DB2305-T 033-2024玉米茎基腐病抗性筛选及鉴定技术规程

ICS65.020.20CCSB16

DB2305双 鸭 山 市 地 方 标 准DB2305/T033—2024玉米茎基腐病抗性筛选及鉴定技术规程2024-08-302024-08-302024-09-30双鸭山市市场监督管理局发布DB2305/T033DB2305/T033—2024前 言本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由双鸭山市农业农村局提出并归口。本文件起草单位：宝清县小城子镇乡村振兴发展服务中心、黑龙江省农业科学院佳木斯分院、芜湖职业技术学院、宝清县朝阳镇乡村振兴发展服务中心。本文件主要起草人：邱磊、杨晓贺、顾鑫、于昌红、丁俊杰、毕永彬、蒋佰福、牛忠林、吴丽丽、IIDB2305/T033DB2305/T033—2024DB2305/T033—DB2305/T033—20244接种圃设计玉米茎基腐病抗性筛选及鉴定技术规程范围本文件适用于玉米茎基腐病的田间筛选及鉴定。规范性引用文件GB4404.1粮食作物种子第1部分:禾谷类NY/T1248.7玉米抗病虫性鉴定技术规范第7部分:镰孢茎腐病DB23/T017玉米生产技术规程术语和定义NY/T1248.7界定的及下列术语和定义适用于本文件。3.1玉米茎基腐病3.2病原菌形态特征玉米茎基腐病是由多种病原菌引起的土传病害，其中包括真菌和细菌。351病圃选择田间设计501319478NY/T1248.7玉米材料采用双行区种植，小区行长4m，行距0.68m，植株密度为5000株/667m2。田间播种5cm～10cm7℃～825～30DB23/T0171GB4404.14.4间苗定苗31GB4404.14.4间苗定苗354.4中耕管理产过程符合DB23/T017-2008标准。5接种方法5.1病菌采集5.1.1采样地点选择在双鸭山市玉米茎基腐病高发区域进行采样，获取具有代表性的病害样本。5.1.2样本采集在发病部位采集玉米茎秆及维管束组织。25.1.3样本处理使用流动的清水轻轻冲洗样本，以去除泥土和表面的杂质。使用无菌的剪刀或手术刀，将玉米茎部从健康区域和病害区域仔细切割开来,病害区域的样本应该包括可见的病斑及其周围的健康组织，以便于后续的显微观察和病原检测。病菌制备微生物分离752s～3s12min～3minPDA25℃～27℃环境中，黑暗培3d菌株鉴定依据柯赫氏法则进行致病力测定，确定其为玉米茎基腐病病原菌的菌株,对分离出的菌株进行形态学、生理生化特征和分子生物学鉴定进行属种鉴定,从比例占绝对优势的病原菌中选取致病力较强的菌株作为接种的目标菌株。菌株培养PDA7d7mm（高梁粒用开水煮20min12145min）5～7261～23min～5min，待菌丝长满每个高粱粒的表面，常温阴干，以留备用。接种时期接种时期为抽雄初期至吐丝初期，可全天进行田间人工接种。接种步骤5c～10cm，303DB2305/T033—2024接种管理在病圃中铺设喷带的灌溉设施，每天喷水10min～20min，试验地保持土壤中含充足水分。接种圃土壤湿度不低于30%。结果调查玉米乳熟后期进行田间调查。逐株检査植株基部茎节，凡茎节变软、变褐色者，记为茎基腐病株。1。发病率（%）=发病株数/总株数表１玉米茎基腐抗性评价标准病级病级划分标准抗性评价0级病株率0%～5.0%高抗（HR）1级病株率5.1%～10.0%抗病（R）3级病株率10.1%～20.0%中抗（MR）5级病株率20.1%～30.0%中感（MS）7级病株率30.1%～40.0%感病（S）9级病株率40.1%～100%高感（HS）6抗性评价6抗性评价6.1鉴定有效性判定406.2非一致性抗性判定6.2.1226.2.226.2.322照品种发病率超过40%时，该批次鉴定有效。6.3玉米筛选并注意田间大斑病的综合防治；慎重使用或者不建议推广感病及高感玉米品种。如果所鉴定的玉米自交系发病株不超过10%，即病级为高抗及抗病，则视为该自交系适用于抗玉米茎基腐病的育种材料，结合田间其他农艺性状进行重点利用。如果所鉴定的玉米自交系发病株在4DB2305/T033DB2305/T033—202410%～30%