DB14-T 2846-2023 丽格海棠组培快繁技术规程

ICS65.020.20CCSB0514IDB14/T2846—2023前言 2规范性引用文件 3术语和定义 4培养基配制 5外植体采集与处理 6不定芽诱导和增殖培养 27生根培养 28组培苗炼苗和移栽 29移栽后管理 310检验检疫 311包装运输 3附录A（规范性）MS基本培养基成分 4DB14/T2846—2023本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由山西省林业和草原局提出、组织实施和监督检查。山西省市场监督管理局对标准的组织实施情况进行监督检查。本文件由山西省林业和草原标准化技术委员会（SXS/TC09）归口。本文件起草单位：山西农业大学、山西梅芝园艺有限公司。本文件主要起草人：贾民隆、曹冬梅、宋卓琴、梁峥、段九菊、李志娟、张超、郑梅梅。1DB14/T2846—2023丽格海棠组培快繁技术规程本文件规定了丽格海棠(Begonia×elatior)组培快繁的培养基配制、外植体的采集与处理、不定芽的诱导和增殖培养、生根培养、组培苗炼苗和移栽、移栽后管理、检疫检验及包装运输等要求。本文件适用于丽格海棠组培苗培育。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/TLY/TNY/T83212306农药合理使用准则林业植物产地检疫技术规程花卉种苗组培快繁技术规程3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4培养基配制4.1基本培养基选用MS为基本培养基，培养基成分按照附录A的规定执行。4.2功能性培养基功能性培养基配方如下：——不定芽诱导培养基为1/2MS+1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+20g/L蔗糖+6g/L琼脂，pH5.8；——增殖培养基为1/2MS+1mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+150mg/L肌醇+20g/L蔗糖+6g/L琼脂，pH5.8；——生根培养基为1/2MS+0.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+150mg/L肌醇+20g/L蔗糖+6g/L琼脂，pH5.8。5外植体采集与处理5.1采集5.1.1时间宜在晴天上午9～11时采集。2DB14/T2846—20235.1.2方法选取生长健壮、无病害的植株，剪取新鲜叶片，用湿润的毛巾或滤纸包裹，置于0℃~4℃的冰壶或冷藏室中保存备用，时间不超过24h。5.2处理5.2.1预处理将叶片用自来水冲洗干净，剪切成约2.5cm×2.5cm的小片，放入烧杯中，用0.7g/L洗洁精水做表面活性剂，置于0.05%NaClO中浸泡10min，用流动自来水冲洗30min后蒸馏水清洗3～4次。将材料取出放置于无菌干燥滤纸上，吸干表面水分置于超净台上。5.2.2灭菌消毒用75%的酒精消毒2min，无菌水冲洗1次，在质量体积百分比为0.1%HgCl2溶液中灭菌8min，无菌水冲洗4次，每次5min，无菌滤纸吸干表面水分，将消毒处理后的小片除去边缘，用消毒刀片切成约1cm×1cm的切片备用。6不定芽诱导和增殖培养6.1培养条件温度23℃~25℃,光照强度3000Lx，光照时间16h/d。6.2不定芽诱导在超净工作台上，将备好的切片放入不定芽诱导培养基中，10d后不定芽生成。6.3增殖培养在超净工作台上，将备好的切片放入不定芽诱导培养基中，10d后不定芽生成。7生根培养在超净工作台上，将继代培养的丛生芽接种到生根培养基中，培养20d～25d。培养条件同6.1。8组培苗炼苗和移栽8.1炼苗移栽前，将培养容器置于室温自然散射光下，闭口炼苗3d后开口再炼苗3d。8.2移栽8.2.1基质选配宜选用泥炭、珍珠岩混合基质，体积配比为4：1。8.2.2根部处理3DB14/T2846—2023将根部培养基清洗干净，用50%多菌灵可湿性粉剂600倍液对组培苗进行蘸根处理。8.2.3栽植将处理好的组培苗移植到装好基质的穴盘中，扶直幼苗，轻压根部。9移栽后管理9.1温湿度温度20℃~30℃,空气湿度≥70%。9.2水肥栽后浇透定根水，隔2d～3d再浇1次，其后根据基质干湿度控制浇水量。20d左右喷施1/1000氮磷钾复合肥。9.3病虫害防治按照GB/T8321的规定执行。10检验检疫10.1检验栽2个月进行苗木质量检验，当苗高≥8cm，基径≥0.4cm，可以出圃。10.2检疫按照LY/T1829的规定执行。11包装运输11.1包装宜用带有透气孔的纸箱包装。在包装箱内外粘贴或者悬挂标签，注明品种、数量、规格、生产单位和日期等。11.2运输运输中温度不应超过30℃,避免日晒雨淋。4DB14/T2846—2023（规范性）MS基本培养基成分表A.1规定了MS基本培养基成分。表A.1MS基本培养基成分母液化合物数量定容量（ml）配制1L培养基需母液量（ml）ANH4NO3KNO3KH2PO4MgSO4.7H2O3.7CaCl2。2H2O4.4BFeSO40.5575Na2-EDTA0.754CKI0.0831Na2MoO4.2H2O0.025CoCl2。6H2O0.0025CuSO4.5H2O