专题01发酵工程（综合题30道）（原卷版）

专题01发酵工程（综合题30道）1．龙眼汁中富含蔗糖、葡萄糖等糖类及多种氨基酸、维生素和铁、磷、钙等元素，以龙眼汁开发生产果醋饮料，能保留较高的药用保健价值。回答下列有关问题：(1)新鲜龙眼去皮后需先榨汁打浆酶解，酶解的目的是。(2)利用龙眼汁生产龙眼果醋的过程通常分为果酒发酵和果醋发酵两个阶段，发酵过程发挥作用的菌种主要是。龙眼果酒制作好后进一步发酵得到龙眼果醋的原理是（写出反应式），同时还需要调整的条件有(3)如图为一定条件下研究LB活性醋酸菌对龙眼果酒的醋酸发酵作用，该实验的实验目的是探究条件下LB活性醋酸菌对的影响。根据实验结果可知，当发酵温度为20℃时，发酵转化率较低，主要原因是。图中最适合LB活性醋酸菌发酵的温度为。2．红酸汤是一种很有特色的火锅底料，制作流程如图所示。请分析回答以下问题：(1)密封发酵时,常在坛中加入成品红酸汤，其目的是。乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行的过程，该过程发生在乳酸菌细胞的中。(2)装坛时坛口留有一点空间而不装满的目的是，红酸汤腌制过程的初期会有气泡冒出，但气泡的产生逐渐停止，试分析原因是。(3)红酸汤有利于人体肠道内多种益生菌的生长。消化道炎症往往与益生菌群减少、有害菌群增多有关。研究表明，治疗消化道慢性炎症时，不宜滥用抗生素，滥用抗生素的害处有。(4)亚硝酸盐的含量影响红酸汤的品质，在发酵过程中影响亚硝酸盐含量的因素有。（至少2个）3．柿子果肉绵软香甜，还能用来制作果酒和果醋，下面是民间制作柿子酒和柿子醋的过程。

(1)果酒发酵过程中，如果一直密封发酵罐，将产生一定的安全隐患，原因是，相关的化学反应式是。(2)果醋发酵过程中没有接种微生物，说明空气以及柿子皮上可能天然存在菌，发酵中没有进行严格的消毒灭菌，却少有杂菌生长，主要原因是。(3)秋冬季酿酒和酿醋的过程中，人们会把发酵罐放置在相对温暖的地方，原因是。4．某兴趣小组就“泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量变化”开展了探究，操作如下：选取1、2、3号三只相同的泡菜坛，在每个坛中加入等量洗净的新鲜莲花菜，再分别倒入相同量煮沸并冷却的10%盐水，将坛密封，置于同一环境中定时测定亚硝酸盐含量，结果如图所示。回答下列问题：

(1)泡菜制作过程中主要涉及的菌种为，测定泡菜中亚硝酸盐含量通常采用法，在腌制泡菜过程中，会出现坛中溶液量增加的现象，主要原因是，制作泡菜的盐水要煮沸并冷却的原因是。(2)有人说泡菜泡的时间太长会导致口感偏酸，一般3～4天的泡菜口感最佳，最宜食用，结合上述实验结果判断，这种观点是（填“正确”或“错误”）的，理由是。(3)亚硝酸盐的含量是衡量泡菜质量的重要指标，为了降低亚硝酸盐含量，泡菜加工过程中可以采取的措施有（答出三点即可）。5．传统泡菜腌制过程中，乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化如图所示，其中亚硝酸盐是硝酸盐还原菌促进硝酸盐还原形成的，硝酸盐还原菌适宜的酸碱度为中性。若摄入过多亚硝酸盐，则对人体有害。回答下列问题：

(1)乳酸菌在自然界中分布广泛，常见的乳酸菌有乳酸链球菌和；在对氧气的需求方面，与醋酸菌相比，乳酸菌的特点是；乳酸菌和酵母菌在细胞结构方面的主要区别是。(2)泡菜制作过程中，用清水和食盐配制质量百分比为5%~20%的盐水，并将盐水煮沸，煮沸的目的是。(3)发酵初期，硝酸盐还原菌的作用（填“较强”或“较弱”），亚硝酸盐含量增加。由图可知，在发酵中、后期的泡菜品质良好，判断依据是。(4)发酵中期，乳酸菌数量增多，但亚硝酸盐含量下降的原因是，并且部分亚硝酸盐被分解，含量开始下降。6．某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌种T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌种T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示。回答下列问题。(1)上述实验过程中利用了菌种T能产生纤维素分解酶将秸秆中的纤维素分解为葡萄糖，酵母菌的无氧呼吸生产酒精。检测乙醇发酵是否成功，请写出两种方案。(2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要适量补充氮源等营养成分，配制完成后需要灭菌而不是消毒，原因在于。温度是影响酵母菌生长的重要因素，需要设置的最适温度约为。(3)在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，原因是。(4)与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是。7．酱油是由酱演变而来。早在三千多年前，中国周朝就有制做酱的记载。而中国古代劳动人民发明酱油之酿造纯粹是偶然地发现。最早的酱油是由鲜肉腌制而成，与现今的鱼露制造过程相近。因为风味绝佳渐渐流传到民间，后来发现大豆制成风味相似且便宜，才广为流传食用。利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。回答下列问题：(1)米曲霉发酵过程的主要目的是使米曲霉充分生长繁殖，大量分泌制作酱油过程所需的酶类，这些酶中的、能分别将发酵池中的蛋白质和脂肪分解成易于吸收、风味独特的成分。米曲霉发酵过程需要提供营养物质、通入空气并搅拌，由此可以判断米曲霉属于(填“自养厌氧”、“异养厌氧”或“异养好氧”)微生物。(2)在发酵池发酵阶段添加的乳酸菌作用是；添加的酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖的产物是。在该阶段抑制杂菌污染和繁殖是保证酱油质量的重要因素，据图分析该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是（答出一种物质即可）。8．山西老陈醋含有多种营养成分，生产工艺经3000多年的传承和发展，具有了传统手工技艺与现代科学相结合的特点，被认定为国家非物质文化遗产。工艺流程如下图：高粱→蒸煮→拌大曲→酒精发酵→醋酸发酵→熏醅→淋醋→陈酿（注：以大麦、豌豆等原料制成的大曲，含有多种与发酵有关的微生物）回答下列问题：(1)拌大曲前蒸煮高粱的目的是（答出1点），蒸煮后的高粱需要冷却，原因是。(2)制曲是酿制老陈醋的关键环节。大曲中的微生物，能产生多种酶，提高原料的利用率。大曲中的酶可将淀粉分解成供微生物发酵利用，并产生风味物质。(3)酒精发酵阶段起主要作用的微生物是，在发酵过程中需先通气后密封，操作目的是。(4)由酒精发酵转变为醋酸发酵，需要改变的环境条件是，发酵过程中抑制杂菌污染非常重要，该阶段抑制杂菌生长的物质有。(5)研究人员研究了山西老陈醋对急性醉酒小鼠的防醉作用，结果如表所示。分组检测指标甲组不做处理乙组用酒灌胃（13ml/kg）丙组食醋灌胃，30min后用酒灌胃（13ml/kg）降解酒精的某种酶含量（μg·ml1）4.221.656.08据表分析，山西老陈醋可通过，加快酒精代谢，起到一定的防醉作用。9．如图1是传统发酵技术的部分制作装置及操作步骤示意图；图2为果酒与果醋发酵装置示意图，请据图回答下列问题：(1)A和B装置中，适用于果醋制作的是，判断的理由是。(2)在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌主要来源于。(3)醋酸菌是一种好氧细菌，只有当条件适宜时，才能进行旺盛的生理活动。当都充足时，醋酸菌可将糖分解成乙酸；在缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇转化为，再进一步转变为乙酸。(4)进行果酒制作时，A装置中的发酵液不能装满，从微生物代谢的角度分析，其目的是，该发酵需要的温度条件是℃。(5)图1C装置是制作的装置，其中在发酵坛盖沿上加水的目的是。(6)酿造葡萄酒时，在榨汁前，要先对葡萄进行，再去除枝梗，该步骤可以避免去除枝梗时引起葡萄破损，增加被污染的机会。(7)用体积分数为对上述装置进行后，再装入葡萄汁，将发酵装置放在18~30℃的环境中，每天拧开气阀b多次，排出发酵过程产生的大量。图2装置中d处设计成弯曲形状的目的是。(8)10d之后，利用酸性条件下的对图2出料口c取样的物质进行检验。若呈色，则说明产生了酒精。(9)产生酒精后，在发酵液中加入醋酸菌，然后将装置放在℃的环境中，适时打开图2中气阀向发酵液中充气。充气的原因是。10．营养缺陷型菌株的诱导和筛选能培育优良的发酵菌种。如图是赖氨酸依赖营养缺陷型菌株的诱导与筛选过程示意图，过程③是在过程②培养的基础上往培养基中添加了某种物质继续培养。据图分析回答：

(1)图中紫外线处理可使野生型菌株中出现营养缺陷菌株，从变异的角度分析，这种变异属于。(2)从营养物质的成分角度分析，过程②所用培养基的特点是。从物理状态的角度分析，该培养基为培养基。(3)过程③往培养基中添加的某种物质是。图中菌落较（填“大”或“小”）的菌株即为赖氨酸依赖营养缺陷型菌株，原因是。(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和等。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。11．部分白酒厂的常见白酒酿造工艺流程可简化为图1。浓发酵是指在高浓度的原料中发酵，在规模化生产中，发酵原料浓度的提高能增加生产能力，并具有降低能耗、节约水资源等优点。研究者不断探索能进一步提高发酵原料浓度的发酵工艺，以实现真正意义上的“浓”发酵。回答下列问题：(1)玉米是东北地区酿制白酒的常用原料，作为培养基的主料主要提供酵母菌所需的碳源。玉米经碾磨后，在“拌料”环节中，除加水外，还应加入其他类型的营养物质如、以满足酵母菌的代谢需求，提高发酵效率。(2)“蒸煮”可以改变淀粉分子结构，有利于淀粉的分解，此外，蒸煮还具有的作用(3)“糖化”环节可以加入黑曲霉菌等菌种，也可以直接加入酶，该环节的目的是。(4)发酵原料浓度升高，提高了发酵难度，常导致酒精转化效率降低，研究者对此展开了模拟实验：对照组一次性添加27g/mL浓度的葡萄糖，实验组在酒精发酵的前24h内分批次每3h添加3g/mL浓度的葡萄糖，最终保持两组添加的葡萄糖量相等，定期抽样检测，测定各组葡萄糖、酒精浓度。实验数据如图2所示。①结果表明，在葡萄糖供应量相等的条件下，分批次添加能提高发酵效率，使酒精产量提高，从培养基理化性质的角度分析，一次性添加过多葡萄糖不利于酒精发酵的原因可能与有关。②为实现浓醪发酵并提高产量，研究者提出了优化发酵工艺环节的建议：将玉米粒研磨颗粒适当增大、将糖化环节与发酵环节合并为一个环节。根据上述实验结果分析，这些措施能，从而在原料浓度高的情况下提高酒精产量。12．下图甲、乙是微生物接种常用的两种方式，回答相关问题：

(1)图甲是利用法进行微生物接种的，图乙是利用法进行微生物接种的，这两种方法所用的接种工具分别是和；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是和酒精消毒。(2)平板划线时，为保证微生物的数目随划线次数的增加而逐步减少，每次划线都要从开始，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线。(3)接种操作为什么一定要在酒精灯火焰附近进行？。(4)假设用图乙所示方法接种培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是。13．甲、乙两位同学学习完微生物的实验室培养后，要利用所学知识研究水中微生物的情况。Ⅰ.甲同学为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基进行培养：蛋白胨10g乳糖5g蔗糖5gK2HPO42g蒸馏水1000mL将pH调到7.2(1)该培养基所含有的碳源有，其功能是。(2)该培养基所含有的氮源有，其功能是。(3)用该培养基培养微生物时，还需要控制哪些理化条件？。Ⅱ.乙同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察。请回答与此实验相关的问题：(4)乙同学配制的培养基为（物理性质）培养基，其中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌提供了和。(5)对培养基进行灭菌时，应该采用的方法是。(6)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种作为对照进行实验。14．甜米酒是我国的传统酒种，某酿酒厂以无核黄皮果（富含维生素、有机酸及特殊的香味）为辅料研制出黄皮甜米酒，该酒具有消食、润肺和清热解毒等功效。制作黄皮甜米酒的工艺流程如图1所示。回答下列问题：

(1)对酒曲微生物进行分离纯化时，需制备LB（培养细菌）和YPD（培养真菌）培养基。将不同种酒曲稀释液涂布于LB和YPD培养基上，培养一段时间后，挑取长出的单菌落，转移到相对应的新LB和YPD培养基中继续分离纯化培养，此过程中YPD培养基中需加入一定量的四环素和链霉素，其目的是。(2)蒸煮的目的有（答一点）；主发酵的原理是（用化学反应简式表示）。(3)在制作黄皮甜米酒的过程中，为确定黄酒高活性干酵母（YWBY）的添加量及发酵时间，研究人员进行了相关实验，实验结果如图2所示。根据实验结果制作黄皮甜米酒时，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是。

(4)滤清后需进行杀菌，能否采用湿热灭菌法进行灭菌，并说明原因。。15．实验一：灰霉病菌感染使作物减产，因化学防治措施会引起诸多副作用，科研人员以黄瓜灰霉病菌为指示菌对BAKA4解淀粉芽孢杆菌的防治效果进行了研究。(1)从自然界筛选BAKA4解淀粉芽孢杆菌的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→计数及性能测定。富集培养时要将装有培养液的锥形瓶放置在摇床上，其目的是提高培养液中的，

可利用方法对土壤样品中的微生物进行分离纯化并计数，筛选获得BAKA4解淀粉芽孢杆菌。(2)为了确定起主要抑菌作用的是BAKA4菌体细胞，还是BAKA4菌体释放到胞外的抑菌物质，实验步骤如下：①挑取BAKA4菌株单菌落接种于液体培养基中，28℃恒温培养48h，离心收集上清液并过孔径0.22μm的滤膜得到无菌发酵液。收集离心获得的菌体，超声波破碎，用培养基稀释到原体积，经离心收集上清液为菌体破碎液。②实验组和对照组处理如下表：请完善实验方案中的I组组别第一步第二步第三步抑菌率倒入25mLPDA培养基，待培养基凝固后，在中央接入直径5mm的灰霉菌菌块22℃恒温培养至菌丝刚长满平板时，测量灰霉菌菌落直径（R0）0对照组AI实验组B加1mLBAKA4的无菌发酵液至培养皿中同上同时测量灰霉菌的菌落直径（R1）63.87%实验组C加1mLBAKA4的菌体破碎液至培养皿中同上同时测量灰霉菌的菌落直径（R2）41.17%注：PDA是马铃薯葡糖琼脂培养基的简称，抑菌率=（R一R）/R×100%③实验结果：该菌株的无菌发酵液具有较强的抑菌活性，而细胞破碎液的抑菌活性较低，说明。实验二：塑料被称为白色污染，黄粉虫幼虫能吃塑料，并降解其中的聚苯乙烯。我国北京航空航天大学的科学家们通过实验进行了如下研究：（一）、用13C标记的聚苯乙烯喂食黄粉虫幼虫，一段时间后，不仅检测到黄粉虫幼虫呼吸释放13CO2，还在黄粉虫幼虫体内检测到标记的化合物。给黄粉虫幼虫喂食庆大霉素，十天后再喂食聚苯乙烯，发现黄粉虫幼虫对聚苯乙烯的降解效率几乎为零。（二）、将制备好的黄粉虫幼虫肠道菌悬液用①均匀涂抹在培养基平板上，将含庆大霉素、青霉素、氯霉素、四环素的圆形滤纸片置于平板上，将培养皿倒置于适宜温度的恒温箱中培养，结果显示含庆大霉素的滤纸片抑菌圈范围最大。（三）、将黄粉虫幼虫的肠道菌悬液加入含聚苯乙烯薄片的无碳培养基（A）中培养，目的是②：待聚苯乙烯薄片明显变小、变薄时，将培养物接种到含聚苯乙烯的无碳培养基（B）中培养得到单个菌落：对菌落进行筛选、鉴定，得到对聚苯乙烯有较强降解能力的微小杆菌和金黄杆菌。回答下列问题：(3)实验一的结果说明聚苯乙烯可以被黄粉虫幼虫利用，作为，庆大霉素可能会（促进/抑制）黄粉虫幼虫对聚苯乙烯的吸收或利用。(4)实验二中，对接种用的玻璃器皿灭菌应该用法：①处使用的接种工具是。(5)实验三的培养基A和B中属于分离纯化微生物的培养基的是;②处所填的目的是。(6)由实验三的结果可知，黄粉虫幼虫能将吃进体内的塑料中的聚苯乙烯降解与直接相关。16．下图甲、乙是微生物接种常用的两种方式，回答相关问题：(1)图甲是利用法进行微生物接种的，图乙是利用法进行微生物接种的，这两种方法所用的接种工具分别是和；对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是和酒精消毒。(2)平板划线时，为保证微生物的数目随划线次数的增加而逐步减少，每次划线都要从开始，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线。(3)接种操作为什么一定要在酒精灯火焰附近进行？。(4)下图是接种后培养的效果图解，其接种方法是（填“图甲”或“图乙”）所示方法。(5)假设用图乙所示方法接种培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是。17．下图1为细菌X合成初生代谢产物丁的过程.其中间产物乙是工业生产的重要原料，下图2为某实验小组利用野生型X菌培育高产乙的突变型X菌的过程，请回答以下问题：(1)由图1可知野生型X菌的乙物质产量很低，原因是。(2)初生代谢为，所以基因发生突变，细菌X则不能合成物质丁，在不含物质丁的培养基上不能生长。(3)培养基Ⅰ和Ⅱ都为完全培养基，其成分的区别是培养基Ⅰ不含；由培养基Ⅰ到培养基Ⅱ的接种方法为。(4)若培养基Ⅲ不含物质丁，能否确定培养基Ⅱ上的菌落3和5为高产乙的突变型X菌?为什么?18．从自然菌样中筛选较理想生产菌种的一般步骤是:釆集菌样→富集培养—纯种分离→性能测定。请回答以下问题：(1)获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从环境釆集。(2)对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以为唯一碳源的培养基，并在条件下培养。(3)如图是釆用两种接种方法接种后纯化培养的效果图解，请分析:获得图A效果的接种方法是，获得图B效果的接种方法是。(4)配制培养基时各种成分在溶化后倒平板前必须进行；接种时为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行；培养时，将平板，放入培养箱中。19．塑料制品方便人们生活的同时，也造成了短时期难以降解的“白色污染”。塑料制品的主要成分为聚氯乙烯（PVC）、聚乙烯（PE）和聚丙烯（PP）等，研究人员欲比较大肠杆菌YT1和芽孢杆菌YP1两类细菌降解PE[化学式为（C2H4）n]的能力。(1)配置培养基，接种菌株后表层覆盖PE塑料。分组实验结果如表所示：培养基及接种菌株培养基1培养基2单独培养并接种YT1单独培养并接种YP1降解圈（直径D/mm）3．51．8①培养这两种菌株时用到的培养基中，PE的作用是给微生物提供，除此之外培养基中还需要添加的主要营养物质有。②从表中数据可知，降解PE能力较强的菌株是；培养基1中形成两个降解圈大小一样的菌落a、b（如下图），菌株a和菌株b降解PE的能力是否一样？，理由是

(2)将筛选到的菌株用于治理“白色污染”时，有可能造成其它的环境污染问题，原因可能是。（答出一点即可）20．为消灭传染性病菌，一些地区对消毒剂的使用量大幅度增加，大量使用消毒剂会造成抗性细菌的出现，这引起了人们的担忧。为了研究消毒剂对土壤中细菌的影响，某实验室进行了如表所示的实验，然后对培养基上的菌落数进行统计。其中“+”表示添加，“”表示不添加；LB固体培养基为细菌培养基。回答下列问题：组别A组B组C组D组普通土壤稀释液++？喷施消毒剂后的土壤稀释液+？LB固体培养基++？含消毒剂的LB固体培养基+？(1)一般使用来制备稀释度相同且适宜的两种土壤稀释液；在进行实验处理时，每组应至少接种三个平板，原因是，表中培养基接种的方法是。接种后的培养基应放在37℃的恒温箱中培养，以防止目的菌种被污染。(2)喷施消毒剂后土壤中细菌数目恢复正常需要20天以上，研究人员依据实验结果绘制的柱状图如下。①D组的处理为。B组与D组的菌落数目明显不同，说明使用消毒剂会导致。②培养基中有的菌落会重叠在一起从而影响计数，可采取什么应对措施？（答出1点）。21．有机磷农药使用不当有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，危害人类健康。某生物兴趣小组同学提出：土壤中可能存在高效降解有机磷农药的微生物。请回答下列问题：(1)在制备固体培养基时需加入的常用凝固剂是。若培养基需要调节pH，则应在灭菌之（填“前”或“后”）调节。为了获得能降解有机磷农药的微生物菌种，可在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在培养基中添加适量的进行选择培养。(2)该小组在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板在适宜条件下先培养一段时间，这样做的目的是。(3)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，图B接种方法是。利用图A的方法在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品（涂布体积为0.2mL），培养一段时间后，平板上的菌落数分别为96个、100个、108个、112个、430个，则每升原菌液样品中的细菌数为个，用这种方法测定菌体密度时，实际活菌数量要比测得的数量多，原因是。(4)将获得的3种待选微生物菌种甲、乙、丙分别接种在1L含20mg有机磷农药的相同培养液中培养（培养液中其他营养物质充裕、条件适宜），观察从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为32小时、45小时、16小时，则应选择微生物（填“甲”“乙”或“丙”）作为菌种进行后续培养。22．为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员从土壤中筛选纤维素分解菌，并对其降解纤维素能力进行了研究。回答下列问题：(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即。为从土壤中筛选纤维素分解菌，配制的固体培养基中是唯一碳源；配制的培养基必须进行灭菌处理，目的是。(2)在分离纯化过程中，土壤样品经梯度稀释后再涂布平板，原因是。如果分离纯化菌株不是纯培养物，除稀释涂布平板法之外，还可以采用法进一步分离纯化。(3)在上述长出菌落的培养基上，覆盖质量浓度为1mg/mL的刚果红（CR）溶液，10－15min后，倒去CR溶液，加入物质的量浓度为1mol/L的NaCl溶液，15min后倒掉NaCl溶液，实验结果如下图。图中降解圈大小与纤维素酶的有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是，理由是。23．牛奶是适合微生物生长的良好培养基。牛奶在饮用前都要用巴氏消毒法消毒，以杀死有害微生物。某小组为检测自制酸奶是否被杂菌污染，进行了如图所示操作。请据图回答下列问题：(1)图1所示方法为，若取最终的牛奶稀释液0.1mL在培养基上进行涂布，应选择的工具是图2中的。(2)理想情况下，培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿，菌落数分别为65、63、64，则可以推测每毫升酸奶中所含细菌数为。(3)要进一步分离纯化菌种，应采用图3中（填字母）所示的划线分离操作。(4)某同学在学习了传统发酵技术的应用后，进行了酸奶制作的实践，制作步骤如下：①将瓶子（连同盖子）、勺子放在电饭锅中加热煮沸10分钟。②瓶子稍冷却后，向瓶子中倒入牛奶，再放入电饭锅中沸水浴加热10分钟。③待牛奶冷却至40℃左右（不烫手）时倒入牛奶量1/5的酸奶作“引子”，用勺子搅拌均匀，拧紧瓶盖。④将电饭锅温度调至40℃，继续保温7~8h。酸奶中（作“引子”）的有益菌主要是，待牛奶冷却后才能倒入酸奶的原因是。24．羽毛主要由角蛋白构成。其富含多种氨基酸，且必需氨基酸含量极高，是一种优质蛋白源。研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛中角蛋白的细菌，实验过程如图所示。回答下列问题。(1)获得纯净的微生物培养物的关键是。实验时，对培养基进行灭菌常采用的方法是。(2)②所使用的培养基是以为唯一氮源的液体培养基，该培养基筛选微生物的原理是。(3)与②所用的培养基相比，甲培养基还需要加入的成分是。在甲培养基上可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物是。25．近年来，石油工业飞速发展，石油污染引起的湿地生态破坏日益严重。研究发现，植物根际微生物对石油的降解起到重要作用。下图为从某植物根际土壤中筛选出高效石油降解菌的部分流程示意图，请据图回答下列问题：(1)微生物的培养包括、灭菌、接种、分离和培养等步骤。对培养基进行高压蒸汽灭菌时，发现灭菌锅内压力达到100kPa而温度未达到121℃，为同时达到设定的温度和压力要求，此时应该（填操作过程）。(2)步骤Ⅰ为石油降解菌的富集培养。称取1g土壤样品加入预先装有100mL以石油为唯一碳源的培养基的三角瓶中，在15℃、160r/min的恒温振荡摇床中培养6d。在相同的培养条件下连续培养四个周期。摇床培养的目的是（写出2点）。在操作Ⅱ、Ⅲ中，采用的接种方法分别是。(3)研究人员通常根据菌落的、隆起程度和颜色等特征来初步区分不同种的微生物。统计菌落的种类和数量时，要每隔24h观察统计一次，直到。长期保存石油降解菌，可以采用的方法，放在℃的冷冻箱中保存。26．乳酸菌在工业、农业和医药领域都具有很高的应用价值。乳酸菌代谢产生的乳酸能保持食品的风味，其产生的细菌素具有较广的抑菌谱。实验小组从陈年泡菜水中筛选出高产细菌素的乳酸菌株，并进行抑菌培养。流程如图所示，回答下列问题：(1)根据乳酸菌的代谢特点，在培养乳酸菌时，除主要营养物质外，还需要在培养基中添加，并提供中性或弱碱性等环境条件。(2)获得纯净高产细菌素的乳酸菌株的关键是防止。为达到此目的，接种过程中还需要对接种环或涂布器进行灭菌。(3)过程Ⅰ用的接种方法是。通过过程Ⅰ可以获得由一个细胞繁殖而来的菌落，达到纯化乳酸菌的目的，其原理是。(4)富集培养的目的是，进而增加上清液中细菌素的浓度。选用多种细菌作为检测的指示菌，得到细菌素的抑菌图谱如下，细菌素对的抑制作用最强。指示菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌蜡状芽孢杆菌植物乳杆菌枯草芽孢杆菌抑菌活性++++++++++注：+表示抑菌圈直径，“+”表示≤10mm，“++”表示10~20mm，“+++”表示≥20mm。27．酸奶是家庭常备饮品，向牛奶中加入适量厌氧菌可制成酸奶。回答下列问题：(1)酸奶是牛奶经过菌发酵制成，若市售袋装酸奶出现涨袋现象，则不宜饮用，原因是。(2)某同学从市场购买了一袋酸奶，运用微生物培养的知识测定其中乳酸菌的数量。过程如图所示：①图1中所用的方法是，接种时所用的工具是，经培养后可能得到的菌落形态是图2中（填字母）②该同学统计数据A组中A1、A2、A3分别是410、430、450；B组中B1、B2、B3分别是150、160、180；C组中C1、C2、C3分别是15、20、25，则可以使用组数