标准操作规程

（一）Dianafuge开/关机程序

1.开机

把仪器电源开关拨到“I”（开）的位置，开

始正确运行。

2.关机

把仪器电源开关拨到“0”（关）的位置。

（二）Dianafuge标准操作程序

1.Dianafuge离心机应放置于水平台桌上,

电源（压）须匹配。

2.离心机在离心前，先按|OPEN|,此时门

盖打开，放入检测卡（需对称放置），放入完毕

后，用手把门盖按下，然后按ISTARTI，离心机

开始转动，10分钟后自动报警开门盖，取出卡

片，最后把门盖按下关好。

二、Diana-Incubator标准操作规程

（一）Diana-Incubator开/关机程序

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1.开机

①按顺序依次打开电源开关。

②把仪器电源开关拨到“I”（开）的位置，

开始正确运行。

2.关机

把仪器电源开关拨到“0”（关）的位置。

（二）Diana-Incubator标准操作程序

1.Diana-Incubator孵育器应放置于水平台

桌上，电源（压）须匹配。

2.孵育器的使用，用手开启门盖，放入检

测卡，按所需要的保温（其温度自动调节保持为

37℃）时间，顺时针旋转选择所需时间，到时后

会报警提示，开门盖取出卡片后关盖。

第二节CH80-2离心机标准操作规程

一、CH80-2离心机开/关机程序

1.开机

①插上电源

②把电源开关拨到6配位置，开始正确运

行。

2.关机

按依次顺序把仪器电源开关拨到药的位

置。

二、CH80-2离心机标准操作程序

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1.电源开关拨到位置

2.离心试管需等重量对称放置。

3.按时间开关调至所需离心时间。

4.再把转速开关调至所需离心转速。

5.按启动，开始正确运行。

5.停止运转后取出标本。

第三节CU600型电热恒温水箱标准操作规程

CU600型电热恒温水箱标准操作程序

1.在水箱内加入清洁温水至总高度1/2~2/3

处。

2.接通电源，选择工作温度。

说明操作显示备注

设定工按“SET”预先设定温度值显

37.0

作温度键示闪烁

增加设

按“+”数值增加，显示闪

定温度52.5

键烁

值

减少设

按“数值减少，显示闪

定温度30.0

键烁

值

确定工按“SET”25.0新设定温度储存

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作温度I键II后，显示箱内温度

3.水槽进入升温状态，加热指示灯亮。当

箱内温度接近设定温度时，加热指示灯闪烁，到

达设定温度后，控制进入恒温状态。

4.水浴箱工作温度波动范围应控制在±1℃

左右，定期用校正过的温度计进行校正。

5.水浴箱内外应保持清洁，每周定期清洗

更换清水，经常保持水箱内水质干净。

第四节SANYOMBR-107D(H)贮血冰箱标准操作规程

SANYOMBR-107D(H)贮血冰箱标准操作程序

1.接通电源，把电源开关拨到巨迎位置，

开始正确运行。

2.温度控制在2〜6℃范围内，实际运行

温度在4℃左右，工作温度波动范围应控制在土

以内，定期(时)用校正过的温度计进行校

正。

3.温度每天记录四次(晨8时、上午11时,

下午4时、晚8时)的温度，如温度超出正常范

围，警报器会自动报警，须及时进行处理。

4.每月对贮血冰箱内的温度芯片进行检查

并作记录于电脑中，以免查询。

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5.贮血冰箱内外应保持清洁，严禁存放她

物；每周清洗消毒一次，用2%戊二醛溶液或施

康I（1：100）消毒；每月冰箱内空气培养一次。

无霉菌生长或培养皿（90mm）细菌生长菌落

<8CFU/10分钟或<200CFU/M3为合格，结果须

登记在记录本上。

第五节Haier低温冰箱标准操作规程

Haier低温冰箱标准操作程序

1.接通电源，把电源开关拨到我位置，

开始正确运行。

2.温度控制在-30C左右范围内，实际运行

温度波动范围应控制在-32℃±3左右,定期（时）

用校正过的温度计进行校正。

3.温度每天记录四次（晨8时、上午11时,

下午4时、晚8时）的温度，如温度超出正常范

围，警报器会自动报警，须及时进行处理。

4.每月对低温冰箱内的温度芯片进行检查

并作记录于电脑中，以免查询。

5.定期进行化霜清洗消毒。

第六节海尔冰箱标准操作规程

海尔冰箱标准操作程序

1.接通电源，把电源开关拨到京位置，

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开始正确运行。

2.温度控制在2~8℃左右范围内，实际运

行温度波动范围应控制在5℃±2左右，定期

（时）用校正过的温度计进行校正。

3.温度每天记录两次（上午8时，下午4

时）的温度，如温度超出正常范围，须及时进行

处理。

第七节医院血库管理软件应用标准操作规程

医院血库管理软件应用标准操作程序

一、开机

1.接通电源，开主机按下①电源开关，同

时按Ctrl+Alt+Delete----按回车。

2.双击医院用血管理信息系统，输入本人

的工号一一按回车键一一再回车一一医院血库

管理软件系统。

二、血液入库

点击入库——点击新增，输入血卡号、血袋

号、血型、血液类别、血量、采血日期，保存即

可。

三、患者档案建立

在配发血前自先将患者档案输入电脑内。

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点击【患者档案】出现患者登记菜单一一点

击新增进入第二联患者登记菜单，然后输入患

者档案,保存。再输入其它患者档案至输完为止。

如门诊病人，能够输入就诊卡号。

四、交叉配血

带有红细胞的血液均需做血液交叉配血试

验

直接点击配血一一出现配血操作菜单一一选

择入院类型一一输入患者住院号、用激光扫描

仪，扫描血袋号条形码，出现配血菜单，输入配

血方法等（已有默认结果）一一按确定，然后

再扫描第二或第三个助血员的血袋号条形码，-

一按确定一一保存一一取消（不打配血收费单

时）——退出。

五、出库（发血）

直接点击出库，出现发血操作菜单一一选择

入院类型一一输入住院号、用激光扫描仪，扫描

血袋号条形码，再扫描第二或第三个血袋号条形

码，一一点击配血单一一打印血液交叉配合试验

报告单一一点击反馈卡一一打印患者输血不良

反应反馈单一一再保存一一取消（不打收费单

时）——退出。

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血浆、血小板不需要配血的血液发血，直接点

击出库，并按以上进行操作。

第八节SJW系列数码恒温血小板振荡保存箱标准操作规程

SJW系列数码恒温血小板振荡保存箱标准操作规程

1.开机

①打开电源开关。

②把仪器电源开关拨到“I”（开）的位置,

开始正确运行。

③打开门，把振荡箱电源开关拨到“I”（开）

的位置，振荡箱开始振荡运行，并显示

箱内温度22±2℃o

④拉开抽屉，把血小板袋平整放入，注意不

要外露，以免箱体在运行时夹破血小板袋。然后,

关上抽屉和门让其运行。

2.关机

按依次顺序把振荡箱电源开关拨到“0”（关）

的位置，振荡箱停止运行，然后关门，再

把仪器电源开关拨到“0”（关）的位置。

3.消毒

按下消毒键，打开电源开关，系统进入消毒

状态（设为20分钟），消毒完毕后，先关消毒键,

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再关闭电源开关。

第九节WGH-I型数码恒温解冻箱标准操作规程

WGH-I型数码恒温解冻箱标准操作规程

1.开机

①水箱内注入清水；

②按顺序依次打开电源开关。

2.融化周期

①装载：将冷冻血浆袋套进外包装袋，挂到

篮架上；

②编程：设定融化周期时间，按下启动钮；

③振荡：挂篮降入水箱中，开始振荡周期；

④上升：融化周期结束后，挂篮自动升出水

面。

3.清洁

每周定期清洗更换清水，经常保持水箱内水

质干净。

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第二章血库项目标准操作规程

第一节血样采集和送检、标本核收、血型复查及血源组织标准操作程序

一、血样采集和送检与输血申请单核收标准操作程序

采集血样

1.采血护士:采集配血血样，护士要求必须

有初级以上护士职称，实习/进修护士不得单独

进行。

2.明确病人用血申请,核对病人信息:姓名、

性别、年龄、住院号、科别、床号等信息。

3,准备采血材料，并明确以下内容。

①正确的标本：取材正确；

②正确的标本量：血型复查（血交叉）标本

抽取3ml；

③正确的标识：条形码号标签或手工书写标

签，但必须明确标明姓名、科室床号、住院号。

4.采集血样过程：

①确保在采集血样时，床边正确的核对患

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者；

②正确地给血样试管贴标签：血样采集后，

在床边给血样贴标签，而不应该事先贴好标签或

到护士站后贴标签；

③第一次输血，应同时采集输血前五项检测

血样，并记录抽取时间入病历。

5.采血样完成后，再次核对血样标识与申请

单信息，无误后送输血科，并进行护理记录。

6.质量标准要求：

①正确完整的血样标识，与申请单一致；

②正确地核对与采血过程；

③标本无溶血、不能在输液处采集血样；

④正确地记录。

送收血样

1.送血样人员必须是医护人员，严禁患者

家属送血样。

2.血样送到输血科后应由送血人员和输血

科人员一起核对以下信息：

①血样信息与申请单信息是否一致；

②核对查看申请单的完整性（必须有血常规

+血型结果）、血样标识的完整性（必须内容齐全、

文字清楚）；

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③血样标本量、有无溶血；

④双方核对，无误后签字交接。

3.有以下情况，输血科拒绝收血样：

①血样标识不完整；

②血样无标识；

③标本量不足、血样质量有问题；

④无输血申请单或申请单上无血常规+血型的

结果。

4.质量标准要求

①血样信息完整无误；

②血样质量符合要求及采集量正确。

血型复查核收

1.核对:按要求核对输血申请单与血标本上

的全部内容，并在标本接收簿中作记录；

2.核收：在检验之星中，进行血型复查医嘱

的核收；

3.血型复检及不完全抗体测定（具体

操作详见有关章节）；

4.核对输血申请单、血标本、病历中

的姓名、住院号、血型（如与原始血型不相

符时，必须重新抽取病人标本检测），正确

无误后，报告其血型复查和抗筛结果，作记

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录;

5.输血申请单按血型类别在文件夹中

放置；血型复查后的标本，按先后次序放在

试管架中。

二、血源组织

1.对临床医师申请用血种类、用血量

进行了解核实，提前备好相应血源；

3.血库存量组织,要求每日存量必须保持在

周用血量的1/2；

当发生重大事件急需大量血液时，按照急诊

用血应急预案执行

3.特殊血液组织

①紧急用血时，血库人员在接到特殊用血申

请单时，应在第一时间先向市中心血站报告用血

种类、用血量和用血时间等；

②非紧急用时，按规定须提前1天预约，由血

库值班人向血站报告；

③Rh(D)阴性和其它稀有血型患者的输血

择期手术病人输血：当临床遇到稀有血型患者

后，应对患者家庭成员、兄弟姐妹进行筛选，符

合者到血站体检献血，并填写《稀有血型用血申

请单》。组织到血源后，临床再择期手术用血；

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急诊抢救病人紧急输血：按卫生部《临床输血

技术规范》第十五条Rh(D)检查可除外。也

可采用自身输血、同型输血或配合型输血。对紧

急输用配合型血液时，由经管医师向患者或其家

属(代理人)讲明，征得同意后方可输用，由医

患双方共同签字并载入病历；

具体实施可按照稀有血型及应急用血管理

条款执行

④特殊血液预约的信息反馈与记录。

注：

特殊血液是指：单采血小板、洗涤红细胞、

冷沉淀、辐照血、Rh(D)阴性和其它稀有血型血

液等

第二节ABO&Rh(D)血型复检标准操作规程

ABO&Rh(D)血型复检标准操作程序

抗A、抗B、抗D血清定型(试管或玻片法)

标准操作程序

【方法原理】

1.ABO血型：根据红细胞上有或无A

抗原或/和B抗原，进行红细胞凝集试验。

正定型，是用已知抗一A和抗一B分型血清

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来测定红细胞上有无相应的A抗原或/和B

抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B

细胞来测定血清中有无相应的抗一A或/和

抗一B。

2.Rh(D)血型：用抗D血清进行鉴

定，则凡带有D抗原者称为Rh(D)阳性,

不带D抗原者称为Rh(D)阴性。

【标本采集和处理】

1.标本采集：常规静脉采血3ml于

EDTA.K2o

2.标本保存：室温放置不超过8小时,

4℃保存不超过72小时，无溶血现象。

【试剂】

1.抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体长

春博德)

2.Anti-D(IgM)Biotesto

3.5%及0型试剂红细胞盐水悬液，制备方

法见附注。

【操作步骤】

1.取小试管3支(或玻片一张划成三等分),

分别标明抗A、抗B、抗D,用滴管分别加抗A、

抗B、抗D分型血清各1滴，再以滴管分别加受

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检者5%红细胞（取1滴压积红细胞加16滴生

理盐水）悬液1滴，混和。

2.另取小试管3支（或玻片一张划成三等

分），分别标明A、B、O细胞，用滴管分别加入

受检者血清1滴，再分别滴加A、B、O型5%

试剂红细胞悬液1滴，混和。

3.立即以1000"min离心Imin（或将玻片

不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约

15min）o

4.将试管轻轻摇动，先以肉眼观察有无凝

集（或溶血）现象。如肉眼不见凝集，应将反应

物倒于玻片上，再以低培镜检查。

5.观察结果时既要看有无凝集，更要注意

凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB

的发现。

6.凝集强度判断标准：

4+=红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。

3+二红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。

2+=红细胞凝块分散成许多小块，见到游离

红细胞。

1+二肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细

胞。

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土=镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围

有很多游离红细胞。

MF二混合凝集外观(mixedfield)是指镜下

可见少数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分

散分布。

一表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分

布。见表2—1

表2—1ABO血型正反定型结果

分型血清+受检者受检者血清+试

红细胞受检者剂红细胞

抗一A抗一血型A细胞B细

B抗一A+B胞O细胞

+

—++

A

+

B

++

O+

+

AB

+

++

注：+=凝集；一=不凝集。

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7.“AB”注意冷凝集或自身凝集，能够在

37c水浴中鉴别。

8.血型复查结果输入检验之星中，核对后

审定报告。

第三节RhD血型鉴定标准操作程序

RhD血型鉴定标准操作程序

RhD血型系统经过输血或妊娠可产生免疫性

抗体，当遇到相应抗原，可致溶血反应或新生儿

溶血病。若误诊误治，可导致患者残废或死亡。

临床输血时，一般需作助血型鉴定。

一、RhD血型鉴定标准操作程序

【原理】

应用血凝试验检测红细胞抗原。RhD血型是

由红细胞表面是存在或缺失D抗原确定。D抗原

于细胞株BS226细胞产生的单克隆抗体发生特

异性反应。

【试剂】

RhD(IgM)血型定型试剂盒(单克隆抗体)

【操作】

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1.盐水法取小试管(10mmX60mm)1支，

蜡笔标记，加试剂1滴，再加人5%受检者红细

胞1滴，混匀，1000r/min离心lmin观察结果。

2.对照管用蜡笔标记阳性和阴性，分别

加人抗D血清(IgM)1滴，阳性对照管加Rh阳

性红细胞1滴，阴性对照管加Rh阴性红细胞1

滴，混匀，1000r/min离心lmin观察结果。3.结

果判定如阳性对照管凝集，阴性对照管不凝

集，受检管凝集，即表示受检者红细胞上有相应

抗原；受检管不凝集，即表示受检红细胞上没有

相应抗原。________________________________

【附注】

1.单克隆IgMRh抗血清有商品试剂供应，

可用盐水介质做凝集试验。抗血清(IgM)1滴,

加5%受检者红细胞悬液1滴，混合，置7℃水浴

lh,观察凝集反应。

2.如临床上只要求检查是否为Rh(D)阳性

还是阴性，只需用抗D血清进行鉴别。如结果为

阴性，则应进一步检查排除弱D。

3.在中国汉族人群中,Rh阳性占99.66%,

Rh阴性占0.34%o

4.阳性对照可取3人0型红细胞混合配成。

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阴性对照不易得到，一般设计方法为正常AB型

血清1滴，加5%D阳性红细胞悬液1滴和菠萝

酶试剂混匀，与受检管一同置7℃水浴lh。

5.Rh血型鉴定应严格控制温度与时间，因

Rh抗原、抗体凝集反应时，凝块比较脆弱，观

察反应结果时,应轻轻侧动试管,不可用力振摇。

【假阳性反应原因分析】

1.试剂中存在具有其它特异性的抗体（指不

完全D抗体），因此，对疑难抗原定型时，建议

用不同来源的抗血清同时做两份试验，因为使用

两份特异性相同的抗血清得到不一致的结果时，

就会使检查人员意识到有进一步试验的必要。

2.多凝集红细胞与任何人血清都会发生凝

集。

3.当用未经洗涤的细胞做试验时，试样中

的自身凝集和异常蛋白质可能引起假阳性结果。

4.试剂瓶可能被细菌、外来物质或其它抗

血清所污染。

【假阴性反应原因分析】

1.搞错抗血清，每次试验时应细心核对抗血

清瓶子上的标签。

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2.试管中漏加抗血清，在加人细胞悬液之

前，必须检查试管中有无抗血清。

3.未遵照抗血清使用说明书做试验，如抗

血清和细胞间的比例以及温育的温度和时间不

正确。

4.抗血清保存不妥，试剂中的免疫球蛋白

变质。

二、弱D(weaKD)型鉴定标准操作程序

【原理】

根据美AABB技术手册第12版(1996)规定：

D“这术语不再使用，携带弱的D抗原的红细胞

仍被归类为D阳性，称之“弱D(weaKD)”。原

称之“D”红细胞一部分具有与正常D

阳性红细胞同样性质的D抗原，只是D抗原数量

减少；另一部分原红细胞D抗原与正常D

抗原相比缺少正常D抗原中1个或多个抗原表

位。

弱D型红细胞与某批或几批抗D血清在盐水

介质及酶试验中不发生凝集，但在间接抗人球蛋

白试验中均发生凝集。因此，当用酶试验检查发

现与抗D不凝集时，不应轻率地定为Rh阴性，

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需进一步排除弱D型的可能。

【试剂】

1.抗D血清不同生产单位或批号不同的抗D

血清3〜5个。

2.抗人球蛋白血清。

3.1%菠萝酶溶液。

4.5%受检红细胞悬液。

【操作】

1.将受检者红细胞分别与各批抗D血清作

间接抗人球蛋白试验（方法见本章第四节）。

2.将受检者红细胞分别与各批抗D血清作

酶试验（方法见本章第五节）。

【结果判定】

受检红细胞与各批抗D血清在酶试验中都

不凝集或只与其中1批或数批抗D血清凝集，但

在间接抗人球蛋白试验中都凝集者，都属弱D型

细胞。

【附注】

1.在临床输血中，弱D型人经输注D阳性红

细胞后可产生抗D抗体。因此受血者若为弱D型,

应作Rh阴性论，应输注Rh阴性血液；供血者为

弱D型者，应作Rh阳性论，不应当输血给Rh阴

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性的受血者。

2.弱D型妇女与Rh阳性丈夫生育的婴儿可

能发生新生儿溶血病。

第四节红细胞血型抗体筛查标准操作规程

红细胞血型抗体筛查标准操作程序

红细胞血型抗体检查适用于下列情况：

1.ABO血型鉴定发现受检者血清中有ABO

血型以外的抗体时；

2.供血者血清抗体筛检；

3.输血前受血者血清抗体检查；

4.输血后溶血性输血反应疑为由同种抗体

引起时；

5.孕妇血清的抗体检查；

6.新生儿溶血病婴儿血液中抗体检查；

7.直接抗人球蛋白试验阳性红细胞上抗体

检查。

筛查方法

一、盐水介质法：

【方法原理】

有些抗体能凝集盐水混悬的红细胞。这些抗体

一般是IgM类抗体，其中许多在22℃下反应最

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好。在室温下有活性而在37c无活性的抗体是

没有什么临床意义的。对患者或供血者的血样不

需要用这种方法。在37℃下也有活性的样本（如

抗KelL抗D）是有临床意义的，

而这些抗体一般可用抗人球蛋白试验和酶技术

来检查。

【试剂】

1.试剂红细胞：由血型参比实验室或血液

中心提供，或由各血库从供血者或工作人员中进

行普查得到。筛查红细胞以2个或3个人抗原互

补的不同的红细胞为1套，单独分开分装，因为

单一的筛查红细胞较混红细胞提供较高的敏感

性。

因为许多抗体同双倍量抗原（纯合子）的红

细胞反应比同单倍量抗原（杂合子）的红细胞反应

要强得多，而不可能得到的都是纯合子红细胞，

因此，筛查红细胞的抗原组成必须是互补，经提

供尽可能多的必要的抗原。

筛查红细胞大多不包括低频率抗原，因此不

可能检出低频率抗体。这种抗体只有在抗体鉴定

时被测到，或在交叉配血时被发现，或在新生儿

出生后出现黄疽时被发现。

文档仅供参考，不当之处，请联系改正。

每一组筛查红细胞中至少有常见的抗原，而

且是互补的。

如果某种抗体只能与一种特定抗原的纯合

子细胞起反应，而筛查红细胞上这种特定抗原是

杂合子，则该抗体可能被漏检。

合适的纯合子表现型的供血者是很少的，为

了提供有重要抗原的纯合子细胞，需要使用来自

3个供血者的红细胞。

2.血清标本：虽然血清和血浆中存在相同

的红细胞抗体，但一般都采用血清进行抗体检

查。因为：

①如果血浆中的凝血系统发生部分激活，就

可产生纤维蛋白，干扰对凝集的解释；

②只有经过激活补体的作用才能证实的抗

体，不能在血浆中检出；

③常见的抗凝剂是结合Ca2+来防止凝固，

而Ca2+对于补体的激活是必不可少的。

血清标本的采取时间应注意：例如，受血者

血样一定要在48h内采集。为了检出由于最近红

细胞刺激而产生的抗体，血样必须是新近的。如

果抗体筛查结果阴性，有时需要隔数天后重新采

样复查，因为此时抗体的浓度可逐渐增强。

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每一样本应详细记录病史，包括姓名、性别、

年龄、民族、妊娠史、输血史，使用过哪些药物

（如甲基多巴、青霉素、先锋霉素等）、采样日期、

有无抗凝剂、抗凝剂的种类和剂量、血液样本的

外观、有无溶血、黄疽以及红细胞比积等。

【操作步骤】

1.取受检者血清2滴于标好的试管中。

2.取2%试剂（筛查）红细胞悬液1滴于每

个试管中，混和。

3.1000r/min离心Imin（离心速度和时间应

按质控规定）。

4.观察溶血和凝集反应，记录结果。

5.按需要置室温（22〜24℃）温育15〜30min。

6.离心，观察溶血和凝集，并记录结果。溶

血或凝集都是阳性结果。

7.报告结果于检验之星中。

二、凝聚胺法

【方法原理】

利用低离子介质（LIM）,降低介质的离子

强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细

胞和血清（浆）中的抗体结合。加入凝聚胺可使

红细胞产生非特异性的凝聚。最后,加入悬浮液,

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具有中和凝聚胺的作用，使正常红细胞非特异性

凝集散开，试验结果为阴性；但红细胞被相应的

抗体致敏,则会被凝聚胺凝结,凝集就不会散开,

试验结果为阳性。

【标本采集和处理】

1.标本采集：常规静脉采血于分离胶/促凝

剂管（血清）、或静脉采血3ml于EDTA.K2（血

浆），一般采用血清进行抗体检查。

2.血清标本的采取时间：要求受检者血样

一定要在输血前3天内采集，血样必须是新近

的。

3.标本分离保存：血清及早分离防止溶血,

可冷冻保存，如用冰冻血清作抗体检查，融化后

的样本要充分混和，重复冻融的标本不能供抗体

鉴定用。

【试剂】

1.抗体筛查I、II、III细胞。

2.凝聚胺试剂：低离子介质（LIM）、凝聚

胺（Polybrene）＞悬浮液（Resuspending）。

3.3〜5%红细胞悬液：取多个“0”型人红

细胞，经生理盐水洗涤三次，配成3〜5%红细胞

悬液。

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【操作步骤】

1.准备样本，患者血清（血浆）、抗体筛查

I、II、III细胞或3〜5%红细胞悬液。

2.取小试管2支，各加被检血清（浆）2

滴，分别加入3〜5%筛检红细胞1滴或I和n

细胞50ul（0.8%）o

3.各加入LIM0.7ml,混合后，加凝聚胺

Polybrene2滴,并混合。

4.以3400rpm,离心10秒，把上清液倒掉,

轻轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，如无凝集,

则必须重作。

5.最后加入悬浮液Resuspending!滴，轻

轻转动试管混合并观察结果。如凝集散开，表示

由凝聚胺引起的非特异性凝集，抗体筛检结果为

阴性。如凝集不散开，则红细胞抗原抗体结合的

特异性反应，抗体筛检结果为阳性，应进一步作

抗体鉴定。

6.报告结果于检验之星中。

五、微柱凝胶法

【方法原理】

利用凝胶过滤技术和离心技术，抗体筛查细

胞上有特定的抗原，抗原能够和相应的抗体结

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合。当待检血清（浆）样本中有不完全抗体时，

抗体筛查细胞和待检血清（浆）中不完全抗体可

专一性的结合。抗人球蛋白可结合抗体，经过桥

介作用使细胞凝集。凝集发生说明血清（浆）中

有不完全抗体。

【标本采集和处理】

1.标本采集：常规静脉采血于分离胶/促凝

剂管（血清）、或静脉采血3ml于EDTA.K2（血

浆），一般采用血清进行抗体检查。

2.血清标本的采取时间：要求受检者血样

一定要在输血前3天内采集，血样必须是新近

的。

3.标本分离保存：血清及早分离防止溶血,

可冷冻保存，如用冰冻血清作抗体检查，融化后

的样本要充分混和，重复冻融的标本不能供抗体

鉴定用。

【试剂】

1.抗体筛查I、II、III细胞。

2.抗人球蛋白检测卡。

3.3〜5%红细胞悬液：取多个“0”型人红

细胞，经生理盐水洗涤三次，配成3〜5%红细胞

悬液。

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【操作步骤】

1.准备样本，患者血清（血浆）、抗体筛查

I、II、III细胞或3〜5%红细胞悬液。

2.标记抗人球蛋白检测卡、姓名、住院号、

标明I、II、IIIO

3.微柱中加50ul待检样本血清（浆）。

4.加抗体筛查I、n、ni细胞各soul（o.8%）o

5.37℃15分钟，离心10分钟。

6.读结果和记录。离心时，凝集块不能经

过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应。未凝

集血细胞离心时可经过凝胶间隙而沉积在凝胶

管底部，呈阴性反应。

7.报告结果于检验之星中。

【附注】

1.判读试验结果常见的代号是：

4+：一个结实的凝集块。

3+：几个大的凝集块。

2+：中等大的凝块，背景清晰。

1+：小凝集块，背景混浊。

±：微小凝集块，背景混浊。

0：无凝集或溶血。

PH：表示部分溶血，有一些细胞残留。

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H：表示完全溶血，无残留细胞。

2.抗体筛查试验结果的解释

抗体筛检试验是很有价值的，但也有其局限

性。一个阴性试验不一定意味着这一血清中没有

抗体，而只是在使用这些技术时，缺乏与筛查细

胞起反应的抗体。如果临床资料和其它实验室所

见提供了另外的线索，就应扩大常规筛查方法。

例如，如果ABO正反定型不符，就应在室温下做

抗体筛查。如疑为溶血性输血反应、新生儿溶血

病或自身免疫性溶血性贫血，有必要做酶试验或

以放散液做筛查，以证明引起疾病的抗体。

第五节抗人球蛋白试验

抗人球蛋白试验标准操作程序

【方法原理】

抗人球蛋白试验(antiglobulintest,AGT)

又称Coombs试验，是检查不完全抗体的一种很

好的方法、将抗人球蛋白血清(antiglobulin

serum,AGS)加入已经致敏的红细胞盐水悬液

中，红细胞表面的抗体球蛋白(即使其致敏的不

完全抗体)与抗人球蛋白血清中的抗体发生特异

性反应，使红细胞发生凝集。抗人球蛋白血清除

能够测定红细胞上IgG抗体外，还能够测定IgM

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和IgA,也能够测补体组分(C3、C4)o所谓广谱

AGS,即包括抗IgG和抗C3抗体。

【标本采集和处理】

标本采集：常规静脉采血3ml于

EDTA.K2o

【试剂】

1.1%标准A/B/O型红悬。

2.抗人球蛋白检测卡。

3.0.9%生理盐水。

【操作步骤】

一、AB0血型、RH血型鉴定、直接抗人球蛋白

试验：

(1)在戴安娜微柱凝胶新生儿血型卡的8个

孔中分别加入1%的样本红细胞50ul；

(2)血型卡直接放入专用离心机离心,观察结

果。

二、释放试验

(1)取压积红细胞0.2ml洗涤三次，再加

0.2ml生理盐水，56℃水浴10分钟，转/min

离心3min,吸取上清液备用；(即放散液)

(2)根据新生儿AB0血型，分别在微孔中加

入1%标准A/B/0型红悬50ul,然后加入50ul上

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清液，置37℃孵育15分钟，离心，观察结果。

患者ABO血型为“A”型的，加入标准A

型、O型红细胞悬液；

“B”型的，加入标准B型、O型红

细胞悬液；

“AB”型的，加入标准A型、B型、

O型红细胞悬液；

“O”型的，加入标准O型红细胞悬

液。

三、游离抗体测定

(1)根据新生儿ABO血型，分别在微孔中加

入1%标准A/B/O型红悬50ul,然后加入50ul样

本血清；(原则同上)

(2)置37℃孵育15分钟，离心，观察结果。

结果判断：

(1)ABO血型、RH血型鉴定、直接抗人

球蛋白试验结果判断：

第L5孔

第6孔

Ctl为阴性对照管；

第7孔

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为兔多克隆抗IgG；

第8孔

AHG为抗人球蛋白试验结果。

（2）游离、释放试验结果判断：

凝集有80%的红细胞在微柱管下端2/3以下者

（即1+以上）为阳性。

第六节血液交叉配血试验标准操作规程

血液交叉配血试验标准操作程序

交叉配血主要是检查受血者血清中有无破

坏供血者红细胞的抗体，故受血者血清加供

血者红细胞相配的一管称为“主侧”；供血者血

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清加受血者红细胞相配的一管称为“次侧”，两

者合称交叉配血。

交叉配血试验又称不配合性试验，是确保患

者安全输血必不可少的试验，完整的操作

规程应包括：①查阅受血者以前的血型检查记

录，如与这次检查结果有所不同，应及时分析原

因;②对收到的受血者血样应作ABO正反定型,

Rh血型和其它血型检查以及血型抗体检测和鉴

定；③选择预先进行血型检查的合格供血者作交

叉配血试验。

一、配血要求

1.受血者配血试验的血样（血型复查）必须

是输血前三天之内的；

2.核对病人资料：核对输血申请单、受血

者血样、病历三者，其内容包括：患者姓名、性

别、年龄、科室床号、住院号、血型（原始血常

规血型和血型复查中血型）、用血品种、用血量

等，必须正确无误；

3.核对血液：血液完整性、血液标签、血

液质量；

4.核对取血凭证：按临床（取血凭证）实

际用血品种、量进行配发血；

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5.配血前，先复查受血者和供血者

ABO血型（正、反定型）、Rh（D）血型和

抗筛，并报告其结果；

6.在电子病历或急诊医生工作站中，

检查临床输血五项的执行情况；

7.输注全血、浓缩红细胞、洗涤红细胞、

浓缩白细胞等患者应进行交叉配血试验，其方

法：采用盐水配血试验、凝聚胺法。

二、盐水配血试验标准操作程序

【方法原理】

本法是当前最常见的配血方法，能够发现临

床上最重要的ABO不配合性。当受血者血清

（浆）和供血者红细胞经混合并离心后，如有

ABO不配合问题，就会很快显示出来。

【标本采集和处理】

1.标本采集：常规静脉采血3ml于

EDTA.K2o

2.标本采取时间：要求受检者血样一定要

在输血前48h（抗筛是48h）内采集，血样必须

是新近的，无溶血现象。

【试剂】

L抗A抗B血型定型试剂（单克隆抗体长

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春博德）

2.Anti-D（IgM）Biotesto

3.0.9%生理盐水

【操作步骤】

1.从贮血冰箱中取出所需血液，取试管一

支，贴上小标签，在血袋配血管中剪下配血管于

试管内。

2.取试管二支，标明主次侧，主侧管加受

血者血清（浆）2滴，供血者5%红细胞悬液1

滴；次侧管加供血者血清（浆）2滴，受血者5%

红细胞悬液1滴。混匀，以1000r/min离心Imin。

3.观察结果：轻轻侧动试管，冬季应注意

冷集素干扰。ABO同型配血，“主侧”和“次侧”

均无溶血及凝集表示无输血禁忌，能够输血。

三、凝聚胺配血试验标准操作程序

【方法原理】

利用低离子介质（LIM）,降低介质的离子

强度，减少红细胞周围的阳离子云，以促进红细

胞和血清（浆）中的抗体结合。加入凝聚胺

（Polybrene）溶液后，可使红细胞产生非特异

性的凝聚。最后，加入悬浮液（Resuspending）

具有中和凝聚胺的作用，使正常的红细胞非特异

文档仅供参考，不当之处，请联系改正。

性凝集散开，试验结果为阴性；但如果红细胞被

相应抗体致敏，则会被凝聚胺凝结，凝集就不会

散开，试验结果为阳性。

【标本采集和处理】

1.标本采集：常规静脉采血3ml于

EDTA.K2o

2.标本采取时间：要求受检者血样一定要

在输血前48h内采集，血样必须是新近的，无溶

血现象。

【试剂】

L抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体长

春博德)

2.Anti-D(IgM)Biotesto

3.0.9%生理盐水

4.凝聚胺试剂：低离子介质(LIM)、凝聚

胺(Polybrene)、悬浮液(Resuspending)。

【操作步骤】

1.从贮血冰箱中取出所需血液，取试管一

支，贴上小标签，在血袋配血管中剪下配血管于

试管内。

2.取试管二支，标明主次侧，主侧管加受

血者血清(浆)2滴，供血者5%红细胞悬液1

文档仅供参考，不当之处，请联系改正。

滴；次侧管加供血者血清（浆）2滴，受血者5%

红细胞悬液1滴。

3.各力口LIMO.7mL混匀，再各力口Polybrene

溶液2滴，并混匀。

4.用离心机1000g离心力（普通离心机以

3400rpm）,离心10秒，然后把上清液倒掉，轻

轻摇动试管，目测红细胞有无凝集，无凝集，则

必须重做。

5.最后加入Resuspending2滴，轻轻转动

试管混合并同时观察结果，如在30秒内凝集散

开，代表是由Polybrene引起的非特异性凝集，

配血结果相合；如凝集不散开，则为红细胞抗原

抗体结合的特异性反应，配血结果不相合。如反

应可疑，可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

6.血液交叉合格后，应在医院血库管理软

件中进行配血、出库操作，打印血液交叉报告单

和患者输血不良反应反馈单。然后，保存。

【附注】

血液样本的保留和贮存：受血者和供血者的

血液样本必须密封或盖紧，在每次输血之后，应

在2〜6℃保存至少7天以上。

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第七节血液出库（发血）标准操作规程

血液出库（发血）标准操作程序

一、核对、签字

1.严格执行“三查”、“八对”制度（见输

血科“三查”、“八对”制度）。

2.输血科（血库）发血时，应当认真检查

申请单的填写项目，合格后方可发血。未按卫生

部《医疗机构临床用血管理办法》第十一条规定

办理申报手续的不得发血。

3.配血合格后，由医务人员凭取血凭证到

血库取血，领血时，收发双方共同核对患者（姓

名、性别、年龄、科室床号、住院号、血型、用

血品种、用血量）和血站名称、许可证号、血型、

血袋编号、血品种、血量、血液质量、血袋完整

性、血液有效时间以及配血试验结果等，准确无

误时，双方共同签字后方可发血。

二、血液出库

1.发血在医院血库管理软件中进行（详见

医院血库管理软件操作细则），并打印交叉配血

报告单和患者输血不良反应反馈单。

2.收发双方共同核对无误后，由取血者把

血液放入专用的血液保温箱内送至所需科室输

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注（要求血液出库后30分钟内输入患者体内）。

3.在血液出库登记本中，记录血液发出时

间、受血者姓名、科室床号、住院号、血品种栏

记录血量、血费、用血互助金、检查费、血袋号、

发（取）血者签名。

4.血液发出后，患者与供血者血样保存于

2〜6℃冰箱至少7天。

5.血液发出后不得退回，以保证下一个用

血者的安全。如临床对发出的血液要求退回时，

应由医院主管（医务部）领导，输血科主任签字

同意“报废处理”后，方可退还血费等。

6.每日17：00下班前进行出库统计，并记

录于血液出入库表格内。次晨8时再统计夜班出

入库情况，并加以修正。每月进行出入库统计并

作保存。

三、血袋回收

回收后的血袋进行记录时间，并保存于2〜

6℃冰箱7天，后按医疗废弃物焚烧处理。

第八节数据记录及费用收取标准操作规程

数据记录及费用收取标准操作程序

一、数据记录

当血液发出后，必须记录：

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1.输血申请单上记录血品种、血量。把血

袋中的小标签贴在申请单上，表明品种、血量。

2.用血通知单上记录用血日期、血品种及

血量，并签名。

3.血费记录簿上记录发出血液品种的数量、

血费、互助金、检查费等金额。对欠款记帐或用

现金收取者，应用红笔注明“欠款记帐”或“门

诊现金收费”字样。

二、收费

当血液发出后，值班者必须对当日（班）的

血费、用血互助金、检查费等按规定标准及时记

入收费电脑。

1.住院病人收费：由值班者通知收费处在

电脑中收取；

2.对急诊“绿”色通道病人收费：

①有住院号者：其全部费用记入电脑；

②对无住院号而只有门诊号者：当班者应及

时通知收费处，交纳血费、检查费、用血互助金

（用手工开具用血互助金交纳通知单）等费用；

③对门急诊血费欠款记帐者：按实际收费的

用血量配发，但通知急诊收费处采用欠款记帐或

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现金收取用血互助金和检查等费用；

3.门诊病人收费：能够在门诊医生站中记

录所要收取的全部费用，由病人(或病人家属、

授权人、工友)到门诊收费窗口，交纳血费、检

查费、用血互助金(用手工开具用血互助金交纳

通知单)等费用。门诊收取用血互助金后，须把

用血互助金交费通知单的第三联贴在用血通知

单后面。

1血费输入

名称金额类别

全血(qx)230元/200ml血费室

Rh阴性全血450元/200ml血费室

(Rhyxqx)

悬浮红细胞(xf)220元/I单位血费室

Rh阴性红细胞410元/I单位血费室

(Rhyxh)

血浆(xxb)5元/10ml血费室

冷沉淀(LCD)110/1单位血费室

1450%/10单血费室

血小板(dcx)

位

洗涤红细胞220元/I单位血费室

(xdh)

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去甘油红细胞二.血费室

490元J1单位

(qgy)

机洗红细胞术

700元/次血费室

(JQXDHX)

2检查费输入

名称金额类别

盐水介质交叉配5元/次血库室

血(YSJZ)

特殊介质交叉配8元/次血库室

血(TSJZ)

ABO正反血型8元/次血库室

鉴定(ABO)

Rh(D)血型鉴8元/次血库室

定(Rh)

红细胞不完全抗40元/次血

体筛查(HXB)库室

按回车，点击保存数据，点击丫(是)，按确定。

注：医保病人记帐，进入医保条件

全血

1.各种急性失血伴低血容量抢救；

2.各种原因引起的经其它治疗无效的严重

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慢性贫血；

3.重大手术确需输血。

红细胞

1.各种急性失血伴低血容量抢救；

2.各种原因引起的经其它治疗无效的严重

慢性贫血；

3.高钾血症，肝、肾、心功能不全确需输

血者；

4.急性溶血性贫血抢救或化疗后骨髓抑制

引起的严重贫血；

5.呼吸衰竭使用人工呼吸机确需输血。

血浆

1.凝血酶原时间(PT)或活化部分凝血酶

时间(APTT)异常伴出血或需手术；

2.凝血因子缺乏伴出血或需手术；

3.抗凝血酶III(AT—III)缺乏；

4.香豆素作用逆转或抗纤溶治疗伴出血；

5.输血量大于15单位；

6.弥漫性血管内凝血(DIC)和血栓性血小

板减少性紫瘢(TTP)；

7.需行体外循环手术。

血小板

1.血小板计数低于10X107L；

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2.因骨髓衰竭引起的血小板减少并发活动

性出血，且血小板计数低于20X10VL；

3.需行外科手术，且血小板计数低于50X

107L；

4.伴有其它出血危险因素的活动性出血，

且血小板计数低于30X107L；

5.大血管吻合手术确需输注血小板。

冷沉淀

1.甲型血友病；

2.血管性血友病；

3.纤维蛋白原缺乏症。

第九节血液申领、入库、核对、贮存标准操作规程

血液申领、入库、核对、贮存标准操作程序

1.每日进行血液库存量的检查，及时对存

量的补充（要求日存量为周用血量的1/2）,值

班人按所需品种、血量填入医院用血申请单内，

由指定人去人民医院领取。

2.对特殊血液的申领，应遵循先报告血站

的原则，血站回复结果必须及时与临床医师沟

通，并记录于记事本中。

3.血液到库后，值班人必须核对和验收，

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其内容：血袋（外观、封闭及包装）是否合格、

标签是否清楚齐全（供血机构名称、许可证号、

供血者姓名、编号、血型、血品种、血量、采血

日期及失效日期）、血液质量是否良好、是否按

要求配发血等。

4.严禁不合格血液入库。

5.核对验收无误后，把人民医院拷贝来的

电脑软盘，拷贝在医院血库管理软件电脑内（详

见输血科医院血库管理软件操作规程）。然后，

按不同类型、品种、采血日期的先后次序整齐排

列入库，存放于血库专用冰箱内的相应位置。

6.血液入库数量登记在血液出入库表格内,

每日、月进行统计。

7.全血、红细胞保存温度为2〜6℃,并每

天监测和记录（晨8时、上午11时、下午4时、

晚8时）冰箱温度各一次；血浆、冷沉淀保存温

度为-30℃以下，每天监测和记录（晨8时、上

午11时、下午4时、晚8时）冰箱温度