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文档简介
第07章临床尿液检验仪器
第七章
临床尿液检验仪器第07章临床尿液检验仪器
教学要求
掌握试剂带的反应原理;掌握尿液分析仪的检测原理;掌握流式细胞术尿有形成分分析仪的工作原理;熟悉尿液分析仪、流式细胞术尿有形成分分析仪的结构
;熟悉尿液分析仪、尿有形成分分析的维护和保养。第07章临床尿液检验仪器
主要内容
第一节尿液分析仪一、尿液分析仪的分类二、尿液分析仪工作原理三、尿液分析仪仪器的结构与功能四、尿液分析仪的安装、调校
五、尿液分析仪的使用注意事项及维护与保养
六、尿液分析仪的质量控制第二节尿有形成分分析仪一、流式细胞术尿有形成分分析仪二、影像式尿有形成分分析仪
第07章临床尿液检验仪器第一节尿液分析仪尿液自动分析仪的发展史尿液分析仪的分类尿液分析仪测试原理尿液分析仪结构安装、调校、维护干化学检查与显微镜检查干化学尿液分析技术操作的局限性影响干化学检测结果的因素第07章临床尿液检验仪器一、自动尿液分析仪的发展史干化学尿液分析仪是测定尿中某些化学成份的自动化仪器,是医学实验室尿液自动化检查的重要工具。20世纪50年代即有人采用单一干化学试带法测定尿中蛋白质和糖。尿液分析仪的出现给临床实验室尿液分析带来了一个飞跃。第07章临床尿液检验仪器20世纪60年代,世界上许多公司也开始研制生产尿液干化学试剂带,如德国宝灵曼公司于1964年代推出COMBUR-TEST试剂带。
20世纪70年代,随着自动化程度不断的提高,半自动尿液分析仪的问世,替代了肉眼观察的结果,减少了人为误差,提高了检测的敏感度和特异性。一、自动尿液分析仪的发展史第07章临床尿液检验仪器一、自动尿液分析仪的发展史
到了20世纪80年代中期,由于计算机技术的高度发展和广泛使用,尿液分析仪的自动化才能得到迅猛发展,由半自动发展到全自动。我国尿干化学试带的研制开始于20世纪60年代。1985年广西桂林医疗电子仪器厂从日本引进了当时先进的MA-4210型尿液自动分析仪和专用试剂带的生产技术和设备,以后几年,经过我国专家的努力,于1990年达到了全部国产化。第07章临床尿液检验仪器一、自动尿液分析仪的发展史但是,在尿液分析仪的使用中,使用不当和许多中间环节及影响因素却直接影响自动化分析结果的准确性,会引起实验结果的误差,以致作出错误的诊断。因此,要求操作者对自动化仪器的原理、性能、注意事项及影响因素的方面的知识要有充分的了解,正确的使用自动化仪器,才能使尿液分析仪得出的结果更可靠、准确。
第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类按工作方式分类按测试项目将尿液分析仪分类按自动化程度将尿液分析仪分类第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类(一)按工作方式可分为湿式尿液分析仪干式尿液分析仪第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类(二)按测试项目可分为8项尿液分析仪9项尿液分析仪10项尿液分析仪11项尿液分析仪12项尿液分析仪13项尿液分析仪第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类1.8项尿液分析仪代表仪器:日本或国产的MA-4210型检测项目:尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿隐血、尿亚硝酸盐。第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类2.9项尿液分析仪代表仪器:德国产的RL-9型检测项目:尿蛋白、尿糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、尿白细胞。第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类3.10项尿液分析仪代表仪器:德国的MIDITRON型或美国的CLINITEK200型检测项目:蛋白、糖、PH、酮体、胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿红细胞、白细胞、尿比密第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类4.11项尿分析仪代表仪器:美国的CLINITEK500型检测项目:蛋白、糖、PH、酮体、尿胆红素、尿胆原、尿亚硝酸盐、尿隐血、白细胞、比密、维生素C第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类(三)按自动化程度可分为半自动尿液分析仪:代表仪器是德国的MIDITRON型、美国的CLINITEK200型全自动尿液分析仪:代表仪器是德国的SUPERTRON型、美国的CLINTEKAT-LAS型第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类第07章临床尿液检验仪器二、尿液分析仪的分类第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理尿液分析仪的测试原理主要有以下三个方面:尿液分析仪的试剂带原理尿液分析仪测量原理尿液分析仪计算原理第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理试剂带原理多联试剂带是将多种项目的试剂块集成在一个试剂带,使用多联试剂带,浸入一次尿液可同时测定多个项目。图为德国宝灵曼公司的COMBURTEST试剂带。它采用了多层模结构;尼龙膜:防止大分子物质对反应的污染;第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理绒制层:包括碘酸盐层和试剂层:碘酸盐层可以破坏维生素C等干扰物质,试剂层含有试剂成分,主要与尿液中测定物质发生化学反应,产生颜色变化;吸水层:可使尿液均匀快速的浸入,并能抑制尿液流到相邻的反应区;塑料底层:作支持体。第07章临床尿液检验仪器
多联试剂带结构图
三、尿液分析仪测试原理第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理
另外,试剂带中还有另一个垫-“补偿区”,作为尿液本底颜色,以对有色尿及仪器变化等产生的误差进行补偿。试剂带按一定的顺序排列,各个厂家不一样,尿液中的各种成分被各测定块吸收,引起化学反应及酶反应,使试剂块颜色根据尿液中各成分的比例而变化。第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理项目缩写符号反应原理胆红素BIL偶氮反应法尿胆原URO醛反应法,重氮反应法酮体KET硝基铁氢化钠法亚硝酸盐NIT亚硝酸盐还原法白细胞LEU脂酶法比密D(SG)多聚电解质离子解离法
各项目测定原理表第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理项目缩写符号反应原理胆红素BIL偶氮反应法尿胆原URO醛反应法,重氮反应法酮体KET硝基铁氢化钠法亚硝酸盐NIT亚硝酸盐还原法白细胞LEU脂酶法比密D(SG)多聚电解质离子解离法第07章临床尿液检验仪器隐血实验原理:利用Hb中亚铁血红素有类似过氧化物酶的作用,在供氢体(如无色的邻联甲苯胺)的存在下,使过氧化物还原成为水,而无色的邻联甲苯胺被氧化成为有色的产物。AH2-H2O2过氧化物酶A2-H2O2(无色)(有色)三、尿液分析仪测试原理第07章临床尿液检验仪器干化学分析试带使用说明操作人员必须仔细阅读试带性能和仪器的操作方法;操作中应充分混匀新鲜尿液标本;将试带全部迅速浸入尿液标本;试带从标本中取出时,除去多余的尿液;可疑结果必须进行确诊实验;干化学实验结果应与理学、显微镜结果相关联。三、尿液分析仪测试原理第07章临床尿液检验仪器试带保存方法:试带贮存在干燥、不透明、有盖的容器中,不能取出容器中的干燥剂;放置于阴凉干燥的地方,不要放冰箱;不能暴露于挥发性的烟雾中;不能使用过期的试带,通常打开后6个月内用完,不能使用已褪色的化学试带。三、尿液分析仪测试原理第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理测量原理此类仪器一般用微电脑控制,将浸有尿液的试剂带放在仪器比色槽内,试带上已产生的化学反应的各种试剂垫被光源照射,其反射光被球面积分仪接收,球面积分仪的光电管被反射的双波长光(包括通过滤光片的测定光和一束参考光)照射。测定每种试剂带块反射光的光量值与空白块的反射光量值进行比较,通过计算机求出反射率,换算成浓度值,便可由分析仪打印出半定量的数值。第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理
各波长的比例由检测项目决定在几十秒钟(根据不同分析仪自己的设定时间而定)的反应时间内,各个项目(空白块不参加反应,只作标准参考用)的试剂带块由于化学反应而呈现颜色变化,并吸收照射的单色光。第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理各波长的选择由检测项目决定,球面积分仪上有三个光电管和特定波长滤光片:参比光为深红色滤片(λ=720nm)。在测量光电管中:一个加有绿色滤光片(550nm)对亚硝酸盐、酮体、胆红素、尿胆原作测量。另一个红色滤光片(620nm),对葡萄糖、蛋白质、PH和隐血作测量。第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理仪器的检测过程为:光源灯发出的光通过积分球照射在试剂带的膜块上。试剂带膜块颜色的深浅对光的吸收和反射是不一样的,颜色越深,吸收的光量值越大,反射光量值越小,则反射率越小。仪器按下列公式自动计算出反射率,然后与标准曲线比较,自动打印出各成分的相应结果。第07章临床尿液检验仪器三、尿液分析仪测试原理计算原理R(%):反射率Tm:试剂垫对测定波长的反射强度Ts:试剂垫对参考波长的反射强度Cs:标准垫对参考波长的反射强度Cm:标准垫对测定波长的反射强度第07章临床尿液检验仪器四、尿液分析仪结构
尿液分析仪由:机械系统、光学系统、电路系统三部分组成。第07章临床尿液检验仪器四、尿液分析仪结构(一)机械系统
主要功能是将待测的试剂带传送到位。第07章临床尿液检验仪器光电管球面积分仪滤光片光源
(二)光电系统结构图四、尿液分析仪结构第07章临床尿液检验仪器四、尿液分析仪结构(三)电路系统其作用是将光电检测器的信号进行放大和运算处理。第07章临床尿液检验仪器五、安装、调校、维护
安装条件:远离电磁干扰源、电源、防止阳光照射、防潮、通风好、温度10~30℃,湿度<80%;调校:新仪器安装后,或每次大维修之后,必须对仪器技术性能进行测试,评价,这对保证检验质量起到重要的作用。第07章临床尿液检验仪器五、安装、调校、维护日常应用和维护
尿液分析仪的日常应用和维护:每台尿液分析仪应建立操作程序,并严格按操作规程进行操作;专人负责管理,健全专用的仪器登记本,对每天仪器操作的情况,出现的问题,以及维护,维修的情况予以登记;
第07章临床尿液检验仪器五、安装、调校、维护每天开机测定前,要对仪器进行全面检查,测定完毕要对仪器进行全面清理保养;做到每日、每周、每月的维护.第07章临床尿液检验仪器五、安装、调校、维护
一般评价程序
1.首先应该对尿液分析仪进行校正,校正的目的是让仪器进入厂商规定的状态。其操作是用标准的校正条对仪器进行测定仪器的光路,状态进行校正,以达到最佳状态,有些厂家的校正条是一次性的,不能重复使用,以免影响试验结果,有些厂家的校正条可重复使用,尿液分析仪只有在校正通过时才能进行实验,否则要停机。第07章临床尿液检验仪器五、安装、调校、维护2.应该对尿液分析仪及试纸条的准确度进行评价。准确度指的是测定值与真值的接近程度,由于尿液分析仪是一个半定量的仪器,因此它的准确度的评价只有根据仪器制造商规定的测定范围配制成一定浓度的标准物,在仪器上严格按说明书操作,每份标准物测定3次,观察测定结果与标准物浓度相符合程度。第07章临床尿液检验仪器五、安装、调校、维护3.用传统的方法与尿液分析仪测定作对比分析,对尿液分析仪的敏感性和特异性进行评价。4.了解该仪器对每项测试指标的测试范围,并建立该仪器的参考范围。第07章临床尿液检验仪器六、干化学与镜检中华医学会经过三次专家研讨会,寻求一个简单、快速的筛选方法,对干化学尿液分析提供了筛选的试验手段。在干化学尿试带质量合格,尿液分析仪运转正常情况下,试验中满足以下条件时,可免去镜检:白细胞、红细胞、蛋白质及亚硝酸盐为阴性。第07章临床尿液检验仪器六、干化学与镜检另外,对肾脏疾病的患者不适合干化学检查筛选法,对以镜检结果作为诊断依据和观察疗效指标时,不宜作筛选,如:结石、结晶、寄生虫的检查。第07章临床尿液检验仪器
七、干化学尿液分析技术操作的局限性干化学尿液分析技术操作简便,检测项目多,诊断过筛面大,仪器价廉等诸多优点,很快在临床推广应用,但这类仪器检测的结果受许多因素的影响,务必严格控制才能获得好的结果。第07章临床尿液检验仪器八、影响干化学检测结果的因素影响检测结果的因素大致来自如下几方面:试纸条因素尿标本因素操作因素:包括仪器的校验和维护,操作程序,环境因素等。第07章临床尿液检验仪器第二节尿有形成分分析仪第07章临床尿液检验仪器第二节尿有形成分分析仪尿有形成分检验方法学进展尿有形成分分析仪分类第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展尿有形成分检验包括有形成分计数和形态学分析两方面的检验。尿液因物理性质改变(渗透压)引起被检细胞形态学变异,鉴定技术较难,自动化和机械化检验发展很慢。但由于有血细胞自动计数仪的开发经验,在美国和日本已有尿有形成分自动分析仪的应用,在我国,在较大的检验科室,已有了各种档次的尿有形成分分析仪在应用。
第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展尿液化学自动分析仪的出现,对尿液化学成分和部分有形成分的检查提供了可靠和重要的数据,但对尿液有形成分的定量计数和形态学的分析还没有完全解决,随着计算机的高速发展,尿有形成分自动分析仪的问世,较好的解决了显微镜镜检尿有形成分所存在的问题。第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展尿有形成分检查虽然已有一个多世纪的历史,但发展远不如尿化学成分的检查迅速,其主要是人工进行尿有形成分检查存在以下问题:检查方法不统一,也无统一的质控标准;检查所需的时间长;检查重复性差,检查人员之间的个体差异大,各检查机构之间的差异也大。全自动尿有形成分分析仪是目前比较满意的检测尿有形成分的分析仪。第07章临床尿液检验仪器手工制片镜检尿有形成分定量分析板的应用尿有形成分自动化分析仪一、尿有形成分检验方法学进展第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展(1)开展利用干化学法检测尿中WBC、RBC,进行显微镜检查的筛选。(2)利用图象摄影系统摄制尿有形成分的静止图象,对尿有形成分进行自动分类、计算及储存等,形成尿有形成分自动分析系统。(3)利用流式细胞术结合电阻抗原理检测尿中成分进行定量分析的全自动尿有形成分分析仪。第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展(4)除利用普通显微镜外,还可采用干涉、相差、偏振光、扫描及透射电镜等观察。(5)现已采用尿沉渣活体染色及细胞化学等多染色法来识别各种细胞和管型。(6)近年来应用单克隆抗体技术识别各种细胞成分。第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展1988年美国国际遥控影像系统有限公司生产了世界上第一台“YELLOWIRIS”高速摄影机式的尿有形成分自动分析仪,简称Y-1尿自动分析仪,这种仪器是将标本的粒子影像展示在计算机的屏幕上,由检验人员加以鉴别。第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展1990年日本东亚医疗电子有限公司与美国国际遥控影像系统有限公司合作,对原有的尿有形成分分析仪进行改进,生产出影像流式细胞仪式的UA-1000型和UA-2000型尿有形成分自动分析仪。
第07章临床尿液检验仪器一、尿有形成分检验方法学进展1995年日本东亚医疗电子有限公司在原来影象流式细胞仪式的尿有形成分分析仪的基础上,将流式细胞和电阻抗技术结合起来,生产出新一代的UF-100(fullyautomatedurinecellanalyzer)型尿有形成分自动分析仪。这种仪器具有快速、操作方便,同时给出尿有形成分的数量结果和RBC、WBC散射光分布直方图,便于临床及科研工作。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类(一)流式细胞术尿有形成分分析仪(二)影像式尿有形成分分析仪(三)尿有形成分分析工作站(四)尿有形成分分析仪与显微镜检查第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类(一)流式细胞术尿有形成分分析仪分析原理仪器结构尿有形成分细胞资料的综合分析尿有形成分分析仪检测项目尿有形成分自动分析仪的评价红细胞、白细胞的参考值仪器的安装、使用及保养第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类分析原理1.稀释、染色的标本通过鞘液池2.氩激光照射3.测定荧光、散射光和电阻抗第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类UF-100分析原理稀释、染色的标本通过鞘液池当一个尿液标本被稀释液稀释和染液染色后,它靠液压作用通过鞘液流动池,当反应样品从喷嘴出口进入鞘液流动室时,它被一种无粒子颗粒的鞘液包围,使每个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心(竖直)轴线。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类氩激光照射在这里每个尿液细胞将被氩激光光束照射。每个细胞有不同程度的:荧光强度(FL,fluorescentlight)是从染色尿液细胞发出的荧光强度,主要反映细胞的定量特性,如细胞膜、核膜、线粒体、核酸)、散射光强度(这种仪器测定的是前向角散射光Fsc,forwardscatterelight,它成比例的反映细胞的大小)电阻抗的大小(电阻抗电信号主要与细胞的体积成正比)。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类测定荧光、散射光和电阻抗仪器正是将这种荧光、散射光和电阻抗的信号转变成电信号,分析这些电信号,才能使得每个尿液标本产生出直方图和散射图,然后分析这些图形,即可区别出每个细胞并得出每个细胞的形态。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类仪器结构流式细胞术尿有形成分分析仪包括:检测系统液流系统电路系统自动进样系统第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类检测系统:
1.光学系统由氩激光(波长488nm)、激光反射系统、流动池、前向光采集、前向光检测器组成。
2.电阻抗检测系统
第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类激光作为光源用于流式细胞分析系统,它被双色反射镜反射,然后被聚光器收集形成射束点,而聚集于流动池的中央。样品流到流动池,每个细胞被激光光束照射,产生前向散射光和前向荧光的光信号。散射光信号被光电二极管转变为电信号,被输送到微处理器。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类根据光散射定律,在分析尿标本时,由于细胞的种类不同和分布不均,光的反射和散射主要取决于细胞表面,因此散射光的强度主要取决于细胞的大小,所以仪器可以从散射光的强度得出测定细胞大小的资料。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类荧光通过滤光片滤过一定波长的荧光后,输送到光电倍增管,将光信号放大再转变成电信号,然后输送到微处理器,得出细胞的定量特性。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类UF-100尿有形成分分析仪使用两种荧光染料:一种为菲啶染料,主要染细胞的核酸成分(DNA),在480nm光波激发时,产生610nm的橙黄色光波,用于区别有核的细胞和无核的细胞(如RBC与WBC,病理管型和透明管型);第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类
另一种为羧花氰染料,它穿透能力强,与细胞质膜(细胞膜、核膜和线粒体)的脂层成分发生反应结合,在460nm的光波激发时产生505nm的绿色光波,主要用于区别细胞的大小(如上皮细胞和白细胞的区别)。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类这两种染料具有下列特性:反应快速:背景荧光低:从细胞发生的荧光与染料和细胞的结合程度成比例。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类电阻抗检测系统:●电阻抗测定系统包括测定细胞体积的电阻抗系统和测定尿液导电率的传导系统。电阻抗测定的方法:与血细胞分析义的电阻抗原理相同●部分标本含有某些结晶,影响电阻抗测定的敏感性,为了保证尿液标本传导性稳定,可以在稀释液中使用含EDTA盐化合物或加热使结晶溶解。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类液流(鞘液流动)系统:反应池染色标本随着真空作用吸入到鞘液流动池。为了使尿液细胞进入流动池不凝固成团。而使单细胞流通过加压的鞘液输送到流动池,使染色的样品通过流动池的中央,鞘液形成一股液涡流,使尿液细胞排成单个纵队通过鞘液中心。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类电路系统:
从样品细胞中得到的前向散射光很强,不需要极敏感光检测器,光电二极管能够将光信号转变成电信号。但从样品细胞中得到的前向荧光很弱,因此需要使用极敏感的光电倍增管。这种光电倍增管能够吸收在光电表面光子的能量,并使用金属光电效应发出光电子。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类
发出的光电子能够被外加电压促进,导致许多继发电子放大。这种放大的前向荧光转变成电信号。从样品中得到的电阻抗信号和传导性信号被感受器接受后直接放大输送给微处理器。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类自动进样装置:自动进样装置主要由自动进样传输装置、样本混匀器、定量吸样装置和样品传输装置组成。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类光学分析系统第07章临床尿液检验仪器分析原理流程图二、尿有形成分分析仪分类第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类UF-100细胞分析过程第07章临床尿液检验仪器尿液有形成分的脉冲图形二、尿有形成分分析仪分类第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类尿有形成分细胞资料的综合分析仪器通过对前向散射光的波形(强度和散射光的脉冲宽度)、前向荧光波形(荧光强度和荧光脉冲宽度)和电阻抗值的大小综合分析,得出细胞的形态、细胞横截面积、染色片段的长度、细胞容积等信息并绘出直方图和散射图。仪器通过分析每个细胞信号波形的特性来对其进行分类。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类前向散射光信号主要反应细胞体积的大小。前向散射光强度FSC反应细胞的横截面积;前向散射光脉冲宽度FSCW主要反应细胞的长度;FSCW=CL+BW/VCL——细胞长度BW——激光束宽度V——流动速度第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类前向荧光信号主要反应细胞染色质块的大小荧光强度FL主要反应细胞染色质的强度;前向荧光脉冲宽度FLW反映细胞染色质的长度。FLW可以用下列等式表示:FLW=NL+BW/VNL——细胞核长度BW——激光束宽度V——流动速度第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类尿有形成分分析仪检测项目UF-100型全自动尿有形成分分析仪采集标本体积为9ml,自动进样模式所需标本体积不少于4ml,实际吸取标本体积为0.8ml,检测标本体积为9.0微升,每小时可检测100个尿标本,可报告以下参数:第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类检测项目-红细胞分析白细胞分析上皮细胞(EC)管型(CAST)细菌(BACT)其他的检测导电率的测定第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类1.红细胞分析RBC直径为8微米,无核和线粒体,所以RBC荧光强度(F1)很弱。另外,RBC在尿液标本中大小不均,且部分溶解成小RBC碎片,或者在肾脏疾患时排出的RBC也大小不等,因此,可以看见RBC前向散射光强度(FSC)差异较大。一般来说,F1极低和FSC大小不等均为RBC。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类仪器除给出尿RBC定量(每微升的细胞数和每高倍视野的平均细胞数)参数外,还可报告尿形态均一性RBC和形态非均一性RBC的百分比,非溶血性RBC的数量和百分比,平均红细胞前向荧光强度、平均红细胞前向散射光强度和红细胞荧光强度分布宽度。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类这种分类方法主要根据RBC形态的变化,将均一性的RBC归为非肾性血尿;非均一性的RBC归为肾性血尿,全自动尿有形成分分析仪也具有此项功能,其规定:80%红细胞前向散射光强度(Fsc)≥126ch;称为均一性红细胞;80%红细胞前向散射光强度(Fsc)≤84ch称为非均一性红细胞(变异性红细胞);介于二者之间即为混合性红细胞。
ch(channel):为检测到的脉冲信号强度及宽度第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类2.白细胞分析WBC在尿液的分布直径大约为10um,约比RBC大,因此前向散射光强度也比RBC稍大一些,但WBC含有核而RBC无核,因此它有高强度的前向荧光,就能将RBC和WBC区别开来。当WBC存活时,会呈现前向散射光强和前向荧光弱;当WBC损害或死亡时,呈现前向散射光弱和前向荧光强。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类利用尿液WBC激光散射光强度和荧光强度的技术识别WBC高活性和低活性的不同程度,来进一步对急性感染和慢性感染,以及恢复期做出判断。急性泌尿系感染WBC>60/ul,且白细胞前向散射光强度强和荧光强度弱;慢性泌尿系感染WBC>10/ul,且白细胞前向散射光强度弱和荧光强度强。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类3.上皮细胞(EC)由泌尿道的上皮细胞脱落而来,种类多,大小不等。上皮细胞胞体大,散射光强,都含有细胞核、线粒体等,荧光也比较强。仪器除给出上皮细胞数量参数外,还标出肾小管上皮细胞(SRC),并在第二个屏幕上显示出每微升细胞数。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类小圆上皮细胞是指细胞大小与白细胞相似或略大,形态较圆的上皮细胞,它包括肾小管上皮细胞、中层和底层移行上皮细胞。由于这些细胞散射光、荧光及电阻的信号变化大,仪器不能完全区分出哪一类细胞,因此当这类细胞的细胞数仪器标出未到达一定浓度时,还需通过离心染色镜检得出准确的结果。
第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类4.管型(CAST)由于管型种类较多,且形态各不相同,仪器不能完全区分这些管型的性质;只能检测出透明管型和标出有病理管型的存在。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类透明管型由于不含有内含物有极高的前向散射光脉冲宽度和微弱的荧光脉冲宽度出现在第二个散射图的中下区域;而病理性管型,由于它们的体积与透明管型相等,但含有内含物(如线粒体、细胞核等);所以有极高的前向散射光脉冲宽度和荧光脉冲宽度,出现在第二个散射图的中上区域。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类借助于荧光脉冲宽度,即可区分出透明管型和病理管型,当仪器标明有病理性管型时,由于仪器只能起过筛作用,不能完全判定就是病理管型,只有通过离心镜检才能确认是哪一类管型。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类5.细菌(BACT)细菌由于体积小并含有DNA和RNA,所以前向散射光强度要比红、白细胞弱,但荧光强度要比红细胞强,又比白细胞弱。因此,细菌分布在第1个散射图红细胞和白细胞之间的下方区域。此仪器较好地解决了上述缺陷,能够检测出所有的细菌。细菌检查临床意义主要用于泌尿系细菌感染的诊断。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类6.其他的检测全自动尿有形成分分析仪除检测上述五项参数外,还能标记出酵母细胞(YLC)精子细胞(SPERM)结晶(X-TAL)第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类酵母细胞(YLC)精子细胞(SPERM)类酵母细胞和精子细胞由于含有RNA和DNA,荧光强度很高,由于类酵母细胞的前向散射光脉冲宽度小于精子细胞的,因此,根椐前向散射光脉冲宽度,可将类酵母细胞和精子细胞区别开来。但在低浓度时,精子细胞与酵母细胞区分有一定的难度;在高浓度时,部分酵母细胞对红细胞计数有交叉。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类
结晶(X-TAL)结晶出现在散射图红细胞区域,由于结晶的多样性,所以其散射光强度分布很宽,如草酸盐在散射图上分布接近FSC轴,尿酸盐依靠自己的荧光分布区域和红细胞重复在一起,因结晶的中心分布不稳定,所以它和红细胞能够被区分开。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类当尿酸盐浓度增多时,部分结晶会影响红细胞计数。因此,当仪器对酵母细胞子、精子细胞和结晶有标示时,都应离心镜检,才能真正的区分。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类7.导电率测定概述导电率与渗透量有密切的关系:导电率代表溶液中溶质的质点电荷,与质点的种类、大小无关;渗透量代表溶液中溶质的质点(渗透活性粒子)数量,而与质点的种类、大小及所带的电荷无关。所以导电率与渗透量又有差异,如溶液中含有葡萄糖时,由于葡萄糖是无机物,它没有电荷,与导电无关,但与渗量有关。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类导电率测定临床意义对糖尿病、尿崩症的鉴别诊断、治疗都具有十分重要的意义;通过对尿导电率的高低监控,可以预防某些结石疾病的发生,有利于结石疾病的治疗。
第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类尿有形成分分析仪检测评价全自动尿有形成分分析仪的优点崭新的流式细胞学技术应用于尿检独特的有形成分鉴别系统第07章临床尿液检验仪器UF-100结合流式细胞学技术与电阻抗测定对尿成份进行直接鉴别及计数,将染色的有形成份加压使其通过鞘流室的小孔。用激光光束照射有形成份,光便产生散射,而尿液有形成份则发出荧光,然后对散射光、荧光及电阻抗的变化进行测定和分析,使用这一已经证实的流式细胞新技术,是自动化尿检获得了重大突破,即实现真正的无人检验!二、尿有形成分分析仪分类1.崭新的流式细胞学技术应用于尿检第07章临床尿液检验仪器将从每个粒子上所产生的散射光,荧光及电阻抗变化转变为电信号进行分析,并将粒子分布制成简明易懂的散射图和直方图。利用先进的自适应凝聚体分析系统(A.C.A.S)确定有形成份的类型,从而以自动分析代替了主观鉴别。二、尿有形成分分析仪分类2.独特的有形成份鉴别系统第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类3.全自动尿有形成分分析仪的优点1)可对血尿中红细胞进行定量计数,同时对其形态进行鉴别,有助于临床分析泌尿系统出血部位。2)对尿中白细胞也可进行定量计数,可同NIT及细菌数结合分析,有助于尿路感染患者的诊断和疗效监控。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类3)仪器提供尿渗透压的信息,对尿液状态有更多了解。4)和尿化学分析一起使用,将更有利于临床。5)可满足大批尿液常规检查单位的需要,减轻劳动强度。 第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类红细胞、白细胞参考值由于尿液常规有形成分的检查一般都使用显微镜检查,该法操作要求高、费时、重复性差,结果不宜临床动态观察。干化学尿液分析仪的问世,虽然给尿液有形成分检查带来一些革新,但它给出的结果只是一个半定量的结果,只起过筛分析,也不宜于临床动态观察。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类红细胞、白细胞参考值的调查全自动尿有形成分分析仪的开发使用,较好地解决了尿有形成分检查中存在的主要问题。目前国内外虽有使用,但迄今未见健康人有关正常参考值的报道。丛玉隆等使用全自动尿沉渣分析仪对400例健康人尿液红、白细胞进行测定。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类结果显示红、白细胞各年龄组之间无明显差异男女性别之间有显著性差异红细胞:男性为0~12/ul,女性为0~24/ul白细胞:男性0~12/ul,女性0~26/ul
第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类仪器的安装、使用及保养仪器安装仪器使用仪器维护及保养第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类1.仪器安装安装条件:远离电磁干扰源、电源、防止阳光照射、防潮、通风好、温度15~30℃,湿度<80%;仪器两侧至少有0.5米空间,最好安装在稳定的水平实验台上。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类2.仪器使用仪器开机前,要对仪器进行全面检查;开机后,仪器先进行自检;仪器自检后,进行自动冲洗并检查本底;本底通过后,进行仪器质控检查;质控通过后,进行样品测试。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类3.仪器维护及保养仪器要有专人负责,建立专用的仪器登记本;仪器必须严格按操作规程进行;仪器的保养必须按规程做:(1)每日保养(2)每月保养(3)每年保养第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类(二)影像型尿有形成分分析仪流动式影像型尿有形成分分析仪
静止式尿有形成分分析仪第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类1.流动式影像型尿有形成分分析仪仪器结构
检测原理自动数码影像拍摄
有形成分的识别报告
第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类(1)仪器结构
流动式影像型尿有形成分分析仪一般有四个模块构成:一是流动式显微成像模块;二是计算机分析处理模块;三是自动进样模块;四是干化学系统模块。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类流动式显微成像模块:采用鞘流技术,是被测样品进入系统,并在流动过程中应用全自动智能显微镜摄像镜头(CCD)高速拍摄有形成分照片。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类计算机分析处理模块:计算机分析处理模块:用于对图像结果的分析、处理、显示、存储和管理,包括电脑主机、显示器、键盘和鼠标。
第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类是自动进样模块:配备有自动进样装置,在样本架上可同时容纳多个专用试管架。
第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类干化学系统模块:根据用户要求,可以接受其他类型的干化学分析系统结果等功能。
第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类(2)检测原理
采用流动式显微镜系统,尿液标本采用层流平板式流式细胞术,标本在上下两层鞘液的包裹下进入系统中。仪器的流体力学系统由特别制作的薄层板构成,蠕动泵带动鞘液进入薄层板构成的流动池,双层鞘液流包裹在尿液标本外周,而尿液会以单层细胞颗粒的厚度进入薄层板,被高速拍摄照片后进入废液容器。第07章临床尿液检验仪器第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类(3)自动数码影像拍摄
尿液标本在鞘流液包裹下进入流动池,通过固定在薄层鞘流板一侧的显微镜物镜头,其厚度和位置正好在显微镜视野的焦距范围,CCD数字照相机位于显微镜目镜后面。流经物镜头前面的标本薄层是平坦的,根据鞘流原理,任何粒子通过时,都会以最大面积直接面对镜头的观测。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类(4)有形成分的识别
在显示器上看到的每个有形成份都是独立的,被分割在一个特定大小的格子内。仪器内部预先存储了12种常见的有形成分的大量图像资料,建立了标准模板数据库。根据被拍摄到的粒子的大小、外形、对比度和纹理特征和数据库中的标准板进行对比来初步鉴定。第07章临床尿液检验仪器二、尿有形成分分析仪分类(5)报告尿有形成分结果用定量方式报告,因此可以用每微升含有量的方式表示,也可以换算成传统的每高倍/低倍视野表
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